Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
TEHNICI DE SPECTROSCOPIE
Definitie generala: Spectroscopia presupune analiza efectului interactiei radiatiei electromagnetice cu proba
energia; viteza;
Lungine de unda Amplitudine
Modificarea a cel putin una din proprietati are loc la interactia radiatiei electromagnetice cu proba
de antilegatura (neocupati)
( <150nm n
de antilegatura (neocupati)
radiatie
Orbitalii legaturilor duble de legatura (ocupati) Orbitalii legaturilor simple de legatura (ocupati)
neparticipanti (
* in
E = Ee
Ef = hc/
Nivele rotationale Nivele vibrationale Stari electronice excitate Nivele rotationale Nivele vibrationale Stari electronice fundamentale
Metoda spectroscopica
Spectroscopie UV Vis
Domeniul de frecventa
Numar de unda
masoara absorbtia pentru a avea tranzitii din starea fundamentala in starea excitata
104
106 cm-1
Spectroscopie Raman
radiatie IR
100
1 m
31012Hz - 31014Hz
radiatia R ntgen
10 nm -100 pm
31016Hz - 31018Hz
106
108 cm-1
microunde
1m
1 cm
300 MHz
30 GHz
0,01
1 cm-1
unde radio
100 m
1m
10-4
0.01 cm-1
Metoda spectroscopica
Spectroscopie UV Vis
Domeniul de frecventa
Numar de unda
Spectroscopie de fluorescenta
masoara absorbtia pentru a avea tranzitii din starea fundamentala in starea excitata masoara tranzitiile din starea excitata in starea fundamentala
1000 nm
100 nm
31014Hz - 31016Hz
104
106 cm-1
SPECTROSCOPIE UV - VIZ
Frecvente mari
Spectrul vizibil
Frecvente mici
> Cand lumina traverseaza sau este reflectata de o substanta colorata, o parte caracteristica a lungimilor de unda este absorbita. > Lumina ramasa din spectru se presupune a fi complementara in culoare cu lungimile de unda absorbite.
Absorbtia luminii in domeniul 420-430 nm face ca substanta sa fie galbena, iar Absorbtia luminii in domeniul 500-520 nm face ca substanta sa fie rosie.
Spectrometru cu monofascicul (pentru fiecare lungime de unda este detectata cantitatea de lumina transmisa / reflectata)
Spectrometru dublufascicul
= c
A = cl
Legea Lambert
Beer
lumina incidenta
lumina transmisa
lumina incidenta
lumina transmisa
lumina incidenta
lumina transmisa
Absorbanta este direct proportionala cu concentratia solutiei > dublarea concentratiei dubleaza absorbtia
Absorbanta este direct proportionala cu distanta parcursa in solutie > dublarea distantei dubleaza absorbtia
A = cl
Legea Lambert
Beer
Exemplu de curbe de absorb ie la diferite concentra ii de analit curba de etalonare a absorbantei la maximul de absorb ie la max
La concentratii mari (> 10-2 M) apar interactii intre particulele absorbante. In plus, se modifica indicele de refractie al solutiei
Evolutia spectrului de absorbtie pentru nanocristale cu diametre de la 1,7 nm pana la 12 nm (CdSe/ZnS core/shell QD)
450 nm 700 nm
blue shift
bulk
= 710 nm 260 nm
QD
= 450 nm
262 nm
pana la valori nanometrice determina aparitia fenomelor de confinare cuantica Apare fenomenul de largire a benzii interzise (BI)
SPECTROSCOPIE DE FLUORESCENTA
detectie complementara spectroscopiei UV-Vis > daca in spectroscopia UV-Viz se masoara energia absorbita de o molecula pentru a trece dintr-o stare fundamentala in stare excitata, > in spectroscopia de fluorescenta se masoara energia emisa de o molecula pentru a trece din starea excitata in starea fundamentala.
Diagrama Jablonski
Conversie interna > tranzitii neradiative
Vi
S0 S1
ns
fluorescenta
fosforescenta
II
Metoda spectroscopica
Domeniul de frecventa
Numar de unda
Spectroscopia IR
Spectroscopie Raman
Inregistreaza aparitia unor miscari vibrationale ale moleculelor Inregistreaza aparitia unor miscari vibrationale ale moleculelor atunci cind sint insotite de o modificare in momentul dipolului
radiatie IR
100
1 m
31012Hz - 31014Hz
SPECTROSCOPIE IR si Raman
Fiecare atom are 3 grade de libertate > o molecula cu n atomi are 3n grade de libertate
3 grade de libertate descriu translatia moleculei 3 grade de libertate descriu rotatia moleculei
Pentru o molecula liniara, rotatia in jurul axei nu conteaza (nu afecteaza energia moleculei)
3n-6
3n
Exemple:
H2O CO2 molecula neliniara cu 3 atomi molecula liniara cu 3 atomi 3n 3n
C6H6 (benzen)
molecula foarte mica, dar cu 30 de benzi de vibratie in IR si Raman polistiren contine 1000 de unitati monomere (16000 atomi) aproximativ 50.000 de vibratii diferite
molecula polimer
simplificam luand in considerare numai gruparile chimice repetitive (ex: benzile nucleului aromatic, vibratiile C-H, C-C sau C=C
Campul electric oscilant al radiatiei electromagnetice interactioneaza cu fluctuatiile momentului de dipol al moleculei
Daca frecventa radiatiei se potriveste cu frecventa vibrationala a moleculei, atunci radiatia va fi absorbita
Exemplu
Legatura C - N absoarbe la 1050 1650 cm-1 Legatura C
Exemplu
N absoarbe la
2200 cm-1
Exemplu
Legatura C - H stretch in alkene absoarbe la 2600 2800 cm-1
Legatura C la 600
Legatura C la 500
I I // Cazul unor molecule neliniare Exemplu: apa (H2O) molecula neliniara cu 3 atomi 3n 6 = 3 stari vibrationale
1=2
vibratii streching
2n
5=1
vibratii bending
pentru legaturile H - O
pentru structura H
O-H
Felul in care radiatia este utilizata difera in spectroscopia Raman fata de spectroscopia IR : in FTIR energia care acopera un interval de frecvente este directionata catre proba; > absorbtia are loc cand frecventa radiatiei incidente se identifica cu cea la care molecula trece intr-o stare excitata vibrationala in Raman se utilizeaza o singura frecventa a radiatiei pentru iradierea probei > radiatia este imprastiata de molecula, detectandu-se unitatile de energie vibrationale diferite de cele incidente (lumina care interactioneaza cu moleculele distorsioneaza polarizeaza norul electronic)
Imprasierea Raman trebuie exprimata ca o deplasare in energie fata de radiatia de excitatie Pentru legaturi cu un moment puternic de dipol (care sunt active IR) mobilitatea electronilor sau polarizabilitatea este de obicei scazuta. Pentru legaturi cu un moment slab de dipol (care sunt inactive IR) polarizabilitatea este de obicei mare si starile vibrationale ale legaturilor sint active Raman.
Spectru IR
Acid benzoic
Spectru Raman
Spectroscopie Raman
Nu implica nici absorbtia, nici emisia, ci imprastierea radiatiei Radiatia IR incidenta determina miscarea electronilor in legaturi si poate fi: absorbita; difuzata fara a i se modifica lungimea de unda > difuzie Rayleigh;
Este sensibila la mobilitatea electronilor in legaturi (polarizabilitatea legaturilor) Masoara cit de usor este sa misti un electron si implicit sa polarizezi o legatura
-4
imprastiata Raman-Stokes (daca lungimea de unda a radiatiei difuzate este mai mare dect cea a radiatiei incidente); imprastiata Raman-antiStokes (daca lungimea de unda a radiatiei difuzate este mai mica dect cea a radiatiei incidente);
Spectroscopie IR
Energia asociata radiatiilor IR este suficienta sa stimuleze vibratiile moleculare (ale legaturilor chimice) Conditii pentru ca o molecula sa absoarba radiatia n domeniul IR: sa aiba o structura de dipol sau sa poata dobandi o astfel de structura prin excitatie perioada de vibratie trebuie sa fie in faza cu perioada de oscilatie a radiatiei incidente cantitatea de energie a radia iei IR trebuie sa fie permisa de restrictiile cuantice Spectrul IR rezultat reprezinta absorbtia si transmisia moleculara, fiind amprenta moleculara a probei
Spectrele utilizate curent sunt de fapt spectre asupra carora s-a aplicat transformata Fourier
Schema de detectie
Al 2-lea fascicul se reflecta pe o oglinda plata care se deplaseaza pe distante scurte (inainte inapoi)
Pentru ca au parcurcurs drumuri optice diferite, semnalul rezultat este un semnal de interferenta
Fiecare punct contine o informatie despre fiecare frecventa IR care vine de la sursa
O-H
C-H
C-0
Observatii: - o molecula contine legaturi care dau mai multe vibratii posibile > in spectrul IR trebuie sa se regaseasca mai multe absorbtii care sa defineasca o molecula (nu numai o legatura chimica); - se pot identifica legaturile specifice ale unei molecule (gruparile functionale) pentru a determina structura;
III
III
Principiul de detectie:
proba cu particule in suspensie este iluminata
daca particulele ar fi fixe > imaginea de pe ecran ar fi stationara; fiind in miscare browniana > imaginea nu este stationara
proba Particule in suspensie
Este posibila obtinerea distributia de dimensiuni ale sferelor si sa ai implicit o descriere a miscarii particulelor in mediul respectiv masurand coeficientul de difuzie al particulelor si utilizand functia de autocorelatie.
Particulele sau macromoleculele suspendate intr-un mediu lichid, aflate in miscare Browniana determina fluctuatiii ale concentratiei locale a particulelor apar neomogenitati locale ale indicelui de refractie
= Dk2
unde
unghiul de imprastiere
IV
SPECTROSCOPIE DE IMPEDANTA
IV
SPECTROSCOPIE DE IMPEDANTA
Sistem analizat
E0 +
E sin( t)
Sistem analizat
I0 +
I sin( t + )
I, E I, U
deplasare de U: phase shift faza
timp time
= E (i
i)
/ I (i
i)
numar complex
= Rei + iImi
.n frecventele din interval
= =Zej
Zi, f i ]
R1
R2
Re
Pe de o parte functia impedanta contine toate informatiile pentru un sistem investigat (daca ipotezele de lucru sunt alese corespunzator). Pe de alta parte aceasta informatie trebuie extrasa din datele experimentale, (identificarea procedurii de analiza a datelor)
structura cristalina - evaluare rapida pentru un material cu o structura policristalina a contributiei individuale la conductia electrica sau la polarizare (efectele regiunilor de contact intergranulare sau a volumului)
caracterizarea densitatii de impachetare si distributia de defecte in straturile auto-asamblate transferul electronilor prin stratul auto-asamblat de alkanethiol si implicit prin straturile corespunzatoare de recunoastere moleculara
caracterizarea electrozilor -potentialul de flat-band, densitatea de sarcina (masuratori Mott-Schottky); - proprietatile catalitice ale nanoparticulelor metalice transferul electric in materiale nanocompozite - contributia starilor electronice de suprafatala transportul electronilor
1.
- parametrii de reactie (relatia intre geometria electrozilor si cinetica la electrod, monitorizarea incarcarii surprafetei electrozilor datorita speciilor intermediare adsorbite; - efectele straturilor de interfata in cazul structurilor poroase.
dezvoltarea de senzori
- mecanismele ne-faradaice
2.
(pierderile ohmice, conductivitatea ionica in membranele cu schimb protonic); - investigarea integritatii oxidului / straturilor de acoperire; - ratele de corodare (proprietatile straturilor organice de acoperire in contact cu solutiile corozive
The capacitance of the Electrolyte/PS/Si has been measured as function of DC potential and the data recorded for different concentration of DNA in electrolyte solution are presented. The figure illustrate that the test structure capacitance plots suffer modifications by adding different concentrations of DNA in electrolyte solution: the flat band potential is shifted to lower values as DNA immobilization starts from 0.31V to 0.24V and 0.21V respectively.
Experimental data Phosphate buffered saline- PBS) is a buffer solution commonly used in biological research. It is a salty solution containing sodium chloride, sodium phosphate, and (in some formulations) potassium chloride and potassium phosphate. The buffer helps to maintain a constant pH. DNA 1 1 M /50 ml PBS solution DNA 2 2 M/50ml PBS solution
Bode (a, b) and Nyquist (c) plots for different concentration of DNA in electrolyte solution
The Bode phase angle plots (a) reveal that phase angle attained a maximum at the value of -30 at higher frequency region, which tends to -20 as the concentration of DNA is increased; opposing, in lower frequencies domain, the maximum is initially around -70 and its value increases to -80 going concomitantly with a gradual shift to lower frequencies, proving that the interface phenomena became dominant. The corresponding impedance module plots fig. (b) show a similar behavior, with a more evident decrease of values in low frequencies domain. The Nyquist graphs presented in fig. (c) indicate that the data are not well separated above 200 Hz and clear distinct below, with a dominant interface capacitance.