Familia Enterobacteriaceae LP 1

Familia Enterobacteriaceae

Manualul de Bacteriologie sistematica Bergey (editia III / 2004) Reuneste in prezent 44 genuri, dintre care 25 au fost implicate semnificativ in patologia umana

Familia Enterobacteriaceae
Genul Numar de specii Specii cu importanta medicala

I. ESCHERICHIA X. CITROBACTER

7 12

E. coli, E. fergusonii, E. hermanii, E. vulneris C. freundii, C. amalonaticus, C. diversus E. cloacae, E. aerogenes, E. agglomerans, E. sakazakii H. alvei K. pneumoniae, K. rhinoscleromatis, K. oxytoca, K. ozaenae

XII. ENTEROBACTER XV. HAFNIA

16

XVI. KLEBSIELLA 10

Familia Enterobacteriaceae
Genul Numar de specii Specii cu importanta medicala

XXI. MORGANELLA XXIX. PROTEUS XXX. PROVIDENCIA

1 8 6

M. morganii P. vulgaris, P. mirabilis, P. penneri P. alcalifaciens, P. rettgeri, P.stuartii

Familia Enterobacteriaceae
Genul Numar de specii Specii cu importanta medicala

XXXIV. SALMONELLA

S. enterica, S. choleraesuis, S. arizonae, S. enteritidis, S. paratyphi, S. typhi, S. typhimurium S. marcescens, S. liquefaciens S. dysenteriae, S. boydii, S. flexneri, S. sonnei

XXXVI. SERRATIA 12 XXXVII. SHIGELLA 4

XLIII. YERSINIA

12

Y. pestis, Y. enterocolitica, Y. pseudotuberculosis

Caractere morfo-tinctoriale:
Bacili Gram-negativ Mobili prin flageli peritrichi / imobili Unii au capsul: genul Klebsiella (K. pneumoniae) Nu formeaz endospori (nesporulati)

Caractere de cultur:

Aerob - facultativ anaerobe Nepretentiosi nutritiv cresc pe medii cu peptona in prezenta bilei Fermenteaza glucoza Oxidazo (-) Produc catalaza Reduc nitratii la nitriti

Caractere de cultur:

Tulbur uniform mediul de cultur lichid Colonii tip S, dar si R Uneori, colonii mucoase (tip M): Klebsiella pneumoniae Medii selective, majoritatea au lactoz:

Drigalski, Levin, MacConkey, Leifson (ADCL), Istrate-Meitert, Hektoen, SS, Wilson - Blair

Mediul Levin (EMB)

Categoria: Mediu slab selectiv si diferenial Contine: Eozina Y si albastru de metilen, care inhiba bacteriile Gram (+) Utilizare: cultivarea enterobacteriilor (E. coli)

Mediul ADCL (Leifson)

Categoria: Mediu moderat - selectiv si diferenial Contine: agar dezoxicholat citrat lactoza Inhiba bacteriile Gram (+) si o parte din bacteriile Gram (-) Utilizare: cultivarea shigellelor si salmonellelor, Yersiniei

Familia Enterobacteriaceae
Categoria I. Patogene Gruparea taxonomica Semnificatia etiologica Salmonella, Shigella certa Escherichia (fenotipuri diareigene si uropatogene de E. coli), Yersinia Citrobacter, Enterobacter, Escherichia, Klebsiella, Morganella, Proteus, Providencia, Serratia Izolate semnificativ in prelevate necontaminate (LCR, prelevate din cavitati inchise, hemoculturi, colectii neabcedate

II. Conditionat patogene

III. Ocazional - patogene Cedecea, Hafnia, Kluyvera, Pantoea, Tatumella, Yokenella

Genul Shigella
patogen intestinal Caracteristicile speciilor de Shigella: imobile nu fermenteaz lactoza pe mediile cu lactoza lactozo (-) determin dizenterie bacilar boala specific umana:

febr, colici abdominale, scaune diareice muco - sangvinolente

Clasificarea Shigella
In functie de antigenul somatic O:

Shigella dysenteriae: 13 tipuri: 1 S. shigae, 2 S.

schmitzii, 3 7 S. Large Sachs, 8 13

Shigella flexneri: 6 tipuri (1 6), 10 subtipuri (1a, 1b,

2a, 2b, , 5a, 5b), 2 variante (x, y)

Shigella boydii: 18 tipuri (1 18) Shigella sonnei (2 tipuri: S, R)

Recoltarea produselor patologice

Produs patologic: Materii fecale (emisie spontana, sondaj recto sigmoidian cu sonda Nlaton ct mai aproape de debutul bolii inaintea instituirii tratamentului antimicrobian Coprorecoltor steril cu mediu de transport: Cary - Blair

Examenul microscopic din produs patologic

-

ofer informatii importante pentru diagnosticul diferential al enterocolitei preparatul nativ ntre lam si lamel polimorfonucleare, eritrocite poate evidentia chiste sau trofozoiti de Entamoeba histolytica (exclude dizenteria bacilara)

Coprocultura
Izolarea: - Medii de cultur selective si diferentiale pentru enterobacterii: * Drigalski * Levin * MacConkey * Leifson (ADCL) * Istrate-Meitert * Hektoen

Caractere morfo-tinctoriale

Bacili Gram-negativ

Proprieti de cultur
Colonii S sau R Lactozo - negative

Identificarea preliminara

caracteristicile biochimice: TSI, MIU, MILF,

Citrat: lactozo (-), nu produce gaz din fermentarea glucozei, nu produce H2S, imobil, ureaza (-), indol (+/-), lizindecarboxilaza (-), fenilalanindezaminaza (-), citrat (-). caracteristicile antigenice (tiparea serologica): permit clasificarea de grup, de tip (ex.: S. disenteriae, S.flexneri etc.).

Patogenie

Shigella este agentul dizenteriei bacilare (shigelloz) Ag. de suprafata permit atasarea non receptor specifica, modificarea citoscheletului, endocitarea bacteriei, apoi diseminarea in submucoasa unde produc necroze patogenitate de tip invaziv. Exotoxinele sunt, de asemenea implicate (ex.: toxina Shiga, produsa de S. dysenteriae blocheaza sinteza proteica, prin efect citotoxic asupra endoteliului capilar determina complicatiile vasculare si producerea Sdr. hemolitic uremic din shigeloze).

Manifestri clinice
se manifest prin: colici abdominale severe, varsturi, tenesme si scaune caracteristice muco - sanguinolente. rareori, caracter invaziv complicatii extraintestinale: tulburari neurologice, sdr. hemolitic uremic, artrita reactiva. Aparitia lor depinde de virulenta tulpinilor.

Epidemiologie:

Shigella este un patogen specific uman se transmite pe cale fecal - oral, asociata intotdeauna cu un nivel igienico sanitar scazut insectele (mustele) sporesc potentialul epidemigen estival transmisia hidrica este importanta dezastrele naturale si razboaiele au fost frecvent asociate cu izbucniri epidemice de dizenterie.

Teste de patogenitate
Testul Srny (testul keratoconjunctivitei): - poate confirma caracterul de invazivitate al Shigellelor izolate; - acest test nu se foloseste n mod uzual. - o pictur cu Shigelle invazive izolate depus n corneea unui cobai (porc de Guineea), va produce keratoconjunctivite severe n cteva zile, prin invazie la cornee, care se vindec complet n 2 - 3 sptmni.

Tratament

se face n functie de sensibilitatea la antibiotice, conform antibiogramei difuzimetrice Kirby Bauer, efectuata dupa standardul CLSI.

Genul Salmonella
peste 2200 serotipuri

Infecii (salmoneloze):

Febra tifoid S. typhi Febra paratifoid S. paratyphi A, B Toxiinfecii alimentare i enterite (copii)
S. typhymurium S. enteritidis S. paratyphi B S. panama
S. paratyphi C S. choleraesuis

Stri septico - piemice

Caractere generale:

bacili Gram negativ mobili (flageli peritrichi) lactozo negativi identificarea antigenelor O, H, Vi reacii de aglutinare

Salmoneloze majore

febra tifoid si paratifoid determinate de bacilul tific si paratific - afecteaz exclusiv omul, omul si animalele sunt responsabile de poluarea solului, a apelor reziduale, apelor de suprafata, in care pot supravietui luni si chiar ani (in sol) se transmit pe cale fecal - oral, ap contaminat, intensificarea comertului si a calatoriilor la mari distante, migratiile populationale, industrializarea alimentatiei si a cresterii animalelor de consum (porci, pasari) in mari colectivitati consumatoare de hrana cu adaosuri proteice deseori contaminate (fainuri furajere de carne, oase, sange) au contribuit esential la raspandirea larga a serovarurilor si totodata la cresterea morbiditatii prin salmoneloze. factori sezonieri si clima calda favorizeza, in conditii precare de igiena, nivelul morbiditatii

Manifestari clinice Febra tifoida

S1: letargie, febr, dureri, constipatie; S2: febr mare, abdomen dureros, rozeole tifice, diaree, hepatosplenomegalie.

Salmoneloze minore

au o incident crescut n ultimul timp, manifestndu-se prin toxiinfectii alimentare I loc in etiologia toxiinfectiilor alimentare Cauze: ingerarea de carne, lapte, ou infestate cu specii de Salmonelle: S. typhimurium, S. anatum, S. enteritidis.

TABLOU CLINIC
Simptomele (Dg. diferential cu infectiile alimentare stafilococice) sunt: incubatie mai lung de 12 48 de ore, febr, sindrom diareic stari septico - piemice

Recoltarea produselor patologice

Febre tifo paratifoide:

S1: hemocultur S2: urocultur, coprocultur coprocultur lichid de vrstur alimente

Gastroenterite:

Examenul microscopic din produs patologic

Nu ofer informatii relevante!

Coprocultura
Izolarea: - Medii de imbogtire:
-

Bulion cu selenit acid de sodiu

Medii moderat selective, inalt - selective si diferentiale:

-

Leifson (ADCL) Istrate-Meitert SS Hektoen Wilson - Blair

Caractere morfo-tinctoriale

Bacili Gram - negativ

Proprietati de cultura

Colonii S

Proprietati de cultura

Mediul Drigalski Colonii lactozo - negative

Proprietati de cultura

Lactozo - negativ Mediul Levin

Proprietati de cultura

Agar Mac Conkey

Identificarea
se bazeaz pe: caracteristicile morfologice: bacili gram - negativi, mobili caracteristicile de cultur: colonii S, lactozo negative, transparente sau in culoarea mediului, cu centrul negru (ochi de pisica) caracteristicile biochimice: Lactoza (-), H2S (+), produc gaz in cantitate mica sau deloc din fermentarea glucozei, mobile, ureaza (-), Indol (-), lizindecarboxilaza (+), fenilalanindezaminaza(-), Citrat (+), rosu-metil (+).

Diagnostic serologic indirect reacia Widal

Sunt colectate 2 probe de snge n prima si a 3 a sptmn de boala. se identific anticorpii specifici anti - S. typhi, S. paratyphi A si B in serul pacientilor, separat pentru antigenul O (somatic) si H (flagelar) prin reactii de aglutinare directa in tuburi. se stabileste dinamica titrului de ac. anti O si anti H.

Tratament

n functie de testul de sensibilitate la antibiotice (antibiograma difuzimetrica Kirby Bauer, conform standardelor CLSI). este recomandat: Cloramfenicolul.

Ampicilina si Trimethoprim -sulfamethoxazolul

sunt alternative cu efecte secundare mai puin severe. in ultima vreme, se descriu tot mai mult tulpini de Salmonella spp. cu fenotipuri de rezistenta de tip ESBL!

Tema pentru studenti

Cautati pe net imagini cu culturi de Enterobacterii (Salmonella, Shigella). Incercati sa descrieti caracterele de cultura particulare, metodele de identificare biochimica si antigenica pentru fiecare gen descris in aceasta lucrare. Desenati in caietul de lucrari practice coloniile si algoritmul de identificare! Tema va fi evaluata si punctata!