Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
FARMACEUTICE
– EVALUAREA TOXICOLOGICĂ A
MEDICAMENTULUI –
Studiile întreprinse pot fi grupate în 3 etape:
Implică:
studii de toxicologie – pentru evaluarea securităţii substanţei-
test
scopuri:
identificarea structurilor şi funcţiilor fiziologice
afectate de substanţă;
oprirea în aceasta fază a substanţelor care nu
prezintă securitate pentru studiile clinice
● toxicitatea acută
● toxicitatea subcronică
● toxicitatea cronică
● mutagenitatea
● cancerogenitatea
● doză unică
● doze repetate în interval de 24 ore
Obiective:
◼ estimarea toxicităţii la om
Din 1970, testul clasic a fost profund criticat din punct de vedere
ştiinţific şi al protecţiei animalelor, fiind abrogat în 2001.
Obiective:
IT = DL50 / DE50
Pe animalul viu:
semnele vizibile de toxicitatea (modificarea aspectului, funcţiilor
vitale, a comportamentului) (modificări de piele, blană, mucoase,
tulburări respiratorii, tulburări de mers, postură sau răspuns, convulsii
tonice sau clonice) sau mortalitatea;
greutatea corporală;
consumul de alimente;
rezultatele examenului oftalmologic;
datele de patologie clinică (parametrii hematologici, enzimatici,
biochimici, analiza urinei);
în cazul toxicităţii cronice – în plus funcţia cardiovasculară şi absorbţia
substanţei în organism.
EVALUAREA TOXICITĂŢII ÎN STUDIILE DE TOXICITATE DUPĂ
ADMINISTRARE REPETATĂ (II)
Post-mortem:
greutatea organelor;
aspectul histopatologic al organelor (ficat, rinichi, glande suprarenale,
ovare, tiroidă, splină, creier, inimă).
Se realizează când:
structura chimică sugerează un potenţial cancerogen;
substanţa urmează a fi administrată o perioadă lungă de timp;
există risc de acumulare;
mecanismul de acţiune toxică este discutabil;
rezultatele de la studiile de mutageneză şi /sau de toxicitate a
reproducerii sunt pozitive.
Animale utilizate – rozătoare (şoareci sau şobolani), mai rar câini sau
primate.
Examene efectuate:
● evaluarea clinică;
● verificarea apariţiei oricăror mase tisulare neobişnuite;
● evaluarea mortalităţii;
● autopsierea;
● examenul microscopic al tumorilor.
STUDII DE TOXICITATE ASUPRA REPRODUCERII
Se analizează:
la femele gestante – semnele de toxicitate, numărul de corpi
galbeni, numărul de implantări, numărul de resorbţii;
la fetuşi (extraşi chirurgical cu o zi înainte de naştere) – numărul
de fetuşi vii sau morţi, sexul, greutatea şi dimensiunile, anomaliile
existente.
Pentru testele in vitro se pot folosi:
modele celulare – culturi de celule sau organe izolate;
modele acelulare – fracţiunea S9 din ficatul de şobolan,
mitocondrii izolate, enzime purificate.
◼ Parametrii morfologici:
● prin microscopie fotonică – formarea culturii celulare (ataşarea
sau detaşarea de celule), leziunile nucleare şi citoplasmatice
(acumularea de vacuole, picături de lipide);
● prin microscopie electronică – leziuni ale structurilor celulare fine.
◼ Parametrii biochimici:
● integritatea membranară:
❑ numărul de celule
❑ conţinutul în proteine totale sau ADN
❑ testul de incluziune cu tripan bleu
❑ LDH, transaminazele
❑ eliberarea de Cr51 din roşu neutru
● permeabilitatea membranară:
❑ fluxul de ioni sau molecule mici (K+, Ca2+)
❑ acumularea de molecule exogene
◼ Parametrii metabolici:
● testul MTT (obţinerea formazanului de către dehidrogenazele
mitocondriale)
● conţinutul în ATP
● sinteza proteică totală (prin incorporarea unui aminoacid
radioactiv)
● raportul lactat / piruvat
● concentraţia în glutation
● peroxidarea lipidică (determinarea malondialdehidei)
● fixarea covalentă
Scopul evaluării toxicităţii generale este determinarea concentraţiei
inhibitorii 50 – CI50.