Bacteriile generaliti, taxonomie, factorii care influeneaz numrul i rspndirea lor
n sol
Bacteriile sunt organisme procariote, fac parte din regnul Procaryota, clasa Schizomycetes, ncrengtura Scotobacteria. Bacteriile sunt organisme foarte mici, care nu se vd dect la microscop, de aceea dimensiunile lor se exprim n microni (a mia parte dintr-un milimetru). Ele sunt situate la limita superioar a substanelor coloidale (nite coloizi hidrofili) i sunt variabile de la o specie la alta. De aceea, dimensiunea constituie un caracter taxonomic important. Dimensiunile sunt cuprinse ntre 0,3-15 microni. Speciile cele mai mici de coci au diametrul de 0,6 microni, iar cele mai mari de 1,2-1,5 microni. Bacilii cei mai mici au grosimea n jur de 0,3 microni, iar cei mai mari de 1-1,3 microni i o lungime de 3-10 microni. Bacteriile de putrefacie pot atinge mrimi de pn la 15 microni Clostridium putrefaciens. Spirochetele au grosimi de 0,2-0,3 microni, lungimea de 6-20 microni. Anatomia bacteriilor
Forma bacteriilor i dimensiunea lor constituie importante criterii de taxonomie, fiind controlate genetic. Aprecierea formei se face n mod convenional n culturile tinere, n faza de cretere activ a celulelor. Dup form, bacteriile pot fi clasificate n cinci mari categorii: 1) sferice, 2) cilindrice, 3) spiralate sau elicoidale, 4) filamentoase, 5) ptrate. Bacteriile sferice (cocii) pot avea forma sferic, ovoidal, elipsoidal, reniform, uneori neregulat, sau parial poliedric, avnd diametrele celulei aproape egale. Dup poziia celulelor- fiice, rezultate n urma diviziunii, cocii prezint ase subtipuri morfologice: a) Coci simpli, izolai, cnd celulele rezultate din diviziune rmn izolate. b) Diplococi, cnd celulele rezultate nu se separ ntre ele, rmnnd grupate cte dou (Diplococcus pneumoniae). c) Streptococi, cnd celulele rezultate se grupeaz formnd lanuri (Streptococcus lactis). d) Tetracoci sau tetrade, cnd celulele rezultate se grupeaz cte patru (Micrococcus tetragenes). e) Sarcina, cnd opt sau 16 celule sunt grupate n pachete asemntoare baloturilor legate (Sarcina flava). f) Stafilococi, cnd celulele rezultate formeaz grupri neregulate n form de ciorchine (Staphylococcus aureus).
Densitatea bacteriilor sau greutatea specific a unei celule bacteriene este aproape de cea a apei (principalul component al protoplasmei); de 1,07 - 1,32 n stare umed (n medie de 1,1). Densitatea bacteriilor scade n cazul unui coninut mic n lipide i crete la un coninut mare de protide i sruri. Dimensiunile bacteriilor
Bacteriile sunt organisme foarte mici, care nu se vd dect la microscop, de aceea dimensiunile lor se exprim n microni (a mia parte dintr-un milimetru). Ele sunt situate la limita superioar a substanelor coloidale (nite coloizi hidrofili) i sunt variabile de la o specie la alta. De aceea, dimensiunea constituie un caracter taxonomic important. 2 Structura celulei bacteriene Structurile intraparietale
Peretele celular (sau membrana celular) este o formaiune extern, rigid, nedeformabil, care nconjoar membrana citoplasmatic i determin aspectul morfologic caracteristic al bacteriei. Peretele celu-lar poate fi acoperit, la unele specii de capsul sau de un strat mucos pericelular, iar la bacteriile mobile, ciliate i piliate este strbtut de cilli sau pili. Grosimea lui variaz ntre 15-35 milimicroni i reprezint 20-30% din greutatea uscat a celulei i 25% din volumul ei. Structura peretelui celular s-a pus n eviden cu ajutorul microscopului electronic, stabilind dou straturi: un strat bazal i un strat al structurilor speciale. Stratul bazal este format dintr-un mucopeptid numit i mucocoplex sau murein. Este cunoscut i sub denumirea de peptidoglican. Stratul structurilor speciale este format din substane care formeaz un matrix, n care este nglobat structura parietal bazal i prezint o compoziie chimic particular, n raport cu grupa de bac-terii analizat. n funcie de structura i compoziia chimic, pereii celulari ai bacteriilor aparin la trei categorii, care coincid cu modul de colorare: Gram-pozitive, Gram- negative i acido-rezistente. La bacteriile Gram-pozitive, peretele este mai gros, relativ omogen, fr stratificri. Analizele chimice au identificat c peptidoglicanul constituie componentul principal, 40-90% din greutatea uscat (circa jumtate din greutatea uscat a membranei). El alctuiete un sac peptidoglicanic multistratificat, rigid, format dintr-o molecul gigant cu o structur de reea tridimensional. Pe lng acesta, s-au identificat polizaharide i o clas special de polimeri, care includ acizii teichoici, teichuronici i lipotechoici. La bacteriile Gram-negative, peretele este mai subire i format din mai multe straturi i are o structur mai complex. - peptidoglicanul formeaz un singur strat bazal i se afl n zona median a peretelui (reprezint 5-10% din greutatea membranei); - un strat de lipidoproteine format din grupri lipidice i grupri proteice, grupate lax, situate pe suprafaa superioar a peptido-glicanului; - membrana extern este situat la exterior fa de stratul peptido-glicanic i de membrana plasmatic i este alctuit din fosfolipide (35%), proteine (15%) i lipopolizaharide (50%); - stratul de lipopolizaharide este identificabil la periferia celulei, avnd o structur discontinu. El este reprezentat de o poriune variabil polizaharidic care corespunde antigenului somatic "O" i de lipidul A rspunztor de proprietile endotoxice. La bacteriile Gram-negative exist spaiul periplasmatic care delimiteaz membrana plasmatic (citoplasmatic), din interior, de membrana extern a peretelui celular. El conine numeroase enzime hidrolitice, fosfataze, amidaze, penicilinaz .a., care acioneaz asupra substanelor ce au trecut membrana extern, crend posibilitatea trecerii lor prin membrana plasmatic. La bacteriile acidorezistente (mycobacterii), structura special a peretelui conine peptidoglican i cantiti mari de complexe formate din acid mycolic i substane ceroase. Acestea le confer impermeabilitatea fa de soluiile apoase de colorani i rezisten la decolorare cu acizi diluai. Semnificaia biologic a peretelui celular: - Reprezint sistemul de susinere mecanic, "un fel de corset ne-elastic" al ntregii arhitecturi celulare. - Are rol protector fa de aciunile mecanice, fizice i chimice ale mediului. - Asigur efectuarea fenomenelor de nutriie i secreie, pentru c substanele nutritive ptrund n celul i substanele de secreie sunt eliminate prin porii peretelui celular. 3 - Asigur protecia fa de presiunea osmotic interioar. - Particip la diviziunea celular, dovad c protoplastele izolate nu se pot nmuli. - Joac un rol de receptor pentru unii bacteriofagi, determinnd fenomenul de "recunoatere" a celulelor apte de conjugare. - Determin diferenele tinctoriale dintre grupe de bacterii. - Asigur mobilitatea bacteriilor ciliate, conferind un suport cililor care mping bacteria nainte. Protoplatii, cu toate c i pstreaz cilii, micrile lor nceteaz. - Membrana extern reine n spaiul periplasmatic enzimele degradative sintetizate n celul, dup ce au traversat membrana plasmatic, precum i o mare varietate de molecule nutritive. Cu toate c peretele celular ndeplinete attea funcii importante, el nu este o structur indispensabil pentru activitile biologice i biochimice ale celulei bacteriene. De aceea, celula bacterian fr perete celular, numit protoplast sau sferoplast, este capabil de activitate i supravieuire. Protoplastul este o celul bacterian Gram-pozitiv, creia i s-a ndeprtat complet peretele celular sub aciunea lizozimului. Protoplastul este delimitat de membrana citoplasmatic i pstreaz, n general, proprietile i activitile vitale ale celulei din care provine. Protoplastul nu-i poate reface peretele celular. Protoplastul prezint i unele caracteristici nespecifice celulei din care a provenit: - de regul, este rotund, indiferent de forma iniial a bacteriei; - se coloreaz numai n rou prin metoda Gram; - este imobil; - pierde capacitatea de a fixa bacteriofagul specific din cauza lipsei zonelor receptoare de pe peretele bacterian; - se divide, dar nu formeaz colonii pe agar. Sferoplastul este tot un fel de protoplast obinut de la bacteriile Gram-pozitive, al crui perete celular nu poate fi degradat complet sub aciunea lizozimului. De aceea sferoplatii i refac peretele celular cu structura lui iniial. Membrana plasmatic este o formaiune celular elastic ce n-conjoar citoplasma i o separ de suprafaa interioar a peretelui celular. Are o structur compact format din mai multe straturi. Constituia ei chimic este format din proteine (50-80%), lipide reprezentate de fosfolipide (care formeaz matricea structural a membranei i sunt rspunztoare de integritatea structural a acesteia) i glucide (polizaharide legate cu proteine - glicoproteine sau lipide - glicolipide). Rolul biologic al membranei plasmatice const n urmtoarele: - delimiteaz spaiul intracelular i constituie o barier osmotic ce regleaz schimburile necesare i selective de substane dintre celul i mediu, meninnd astfel o compoziie chimic i ionic constant a celulelor; - este implicat n mobilitatea bacterian, deoarece una din structurile corpului bazal ale flagelului se leag de structura membranei, n cazul bacteriilor ciliate; - are rol important n diviziune, contribuind astfel la formarea septului transversal care desparte celulele-fiice; - particip la sinteza peretelui celular, a capsulei i chiar a cililor; - particip la formarea i eliminarea unor proteine, ca enzimele i exotoxinele, care pot fi sintetizate n membrana plasmatic sau pe suprafaa ei extern; - are funcii nemijlocite n delimitarea sporului; - ndeplinete rolul mitocondriilor; - particip la duplicarea ADN-ului; - este "inta" unor antibiotice, ce deregleaz schimburile dintre bacterii i medii, afectnd selectivitatea i funciile de transport. Mezozomii sunt cunoscui n literatur i sub denumirile de: membrane intracitoplasmatice, corpi periferici, condrioizi sau plasmalemasomi. Ei provin dintr-o 4 invaginare n form de "sac" sau de "pung" a membranei plasmatice i au caracteristicele structurale ale membranei plasmatice din care au provenit. Mezozomii au rol n procesele secretorii, de exemplu, n producerea i eliberarea unor exoenzime ca "penicilinaza". De asemenea, sunt implicai n sinteza nveliurilor celulare. Ei au un rol important i n controlul replicrii cromozomului i a plasmidelor bacteriene. Citoplasma bacterian este un sistem coloidal complex format din proteine, glucide, lipide, ap i substane minerale. Ea nu are o organizare definit, ca la celulele eucariote, n interiorul ei gsindu-se materialul nuclear, incluziunile i ali constitueni ai protoplastului. La celulele btrne, citoplasma se retrage centriped, scade cantitatea de ADN, i pierde treptat afinitatea tinctorial (se decoloreaz mai puin intens) i capt o structur granular cu vacuole. Ribozomii sunt formaiuni intracitoplasmatice, nucleoproteinice, de form sferic, cu diametrul de circa 20 milimicroni, n numr de la 1.500 la 100.000 (n medie 20-30.000). Ei conin 50% ap, iar substana lor uscat se compune din circa 65% ARN (ARN ribozomal) i circa 35% proteine. Volutina apare sub form de granule sferice cu diametrul de 48 milimicroni - 1 milimicron, fr structur intern, situate n regiunea nucleoplasmatic i prezente mai ales n celulele btrne. Rolul biologic al granulelor de volutin, formate dintr-un complex polifosfat-ARN- proteine, const n aciunea lor de reglare a economiei fosforului n celul i ar reprezenta o rezerv de P i de energie intracelular. Incluziunile lipidice apar sub form de granule bine delimitate, observabile la microscopul fotonic, formate din acidul poli-B-hidroxi-butirat (PHB). El constituie rezerva de carbon i energie, caracteristic tuturor celulelor procariote. Incluziunile polizaharidice sau incluziunile de glicogen i amidon se gsesc, ndeosebi, la bacterii sporulate aerobe. Ele reprezint circa 50% din greutatea uscat a celulelor i constituie substane de rezerv de carbon i energie, ca i PHB. Incluziunile de sulf se gsesc n sulfobacterii i reprezint un depozit de rezerv. Ele dispar prin oxidarea sulfului. Incluziunile celulare menionate au rol n activitatea metabolic a celulei bacteriene, constituind, adesea, substane de rezerv, ca o reacie de aprare a echilibrului osmotic celular. Vacuolele sunt formaiuni mai transparente dect citoplasma, sferice (diametrul = 0,3 - 0,5 milimicroni), n numr de 6-20 (n funcie de mediul de cultur) i se formeaz n perioada de cretere activ a celulei. Vacuolele sunt constituite din diferite substane dizolvate n ap. Ele pot dispare din celulele btrne. S-au descris i vacuole cu coninut gazos, la bacteriile imobile acvatice (cianobacterii, bacterii fotosintetizante roii i verzi etc.). Sporul este o celul special care se formeaz n interiorul celulei vegetative (celula activ) a unor bacterii, cu o ultrastructur, compoziie chimic i enzimatic diferite de a celulei din care provine, ceea ce i confer o rezisten deosebit fa de condiiile de mediu nefavorabile. Sporul are capacitatea de a pstra n stare latent toate caracteristicile genotipice ale celulei vegetative. Dup maturare, sporul se desprinde sau rmne ataat de celul. Bacteriile sporogene sunt Gram-pozitive i adesea de forma unor bastonae drepte. Sporul endogen (endosporul) sau sporul propriu-zis este forma cea mai caracteristic pentru bacterii; el apare n interiorul unei celule vegetative numit sporangiu, fiind incapabil de diviziune. Sporul endogen este o celul refrigerent i foarte rezistent la factorii de mediu nocivi. ntr-un sporangiu, n general, apare numai un spor. Morfologia sporului (ne referim la endospor). Forma sporului este rotund sau oval. Poziia n sporangiu poate fi central, subterminal sau terminal. Diametrul sporului poate fi mai mic sau mai mare dect diametrul transversal al sporangiului, reprezentnd 1/7-1/17 din volumul i din greutatea lui. O celul bacterian, n majoritatea cazurilor, produce numai un spor. Germinarea sporului nseamn trecerea de la viaa latent la viaa activ, adic la starea vegetativ a celulei bacteriene i cuprinde trei etape succesive: activarea, germinarea i creterea. 5
Semnificaia biologic a sporului const n urmtoarele: - este o form de rezisten, de conservare a speciei; - pstreaz nealterate caracteristicile celulei vegetative i le transmite la celula rezultat din germinare; - are o mare longevitate (zeci i chiar sute de ani); - este foarte rezistent la cldur, uscciune i aciunea substanelor chimice. Alte structuri intraparietale sunt rhapidosomii, particule ribonucleoproteice (ARN n proporie de 2:1) de forma unor bastonae cu un canal central, cu rol n micrile protoplasmatice i magnetosomii care, coninnd fier sub form de magnetin, acioneaz ca o busol biomagnetic asigurnd orientarea i deplasarea unor bacterii. Mag-netosomii se gsesc n imediata apropiere a suprafeei interne a membranei plasmatice unde formeaz lanuri, avnd forma unor cuburi cu coluri rotunjite. Structurile extraparietale
Capsula bacterian este un nveli mucoid (gelatinos), protector al unor bacterii saprofite i patogene, care se poate prezenta sub patru forme: 1) microcapsula - un strat mucoid foarte fin ce nconjoar celula bacterian; 2) capsula propriu-zis (macrocapsula) - o formaiune distinct ce formeaz un nveli voluminos al fiecrei celule sau a unei perechi de celule; 3) stratul mucos - o mas amorf neorganizat ce se afl n jurul celulei; 4) zoogleea sau masa zoogleic - un strat mucos care leag prin fibrile, ntr-o singur mas, mai multe celule. Att capsula ct i stratul mucos sunt, n general, de natur polizaharidic. La unele bacterii (B. anthracis) sunt de natur proteic.
Creterea bacteriilor
Prin cretere se nelege, n general, procesul biologic care determin mrirea n timp a dimensiunilor spaiale i a volumului unui organ sau organism (de exemplu, n ontogenez), ca rezultat al metabolismului de biosintez ce faciliteaz adugarea de substan nou. Acest fenomen este foarte evident la organismele pluricelulare i mai puin pregnant la bacterii. De aceea, noiunea de cretere bacterian are dou nelesuri: creterea propriu-zis (mrirea volumului celular) i sporirea numrului de indivizi ntr-o populaie (multiplicare). Creterea propriu-zis la bacterii const n sintetizarea din mediu a unor substane nutritive noi, identice cu constituenii celulei. Acest proces este controlat genetic. Creterea, la un moment dat, sisteaz i urmeaz diviziunea sau multiplicarea bacteriilor. Creterea bacteriilor poate fi influenat de numeroi factori de mediu: temperatur, pH, lumin, presiunea hidrostatic, condiiile osmotice, oxigenul, precum i de compoziia chimic a mediului. Influena acestor factori asupra creterii i multiplicrii este larg utilizat n practic.
Multiplicarea bacteriilor
Acest fenomen se poate realiza prin: diviziune direct (simpl sau binar), nmugurire, fragmentare, spori (de propagare). Multiplicarea prin diviziune 6 Diviziunea direct este forma cea mai frecvent de multiplicare a bacteriilor i const n scindarea celulei-mam n dou celule-fiice, adesea identice (diviziune izomorf) i mai rar inegale (diviziune heteromorf). La bacili i spirili, diviziunea se face frecvent n plan perpendicular pe axul longitudinal al celulei, iar la coci dup 1, 2 sau 3 planuri perpendiculare succesive, ceea ce face posibil o grupare caracteristic a celulelor-fiice. Diviziunea direct se desfoar n dou moduri: prin strangulare sau prin formarea unui sept transversal. n ambele cazuri, prima etap a celulei o constituie diviziunea nucleului. ntre dou diviziuni, ntreaga mas de constitueni celulari, inclusiv ADN, i dubleaz coninutul, iar cei doi corpi nucleari se despart unul de altul. Urmeaz apoi strangularea (la diviziunea simpl), adic creterea i invaginarea membranei plasmatice i a peretelui celular sau formarea unui sept transversal (la diviziunea binar), ca o diafragm, care apoi se divide n lungul lui, separnd cele dou celule-fiice. Cnd invaginarea sau septarea peretelui celular nu se fac complet, celulele-fiice rmn legate ntre ele prin plasmodesme (un pseudoperete celular), rezultnd "bacterii pluricelulare". De fapt, astfel de bacterii sunt formate din celule individuale, fiziologic independente i cu nucleu propriu. Aa se explic i existena formelor diplococice, diplobacilare, streptococice, streptobacilare. Multiplicarea prin nmugurire Acest tip de multiplicare este caracteristic numai unor specii de bacterii i const n formarea de ctre celula-mam, pe suprafaa ei, lateral sau terminal, a unei protuberane n form de mugure, mai mic dect ea, n care migreaz constituenii noii celule sau n care vor fi sintetizai de novo. Mugurele format crete treptat i, cnd ajunge la o anumit mrime, se separ de celula-mam. Multiplicarea prin fragmentare A fost observat la cele mai multe actinomicete (filamentoase cu ramificaii adevrate) i const ntr-o diviziune multipl a bacteriilor care n ciclul de cretere au o perioad hifal cenocitic, cnd hifa se alungete. La un moment dat, apare la mijlocul hifei primul sept transversal i apoi altele de-a lungul filamentului, rezultnd mai multe fragmente scurte, egale, ale cror extremiti devin situsuri de cretere, facilitnd astfel formarea de noi celule bacteriene Multiplicarea prin spori A fost studiat la actinomicetele care formeaz exospori sau spori de dispersare de tip asexuat, dispui adesea pe hifele aeriene, n lanuri de diferite lungimi sau n vezicule sporale speciale (sporangii). La unele actinomicete, hifele sporulente care formeaz exospori, sunt nvelite ntr-o teac extracelular independent de transformrile peretelui sporoforului Viteza de multiplicare la bacterii este excepional de mare, comparativ cu a altor organisme. Durata medie a unei generaii bacteriene este n medie de 20-30 minute (cu variaii de la 9 minute la mai multe ore sau chiar zile). Viteza de multiplicare este determinat genetic, de aceea variaz de la o specie la alta. n cadrul aceleiai specii, poate fi influenat de condiiile de mediu. Durata unei generaii este minim cnd condiiile de cultur sunt optime. Aceast proprietate de multiplicare rapid a bacteriilor explic supravieuirea lor n natur, adesea n condiii de mediu nefavorabile. Ea se datoreaz, printre altele, valorii foarte mari a raportului dintre suprafaa celulei i greutatea ei (de 400.000 de ori mai mare dect la om).
Nutriia bacteriilor
Nutriia const n totalitatea proceselor prin care bacteriile i asigur necesitile energetice i plastice, de sintez a constituenilor celulari, de activare a enzimelor i a sistemelor 7 de transport. Nutriia constituie i un etalon de clasificare a bacteriilor care pot fi grupate att dup sursa de energie ct i dup cea a materialelor plastice. Dup sursa de energie, bacteriile pot fi clasificate n: - fototrofe (fotosintetizante), a cror surs primar de energie este lumina (energie fotonic); - chemotrofe (chemosintetizante), a cror surs de energie este obinut n lipsa luminii, n urma unor reacii de oxidoreducere a unor substane exogene anorganice sau organice. Metabolismul energetic, n funcie de natura compuilor folosii ca donatori de electroni, ofer posibilitatea clasificrii bacteriilor n: - litotrofe, bacterii care metabolizeaz substane anorganice; - organotrofe, bacterii care utilizeaz substanaele organice (inclusiv ca surs de carbon). Dup sursa materialelor plastice, bacteriile pot fi clasificate n: - autotrofe, care i sintetizeaz toi metaboliii organici din substane anorganice (bioxid de carbon, amoniac, ap, sruri minerale), fiind independente de orice surs organic de energie; - heterotrofe, cele a cror dezvoltare este dependent de prezena unor substane organice. Bacteriile heterotrofe au un metabolism de tip chemosintetic. Unele bacterii heterotrofe utilizeaz ca surs de energie exclusiv hidraii de carbon (bacterii de fermentaie), iar altele compuii cu azot (bacterii de putrefacie). Exist i bacterii cu nutriie mixotrof Bacteriile fototrofe utilizeaz lumina ca surs obligatorie de energie. Ca surs de carbon i ca donatori de hidrogen ele pot utiliza fie bioxid de carbon i componente anorganice (bacteriile fotolito-autotrofe), fie diferii compui organici (bacteriile fotoorgano- heterotrofe). Comparativ cu plantele verzi, bacteriile fototrofe metabolizeaz n lipsa oxigenului i nu produc oxigen, clorofilele lor sunt diferite ca structur chimic i adsorb radiaiile infraroii. Bacteriile chemotrofe utilizeaz energia eliberat n urma reaciilor de oxidare a unor compui organici sau anorganici. Ca i surs de carbon i donator de hidrogen, bacteriile chemolitoautotrofe pot utiliza fie numai compui anorganici (chemo-litoautotrofe obligate), fie n cadrul unei nutriii mixotrofe, att compui organici ct i anorganici (chemolitoautotrofe facultative). Restul bacteriilor utilizeaz pentru ntregul metabolism numai compuii organici (chemoorganoheterotrofe).
Rickettsiile - bacterii dup modul de organizare celular, form, dimensiuni, structur intern, multiplicare. Parazitism absolut. Form cocobacilar, gram negative, alctuite din proteine, glucide, lipide, ADN Sunt considerate intermediare ntre bacterii i virusuri Sunt alctuite din proteine, glucide, lipide, ADN, diferite tipuri de ARN, vitamine, sruri minerale, ap. Chlamidiile - paraziteaz celule eucariote - form cocoidal, gram negative - parazii de energie - sunt patogene
Arhebacteriile
Grup heterogen foarte ndeprtat de bacterii Grupate n trei uniti distincte: Bacterii metanogene - producere de metan Halofile - conin carotenoide roii, chemoheterotrofe, aerobe Termoacidofile 8
Actinomicetele
Unicelulare - cu hife lungi i subiri - Bacterii filamentoase, ramificate, prin involuie ajung la forma de bacil. - Gram pozitive, imobile, aerobe, saprofite sau parazite - nmulire: prin fragmentare, sporofori - Rezistente la uscciune i sensibile la aciditate - Productoare de antibiotice - Rol n sol: mineralizeaz compuii organici, descompun hemicelulozele, xilanele, leag particulele de sol.