Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
1.GENUL MYCOBACTERIUM
1.1 Scurt istoric
1.2 Definitie; incadrare
2. MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
2.1 Caractere generale
2.2 Sructura celulara si metabolism
2.3 Izolare, condiii de cretere i dezvoltare
2.4 Medii de cultura
2.5 Caractere biochimice si de metabolism
2.6 Rezistena fa de factori fizici, chimici si biologici
2.7 Structur antigenic
2.8 Caractere de patogenitate
2.9 Implicaii asupra strii de sntate:
3. TUBERCULOZA
3.1 Boala
3.2 Simptomele
3.3 Transmisie
3.4 Diagnostic de laborator
3.5 Tratament
3.6 Epidemiologie, Prevenire, Control
4. BIBLIOGRAFIE
1. GENUL MYCOBACTERIUM
Rezistena specific fa de infecia tuberculoas poate fi obinut cu germenii vii atenuai. Prin
vaccinare, n special a copiilor, cu B.C.G.(bacilul Calmette-guerin), se obine o scdere important a
cazurilor noi de tuberculoz. Acest vaccin conine bacili tuberculoi bovini care, prin treceri repetate pe
mediul de cultur cu cartof biliat i glicerinat, i-au pierdut virulena i capacitatea de a produce
tuberculoza, dar i-au pstrat proprietile antigenice.
2. MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
2.1. Caractere generale
Este agentul cauzal al tuberculozei, descoperit de Robert Koch n 1882. Dei neoficial se
mai numeste i bacilul Koch numele genului se datoreaz asemnrii morfologice cu fungii
microscopici filamentoi: myces = fung + bakterion = baston mic.
Este un patogen strict uman desi poate infecta si animalele de companie: papagal, cine,
pisic, maimu.
Mycobacterium tuberculosis are cromozomi circulare de aproximativ 4,200,000
nucleotide lung. Coninutul de G + C este de aproximativ 65%.
Genomul M. tuberculoza a fost studiat n general folosind tulpina M. tuberculoza
H37Rv. Genomul conine aproximativ 4000 de gene. Gene care cod pentru metabolismul lipidic
sunt o parte foarte important a genomului bacteriene, i 8% din genomul este implicat n aceast
activitate.
Diferitele specii ale complexului Mycobacterium tuberculosis prezint o nrudire ADN
95-100% i o bazat pe studii de omologie ADN i secvena genei ARNr 16S sunt exact acelea i
pentru toate speciile. Deci, unii oameni de stiinta sugereaza ca acestea ar trebui s fie grupate n
o singur specie n timp ce alii susin c acestea ar trebui s fie grupate ca soiuri sau subspecii
de M. tuberculoza.
Plasmidele din M. tuberculoza sunt importante n transferul de virulenta, deoarece
genele de pe plasmidele sunt mai uor de transferat peste gene situate pe cromozomul. Un astfel
de plasmid 18kb n M. tulpina H37Rv tuberculoza a fost dovedit pentru a efectua transferuri de
gene.
2.2 Sructura celulara si metabolism
M. tuberculosis are un perete celular dur care previne trecerea de substante nutritive n i
eliminat din celula, prin urmare, oferindu-i caracteristica de a ratei de cre tere lent. Peretele
celular al agentului patogen arata ca o celula-Gram perete pozitive. Plicul conine un strat de
celule polipeptide, un strat peptidoglicanilor, i lipide libere. n plus, exist i o structur
complex de acizi grai cum ar fi acizii mycolic care apar lucioas.
M. tuberculoza genomului codifica aproximativ 190 de reglementare transcriptie, inclusiv
13 factori sigma, 11 sistem de doua componente i mai mult de 140 de reglementare de
transcriere. Mai multe de reglementare au fost gsite pentru a rspunde la stres de mediu, cum ar
fi extrem de frig sau de cldur, foame de fier, i stres oxidativ. Pentru a supravieui n aceste
4
Pe mediul lichid Mycobacterium tuberculosis crete sub forma unei membrane groase,
cu multe pliuri, care se ridic pe peretele flaconului de cultur. Astfel de crestere pe medii de
cultur o numim cretere eugonic
Pentru necesiti de ordin practic, pe baza efectului pe care oxigenul l exercit asupra
creterii i metabolismului, microorganismele pot fi grupate n 4 categorii:
1) Strict aerobe (Bacillus anthracis, Bacillus subtilis, Mycobacterium tuberculosis) - care
au nevoie absolut de prezena oxigenului molecular, fiind incapabile s triasca n absena
acestuia.
2) Strict anaerobe (Clostridium tetani, Clostridium botulinum, Clostridium perfringens) care pot fi cultivate numai n medii sarace n oxigen, deoarece chiar la presiuni joase (10-5 atm)
acesta poate avea efect inhibitor.
n practica, anaerobioza se realizeaz fie prin nglobarea n mediu a unui compus
sulfhidrilic (ex.tioglicolatul de sodiu, care reduce O2), fie prin cultivarea n anaerobiostate, n
care O2 a fost ndepartat sau nlocuit cu un amestec controlat de alte gaze.
3) Microaerofile (spirochaetales, thiobacterii) - care cresc foarte bine la presiuni de oxigen
mai mici dect aerul atmosferic (0,2 atm). Aceasta particularitate reflect prezena unor enzime
care sunt inactivate n condiii de oxidare puternic i pot fi meninute n stare funcional numai
la presiuni joase de O2.
4) Anaerobe, facultativ aerobe (E.coli, Staphylococcus, Streptococcus) - care au capacitatea
de a se dezvolta att n prezena ct i n absena O2, dupa cum li se furnizeaz anumite substane
nutritive n mediu. Aceti germeni i pot desfaura procesele respiratorii i cele fermentative cu
aceeai intensitate, fie simultan, fie cu precadere, numai unul, n functie de natura mediului de
cultura i de aportul de oxigen
Proteinele secretate de M.tuberculosis se mpart n trei grupe principale, n funcie de eliberarea
lor n supernatantul de cultur. Antigenele separate prin electroforez n gel au fost identificate
prin tehnici de western blotting (10) :
(1) Proteine excretate: sunt produse n cantiti mici, n primele zile dup nsmnarea
mediului de cultur. Dei n mediu de cultur se acumuleaz cantiti semnificative, n bacilii
ntaci aceste proteine se gsesc n cantiti foarte mici (urme).
(2) Proteine secretate : aparin peretelui celular i sunt eliberate n cursul creterii bacililor.
Concentraia acestor antigene crete treptat pe parcursul perioadei de cultivare.
(3) Antigene citoplasmatice, eliberate din bacteria omort, a caror
concentraia crete brusc spre finalul fazei logaritmice de cretere (ziua a 5-a), odat
cu eliberarea masiv de izocitrat dehidrogenaza (indicator al autolizei
7
3. TUBERCULOZA
3.1 Boala
Tuberculoza este o boal cauzat de infecia de bacterii M. tuberculoza. Dac nu
este tratat n mod corespunztor, tuberculoza poate fi fatala . n prezent, Organizatia Mondiala a
Sanatatii estimeaza ca peste 13 de milioane de oameni au TBC i aproximativ 1,5 milioane mor
in fiecare an din cauza bolii. Tuberculoza afecteaza cel mai frecvent in plamani (TBC
pulmonar). Pacienii cu TB pulmonar activ au de obicei o tuse, un piept X-ray anormale, i
sunt infectioase. TB poate aprea, de asemenea, n afara plmnilor (extrapulmonare), cel mai
frecvent n nervos, limfatic central, sau sistemele genito-urinare, sau n oaselor si articulatiilor
(1). Tuberculoza
care
apare
mprtiate
pe
tot
corpul
este
menionat
TB
ca
rinichi sau coloanei vertebrale, nu este de obicei infecioase . Dac o persoan are TB confirmat
sau este suspectat de a avea TBC, cel mai bun mod de a opri de transport este prin izolare
imediat. Tratamentul trebuie nceput imediat. Contagiozitate scade repede dupa un regim
standard de tratament a inceput, cu condiia ca pacientul ader la cursul terapiei.
3.4 Diagnostic de laborator
Diagnosticul de laborator al tuberculozei urmrete evidenierea, izolarea i
identificarea Mycobacterium tuberculosis. Probele trebuie recoltate n mod repetat i nainte de
nceperea tratamentului antibacterian. n tuberculoza pulmonar se recolteaz sput eliminat
dup un puseu de tuse sau la copii recoltat prin spltur gastric. Se pot recolta secreii
bronice n cursul bronhoscopiei, lichid de spltur bronsic.
n tuberculoza extrapulmonar produsele recoltate depind de localizarea infectiei: lichid
cefalo-rahidian, urin, secreii vaginale, lichid de punctie etc. Examenul microscopic al frotiului
efectuat din produsul patologic se coloreaz cu metoda Ziehl-Neelsen i se examineaz cu
obiectivul de imersie. Pe fondul albastru al preparatului, Mycobacterium tuberculosis apare ca
bacil fin, uor ncurbat, colorat uniform sau neuniform.
Cultivarea se face n vitro pe mediul Loewenstein-Jensen sau n vivo prin inocularea
cobaiului. Identificarea are la baz caracterele morfotinctoriale, apariia de cordoane pe frotiul
din cultur, caracterele biochimice.
Avnd n vedere creterea lent a bacteriei, antibiograma se efectueaz n paralel cu
izolarea pentru a ctiga timp. Pentru c la un bolnav, n populaia de Mycobacterium
tuberculosis infectant, pot exista tulpini mutante rezistente fa de tuberculostatice, tulpini care
pot cauza eecul tratamentului, este necesar depistarea acestora.
n ultimii ani au fost dezvoltate metode rapide de diagnostic al tuberculozei:
- Sisteme bifazice de izolare i identificare care detecteaz Mycobacterium tuberculosis n 20
de zile.
- Sisteme respirometrice care constau n detectarea radiometric sau fotometric a CO2
eliminat n metabolismul bacterian evideniind creterea bacterian n 15 zile.
- Metode chimice, cromatografice de analiz a acizilor micolici din peretele bacterian permit
identificarea de specie.
- Reacii de tip PCR aplicabile direct produsului patologic permit un diagnostic n cteva ore
i au o mare sensibilitate.
- Metode de hibridare a ADN-ului i ARN-ului bacterian cu sonde marcate sau detectarea
acidului tuberculo-stearic prin cromatografie gazoas i spectrometrie de mas sunt metode
rapide de identificare a tulpinii de Mycobacterium tuberculosis.
11
la noi n ar. Vaccinul conine o tulpin de Mycobacterium bovis care, dup ce a fost
subcultivat de 230 de ori de Calmette i Guerin pe mediul cu bil i cartof, i-a pierdut
capacitatea patogen rmnnd imunogen. Vaccinul BCG (bacille Calmette-Guerin) se
utilizeaz n profilaxia tuberculozei din 1921.
Tulpina vaccinal de Mycobacterium bovis crete pe mediul Loewenstein- Jensen n 2-4
sptmni formnd colonii rugoase, margini netede. Nu produce niacin, nitrat-reductaz, este
rezistent la pirazinamid i la cicloserin. Este catalaz pozitiv i sensibil la hidrazida
acidului tiophen-2-carboxilic.
13
Concluzii
1. Mycobacterium tuberculosis este bacteria care cauzeaz cele mai multe cazuri de tuberculoz. A
fost descris pentru prima dat de Robert Koch, n martie 1882.
2. Este un patogen strict uman desi poate infecta si animalele de companie: papagal, cine,
pisic, maimu.
3. Mycobacterium tuberculosis nu produce toxine. Este patogen prin capacitatea sa de a se
14
BIBLIOGRAFIE
15