ANOMALII (ABERATII CROMOZOMIALE)

Aberaii numerice
Aberaiile numerice pot fi mprite n dou mari categorii i anume:
aneuploidia - datorat pierderii sau dobndirii unuor cromozomi suplimentari; poliploidia datorat adiiei unuia sau a dou seturi haploide complete

1. Aneuploidia Cele mai frecvent ntlnite aneuploidii sunt:

trisomiile datorate apariiei unui cromozom suplimentar;

tetrasomiile datorate existenei n celule a doi cromozomi suplimentari pentru o anumit pereche de cromozomi omologi;

monosomiile rezultate ca urmare a pierderii unui cromozom.

Originea aneuploidiei
Principalele cauze ale aneuploidiei sunt:
non-disjuncia;
pierderea de cromozomi datorit retardrii anafazice; endoreduplicarea selectiv; mitozele multipolare.

Non-disjuncia este procesul prin care cromozomii omologi (sau cromatidele aceluiai cromozom) nu se separ pentru a se distribui n mod egal celulelor fiice, ci migreaz mpreun n una din aceste celule. Acest proces poate avea loc att n timpul gametogenezei ct i n primele stadii ale clivrii

 Procesul de non-disjuncie poate aprea n meioza I, meioza II sau (mai rar) n ambele diviziuni meiotice. Vorbim despre non-disjuncie primar cnd celulele germinale sunt normale i non-disjuncie secundar ce opereaz pe celule germinale anormale (de ex. 47, xxx).
Consecinele non-disjunciei sunt diferite la barbai i la femei, deosebire determinat de particularitile gametogenezei la cele dou sexe. la barbat dintr-un spermatocit primar rezult 4 spermatozoizi funcionali; la femeie dintr-un ovocit primar rezult un singur ovul funcional, fiecare diviziune meiotic fiind nsoit de eliminarea unui globul polar. Din acest motiv la brbai non-disjuncia n decursul meiozei I va determina apariia unor spermatozoizi disomici i nulisomici n timp ce non-disjuncia n meioza II va produce i gamei normali alturi de gamei disomici i nulisomici. La femeie ns non-disjuncia survenit fie n decursul primei, fie a celei dea doua meioze nu poate produce dect ovule anormale: disomice sau nulisomice.

 Posibilitatea ca un zigot anormal s fie consecina unei anomalii survenite n timpul ovogenezei este deci mai mare dect cea a unei anomalii similare aprute n decursul spermatogenezei. Studiile au artat c cea mai mare parte a copiilor cu trisomii autosomale au motenit cromozomul suplimentar de la mam

 Cu o frecven redus, non-disjuncia poate s apar i n primele diviziuni mitotice ale zigotului. Vor rezulta dou sau mai multe linii celulare diferite, fenomen denumit mozaicism.

Constituia cromozomial a organismului care rezult depinde de momentul n care are loc non-disjuncia.
Astfel, dac non-disjuncia are loc n timpul primei diviziuni de clivare a unui zigot normal, va rezulta un produs de concepie care va prezenta dou linii celulare anormale, una monosomic i una trisomic pentru cromozomul n cauz Dac non-disjuncia apare in a doua diviziune a zigotului, va rezulta un blastocit mixoploid alctuit din trei linii celulare: una normal disomic, una trisomic i una monosomic.

In cursul vieii indivizilor se poate produce o selecie care va duce la eliminarea celulelor dezavantajate (n special a celor monosomice). Intruct aceast selecie opereaz mai eficient n esuturile cu diviziune rapid, proporia celulelor anormale nu va fi identic n toate esuturile unei anumite persoane

Cauzele non-disjunciei
Cauzele non-disjunciei nu sunt nc suficient de bine cunoscute. Non-disjuncia apare n decursul ambelor diviziuni meiotice ale spermatogenezei i ovogenezei, dar survine cu o frecven mai mare n ovogenez. In acest sens pledeaz faptul c vrsta medie a mamelor care au dat natere unor copii ci trisomii 21, 13 sau 18, este mai ridicat dect a mamelor care au dat nastere unor copii normali. Studiile au artat, de asemenea, c absena recombinrii n profaza meiozei I ar predispune la non-disjuncie. La femeie recombinarea se produce nainte de natere n timp ce nondisjucia se produce cu 15-50 de ani mai trziu. Aceast observaie sugereaz faptul c non-disjuncia ar putea fi cauzat de cel puin doi factori, i anume: absena recombinrii ntre cromozomii omologi n perioada fetal i apariia, mult mai trziu, unor anomalii n formarea fusului de diviziune. O alt explicaie a aocierii ntre vrsta avansat a mamei i riscul naterii unui copil afectat de o trisomie autosomal, ar consta n aceea c supravieuirea embrionilor trisomici ar putea fi rezultatul unei diminuri a rspunsului imun al mamei, odat cu vrsta. Se apreciaz, de asemenea, c non-disjuncia ar fi favorizat i de creterea intervalului de timp dintre ovulaie i fertilizare.

 Procesul de retardare anafazic reprezint o alt cauz a pierderii de cromozomi. In decursul anafazei, unul sau civa cromozomi nu se deplaseaz spre polii celulei astfel nct dup ce membrana celular se reface n telofaz ei sunt exclui din nucleu, pierznduse n citoplasm. Endoreduplicarea selectiv a fost definit ca o replicare dubl a unei pri din genom (un cromozom ntreg sau o parte de cromozom). Mitozele multipolare sunt o cauz a aneuploidiilor n special n celulele canceroase. Ele sunt consecina formrii unui fus multipolar datorat unor diviziuni succesive ale centrosomului i duc la repartizri inegale ale cromozomilor n celulele fiice. Un procent relativ mic din numrul de aneuploizi ar putea fi atribuit i altor factori precum:
tulburarilor autoimune parentale (anticorpi antitiroidieni la mam); aciunea mutagen a iradierilor medicale; infeciile virale materne.

Poliploidia
Organismele poliploide conin n celule un multiplu al numrului haploid de cromozomi. La om, formele triploide conin 69 de cromozomi n celule i au fost ntlnite n special n cazul analizelor citogenetice a produilor de concepie avortai. Zigoii triploizi pot lua natere fie prin fecundarea unui ovul de ctre doi spermatozoizi (dispermie), fie, prin fuziunea ovulului cu un globul polar (diginie).

Tetraploizii au la om 92 de cromozomi i apar cu o frecven foarte mic, tetraploidia fiind cosiderat incompatibil cu viaa. Astfel de constituii genetice au fost identificate n urma realizrii analizei cromozomiale a unor produi de concepie avortai spontan.
Se apreciaz c aceste forme apar, cel mai probabil, ca urmare a unei supresii a primei diviziuni de clivare a unui zigot diploid, dup separarea cromozomilor dar naite de diviziunea citoplasmei.

 Poliploidizarea poate aprea i n decursul vieii adulte datorit unor accidente mitotice (endomitoza sau endoreduplicarea).

Celule poliploide au fost evideniate n proporie foarte redus n mduva osoas i n culturile de limfocite, fiind ns foarte frecvente n celulele tumorale.
In cazul endomitozei cromozomii se comport normal pn n profaza trzie cnd membrana nuclear nu se dezintegreaz iar fusul de diviziune nu se formeaz. Endoreduplicarea se caracterizeaz prin dou duplicri succesive a cromozomilor n interfaz astfel c n profaz i metafaz se observ un numr dublu de cromozomi. Procesul de separare a cromozomilor se desfoar n mod normal dar el opereaz pe o garnitur cromozomial dubl i va duce n final la apariia a dou celule tetraploide.

Aberaii structurale
Aberaiile structurale ale cromozomilor rezult ca urmare a apariiei unor rupturi urmate fie de pierderea segmentului lipsit de centromer, fie de realipirea fragmentului rupt ntr-o configuraie diferit. Aberaiile cromozomiale pot fi balansate sau nebalansate.
In cazul celor balansate complementul cromozomial rmne complet deoarece nu a avut loc o pierdere sau un ctig de material genetic. Ca urmare acest tip de aberaii cromozomiale nu are n general urmri mai puin rarele situaii n care unul din punctele de ruptur este localizat la nivelul unei gene funcionale importante. Purttorii unor aberaii cromozomiale balansate prezint un risc de a avea copii cu un complement cromozomial anormal. In cazul aberaiilor cromozomiale nebalansate, se produce o modificare a cantitii de material genetic iar urmrile asupra organismului sunt cel mai adesea severe.

Rupturile
Constau n ntreruperi ale continuittii cromatidelor sau cromozomilor nsoite de o deplasare lateral a fragmentelor distale. Ele pot avea trei consecine: reunirea fragmentelor cu refacerea structurii iniiale a cromozomilor (restituie); reunirea cu modificare rezultnd diferite tipuri de aberaii cromozomiale; lipsa reunirii cu pierderea fragmentului rupt. Agenii care provoac rupturi cromozomiale (ageni clastogeni) sunt destul de variai. Ei pot fii clasificai n factori externi (radiaii, substane chimice, virusuri) i interni (afeciuni ereditare, mbtrnirea). Expunerile la doze mari de radiaii pot fi accidentale sau datorate iradierilor profesionale sau medicale. In grupa agenilor chimici intr substane extrem de numeroase utilizate pe scar larg (chimioterapicele antitumorale, unele antibiotice, pesticide, detergeni i aditivi din industria cosmetic sau alimentar). Consecinele aciunii virusurilor infecioase (virusurile hepatitei A i B, rubeolei) sau oncogene (polyoma, SV-40) sunt extrem de grave iar tabloul modificrilor cromozomiale este complex.

In unele afeciuni ereditare precum Sindromul Bloom sau anemia Fanconi exist n mod spontan un nivel crescut de rupturi cromozomiale. Persoanele care sufer de aceste boli prezint o inciden crescut a anumitor tipuri de cancer.

Deleiile
Deleiile (lipsurile) constau n piederea unui fragment de cromatid sau de cromozom.
Ele pot fi terminale sau interstiiale i sunt cauzate de rupturi care apar la nivelul cromozomului. Dac ruptura a avut loc nainte de faza S a ciclului celular va genera o deleie cromozomial, iar dup aceast faz o deleie cromatidic. n urma unor deleii izocromatidice suprafeele de ruptur de la capetele cromatidelor pot fuziona, iar n faza urmtoare a diviziunii, cnd cei doi centromeri rezultai prin clivare migreaz spre cei doi poli ai fusului de diviziune, cromatidele ramn unite prin zona de fuzionare realiznd o punte anafazic. In anafaz, fragmentele telomerice acentrice nu se pot deplasa spre unul dintre polii celulei datorit faptului c sunt lipsite de centromer. Din aceast cauz se pierd i rezult o lips terminal simpl.

Dac se produc rupturi simultane la ambele capete ale unui cromozom, zonele acentrice se pierd, iar fragmentul cu centromeri formeaz un cromozom circular (inelar) prin unirea capetelor lipsite de telomere care devin instabile i au tendina de a se uni.

 Deleiile sunt datorate, cel mai frecvent, formrii unei bucle de nclecare, la nivelul creia se produce o ruptur dubl rezultnd patru capete. Va rezulta un fragment acentric (care la nivelul metafazei formeaz micronucleii) i un cromozom cu deleie.
Contrar ateptrilor deleiile intercalare sunt mai frecvente dect cele terminale, deoarece nu implic formarea de noi telomere pentru stabilizarea deleiilor. Deleia const n pierderea un fragment de cromozom i prin urmare va duce la apariia unei monosomii pentru fragmentul pierdut. In general o deleie mare (mai mare de 2% dintr-un set haploid de cromozomi) este considerat incompatibil cu supravieuirea. Unele deleii, precum cele care duc la apariia sindroamelor WolfHirschhorn sau cri-du chat pot fi observate la microscop n preparate obinute din plci metafazice. In cazul n care deleia implic un fragment de dimensiuni foarte mici identificarea se poate face numai prin realizarea unei analize citogenetice n prometafaz i studiilor de hibridizare in situ. Aa este cazul sindroamelor Angelman i Prader-Wili.

Duplicaiil
Duplicaia const n dublarea unui fragment cromozomial sau cromatidic Apariia unei duplicaii este consecina unei rupturi urmate de anexarea segmentului rezultat la cromozomul sau cromatida omoloag. Fragmentul anexat poate avea o orientare identic cu cea a cromozomului normal, rezultnd o duplicaie n tandem. Uneori nainte de anexare segmentul se rotete cu 180o rezultnd o duplicaie invers sau palindrom. Duplicaiile pot rezulta i prin crossing-over inegal ntre cromatidele unui bivalent.

Inversia
Inversia const n ruperea unui fragment cromozomial urmat de sudarea acestuia n punctele de ruptur, dup ce a suferit o rotaie de 180.
In funcie de poziia segmentului inversat, inversiile pot fi terminale sau intercalare. Acest din urm tip presupune producerea a dou rupturi.

In funcie de poziia rupturilor inversiile intercalare pot fi: pericentrice, dac punctele de ruptur sunt situate pe brae cromozomiale diferite, de o parte i de alta a cetromerului, i intercalare sau paracentrice, cnd cele dou puncte de ruptur sunt pe acelai bra. In meioz inversiile se pot detecta deoarece n timpul sinapselor dintre cromozomii omologi segmentul inversat va forma o bucl cu segmentul omolog normal datorit inversrii succesiunii genelor. Inversiile sunt restructurri cromozomiale balansate dar duc la schimbarea succesiunii genelor pe cromozom fapt ce poate genera un efect de poziie. Cnd unul din punctele de ruptur este localizat la nivelul unei gene funcionale importante efectele pot fi grave.

Un individ care prezint o inversie pericentric poate produce gamei neechilibrai genetic dac crossing-overul are loc pe poriunea segmentului inversat. Ca urmare vor rezulta doi cromozomi omologi

Izocromozomi
Izocromozomii sunt cromozomi metacentrici cu bratele identice structural i funcional, rezultai n urma unor clivri transversale a centromerului. Cel mai frecvent ntlnit izocromozom este cel alctuit din dou brae lungi ale cromomosomului X. El este rspunztor de cca. 20% din cazurile de sindrom Turner.

Fragmente acentrice
Fragmentele acentrice rezult n urma unor deleii intercalare sau terminale i sunt detectabile n metafaz. Apartenena acestora se poate stabili prin aplicarea tehnicilor de bandare. La sfritul mitozei fragmentele acentrice formeaz unul sau mai muli micronuclei.

Cromozomii inelari
Un cromozom inelar rezult ca urmare a fuziuonrii suprafeelor de ruptur ale cromatidelor unui cromozom n urma unor deleii terminale. Ei sunt nsoii cel mai adesea de unul sau mai multe fragmente acentrice. Cromozomii inelari sunt cel mai adesea incapabili de a trece printr-o diviziune mitotic, astfel nct ei pot fi ntlnii numai la o parte din celule. Celelalte celule ale individului sunt monosomice datorit absenei cromozomului inelar.

Cromozomi minusculi dubli (dms)

Aceti cromozomi au aspectul unor sfere mici de cromatin apropiate ntre ele i au fost observai prima dat n celule provenite din tumori umane. Faptul c dms se gsesc numai n tumori, se pot ntreine i chiar nmuli, a condus la afirmaia c ele au rol n evoluia tulpinilor maligne pentru a provoca prbuirea mijloacelor de aprare ale gazdei. Prin tehnicile de bandare s-a constatat c dms nu prezint centromeri, fapt care face greu de explicat modul n care acetia pot rmne timp ndelungat n populaiile celulare maligne tiut fiind faptul c formaiunile acentrice nu se include n nucleu la sfritul mitozei.

Translocaiile
Translocaiile constau n transferul unui segment dintr-un cromozom la un alt cromozom neromolog. Atunci cnd are loc un schimb reciproc de segmente cromozomiale se realizeaz o translocaie reciproc Schimbul dintre doi cromozomi neomologi poate fi egal sau inegal, iar detectarea segmentelor implicate se face prin tehnici de bandare. De cele mai multe ori, complementul cromozomial al individului ce conine o translocaie este echilibrat, schimbndu-se numai localizarea genelor pe cromozom. Cnd un cromozom pierde prin deleie un fragment ce se va ataa la un alt cromozom neomolog fr ca la cromozomul deletat s se transfere n schimb un alt fragment se produce o translocaie nereciproc

Translocaie robertsonian (fuziune centric)

Translocaia robertsonian rezult ca urmare a clivrii a doi cromozomi acrocentrici (13, 14, 15, 21 sau 22) la nivelul centromerului sau n apropierea sa, urmat de fuziunea braelor lungi. Urmarea unei translocaii robertsoniene este reducerea numrului de cromozomi la 45. Deoarece nu se pierde i nici nu se ctig material genetic de importan major, translocaia robertsonian este considerat o restructurare balansat. Incidena translocaiilor robertsoniene n populaie este estimat la 1/1000, cea mai frecvent fuziune centric fiind cea ntre braele lungi ale cromozomilor 13 i 14.