COAGULAREA I FIBRINOLIZA

ACTIVAREA LOCAL A PLASMINOGENULUI

SCHEMA OBINERII ACTIVATORULUI TISULAR AL PLASMINOGENULUI UMAN PRIN RECOMBINARE GENETIC

FACTORUL VIII DE COAGULARE ENDOGEN (FAH)

glicoprotein plasmatic cu rol n coagularea sngelui; deficitul FAH din organism duce la hemofilia de tip A, genopatie ce se transmite de ctre mam i se manifest la biei (transmiterea unei tare purtat de cromozomul X); este o protein care se scindeaz uor prin proteoliz i care are o durat de via de 812 ore; forma activ a factorului VIII are 2332 de aminoacizi legai de carbohidrai la nivelul a 25 locuri de legare; factorul VIII este asociat covalent cu factorul von Willebrand (carrier pentru factorul VIII), ce are 2 roluri: de a proteja factorul VIII mpotriva scindrii sale proteolitice i de a susine asocierea ntre lanurile grele i uoare;

OBINEREA FAH
1. EXTRACIE DIN PLASMA UMAN se obin cantiti mici, iar produsul este scump; expune pacienii la aloantigeni; pot aprea anticorpi circulani antiA sau antiB, expune pacienii la maladii virale (ex: hepatita viral B, hepatite nonA i nonB, SIDA);

2. OBINEREA PRIN INGINERIE GENETIC A rFAH a nceput n 1984 odat cu izolarea genei care codific producerea factorului VIII de coagulare; se realizeaz prin: introducerea genei n culturi de bacterii; introducerea genei n culturi de celule animale, introducerea genei n animale transgenice, obinerea primei generaii de rFAH const n producerea moleculei ntregi de factor VIII cu 2332 aminoacizi; ncepnd cu anul 2000 se comercializeaz a doua generaie a factorului VIII (cu numr mai mic de aminoacizi)

FACTORUL IX DE COAGULARE
protein cu 415 aminoacizi separai n 5 lanuri polipeptidice (AE) are rol n coagularea sngelui; deficiena acestui factor (factor antihemofilic B) duce la hemofilia de tip B se obine prin recombinare genetic, metod pus la punct de firma TRANSGENE

FACTORUL IX DE COAGULARE
avantajele factorului IX recombinant sunt: stabilitate mai mare (nu necesit adaos de albumin sau alte proteine pentru stabilizare) purificarea lui nu necesit utilizarea de anticorpi monoclonali producerea lui nu este dependent de snge are puritate avansat activitatea biologic este egal cu a compusului endogen

ANTICOAGULANTE RECOMBINANTE
n terapie se utilizeaz: - heparina glucozaminoglican cu M=3000-40.000 Da (extras din plamni de vac, din mucoasa gastric porcin) - dicumarolul baz cumarinic cu M=336,3 Da (obinut prin sintez chimic) - warfarina baz cumarinic cu M=308,4 Da (obinut prin sintez chimic) - hirudina polipeptid cu M=7000 Da (extras din saliva lipitorilor i mai nou prin inginerie genetic) - proteina C glicoprotein cu M=62.000 Da (extras din plasma uman) - ancrodul polipeptid cu M=35.000 Da (cercetri clinice) (extras din veninul de arpe i mai nou prin inginerie genetic)

ANTITROMBINA RECOMBINANT
glicoprotein format din 432 Aa aranjai ntr-un singur lan i 4 oligozaharide ataate lateral, cu M=58 kDa anticoagulant natural, prezent n plasma uman n conc de 150 g/ml inhibitor al trombinei (formeaz un complex inactiv antitrombintrombin) i ai factorilor de coagulare IX i X se folosete din 1980 sub forma concentratelor de plasm uman n tratamentul deficienei ereditare i dobndite de antitrombin risc crescut de afeciuni embolice antitrombina recombinant se comercializeaz din 2006 sub denumirea de ATRYN (pulbere liofilizat i.v.) primul i singurul produs comercial obinut cu ajutorul animalelor transgenice