TEMA 25: DIAGNOSTICUL DE LABORATOR A HEPATITELOR VIRALE I HIV/SIDA

1. Virusurile hepatice. Virusurile hepatitei A(VHA) si E(VHE). Caracterele morfobiologice. Sursa de

infectie, mecanismele de infectare, patogeneza hepatitelor A si E.

HEPATITE leziuni inflamatoare ale ficatului

ORIGINE infecioas, medicamentoas, toxic, autoimun, etc
Hepatitele virale leziuni determinate de aciunea citopatic direct a virusului n cauz, sau, mai frecvent,
de reacia imun contra celulelor hepatice infectate
VIRUSURILE HEPATITICE
Virusuri dominant hepatotrope
Virusul hepatitei A HAV- (fam. Picornaviridae)
Virusul hepatitei B HBV- (fam. Hepadnaviridae)
Virusul hepatitei C HCV- (fam. Flaviviridae)
Virusul hepatitei D HDV - (neclasificat)
Virusul hepatitei E HEV - (fam. Hepeviridae)
Virusul hepatitei G HGV?
Virusurile TT (Circovirus ?)
Virusuri ce afecteaz ficatul ocazional: Coxsackie, virusul citomegalic (CMV), virusul Epstein-Barr (EBV),
virusul herpes simplex (HSV), .a.
MANIFESTRI CLINICO-BIOLOGICE
ALE HEPATITELOR
Incubaia variabil (15 zile 6 luni)
Gravitatea hepatitele A i E au evoluie benign, hepatitele B, C, D acute i cronice, complicaii grave
Forma clinic clasic febr, artralgii, astenie, erupii, dereglri digestive, urmate de icter (3 sptmni),
asociat cu anorexie, oligurie, decolorarea maselor fecale, bilirubinurie
Forme anicterice, asimptomatice (80-90% cazuri)
Hepatita fulminant foarte grav
Hepatita cronic persistent i cronic activ (cu citoliz)
Complicaii ciroz, cancer primitiv al ficatului
Manifestri extrahepatice, determinate de complexe imune circulante periarterit nodoas, poliartrit,
glomerulonefrit, poliradiculonevrite, etc.
RM - ar endemic prin hepatitele B i C. Indicele de prevalen a HBV este de peste 8%, iar al HCV de
5%.
Program naional de combatere a hepatitelor virale B, C i D (Hotrrea Guvernului RM nr 1143 din 19
octombrie 2007)
VIRUSUL HEPATITEI A
Familia Picornaviridae
Genul Hepatovirus
Specie Virusul hepatitei A (HAV)
Dimensiuni 28-30 nm
Genom ARN+, liniar

Capsid icosaedric, 60 capsomeri, compui fiecare din 4 polipeptide VP1, VP2, VP3, VP4
Rezisten: total la 60 grade 1 or, parial - 12 ore, rezist la % de clor uzuale. Inactivat de formol,
beta-propiolacton, UV, hipoclorit de sodiu.
Primul vaccin 1992
Se cunosc 7 genotipuri (om, maimue)
Cultivarea :
-Marmozete, cimpanzei
-Celule de hepatocarcinom uman
-Celule diploide umane
-Celule din rinichi de maimu
PATOGENEZA HEPATITEI A
Surs i rezervor de infecie omul bolnav
Mecanismul de transmitere fecal-oral (mini murdare, alimentele, apa contaminate); cazuistic
transfuzional
HAV se multiplic n esutul limfoid intestinal i citoplasma hepatocitelor. Se elimin cu masele fecale dup
2 sptmni de la infectare, diminueaz odat cu apariia semnelor clinice. Viremia 1-2 sptmni
Hepatocitoliza este determinat de LT CD8, NK.
Incubaia 30 zile (15 50 zile)
Forme clinice forme asimptomatice (90%), forme benigne (1-2 spt.), rareori forme grave, fulminante.
Lipsa cronicizrii!
Markerii virali n cursul maladiei:
HAV (Ag viral) (mase fecale, snge) n ultimele 2 sptmni de incubaie i cteva zile de la apariia
icterului
IgM anti-HAV depistate de la debutul fazei icterice, titru maxim peste o sptmn i dispar dup 8-12
sptmni.
IgG anti-HAV persist toat viaa
ARN viral (n mase fecale, snge, hepatocite)

VIRUSUL HEPATITEI VIRALE E (HEV)

HEV depistat n 1983 prin ME
Familia Hepeviridae
Genul - Hepevirus
Structura HEV
Dimensiuni 27 30 nm
Genom ARN+ (descris n 1990)
Capsid icosaedric (protein unic glicozilat)
HEV se repartizeaz n 3 grupe genomice:
I asiatic, II mexican, III nord-american (include i tulpini porcine)

Patogeneza

Sursa de infecie omul bolnav

Mecanismul de transmitere fecal-oral (ap, alimente), posibil parenteral (la hemofili, persoane cu
transfuzii, hemodializ)

Perioada de incubaie 30 zile

Clinica hepatit acut, asemntoare cu hepatita A. Forme grave la femei gravide, n special n trimestrul
III al sarcinii (20-40% mortal). Risc de avort i natere prematur (12 30% cazuri)
Markerii HEV:
Virusul (Ag viral) prezent n mase fecale n faza acut (ME)
IgM (3 luni de la debut) i IgG anti-HEV
Genomul viral n mase fecale, hepatocite
VIRUSUL HEPATITEI VIRALE B (HBV)
Ag Australia a fost detectat n 1964 de Blumberg, actualmente numit Ag HBs
HBV virus ADN, ciclul de replicare comport o etap de transcripie invers;
Extrem de contagios i prezent n titruri mari n lichide biologice. Provoac hepatite acute, chiar fulminante,
hepatite cronice, ciroz, hepatocarcinom.
Peste 350 mln persoane infectate n lume
Peste 1,5 mln decesuri anual

2. Virusurile hepatitei B (VHB), C (VHC), D (VHD). Caracterele morfobiologice. Sursa de infectie,

mecanismele de infectare, patogeneza si consecintele hepatitelor virale B, C, D.
Virusul hepatitei B (HBV)
Familia Hepadnaviridae
Genul Orthohepadnavirus
Specia Virusul hepatitei B (HBV)

Morfologia
Particule sferice de 42 nm (particulele Dane), infecioase virionul complet (109 part/ml)
Particule sferice, lipsite de acid nucleic, de 22 nm, neinfectioase
Structuri tubulare, 200-700 nm lungime, neinfectioase
Structura HBV (particula Dane)
Genomul: ADN circular bicatenar parial (2/3). Posed catena lung L(-) i catena scurt S(+). Se disting 8
genotipuri (A H).
Nucleocapsida (NC, core) icosaedric, comport Ag HBc, asociat cu Ag HBe (solubil). n NC se afl i
ADN-polimeraza i timidin kinaza.
Supercapsida dublu strat lipidic asociat cu proteine virale (Ag HBs). Un receptor pentru albumin din
supercapsid intervine la etapa de penetrare a virusului.
Rezistena : HBV este rezistent la aciunea eterului, la desicare i cldur.
HBV i pstreaz infeciozitatea mai muli ani la -20 grade, cteva luni la +30 grade, cteva ore la +60
grade. Este distrus la fierbere i cu hipoclorit de sodiu.
Animale experimentale maimue cimpanzei
Structura antigenic a HBV (markeri epidemiologici)

Ag HBs, de suprafa. Posed determinani de grup (a) i de tip (d/y i w/r). Serotipuri ale Ag HBs : ayw,
ayr, adw, adr, etc. Anticorpii anti-HBs au rol protector.
Ag HBc, din NC, nu este detectabil n ser, doar n nucleul hepatocitelor infectate.
Ag HBe, solubil, component al NC. Prezent n ser i martor de infeciozitate (replicare viral).
ADN polimeraza
Timidin kinaza
Ag suscit sinteza Ac anti-HBs, anti-HBc, anti-HBe, anti-ADN polimeraz.
Multiplicarea HBV
Virusul penetreaz n hepatocit debarasat de supercapsid datorit receptorului su pentru albumin
Dup decapsidare ADN este completat de polimeraza viral, devenind bicatenar
ADN-ul viral ptrunde n nucleul celulei
ARN polimeraza gazdei transcrie catena ADN L(-) n ARN-pregenomic (+) i ARNm
n citoplasm are loc translarea ARNm i sinteza proteinelor virale
ARN-pregenomic (+) este ncorporat n capsid i ADN polimeraza viral sintetizeaz catena L (-)
activitate de reverstranscriptaz
Pe matricea catenei L (-) este sintetizat catena S (+)
Polimeraza manifest activitate de RNaz H i degradeaz ARN-pregenomic
NC capt supercapsida la nivelul MC i virionul nou format este eliberat prin nmugurire (particulele Dane,
infecioase).
Proteinele externe (HBs) sunt produse n exces i se asambleaz n ser n particule sferice sau tubulare,
neinfecioase.

HBV nu este citolitic. Hepatocitoliza este determinat de rspunsul imun al gazdei. Hepatocitele infectate
prezint pe suprafaa lor antigene virale, ce stimuleaz un rspuns imun.
Limfocitele T CD8 i celulele NK atac i distrug celulele bolnave, iar anticorpii specifici neutralizeaz
virusul circulant.
DE REINUT !!!
ADN viral dublu catenar este extrem de stabil, poate persista sub form de plasmid n hepatocit, fiind la
originea portajului cronic i fenomenelor de reactivare.
ADN viral se poate integra n cromozomul hepatocitelor (aciune oncogen posibil)
Implicarea transcriptazei inverse se afl la originea unei rate de mutaii crescute (rezisten la
chimioterapice, eec n cursul seroterapiei sau vaccinare, mutante fr Ag HBe)
Patogeneza hepatitei virale B
Sursa de infecie omul. HBV este prezent n sngele bolnavului, secreii genitale i sperm, saliv, lapte,
urin, lacrimi.
Cile de transmitere a HBV:
- Parenteral prin snge i derivate (transfuzii, tratament cu produse sangvine, activitate profesional, injecii
cu seringi contaminate -toxicomani, tatuaj, piercing, acupunctur)
Sexual (homo- hetero)

Vertical de la mam la copil (la natere sau n perioada neonatal)

Transmiterea direct (contact, srut) nu este exclus
Riscul infeciei prin injecie 20-30%
Contagiozitate sangvin extrem de 10 ori superioar infeciei cu HCV i de 100 ori HIV.
Perioada de incubaie - 30180 zile (10 sptm)
Perioada de stare simptomatic la 20-30% pacieni (forme anicterice 70-80%)
Vindecare 90%
Hepatita viral B poate evolua spre cronicizare (10% la persoane imunocompetente).
Hepatita fulminant 0,1 - 1%
Ciroza hepatic sau cancer 20%
CINETICA MARKERILOR
Hepatita acut
Ag HBs este primul marker depistat n ser dup 1-3 luni de la contagiu, persist 1-2 luni i dispare peste
cteva sptmni dup normalizarea transaminazelor. Persist la purttorii cronici
Ag HBe apare imediat dup HBs, marker de replicare viral, dispare naintea Ag HBs
Ac anti-HBc (IgM) apar peste 2-4 spt dup Ag HBs
Ac anti-HBe apar dup ncetarea replicrii virale, odata cu dispariia Ag HBe. Marker de pronostic favorabil
Ac anti-HBs apar peste 2-3 sptmni dup dispariia Ag HBs (fereastr imunologic). Neutralizani.
Markeri ai vindecrii. Lipsesc la purttorii cronici
Evoluie favorabil: dispariia Ag HBs i Ag HBe, apariia succesiv a Ac anti-HBc, anti-HBe i anti-HBs
Hepatita fulminant prezena constant a IgM anti-HBc n titru nalt
Hepatite cronice (evoluie peste 6 luni)
Hepatit cronic activ (persistena Ag HBs, Ag HBe i Ac anti-HBc - IgG)
Hepatit cronic persistent (Ag HBs, Ac anti-HBe, anti-HBc) - purttor cronic de Ag HBs
(Reactivri sunt posibile, supraveghere necesar).
VIRUSUL HEPATITEI D
Agent viral defectiv, satelit al HBV, 36-37 nm. Descoperit n 1977
Genul Deltavirus
Genom ARN-, circular (3 genotipuri)
Capsida sferic, 2 proteine, Ag Delta
Supercapsid derivat din HBV, cu 3 forme de Ag HBs
Se replic n nucleu, independent de HBV, dar care i asigur supercapsida cu Ag HBs.
Manifest efect citopatic direct sau via rspunsul imun celular.
Markerii HDV Ag HDV, Ac anti-HDV, ARN viral (asociai cu markeri ai HBV)
Patogeneza hepatitei D
Mecanismele i cile de transmitere identice cu HBV.
Infecia Delta se poate manifesta n acelai timp cu hepatita B (co-infecie, evoluie acut, risc de forme
fulminante) sau survine la un purttor cronic (suprainfecie, risc de hepatit cronic activ cu evoluie
rapid n ciroz, forme fulminante sunt posibile)
VIRUSUL HEPATITEI C
Identificat n 1989. n prezent 180-200 mln infectai
Familia Flaviviridae

Genul Hepacivirus
Dimensiuni 55-65 nm
Genom ARN+, liniar. Heterogenitate genetic - se disting 6 (11 ?) genotipuri i numeroase subgenotipuri.
HCV circul sub forma de un amestec complex i instabil de populaii virale genetic distincte. n Europa
predomin genotipul 1, care este mai puin sensibil la tratamentul cu IFN.
Capsida icosaedric, protein unic
Supercapsida derivat din membrana reticulului endoplasmatic, cu 2 glicoproteine virale E1 i E2
Replicarea HCV are loc in citoplasma hepatocitelor i a celulelor mononucleate din snge
Markeri epidemiologici Ag HCV, Ac anti-HCV, ARN viral
Transmitere:
Prin transfuzii, transplant de esut i organe
Droguri administrate i/v
Nozocomial (n mediu medico-chirurgical, stomatologie, piercing, tatuaj, acupunctur)
Vertical
Sexual
Intrafamilial (foarfece, peptene, aparat de ras, etc)
Incubaia 4 12 sptmni
Hepatita C acut: 70-90% - asimptomatic, activitatea seric a transaminazelor (n special ALAT) este
moderat crescut i tranzitorie, uneori oscilant. Se poate vindeca spontan n 20 % cazuri, fr a
conferi imunitate complet.
Hepatita C fulminant co-infecie cu HBV sau HAV
Hepatita C cronic (80% cazuri) persistena HCV peste 6 luni de la infecia acut. Cretere cronic a
activitii ALAT, care este moderat i fluctuant. Co-infecia cu HIV factor stimulator
Complicaii ciroz (20% cazuri), cancer
3. Diagnosticul de laborator al hepatitelor virale. Prelevatele. Metodele de diagnostic. Markerii seroepidemiologici ai infectiei hepatice i semnificatia lor diagnostica.
DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL HEPATITELOR VIRALE
Diagnostic paraclinic: dozarea transaminazelor, bilirubinei, raportul albumine/globuline.
Trombopenie, leucocitoz, diminuarea protrombinei factori de alert.
Diagnostic etiologic
Detectarea virionilor (ME, IME) sau Ag virale (ELISA, RIF) n bioptate hepatice sau snge
Detectarea AN virali ntrahepatic sau n snge (hibridare, PCR)
Evidenierea anticorpilor antivirali n serul sangvin prin tehnici ELISA, ARI, imunoblot, RIFI
Diagnosticul hepatitei A
Evidenierea Ig M anti-HAV (Ig G imunitate)
Diagnosticul hepatitei B
Depistarea Ag HBs, Ag HBe, Ac anti-HBc, anti-HBs, anti-HBe, anti-polimeraz n ser; Ag HBc n
hepatocit)
Diagnosticul hepatitei C
Depistarea Ac anti-HCV (80% peste 15 spt de la expoziie, 95% - 5 luni, 97% - 6 luni )
Diagnosticul hepatitei D
- Evidenierea Ac anti-HDV

4. Imunitatea, profilaxia i tratamentul specific al hepatitelor virale.

PROFILAXIA HEPATITELOR VIRALE
1- Control eficace al donatorilor de snge, esuturi, organe, sperm, prevenirea MST i nozocomiale,
utilizarea materialelor de uzaj unic, ameliorarea condiiilor sanitare, etc.
2 Imunizarea activ
Anti-hepatita A vaccin inactivat (10-20 ani)
Anti-hepatita B (vaccin recombinant Ag HBs).
Vaccin anti-hepatita D i E n curs de studiu
3 Imunizarea pasiv
- Imunoglobuline specifice anti- HAV, anti-HBV, anti-HEV
Tratament specific al hepatitelor A i E nu exist.
Tratamentul specific al hepatitei B
Interferon alfa
Vidarabin, lamivudin, entecavir, telbivudin, adefovir (!!! Selecia tulpinilor rezistente)
Imunoterapie
Tratamentul specific al hepatitei C
Interferon alfa
Ribavirin
Imunoterapie
5. Familia Retroviridae. Clasificarea. Rolul n patogenie.
FAMILIA RETROVIRIDAE. VIRUSUL HIV I INFECIA HIV/SIDA
Prima descriere clinic a SIDA 1981
1983HIV a fost identificat la Paris, ins. Pasteur
1986 - propus denumirea HIV (Human Immunodeficiency Virus)
1986 a fost izolat HIV-2, Africa de Vest
Zilnic se infecteaz 5-6 mii persoane (6 pers/sec)
CLASIFICAREA FAM. RETROVIRIDAE
Retroviridae familie numeroas de virusuri ARN dotate cu o enzim numit transcriptaz invers
(reverstranscriptaz).
ARN
ADNd.c
Subfamilia Orthoretrovirinae
Genurile: Alpharetrovirus, Betaretrovirus, Gammaretrovirus, Deltaretrovirus, Epsilonretrovirus (induc tumori
i leucemii), Lentivirus (virusul HIV, SIV)
Subfamilia Spumaretrovirinae
Genul: Spumavirus (nepatogeni)
6. Caracterele morfostructurale comune ale retrovirusurilor. Organizarea genomului. Multiplicarea,
Aspecte genetice.
CARACTERE MORFOSTRUCTURALE GENERALE ALE FAMILIEI RETROVIRIDAE
Dimensiuni 80-130 nm

Form sferic
Genom dou molecule de ARN+, capacitate de integrare n nucleu sub form de ADN proviral
Enzima reverstranscriptaza
Capsid icosaedric
Supercapsid derivat din MCP, lipidic cu GP virale nserate
Ciclul replicativ este identic
VIRUSUL HIV. STRUCTURA I
ORGANIZAREA GENOMULUI
HIV-1 i HIV-2 responsabili de Sindromul Imuno-Deficienei Achiziionate (SIDA)
HIV-1 repartiie mondial
HIV-2 limitat la Africa de Vest
Particule sferice, 80-120 nm
Structura virusului HIV-1
Genomul: diploid 2 molecule de ARN+ identice, nu sunt utilizate n calitate de ARNm
Enzime: reverstranscriptaza (RT, p66), integraza (p31), proteaza (p9)
Capsida: n form de trunchi de con, constituit din 2 proteine - p24 (CA, a capsidei, major) i p7 (NP, a
nucleocapsidei, asociat ARN)
Supercapsida: dublu strat lipidic de origine celular n care sunt nserate 2 GP virale
Gp120, de suprafa, asigur fixarea virusului de receptorul celular CD4 i de coreceptori. Regiunea V3
(variabil) induce anticorpi neutralizani specifici
Gp41, transmembranar, legat de gp120, responsabil de fuziunea supercapsidei cu membrana celular
Proteina p17, (MA), matrice, cptuete stratul intern al supercapsidei, este asociat cu proteaza
Genomul, proteinele interne (p24, p7, p17) i enzimele constituie nucleoidul (core) viral
Structura genomului (apr. 10 mii nucleotide)
Gena gag (group antigens), codeaz proteinele structurale interne (p24, p7 i p17)
Gena pol (polimerase), codeaz 3 enzime: RT (p66), integraza (p31), proteaza (p9)
Gena env (enveloppe), codeaz o protein precursor gp160, clivat ulterior n gp41 i gp120
Gene regulatoare tat, rev, nef, vif, vpr i vpu (HIV-1) sau vpx (HIV-2)
7. Subfamilia LENTIVIRINAE. Virusuri HIV I si HIV II (virusuri SIDA). Caracterele morfostructurale.
Organizarea genomului. Structura antigenica. Rezistena la ageni fizici i chimici.
Omologia dintre HIV-1 i HIV-2 este de 42%, mai nalt la nivelul genelor gag i pol (peste 50%) i redus
la nivelul genelor env (39%)
Se disting 3 grupe genomice ale HIV-1: M (major), O (outlier) i N (new). Grupul M comport 10 subtipuri
(A-H, J i K), repartizate geografic neuniform (majoritatea n Africa, B Europa occidental i America
de Nord, F, B Romnia, G Rusia, etc)
Structura antigenic toate proteinele i glicoproteinele virale sunt imunogene.
Rezistena HIV
HIV este sensibil la solveni lipidici i detergeni, la 56 grade C este inactivat n 30 min, n 5 minute - 0,2 %
hipoclorit de Na, 70% etanol, 0,2% glutaraldehid. Labil la pH-uri extreme, radiaii UV i RX
Cultivarea
Celule mononucleate de la persoane sntoase
Linii celulare din LT MT2
Animale sensibile maimuele cimpanzei (HIV-1), Rhesus (HIV-2)

CELULELE-INT I REZERVORUL CELULAR

1. Limfocite TCD4+ (Th) (99% de replicare, ECP-sinciii)
2. CPA: monocite/macrofage tisulare (replicare redus, ECP minim), celulele dendritice (prezente n timus,
tegument, mucoase, organe limfoide, SNC i snge perif.), celulele microgliei. Ele au rol de vector i
rezervor de virus (adsorb HIV la suprafaa lor i-l transport n organele limfoide, unde el este prezentat
celulelor CD4+ n care se replic).
Se disting tulpini ale HIV cu tropism macrofagic (M, sau R5), utilizeaz coreceptorul CCR5, i tulpini cu
tropism limfocitar (T, sau X4), coreceptorul CXCR4.
Limfocitele T pot fi infectate cu ambele tulpini (prezint ambii receptori).
n primo-infecie sue R5, n stadiu de SIDA sue X4

8. Patogeneza. Etapele infectiei HIV. Formele clinice. Imunitatea.

CICLUL DE REPLICARE
Ataarea HIV la celula-gazd prin legarea gp120 la receptorul celular CD4. Rezult o modificare
conformaional a gp120, ce permite buclei V3 a acestei gp s se fixeze de coreceptorii de pe suprafaa
celulei: CCR5 i CXCR4, CCR3, CCR2b .a.
Penetrarea NC prin fuziunea supercapsidei (gp41) cu MCP
Decapsidarea i eliberarea ARN viral asociat cu RT
Retrotranscrierea ARN+ n ADN- (RT). In continuare RT (funcie de RNA-aza H) degradeaz ARN+, apoi
transcrie ADN- n ADNd.c., care va fi circularizat, apoi integrat (integraza) n cromozomul celular,
constituind provirusul.
Transcrierea ADNv n ARNm i ARN viral prin intermediul ARN-polimerazei II celulare
Sinteza proteinelor virale sub controlul factorilor celulari i proteinelor reglatoare
Poliproteina gag/pol 160 kd (p17 MA, p24 CA, p7 NC, p9 (proteaza), p66 (RT), p31 (integraza)
Poliproteina env 160 kd (gp41 i gp120)
Asamblarea NC
Eliberarea prin nmugurire la nivelul MCP modificat prin inserarea gp virale gp120 i gp41.
1-10 mlrd de virioni/zi/o persoan infectat
Variabilitatea HIV este determinat de erorile comise de RT (o eroare la fiecare 10 mii baze). Mutaiile
survin n special la nivelul genei env (bucla V3 din gp120, care intervine n fixarea HIV de coreceptori,
reprezint epitopul major de neutralizare).
Nu exist 2 tulpini virale identice. La bolnav este prezent o populaie viral polimorf, cu genotipuri diferite
Consecine:
dificultatea de a obine vaccin eficient
selecia mutantelor rezistente la antiretrovirale
Mecanismele de distrugere a limfocitelor T CD4:
Liza direct a celulelor infectate (ECP)
Limfocitele T CD8 elimin limfocitele T CD4 infectate
Apoptoz n urma stimulrii antigenice a celulelor care au fost n contact cu Ag HIV
Limfocitele infectate, acoperite cu gp120 pot provoca fixarea, fuziunea i moartea limfocitelor neinfectate
Hiperstimulare celular cu dezvoltarea anergiei celulare

PATOGENEZA I CLINICA INFECIEI CU HIV

Transmiterea:
Cale sexual (hetero-, homo).
Cale sangvin (toxicomani, hemofili, transfuzii de snge sau transplante de organe, manopere medicale
penetrante -injecii, acupunctur, tatuaj, piercing)
Cale vertical (in utero n ultimele sptmni de sarcin, n timpul naterii sau n timpul alptrii)
EVOLUIA MALADIEI
Primo-infecia (perioada de timp de la infectare pn la apariia Ac). Durata 4-6-8 sptmni. Are loc
multiplicarea intens i diseminarea virusului, scderea numrului de limfocite T CD4 i creterea
numrului limfocitelor TCD8. Diminuarea ulterioar a arjei virale i creterea nr LT CD4 este
determinat de rspunsul imun specific celular (limf TCD8) i umoral (Ac anti-gp120, anti-gp41, anti-p24,
apar la finele primoinfectiei). Persoana infectat devine seropozitiv.
Factorii care influeneaz evoluia primo-infeciei: tipul virusului, raspunsul imun al gazdei i factori genetici
(homozigoii cu mutaie la nivelul genei receptorului CCR5 prezint rezisten la infecia cu HIV 1)
Evoluia poate fi asimptomatic sau simptomatic (50%): adenopatie cervical, febr, faringit, ulcere ale
mucoasei bucale, oboseal, mialgie, artralgie, erupii cutanate.
Durata simptomelor 7 10 zile
Faza asimptomatic, de laten clinic (durata variabil: 3 - 18 ani).
Virusul se replic n organele limfoide, numrul LT CD4 diminueaz lent sau rmne stabil. Apar
variante noi de virus care se multiplic, Sistemul Imun le recunoate i reacioneaz specific, ciclul
se repet de multiple ori. Aceasta duce la diminuarea progresiv a LT CD4 i LT CD8 i epuizarea
Sistemului Imun, urmat de multiplicarea necontrolat a HIV i dispariia complet a LT CD4.
Faza clinic (SIDA)
Numrul LT CD4 - 500-200 celule/ml.
Se manifest clinic prin febr cronic, pierdere n greutate, diaree, afeciuni ale tuturor organelor i
sistemelor, tumori (sarcomul Kaposi, limfoame), infecii oportuniste cu:
Parazii: Toxoplasma, Histoplasma, Leishmania
Bacterii: Mycobacterium, Salmonella, enterobacterii condiionat patogene, etc
Fungi: Pneumocystis carinii, Cryptococcus neoformans, Cryptosporidium, Candida, etc
Virusuri: HSV, HZV, CMV
Rspunsul imun:
Celular LT CD8 recunosc i elimin celulele infectate (n special LT CD4) prin citotoxicitate direct
(restricie CMH I) sau prin intermediul citokinelor, chemokinelor. Imunitatea celulara este crucial pentru
controlul replicrii HIV i are un impact substanial n evoluia infeciei
Umoral Ac apar precoce n infecie primar, dar depistarea lor poate fi efectuat dup 6-12 sptmni de
la infectare. Rolul neutralizarea virionilor, Ac anti-gp120 mpiedic fixarea HIV pe celulele-int.
Eficien maxim n fazele precoce ale infeciei
5-10% din infectai sunt asimptomatici de
lung durat:
arj viral redus
Numrul LT CD4 stabil (peste 500 celule/ml)
Rspuns imun celular i umoral constant
Absena semnelor clinice

9. Diagnosticul de laborator a HIV infectiei. Produse patologice. Indiarea Ag virale. izolarea i

indentificarea virusului. Serodiagnosticul, examenul hematologic n HIV infectie.
DIAGNOSTICUL DE LABORATOR
AL INFECIEI HIV/SIDA
Teste indirecte de depistare
Teste ELISA de depistare a Ac (dup minimum 22 zile de la contagiu)
Teste combinate Ag - Ac (detectarea Ag p24 i Ac anti-p24 prin tehnici ELISA)
Teste rapide (RA cu particule de gelatin sensibilizate cu Ag)
Teste de confirmare (n caz de reacie pozitiv) Tehnica de referin Western-blot (separarea el-for. a
proteinelor virale, transferarea lor pe o band de nitroceluloz, tratarea cu serul cercetat, apoi efectuarea
RIE). Pot fi detectai Ac contra tuturor Ag HIV.
Criterii de apreciere: un ser este considerat pozitiv dac sunt prezeni Ac contra cel puin 2 Ag de suprafa
(gp160, gp120, gp41), asociai cu Ac contra cel puin o protein intern (p24, p17 sau a enzimelor)
Teste directe
1. Detectarea Ag p24 (marker direct al infeciei HIV) prin tehnici ELISA. Poate fi detectat n primo-infecie
pn la seroconversie. Ag p24 reapare n momentul evoluiei spre SIDA.
2. Detectarea ARN-lui plasmatic sau ADNv prin teste de amplificare genic.
Prezena ARNv n ser denot replicarea constant a virusului. Determinarea arjei virale este utilizat
pentru monitorizarea unui pacient infectat.
3. Izolarea HIV n cultur
Se realizeaz prin inocularea cu plasm sau celule mononucleate de la bolnav a unei culturi de celule
mononucleate de la donatori sntoi.
Replicarea este detectat prin evidenierea Ag p24, RT sau a ARNv.
Diagnosticul primo-infeciei (markerii virali)
ARNv plasmatic (apare dup 8-17 zile de la contagiu)
Ag p24 n ser (pn la apariia Ac anti-p24)
Ac anti-HIV (dup minimum 3 sptmni de la contagiu)
Monitorizarea seropozitivilor
Parametrii imuno-hematologici - formula sangvin, determinarea subpopulaiilor de LT (valori absolute,
raport T CD4/T CD8), dozarea Ig, microglobulinei beta2
Markerii virali - arja viral plasmatic (ARNv),
Ag p24, Ac anti-p24

10. Imunitatea. Profilaxia i tratamentul specific al HIV infectiei.

PROFILAXIA INFECIEI HIV/SIDA
Msuri nespecifice: prevenirea transmiterii HIV
Profilaxia specific dificil!!!
Existena a 2 virusuri HIV-1 i HIV-2 cu numeroase subtipuri genetice i antigenice, variabilitatea genetica
Infecia natural nu este stopat de rspunsul imun, iar memoria imunologic este mediocr
Nu este definitif clar rolul LT CD8+ (Tc)

Lipsa unui model animal satisfctor

STRATEGII DE VACCINARE
Elaborarea vaccinurilor vii atenuate
Elaborarea vaccinurilor inactivate
Vaccinuri recombinante subunitare (numai imunitate umoral)
Epitopi peptidici anti-gp 120 (numai imunitate umoral)
Utilizarea vectorilor (inseria genelor env)
Vaccinuri ADN
VIRUSURILE HTLV
(Human T-cell Lymphotropic Virus)
Genul Deltaretrovirus
Specii HTLV-1 i HTLV-2
Structura comun retrovirusurilor
Transmiterea contact sexual, vertical, prin snge (cu limfocite).
Puterea oncogen determinat de gena transactivatoare tax.
Manifestri clinice 1-5% din persoanele infectate dezvolt peste 20-30 ani leucemie acut cu celule T.
Diagnostic depistarea virusului prin ELISA i confirmarea W-B, PCR
Tratament antiretrovirale, IFN
Tratament
Este indicat asocierea a 3 chimioterapice: 2 INRT + 1 IP; 2 INRT + 1 INNRT, 3 INRT, 1 INRT+1 INNRT+IP
zidovudina (300 mg) + lamivudina (150 mg)+abacavir (300mg)
zidovudina (300 mg) + lamivudina (150 mg) + nevirapina (200 mg)
stavudina (40 mg) + lamivudina (150 mg) + nevirapina (200 mg)
stavudina (30 mg) + lamivudina (150 mg) + nevirapina (200 mg) pentru pacientii cu greutatea < 60kg
Dificulti:
Durata i costul tratamentului
Toxicitatea preparatelor
Dezvoltarea rezistenei
Monitorizarea terapiei antiretrovirale:
Msurarea arjei virale (copii ARNv n plasm fiecare 6 luni)
Determinarea numeric a LT CD4+ fiecare 3 luni