Metode bazate pe absorbsorbie

Din acest grup fac parte metodele spectrometrice de absorbie in ultraviolet ,

vizibil i n inflarou.
S p e c t r o m e t r i a s a u s p e c t r o f o t o m e t r i a este o metod care
se ocup cu msurarea absorbiei de energie a substanelor n funcie de
lungimea de und a radiaiei. Spetrofotometria de absorbie este la ora actual
una dintre metodele cele mai utilizate pentru identificarea , determinarea
cantitativ a unui numr extrem de mare de substane medicamentoase din
cele mai diverse clase. Metoda se caracterizeaz prin sesibilitate, simplicitate
i rapiditate, impunndu-se mai ales specificul ei.
S p e c t r o f o t o m e t r i a n u l t r a v i o l e t i v i z i b i l este o
metod curent de investigaie n controlul medicamentelor ce aplicaii
pentru : cunoaterea constituiei moleculare a unor substane, bazat pe
evidenierea unor grupri care modific benzile de absorbie atribuite unor
cromofori; identificarea i controlul puritii substanelor medicamentoase ;
dozarea substanelor medicamentoase ca atare i din amesticuri; studiul
echilibrelor n soluii, formarea combinaiilor complexe, determinarea
constantelor de stabilitate i instabilitate, ordinul unei reacii, gradul de
polimerizare etc.
n vederea identificrii substanelor medicamentoase pure se recomand
compararea spectrului n UV al substaei de determinat cu cel obinut aceleai
condiii experimentale pentru aceeai substana n stare pura sau se indic cu
precizie lungimele de und la care se nregistreaz maximele i minimele de
absorbie ale spectrului obinut ntr-un anumit solvent i intr-o anumit
concentraie, precizndu-se uneori i valoarea extincilor (E), a coeficienilor i
valoarea coeficienilor de extinncie molar (E) sau a coeficienilor de extincie
specific E1% cm. La 1 max.
n FS, ed. XI , snt prevzute diferite variante spectrofotometrice de
determinare cantitativ a substanelor medicamentoase: determinarea
cantitativ dup coeficientul de extincie (E1% cm ), spectrofotometria
diferenial .a.
Noi posibiliti n identificarea i determinarea cantitativ a substanelor
medicamentoase deschde utilizarea metodei de spectrofotometrie derivat n
UV.
Metoda fotocolorimetric se utilizeaz pe larg n analiza farmaceutic.Spre
deosebire de spectrofotometria n UV, metoda fotocolorimetric prevede
msurarea densitii obtice a sluiei colorate cu ajutorul fotocolorimetrului .
FS,ed.XI prevede determinarea cantitativ fotocolorimetric a nitroglicerinei,
furadoninei, furazolidonei, riboflavinei, acidului folic, unor glicozide cardiotonice
etc.
S p e c t r o f o t o m e t r i a n i n f r a r o u se caracterizeaz printro
informaie mai multilateral despre structura chimic a substanei
medicamentoase. Interpretarea unui spectru n IR reprezint un mijloc deosebit

de important de determinarea a structurei unei substane,a degradrii ei

chimice, a identitii, puritii i evalurii ei cantitative.
Spectru in IR reprezint o proprietate fizic specific a moleculei, care nu se
repet la o alt molecula orict demult sar asemena structurile lor,dar care
este identic pentru substane cu structuri identice.
Dac doi compui identici prezint n spectrele lor diferene ale poziiei i
intensitii relative a benzilor,farmacopeile recomand restrictalizarea ambelor
compui din acelai solvent i repetarea determinrii pe probe n stare solid,
sau dizolvarea probelor n acelai solvent i efectuarea spectrelor n aceleai
condiii. n acest fel este posibil evidenierea formelor cristaline(polimorfe)
diferite ale acelorai substane.
Spectru IR asigur o identificare mai precis dect prin alte metode.numrul
benzilor fundamentale, armonice i combinaie complic spectrul , dar ofer
garanii suplimentare de identificare.n practic se ntlnesc doua cazuri
diferite: identificarea substanelor cu structuri necunoscute i celor cu structuri
cunoscute.
Spectroscopia n IR ne permite identificarea omologilor aceleeai clase care
prin alte metode nu se pot
diferenia(barbiturice,xantine,fenotiazine,sulfamide,peniciline etc.), a
enantiomerilor i sterioizomerilor.Principiile care stau la baza determinrilor n
IR snt aceleai ca in UV. n IR avem posibilitatea de a alege dintre multiplele
benzi care alctuiesc spectru pe cea mai intens,respectiv pe cea care se
refer la o anumit parte din molecul,deobicei la gruparea responsabil de
activitatea biologic. Aplicarea legii lui Lambert-Berr, corelat cu cunoaterea
exact a coeficientului de extincie al unei benzi caracteristice,permite
determinri exacte de concentraie sau a gradului de puritate a unui compus.
Calculul concentraiilor se realizeaz fie prin interpolarea extinciilor pe curbele
de etalonare ,fie prin direct compararea a absorbiei cu cea a standardului, al
substanelor integrate corespunztor curbelor de absorbie sau a nlimii
vrfurilor.

Metodele bazate pe emisia energiei

absorbite
Din acest grup de metode fac parte fluorimetria, metodele radiochimice i
fotometria flacrii.
Analiza de
flurorescen
este o metod strns legat de spectrofotometric. Prin absorbia de energie o
molecul poate fi transfert din starea electronic fundamental la o alt stare.
Multe molecule snt capabele s emit aceast energie sub form de radiaie,
astfel rentorcndu-se la starea fundamental. ntr-un mod simplificat, aceast
radiaie emis este denumit luminescena, care n dependen.
Capacitile fluorescente ale substanelor medicamentoase snt condiionate de
structura lor sau a produselor de disociere, salvoliz, altele reacii chimice care
dus la formarea iluoroforilor.
Unele substane medicamentoase fluoresceaz att n stare solid, ct i
nsoluii. Intensitatea fluorescenei depinde de structura chimic i proprietaile
fizice, ct i de concentraia substanei. Natura solventului, pH-ul mediului,
temperatur, prezena unor impuriti etc.
Multe substane medicamentoase pot fi studiate fluorimetric, de exemplu:
steroizii, vitaminele,alcaloizii,antibioticele,sulfalanilamidele,derivaii acidului paminobenzoic,indolului,fenoteazinei,pirimidinei,dibenzazeipinei,etc.
Se impun numeroase aplicaii ale analizei calitative de fluorescen,care este o
proprietate extrem de avantajoas a moleculelor unor substane
medicamentoase. Atunci cnd ele snt supuse separrii prin cromotografie pe
strat subire sau hrtie.
Localizarea zonelor(spoturilor) pe cromotogram este uor de efectuat prin
expunerea cromotogramei la radiaie luminoase excitante adecvate i apoi prin
observarea fluorescenei compuilor concentraiei n diversele zone ale
cromotogramei. Aceste zone pot fi marcate pentru a fi definite prin valorile R.
Avantajul avident al determinarilor de fluorescen const in sensibilitatea lor
mrit. Prin metoda fluorescen pot fi determinatecantitativ concentraiile
compuilor fluorescenei de ordinea 10-710-9 M. Metodele radiochimice
bazate pe msurarea B- i a-iradierii cu ajutorul spectrometrelor se utilizeaza
tot mai frecvent la determinarea calitii preparatelor radiofarmaceutice.
Metoda de analiz cu folosirea izotopelor radioactivi (atomilor marcai ) de

asemenea se utilizeaz n diferite domenii ale tehnicii i chimiei analitice. O

variant ingenioas de analiz a preparatelor radiofarmaceutice este utilizarea
combinat a metodei radioizotopice i cromatografice pe strat subire.
n analiza biofarmaceutic se impune n perspectiv aplicarea metodei
radioimunolgice.
F t o m e t r i a f l c r i i este o metod de determinare a concentraiei
elementelor alcaline i alcalinopamntoase din soluiile substabelor
medicamentoase anorganice i
organice, dupa intensitatea iiradierii
caracteristice a flcrii.

Metodele magnetice
Rezonana Magnetic Nuclear (RMN) este o metod de analiz ce se bazeaz
pe proprietile magnetice ale nucleelor atomilor, fie ale atomilor de H-RMH
(Rezonana Magnetic Protonic), fie ale atomilor de
C-RMN ( Rezonana
Magnetic de Carbon ).
Modul de manifestare a acestor nsuiri este influenat de ambiana chimica n
care se afl atomii respectivi, oferind informaii cu privire la structura
compusului n care snt nglobai atomii cu nucleele implicate n fenomenul de
magnetizare. RMN ofer informaii de o inestimabil valoare analitic cu privire
la atomii acestor elemente, punnd la dispoziie analistului date complexe i
diferite cu privire la alctuirea scheletului de atomi de carbon ai moleculei i la
dispunerea atomilor de hidrogen atasai acestora.
n cadru
controlului medicamentelor, metoda RMN ofer posibilitatea de a stabili
structura chimic a substanelor medicamentoase organice, proprietaile
dinamice ale moleculelor ( conformaia, configuraia izomerilor,
diasterioizomerii, tautomeria ceto-enolitic) de a face analiza cantitativ a
substanelor medicamentoase individuale sau n amestecuri.
Metoda RMN se prezint preponderent specific n identificarea i diferenierea
derivaiilorde penicilin, a formelor acide de sruri de sodiu i potasiu, a
formelor anhidre, n diferenierea izomerilor amfetaminelor, n determinarea
puritaii optice; n evedenierea interaciunelor moleculare. Prin RMN pot fi
explorai complecii moleculari medicament-medicament, medicamentexcipient. Astfel, butamida formeaz cu B-ciclodextrinele (B-CD) un compus
de incluziune de tip canal
(7-8A) cu proprietile terapeutice mbuntite .
Utilizarea metoda RMN, se constat c n interaciunea acesteia cu B-CD, o
jumtate din partea fenilaromatic este inclus n cavitatea B-CD i formeaz o
legtur hidrofob, n timp ce o grup hidroxil a molecule-gazd se asociaz
suplimentar cu substana medicamentoas printr-o legatur de hidrogen.