LP 27: Examenul de laborator al ulceraiilor i exsudatelor genitale.

Identificarea gonococului si diagnosticul de laborator al sifilisului

Obiective: cunoastrea de catre studenti a
1. condiiei microbiologice a tractusului genital masculin i feminin
2. agenilor etiologici din infeciilor tractusului genital masculin i feminin
3. a diagnosticului microbiologic in:
- uretrite acute;
- vaginoza;
- endocervicita acuta;
- sifilis.
-

Condiia microbiologic a tractusului genital masculin:

uretra distal - normal colonizat cu bacterii de pe tegument i colon: stafilococi
coagulaz negativi, difterimorfi, enterobacteriaceae, neisserii nepretenioase,
anaerobi, stafilococi coagulaz pozitivi
uretra proximal - necolonizat, ocazional contaminat
prostata, canalele ejaculatoare, veziculele seminale, canalele deferente, epididim normal sterile.
Infeciile tractusului genital masculin:
la vrst tnar - exogene
peste 35 ani - endogene

1.

Infecii ale organelor genitale externe:

Leziuni ulcerative: Treponema pallidum
Virusul Herpes simplex 2
- n zone tropicale i subtropicale Haemophilus ducreyi
Chlamydia trachomatis (L1-L3)
Leziuni verucoase: Papillomavirus
T. pallidum
2. Uretrite acute:
Gonococice (incubaie aprox. 4 zile): Neisseria gonorrhoeae
Non-gonococice (incubatie 7-14 zile): C. trachomatis
U. urealyticum
M. genitalium
v. Herpes simplex
Post-gonococice: infecie dubl, eec terapeutic, reinfecie
3.
Prostatite: reprezentani ai familiei Enterobacteriaceae
C. trachomatis
U. urealyticum
4. Epididimite, epididimo-orhite:
la tineri: Neisseria gonorrhoeae
Chlamydia trachomatis
peste 35 ani: bacili gram negativi coliformi, pseudomonade, S. aureus
4.
Orhite: virusul urlian, rar Coxsackie B

Diagnosticul de laborator al uretritelor acute

1.

2.

5.

6.

Se investigheaz, cu predilecie, uretrita gonococic (diagnosticul de uretrit

nongonococic se pune prin excluderea celei gonococice).
Prelevare i transport:
secreie uretral
dimineaa sau la minim 4 ore de la ultima miciune
dup toaleta local
3 tampoane ( realizate din dacron sau vat atoxic)
primul tampon: 2 frotiuri realizate extemporaneu
al 2-lea tampon: nsmnare imediat sau includere n mediu de transport Amies sau
Stuart
al 3-lea tampon (facultativ): pentru izolarea agenilor etiologici nongonococici
Examen microscopic: frotiuri colorate cu albastru de metilen i Gram
celule epiteliale scuamoase
5 PMN /cmp = uretrita acut
diplococi gram negativi n boab de cafea asezai predominant intracelular = aspect
caracteristic pentru uretrita acut gonococic la brbat (n infecia cronic dispoziia
este extracelular, situaie n care nu-i putem diferenia de neisseriile nepretenioase).
3. Cultivarea:
se realizeaz n infecia cronic i n caz de eec terapeutic
pe mediul Thayer-Martin sau pe mediu cu extract HYL, neselective i selective prin
adaos de antibiotice
dup 24 - 48 ore la 37C, n atmosfer cu CO 2, se observ colonii de tip S,
translucide, mici, stralucitoare, nepigmentate
Identificare:
biochimic
antigenic
Decelarea rapid a tulpinilor productoare de beta lactamaze i antibiogram.

Diagnosticarea uretritei gonococice este urmat de diagnosticarea altor boli cu

transmitere sexual: sifilis, HIV/SIDA, infectiile cu virusurile hepatitice B, C, etc.
Diagnosticul prostatitelor
se recolteaz trei probe seriate de urin
prelevm primii 5-10 ml urin (proba1)
lsm s se evacueze 100-200 ml urin (pentruc splarea uretrei)
recoltm ali 5-10 ml (proba 2)
masm rectal prostata
recoltm urmtorii 5-10 ml care conin secreia prostatic (proba 3)
se apreciaz numrul de leucocite:
un nr. important de leucocite n prima prob, n celelalte nr. fiind mai
redus sau absent, este sugestiv pentru diagnosticul de uretrit
un numr de leucocite aproximativ egal n cele trei probe este semnificativ
pentru o infecie urinar
n prostatite, numrul de leucocite n proba 3 este de cel puin 10 ori mai
mare dect n primele dou probe
se apreciaz tipul i numrul bacteriilor prezente n proba 2 i 3
examen microscopic frotiu colorat Gram
2

urocultura cantitativ pe geloz snge i MacConkey n prostatite,

numrul de bacterii din proba 3 este de cel puin 10 ori mai mare fa de proba 2

sunt recomandate n paralel hemoculturi

Conditia microbiologica a tractusului genital feminin:
- vulva, vagin, exocol- normal colonizate
1. primele saptmni de via: lactobacili
2. prepubertar: bacterii de pe tegumentul perineal
a. stafilococi coagulaz negativi
b. difterimorfi
c. enterobacteriaceae
d. neisserii nepretenioase
e. anaerobi
3. de la pubertate i pn la menopauz: lactobacili predomoiant, anaerobi,
stafilococi coagulaz egativi, streptococi, Gardnerella vaginalis, Candida
4. postmenopauza: bacterii de pe tegumentul perineal
- uter, trompe sterile
Infecile tractusului genital feminin:
1. Vaginite

la fetie: Neisseria gonorrhoeae

Streptococcus pyogenes
Enterobius vermicularis
la femeie: Candida albicans
Trichomonas vaginalis

2. Leziuni ulcerative ( vulv, vagin, exocol): Treponema pallidum

v. Herpes simplex 2
Haemophilus ducreyi
Chlamydia trachomatis(L1-L3)
3. Leziuni verucoase ( vulv, vagin, exocol): Papillomavirus
T. pallidum
4. Endocervicite: Neisseria gonorrhoeae
Chlamydia trachomatis ( serotipurile D-K )
v. Herpes simplex 2
5. Endometrite acute: bacterii din microbiota vaginal
S. pyogenes
C. perfringens
6. Endometrite cronice: Chlamydia trachomatis
M. tuberculosis
7. Boala inflamatorie pelvin: Neisseria gonorrhoeae
Chlamydia trachomatis
bacterii din microbiota vaginala
3

Diagnosticul de laborator al vaginitelor

1. Prelevare i transport
Se prelev 3 tampoane din secreia vaginal
primul tampon: se descarc n ser fiziologic (preparat umed lam-lamel pentru
Trichomonas vaginalis)
al 2-lea tampon: 2 frotiuri realizate extemporaneu
al 3-lea tampon: nsmnare pe medii de cultur
2. Examen microscopic:
reacie inflamatorie (raportul PMN/CES >1)
evidenierea Candida, T. vaginalis
3. Cultivare pe medii speciale pentru specii Candida (mediu Saboureau)
Diagnosticul de laborator al vaginozelor
Vaginoza = disbioz (modificare a ecosistemului normal vaginal)
! Nu este o infecie

flora lactobacilar este inlocuit de Gardnerella vaginalis i anaerobi

(Mobiluncus, Bacteroides) i micoplasme genitale
Diagnostic
n cabinet

pH-ul secreiei vaginale > 4,5

la adugarea KOH 10% se degaj miros de pete alterat (testul aminelor

volatile)
n laborator

frotiu lipsesc celulele inflamatorii i flora lactobacilar

numeroase celule epiteliale vaginale superficiale n placarde; peste 20% dintre
ele au pe suprafaa lor o abundent flor cocobacilar care le mascheaz conturul
(clue cells)

nsmnarea este fr valoare diagnostic

1.

2.

3.
4.
5.
1.

Diagnosticul de laborator al endocervicitelor (se vizeaz de predilecie etiologia

gonococic)
Prelevare i transport
se terge suprafaa exocolului cu 2-3 comprese sterile
se introduc succesiv 3 tampoane n endocol, rotind uor
primul tampon: 2 frotiuri realizate extemporaneu
al 2-lea tampon: nsmnare imediat sau includere n mediu de transport Amies sau
Stuart
al 3-lea tampon (facultativ): pentru izolarea altor ageni etiologici ( C. trachomatis,
VHS)
Examen microscopic: frotiuri colorate cu albastru de metilen i Gram
reactie inflamatorie ( peste 10 PMN/camp)
diplococi gram negativi n boab de cafea predominant extracelulari ( aceeasi
morfologie o pot avea i alte bacterii din microbiota indigen)
Cultivare
Identificare
Antibiograma
Diagnosticul de laborator al endometritelor
Prelevare i transport
4

 exsudat inflamator de la nivelul cavitii uterine

se introduce un cateter sau o sond prin canalul cervical
se adapteaz o sering i se aspir lichid endometrial; se evacueaz aerul
2. Examen microscopic
3. Cultivare
Diagnostic de laborator in suspiciunea de sifilis
1.

Microscopie optic pe fond ntunecat

serozitate exprimat prin comprimarea bazei ancrului
aspirat din puncia ganglionilor afectai
raclat din elemente eruptive cutanate sau mucoase
preparat umed lam lamel
treponeme strlucitoare, subiri, spiralate, cu capete efilate, mobile
2. IFD specificitate mare
3. Impregnare argentic- pe seciuni histologice
4. Teste serologice nespecifice (de triaj):
VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) i RPR (Rapid Plasma Reagin)

depisteaza Ac tip reagine fa de Ag cardiolipinic

sunt rapide i ieftine

utilizate pentru urmrirea eficienei terapiei

reacii fals pozitive: boli acute febrile, vaccinare recent, sarcin, boli autoimune
sau de colagen, infecii hepatice cu distrucie tisular, pacieni n vrst
testele pozitive se confirm prin teste specifice
numai VDRL poate fi utilizat pentru testarea LCR la pacieni suspectai de
neurosifilis
-

5. Teste serologice specifice:

evideniaz anticorpi specifici (specificitate 97-99%)
se pozitiveaz naintea celor nespecifice i rmn pozitive cand cele
nespecifice sunt negative (sifilis tertiar)
sunt mai puin influienate de terapie
FTA-ABS (Fluorescent treponemal antibody absorption)

IF indirect cu seruri adsorbite cu suspensii de T. Reitter;

departajeaz Ac IgM de cei IgG

TPHA (Treponema pallidum hemagglutation) hemaglutinare pasiv;
este o reacie calitativ; testele pozitive persist uneori dup vindecare
Western blot
Diagnosticul sifilisului congenital
- titrarea n dinamic la interval de 6 luni a Ac
- depistarea Ac tip IgM
- IFD
n sal sunt:
-

frotiuri din puroi uretral colorate Gram i cu albastru de metilen;

frotiuri din cultur de gonococ Gram;
TPHA.