Biosenzori

Bibliografie
1. B. Eggins, Biosensors. An Introduction, Ed. Willey
Teubner, 1996.

2. L. Kekedy, Senzori elecrochimici metalici şi

ionselectivi, Ed. Academiei, Bucureşti, 1987.

3. X. Zhang, H. JU, and J. Wang, Electrochemical

Sensors, Biosensors and Their Biomedical
Applications, Ed. Elsevier, 2008.

Biosenzori 1
 §1. Introducere

1.1. Definiția biosenzorului. Structura. Parametrii.

Biosenzorul este un circuit analitic care convertește un

răspuns biologic într-un semnal electric.

Este folosit pentru determinarea concentrațiilor

substanțelor și a unor parametri biologici.

Este alcătuit din trei părți: elementul biologic sensibil,

traductorul și electronica pentru prelucrarea semnalelor.

12/3/2010 Biosenzori 2
  Structura unui biosenzor

(a) bio-reacție – transformă substratul (S) în produs (P);

(b) traductor – determină reacția și o transformă într-un semnal
electric;
(c) amplificator – amplifică semnalul electric;
(d) circuit de prelucrare a semnalelor - prelucrarea semnalului
electric amplificat;
(e) dispozitiv de afișare – afișarea rezultatului prelucrării semnalului.

12/3/2010 Biosenzori 3
  Exemplu de biosenzor : nasul
Structura sistemului olfactiv
nazal

Nările preiau un eșantion de miros, care este apoi sesizat de membrana

olfactivă (elementul biologic). Răspunsurile membranei olfactive sunt
convertite de către celula nevoasă olfactivă (traductorul) în semnale
electrice, care sunt transmise dealungul fibrelor nervoase creierului
pentru interpretare. Astfel, creierul se comportă ca un microprocesor
(circuit de prelucrare a semnalelor), transformând semnalul într-o
senzație, pe care o numim miros.
12/3/2010 Biosenzori 4
 Substratul (analitul)
 Orice substanță care este consumată sau produsă într-un proces
biochimic poate fi, în principiu, analizată de un bisenzor construit în
acest scop.
 Exemple: zaharuri, urea, creatina, etanolul, acidul glutamic, acidul
lactic, fosfatul, colesterolul, penicilina, paracetamolul, aspirina, TNT,
diferiți aminoacizi.

 Elementul biologic sensibil

 Importanța elementului biologic constă în faptul că interacțiunea sa
cu substratul este în cea mai mare parte realizată doar cu acesta,
fără influența (interferența) altor substanțe. Elementul biologic poate
cataliza o reacție implicând substratul (enzima) sau se poate lega
selectiv cu substratul (anticorpi).
 Exemple: enzime sau componente care conțin enzime (microorganisme
și țesuturi), anticorpi, acizi nucleici.

12/3/2010 Biosenzori 5
 Traductoare
- Electrochimice:
(a) Potențiometrice
Implică măsurarea potențialului unei celule la curent egal cu
zero. Potențialul este proporțional cu logaritmul concentrației
substanței care trebuie determinată.
(b) Voltametrice
O creștere (descreștere) de potențial este aplicată celulei până
la oxidarea substanței analizate. În acestă situație apare o
creștere (descreștere) a curentului prin celulă. Înălțimea
vârfului de curent este proporțională cu concentrația
materialului electroactiv.
Dacă potențialul corespunzător oxidării este cunoscut, mărimea
analizată este curentul. Acest mod este cunoscut sub numele
de amperometric.
(c) Conductimetrici
Soluțiile care conțin ioni conduc electricitatea. Valoarea
conductivității depinde de reacția chimică sau biologică. Relația
dintre concentrație și conductanță depinde de natura reacției.

12/3/2010 Biosenzori 6
- Senzori bazați pe tranzistoarele cu efect de câmp (FET – Field Effect
Transistor )
Miniaturizarea poate fi obținută prin realizarea unora dintre senzorii
precizați anterior (cel mai adesea senzorii potențiometrici, dar
și pentru cei voltametrici sau conductimetrici) pe cipul unui tranzistor
FET.
- Optice
Sunt bazate pe tehnicile: absoția spectroscopică, spectroscopia
fluorescentă, spectroscopia luminișcentă, spectroscopia reflexiei
interne, împrăștierea luminii.
- Piezoelectrice
Acestea implică generarea unor curenți electrici într-un cristal
care vibrează. Frecvența vibrației este afectată de masa
materialului absorbit în suprafața sa, care poate fi legată la o
reacție biochimică activă.
- Unde acustice de suprafață
- Metode termice
Procesele chimice și biochimice implică producerea sau absoția
de căldură. Aceasta poate fi măsurată cu termistoare și, astfel,
legată de o parte a reacției.
12/3/2010 Biosenzori 7
  Parametrii unui biosenzor
- Selectivitatea: - indică abilitatea de a deosebi diferite substraturi. Este,
în principal, o funcție a elementului biologic.
- Domeniul de sensibilitate: - în general este ordinul sub-milimolar, dar
poate coborî, în cazuri speciale, la ordinul femtomolar (10-15 M).

- Precizia: - în general este în jurul valorii de  5 %.

- Natura soluției: - condiții precum indicele pH, temperatura, forța
ionică, care trebuie considerate.
- Comportarea dinamică:
- timpul de răspuns – timpul necesar pentru a ajunge la 95% din
răspuns (poate fi 30 s sau mai mare);
- timpul de revenire – timpul necesar biosenzorului pentru a putea fi
gata pentru analizarea unui nou eșantion (nu trebuie să depășească
câteva minute);
- durata de funționare – este determinată de instabilitatea
elementului biologic (poate varia de la câteva zile la câteva luni).
Exemplu: biosenzorul pentru măsurarea glucozei în sânge – 1 an.

12/3/2010 Biosenzori 8
 Metode de imobilizare a elementului biologic de traductor
 Elementul biologic trebuie să fie conectat cât mai bine
de traductor.
Sunt mai multe metode de realizare a acestui lucru:

- Metoda adsorției la suprafață

 este cea mai simplă metodă

- Microîncapsularea
– prinderea se face între membrane. Este cea mai veche
metodă (este folosită pentru biosenzorii de măsurare a glucozei și
ureii).

- Prinderea “în capcană’”

– elementul biologic este prins într-o structură de gel, de pastă
sau de polimer. Este cea mai des folosită metodă.

12/3/2010 Biosenzori 9
- Atașare covalentă
- între elementul biologic și traductor se realizează legături
chimice covalente.

- Legătură încrucișată
- este utilizat un agent bifuncțional pentru realizarea unei legături
între traductor și elementul biologic. Se utilizează, adesea,
împreună cu metoda adsorției și a prinderii în capcană.

12/3/2010 Biosenzori 10