- INSULINA-

PRODUSUL BIOTEHNOLOGIEI
MEDICALE FOLOSIND
TEHNOLOGIA
ADN-ULUI RECOMBINAT

DAVID ALEXANDRA
FACULTATEA DE BIOINGINERIE BEDICALA
ANUL 3
GRUPA 1
INTRODUCERE:

 Biotehnologia medicală este definită

ca aplicarea instrumentelor biotehnologice
pentru producerea produselor medicale care
pot fi utilizate pentru diagnosticul,
prevenirea și tratamentul bolilor. Cele mai
cunoscute produse ale biotehnologiei
medicale sunt antibioticele care sunt utilizate
pentru tratarea infecțiilor bacteriene. .
TEHNOLOGIA AND-ULUI RECOMBINAT
 Cel mai remarcabil produs al
biotehnologiei medicale este insulina umană
care poate fi acum produsă în afara corpului
uman. Acest produs evidențiază creșterea
tehnologiei biomedicale în ultimii ani. Similar
cu hormonii de creștere, insulina este, de
asemenea, considerată un dar al biotehnologiei
moderne. Aceste produse medicale au fost
generate folosind tehnologia ADN-ului
recombinant , permițând producția în cantități
mari.
 Primul concept pentru tehnologia ADN-
ului recombinant a venit din descoperirea de către
Werner Arber a enzimelor de restricție din
bacteriile care degradează moleculele ADN virale
străine. Din această descoperire, geneticienii au
învățat să „taie” și „să lipească” molecule de
ADN și au fost descoperite sau inventate noi
enzime de restricție pentru tăiere și lipire.
 Dezvoltarea tehnologiei ADN-ului
recombinant a fost avansată prin colaborarea lui
Stanley Cohen și Herbert Boyer în 1972. Ei au
înființat și prima companie care s-a concentrat pe
tehnologia ADN-ului recombinant în 1976.
 Tehnologia ADN-ului recombinant se referă la
utilizarea a trei instrumente principale:

 enzime (enzime de restricție, polimeraze și

ligaze);
 vectori;
 organismul gazdă.
ENZIME:
 Enzimele vor ajuta la tăierea (enzimele
de restricție), la sintetizarea (polimerazele) și la
legarea (ligazelor) ADN-ului. Enzimele de
restricție joacă un rol important în această
tehnologie. Enzima de restricție se va tăia la un
anumit situs din molecula de ADN numit situs
de restricție. De obicei, enzima de restricție va
produce capete lipicioase în secvența ADN care
se va produce si ajută să se lege specific de
gena dorită.
 VECTORI:
 Vectorul va purta gena dorită. Vectorii sunt părți
importante ale tehnologiei ADN recombinant. Acestea
sunt considerate drept vehiculele finale care transportă
gene de interes în organismul gazdă. Până în prezent au
fost dezvoltate mai multe tipuri de vectori; totuși,
vectorii cei mai frecvent utilizați sunt plasmidele și
bacteriofagii.
 Un vector trebuie să conțină aceleași site-uri de
restricție care se găsesc în gena dorită pentru a facilita
integrarea genei. În plus, vectorii ar trebui să poarte, de
asemenea, secvențe pentru selecție și identificare, cum ar
fi o genă pentru rezistența la ampicilină și site-uri de
clonare.
ORGANISMUL GAZDA:

 Organismul gazdă este celula în care este introdus

ADN-ul recombinant. Până în prezent, organismele gazdă
includ bacterii, ciuperci și celule animale. Pentru a
introduce vectori în gazde, s-au folosit tehnici care implică
microinjecție , biolistică , pistol de gene, răcire și încălzire
alternative și ioni de fosfat de calciu .
 În general, o tehnologie ADN recombinant are
cinci etape:
 (1) tăierea ADN-ului dorit prin situri de restricție,
 (2) amplificarea copiilor genei prin PCR,
 (3) inserarea genelor în vectori,
 (4) transferarea vectorilor în gazdă
 (5) obținerea produselor genelor recombinate.
 Tehnologia ADN-
ului recombinant .
Evidentierea celor 5
etape
INSULINA, HORMONUL UMAN RECOMBINAT
 Insulina este un medicament cu succes spectaculos pentru
tratamentul diabetului, dar, rămâne dificil să imiți modelul
fiziologic al secreției de insulină, chiar folosind diferitele
formulări cu acțiune rapidă și insolubile disponibile.
Introducerea tehnologiei recombinante: -ADN la fabricarea
produselor terapeutice, insulina a modificat proiectarea și
producția rațională a analogilor insulinei posibile proprietăți
farmacocinetice și farmacologice. Astfel de analogi includ
'insulină monomerică, care nu formează hexamerul insulină-
zinc în soluție și sunt absorbite mai rapid de la locul injectării și
insuline cu acțiune îndelungată, care sunt absorbite foarte lent la
pH fiziologic. Mulți dintre acești analogi sunt testat clinic și
este posibil ca următoarea generație de terapie cu insulină să fie
diverse combinații de analogi de insulină proiectați rațional
produși de industria biotehnologie.
 De la descoperirea sa de către Banting și Best în anii 1920, utilizarea insulinei în tratamentul
diabetului zaharat a fost unul dintre succesele spectaculoase ale stiintei farmaceutice. Mai recent,
fabricarea și comercializarea insulinei umane produse de Tehnologia ADN –ului recombinat
(ADNr) rămâne una dintre cele mai multe realizări semnificative ale biotehnologiei industriale. O
serie de strategii diferite au fost adoptate pentru a produce insulină terapeutică. Timp de mulți ani,
insulina a fost purificată din extracte pancreatice de porc si bovine. Insulina porcină diferă de
insulina umană cu un singur aminoacid și utilizarea sa a înlocuit treptat insulina bovină, care diferă
de insulina umană prin trei aminoacizi. Fabricarea de insulină umană în cantități suficiente pentru
utilizarea în terapie a fost următorul pas logic și acest lucru a fost realizat inițial de modificarea
enzimatică a insulinei porcine. Singurul aminoacid diferit dintre cele 2 specii este B30-alanina
(porcina) - B30-treonina(umana) si deoarece aminoacidul B29 este lizina, enzimele ca tripsina pot
elimina rezidual de alanina C- terminal și îl înlocuiesc cu terotonina, dacă acesta din urma este
prezent în exces. Ulterior, insulină umana a fost produsa prin mai multe abordări diferite care
utilizează tehnologia ADN-ului recombinat. Insulina umană crb(lanț, recombinare, bacterii) a fost
produsa prin fabricarea lanțurilor se parte de insulină A și B și realizarea unei substanțe reoxidate
chimic. Insulina umană prb (proinsulină, recombinare, bacterii) a fost produsă prin fabricarea
intermediar fiziologic, biosintetic, proinsulină, și îndepărtarea enzimatică a peptidei de legătură.
Prezența insulinei umane pry (precursor, recombinant, drojdie) a fost fabricat, de asemenea, în
drojdie, printr-un proces care utilizează un intermediar biosintetic, în care aminoacidul natural 35
conectează peptida de legătură care este înlocuită cu doi aminoacizi. Este demn de remarcat faptul
că insulina umană emp (Enzyme- porcine modificate) este de o calitate similară cu insulina
recombinată și, într-adevăr, este practic similar cu orice preparat recombinant și nu este mai scump
de produs.
Avantaje:
 Avantajele producției de ADN
recombinat sunt în principal condiții de
eliminare a dependentei de material de
abator, garantând astfel aprovizionarea și
eliminarea potențialelor probleme de
material slab reproductibil sau materie
prima infecțioasă.
CONCLUZIE:
 Biotehnologia medicală a furnizat mai multe
tehnologii pentru îngrijirea sănătății : reacția în lanț
a polimerazei , au contribuit semnificativ la
îmbunătățirea științei sănătății, cum ar fi
secvențierea genomului uman, utilizarea celule
stem pentru medicina regenerativă , ingineria
țesuturilor, dezvoltarea antibioticelor și generarea
de anticorpi monoclonali pentru terapie, dar dintre
toate aceste ,cel mai remarcabil produs al
biotehnologiei medicale este insulina umană
produsă în afara corpului,prin diferite tehnologii
ale AND-ului recombinat.
BIOGRAFIE:
 Academic Press, Omics Technologies și Bio-
Engineering 2018, Cap. 19. Medical
Biotechnology: Techniques and
Applications, pag. 449-469.
 Cell Press, Trends in Biotechnology,
Volumul 11, pag. 301-305.