S p ectrofotom etria d e ab sorb ie n u ltraviolet i vizib il

I. N oiu n i teoretice
n aceast lucrare ncercm s prezentm aplicaiile spectro -fotom etriei n ultraviolet i vizibil
pentru substane n stare lichid, lichide pure, am estecuri i n special soluii. S pectrele urm rite sunt
spectre m oleculere electronice la care structura de rotaie nu m ai apare iar cea de vibraie se m anifest
numai n anumite cazuri printr-o structurare a benzilor de absorbie care, n general, sunt largi i
nerezolvate n linii.
B enzile de absorbie din aceste dom enii spectrale corespund tranziiilor de pe nivelul electronic
fndam ental pe cele m ai joase nivele electronice excitate, pentru care tranziiile sunt perm ise conform
legilor de selecie. n aceste condiii tranziiile electronice im plic cele m ai m ari variaii de energie, iar
frecvenele cuantelor absorbite se situeaz att n dom eniul vizibil ct i de ultraviolet al spectrului.
L a aceste tranziii electronice particip electronii unor anum ite grupri structurale ale moleculelor
numite cromofori. n cazul substan-elor organice asem enea grupri structurale sunt reprezentate de
legtura sim pl, dubl i tripl, gruparea bazic, etc.
Interacia crom oforilor ntre ei sau cu alte grupri atom ice provoac im portante modificari ale
spectru1ui de absorbie atribuit crom oforului singur. n aceste condiii pot apare urm toarele efecte:
-

efectul batocromic - de deplasare a m axim ului de absorbie spre lungim i de und m ai m ari
(deplasarea spre rosu),

efectul hipsocromic - de deplasare a m axim ului de absorbie spre lungim i de und m ai m ici
(deplasarea spre albastru),

efectul hipercromic - de cretere a intensitii de absorbie,

efectul hipocromic - de descretere a intensitii de absorbie.

P roprietile de absorbie ale m ediului pot fi caracterizate prin m rim ile: absorban, trasm itan,

extincie, coeficient de extincie.

Legea Bouguer-Lambert exprim relaia cantitativ dintre inten -sitatea I, a luminii emergente,
intensitatea I0, a luminii incidente, grosimea x a substanei absorbante i natura substanei.

Figura 6.1. R eprezen tarea grafic a legii B o u gu er-Lambert

(X1/2 gro sim ea d e n ju m tire).

Expresia legii Bouguer-Lambert se poate scrie:

I( x ) I0e kx

P rin definiie transmitan a (T ), sau coeficientul de transmisie al unei substane este dat de
formula:

T(%)

I
100
I0

iar extincia natural E n, este dat de relaia:

E n ln

1
I
ln 0 k n x
T
I

unde kn reprezint coeficientul natural de extincie. S e poate arta uor c 0 En .

A vantajul folosirii extinciei este acela al proprietii de aditivitate pe care o are aceast m rim e:
un am estec de m ai m ulte soluii diluate avnd extinciile E 1,...,En se com port ca o singur soluie cu
extincia global E , dat de relaia:

E E1 ... E n
Prin ab sorb an (A ), sau coeficient de absorbie se nelege:
A(%)

I0 I
I0

100

n practic, deoarece logaritm ii naturali sunt m ai puin com ozi se folosete o relaie asem ntoare
n care intervin, ns logaritm ii zecim ali:
I I0 10 kx I0 e E

unde k reprezint coeficientul zecim al de extincie iar E extincia zecim al sau densitatea optic.
Lege Beer este valabil num ai pentru soluii diluate i stabilete o legtur m atem atic ntre
extincia E , concentraia C a substanei i coeficientul m olar de extincie care depinde de natura substanei
i de lungim ea de und.

E(, x) () C x
unde C se m soar n m ol/dm 3.
n aceste condiii legea Bouguer-Lambert-Beer se poate scrie:
I(, x ) I0 10 ()Cx

C urbele care dau dependen E = f(), T=f(), A=f(), =f() sau f(), sunt cunoscute sub numele
de spectre de absorbie.Un exemplu de astfel de spectru este reprezentat n figura 6.2.

Figura 6.2. S p ectru l d e ab so rb ie d e tipu l A = f().

F actorii care pot influena spectrul de absorbie al unei substane:

a) natura solventului nivelele energetice electronice ale molecu-lelor n stare condensat pot fi
m odificate prin prezena m oleculelor solventului datorit interaciilor ce apar.
b) concentraia soluiei i tem peratura cu creterea concentraiei apar asocieri m oleculare care dau
un spectru distinct de cel al monomerului substanei de studiat, tem peratura favorizeaz
deplasarea echilibrului dintre concentraiile de m onom er i dim er iar tem peraturile ridicate pot
produce chiar transform ri ireversibile ale spectrelor de absorbie.
c) valoarea pH-ului soluiei la valori diferite de pH , punctul izosbestic aprut n spectru indic
prezena n am estec a unor specii m oleculaare ce se transform una ntr-alta ntr-o proporie
depinznd de pH.
d) iradierea substanelor iradierea optic a probei poate conduce la polim erizarea unei sp ecii
m oleculare i de aici m odificri n spectrul de absorbie.
e) form area de com pleci cationii prezeni n solvent pot duce la form area com plecilor i deci
influenarea spectrului probei.
f) fluorescena datorit fenom enului de fluorescen, intensitatea radiaiei reem ise va duce la o
valoare aparent m ai m ic a absorbiei probei dect cea real.
g) fenomene de oxidare
h) probele nu sunt dizolvate total sau precipit ulterior
i)

fenom ene de hidroliz

D escrierea in stalaiei sp ectrofotometrice
Un spectrofotometru conine o parte optic i una electric. C om ponentele de baz ale prii

optice sunt: sursa, m onocrom atorul, com partim entul probelor i detectorul m preun cu sistem ul de
nregistrare (figura 6.3).

Figura 6.3. Principalele componente ale unui spectrofotometru.

Spectrofotometrele se pot clasifica att dup sistem ul dispersiv ct i dup sistem ul constructiv.
A stfel, n funcie de prim ul criteriu exist spectrofotometre cu prism , spectrofotom etre cu reea, spectrofotometre mixte, iar n funcie de al doilea criteriu spectrofotom etre cu m onofascicul i cu dublu fascicul.
Spectrofotom etrul C am spec M 330 are ca elem ent dispersiv o reea de difracie cu 1200 linii/m m
i este de tipul m onofascicul. M 330 poate trasa spectre U V -VIS n intervalul de lungim i de und cuprins
ntre 190-900n m , cu o acuratee de 1nm . n absorbie poate balea pe intervalul -0.3 la 2.5Abs, iar n
transmisie de la 0 la 200%. M330 poate fi accesat fie direct utiliznd tastatura acestuia, fie prin
intermediul unui calculator.