Sunteți pe pagina 1din 9

Introducere

In ultimii ani, test imunologic chemiluminiscent (CLIA) a dobndit o atenie sporit [1-4] n diferite domenii,
inclusiv stiinta de viata, diagnostic clinic, monitorizarea mediului, sigurana alimentar i analiza farmaceutic [5],
din cauza sensibilitii sale ridicate, o bun specificitate, larg gama de aplicatii, echipament simplu i o gam larg
liniar. Imunoreacie este recunoaterea ntre antigen i anticorp. Din cauza ratei de difuzie sczut a acestor
molecule mari i problema bloc site-ul, rata imunoreacie controlat de o cinetic de transport i masa de reacie este
n general sczut. imunotestare tradiional are ntotdeauna nevoie de o lung perioad de incubaie lung, care, la
rndul su, determin ntreaga analiz s ia cteva ore pentru finalizare, astfel nct debitul i intervalul de aplicare
sunt n mare msur limitate. Cercettorii au proiectat diferite metode pentru a scurta timpul de analiz prin
mbuntirea cinetic de transport i de reacie n mas. Imunotestul rapid a extins aplicaiile CLIA.

Este adesea necesar pentru a detecta mai multe componente ale sistemelor complicate n practic. De exemplu,
datorit specificitii limitate i sensibilitatea biomarkeri pentru diagnostic clinic, msurarea mai multor biomarkeri
se aplic de obicei n scopul diagnosticrii mbuntite [6,7].

Concentraiile de pesticide multiple i erbicide sunt monitorizate simultan pentru a evalua starea de poluare a
mediului [8,9]. In mod traditional, teste imunologice se efectueaz ca teste discrete, adic, o substan analizat
pentru fiecare test a alerga, i sunt necesare mai multe serii pentru a detecta toate componentele ntr-un sistem
complex. Consumul mare de timp, reactivii i forei de munc limiteaz aplicarea strategiei tradiionale. Din
moment ce un sistem de multianalyte immunosensing are avantaje de debit mare, timp scurt, un consum redus i un
cost redus, acesta a fost foarte popular n ultimii ani. Bazat pe microcipuri [10-15], n combinaie cu dispozitive
automate de debit injecie ncrcare sistem cuplat (CCD), precum i caracterul de purttori de imobilizare, cum ar fi
strategia rezolvat cu temperatura [16], au fost construite mai multe sisteme multianalyte immunosensing.

De asemenea, este necesar, pentru a detecta mostre de abunden sczut, astfel nct n curs de dezvoltare CLIA
extrem de sensibile, a devenit o nou tendin. Abordarea principal a mbunti sensibilitatea analizei este de a
reduce zgomotul i de a spori semnalul. Pentru a reduce zgomotul, proteine mici sunt ntotdeauna folosite pentru a
bloca site-ul activ pe interfaa biosensing. Tehnici de amplificare a semnalului se concentreze pe construirea de
interfa funcionalizat i proiectarea de noi tag-uri de urme. Odat cu dezvoltarea rapid a nanotehnologiei,
nanomaterialelor, cum ar fi nanoparticule de Au
(AuNPs), nanotuburi de carbon, nanoparticule de SiO2, puncte cuantice (QDs) i structurile lor nanocompozite, au
fost utilizate pentru a construi biosenzori teste imunologice extrem de sensibile. Gama larga de aplicatii ale
nanoparticulelor in proteine de etichetare a atins avansarea progres [17,18]. Unele nanoparticule nu pot cataliza
numai direct chemiluminiscente (CL), reacii enzimatice ca mimeaz [19-22], dar, de asemenea, ncrca un numr
mare de enzime pentru a realiza amplificarea semnalului [23-29]. Nanotehnologie a fost utilizat pe scar larg n
CLIA pentru a accelera dezvoltarea rapid a CLIA.

Aceasta revizuire introduce teoria de baz a CL, rezum progresele recente ale CLIAs a cror analiz de timp,
productivitatea si sensibilitate au fost mbuntite n mod semnificativ, i prezint pe scurt perspectivele dezvoltrii
viitoare a CLIA.

2 imunotestare chemiluminescen

CLIA este o metod pentru determinarea concentraiei de probe n funcie de intensitatea luminiscena care emite
reacia chimic. CLIA combin sistemele CL i imunoreacie. Unii reactivi au fost folosite ca etichete CL, iar dup
introducerea substraturilor CL, sistemul produce chemiluminescen, astfel nct probele pot fi detectate cantitativ.
Cele mai populare substraturi CL sunt luminol, izoluminol i derivaii acestora, derivat acridiniu ester, peroxidaza i
fosfataza alcalin (ALP).
Folosind enzime pentru a eticheta proteine este nc mainstream n CLIA. Enzimele de etichetare cele mai frecvent
utilizate sunt peroxidaza din hrean (HRP) i ALP. Dezvoltarea de enzime i substraturi cu activitate mai mare, o mai
bun stabilitate i mai curba cinetic adecvat este hotspot n cercetarea CLIA.
Tehnologia de etichetare este una dintre tehnologiile-cheie n teste imunologice moderne. Noua tehnologie Eticheta
a fost aplicat imunotestare pe scar larg n monitorizarea mediului [30,31], diagnosticul clinic [32,33], sigurana
alimentar [34,35], analiza farmaceutic [36,37] i identificarea bacteriilor [38,39], care prezint perspective de
aplicare mari. Deoarece nanoparticulele au compatibilitate biologic favorabil i un efect de amplificare a
semnalului, nanotehnologie a fost utilizat pe scar larg n bio-etichetare, de exemplu, AuNPs poate fi utilizat pentru
a marca anticorpii, i de a spori CL sistemului cu luminol H2O2. QDs sunt nanoparticule din materiale
semiconductoare care pot accepta lumini excitat s produc fluorescen, care au o calitate mai stabil, o
reproductibilitate mai bun, activitate mai lung i un consum mai mic dect enzimele normale de etichetare ale
CLIA. Huang [40] utilizat CL ca donator de energie pentru a excita QDs, i a realizat transferul de energie CL
pentru detectarea sensibil.

CLIA are avantajele de sensibilitate ridicat a CL i specificitatea imunoreacie. Ea are o larg aplicare i o mare
perspectiv n diagnosticul clinic, sigurana alimentar i monitorizarea mediului [41-43].
3 Dezvoltarea recent a CLIA

3.1 imunotestare chimioluminiscen Rapid

imunotestare tradiional are nevoie, de obicei, de mai multe ore pentru a finaliza o rulare, care determin adsorbia
immunoreagents n canalul de detecie i cross-talk ntre analii. Ca urmare, timpul de incubare ndelungat limiteaz
debitul de detectare a probelor i valoarea de aplicare a CLIA. Pentru a evita aceste dezavantaje i s accelereze teste
imunologice, forele externe sunt folosite pentru a realiza o amestecare eficient i temperaturi mai mari de incubare
sunt folosite pentru a spori cinetica de reacie imunologic.
Metode cum ar fi electroosmoza [44], magnetice agitare, [45], fluxul electrocinetic [46] i efecte cu ultrasunete [47]
poate crete transportul de mas, astfel nct s se efectueze CLIA rapid. n 2007, Morozov i alii [48] a proiectat
un dispozitiv microfluidic unic, care ar putea electroforetic de captare a analiilor ncrcate pe o matrice de anticorp
de debit. Analiii colectate au fost apoi detectate cu perle magnetice. Suspensia de granule magnetice care se leag n
mod specific analiii curge prin celula in timp ce un magnet atras perlele la suprafa, provocnd diapozitivul pe
suprafaa matrice. Acest lucru test imunologic microfluidic zeptomolar electroforetic asistat cu detecie magnetic
perle ar putea fi terminat n 3 minute.

Abordrile conduse de forele externe au nevoie, n general, echipamente complexe sau speciale. Yang i colab [49]
flux injecie propus test imunologic chimioluminiscent (FICLIA) prin combinarea perle de rin carboxilici ca
suport de imobilizare i un micro-bule de proces test imunologic (Fig.1) accelerat. Aceast metod a fost simpl,
rapid i flexibil, i poate realiza ntregul test incluznd etapele de pre-incubare, de detectare i de regenerare n
decurs de 16 min.

Strategiile de amestecare pasive utilizeaz geometria canalului pentru a accelera amestecarea prin laminare sau
tehnica de rotaie, fr nici o for extern [50]. Atunci cnd fluidul se deplaseaz de-a lungul unei traiectorii curbe,
efectul centrifug produce fluxurile transversale, care mbuntite amestecarea.
Fig.1 Micro-bubble-accelerated immunoreaction for fast flow-injection immunoassay[49]

Liu et al [51] a dezvoltat o tridimensionale tuburi de sticl elicoidale pentru amestecarea rapid a immunoreagents
(Fig.2). o cinetic Immunoreation este un alt factor esenial pentru accelerarea teste imunologice, iar radiaiile
infraroii pot fi utilizate pentru nclzire rapid i de control al temperaturii [52,53]. Imunoreacie ar putea fi
finalizat n termen de 90 s din cauza acceleraiei duale de transport de mas mbuntit i cinetica de reacie
mbuntit.

3.2 detecie multiplexat de test imunologic cu chemiluminiscen

Sistemul immunosensing Multianalyte posed avantajele de debit mare, timp scurt, un consum mic i cost redus
[54], care este scopul de teste imunologice, i este, de asemenea, hotspot-ul de cercetri recente. detecie test
imunologic multipl are dou modele: detecie simultan i detecie secvenial. detecie simultan combin, de
obicei, strategie i CCD echipamente rezolvate zone pentru a detecta toate componentele ntr-un singur ciclu de
testare. detecie secvenial ofer o modalitate simpl de a detecta probe de unul cte unul ntr-o perioad. In ultimii
ani, odat cu dezvoltarea de staii de lucru pe mai multe canale electrochimice, senzor piezoelectric multiarray i
fotodiode paralele, electrochimice i tablouri de senzori optici au fost proiectate pe scar larg n detecia
multiplexate. de detectare a multiplexat a cunoscut o dezvoltare rapid, deoarece principalele probleme ale analizei
fluxului de injecie secvenial au fost rezolvate.

Ju et al [12] a propus un sistem de multianalyte immunosensing CL flow-through cu substrat rezolvat-o zon


tehnic, care ar putea detecta antigenul de carcinom 125 (CA 125) i CEA ntr-o singur curs. Anticorpii de captare
au fost imobilizate pe o membran aldehid activ UltraBind s acioneze ca un immunoreactor. Apoi amestecul de
CA 125, CEA, i marcatorii lor corespunztoare, marcat cu HRP anti-CA 125 i ALP marcat anti-CEA a fost
introdus pentru incubare on-line. Substraturile pentru HRP si ALP au fost livrate pentru a efectua substrat rezolvat-
o zon de imunotestare. Grupul de cercetare, de asemenea, a adus conceptul de abordare rezolvat-canal [13], i a
dezvoltat un CLIA autom multianalyte. Acest sistem a utilizat obturator optic mobil pentru a detecta semnalele de
trei canale de detecie paralele, care ar putea detecta trei markeri tumorali secvenial. Mai trziu, au strategii
integrate rezolvate zona de canal i substrat, i a propus rezoluia bi-dimensionale pentru CL multiplex imunoanaliz
[14]. Ei au proiectat dou canale pentru a detecta patru analii simultan (Fig.3). Pentru a atinge obiectivul de a
detecta mai muli analii n acelai timp, acest grup proiectat n continuare prelevarea probelor [55] i a strategiilor
de sprijin de rezoluie [56]. n strategia de prelevare a probelor de rezolutie, cercetatorii au imobilizat anticorpii de
captare de pe sferele paramagnetice (PMS), atunci ei dispended probele n patru vase de agitare care conin anticorpi
trasoare i captura corespunztoare
anticorpi. PMs imobilizat Dup vasele scufundate ntr-o baie de ap timp de incubare, amestecurile au fost
introduse n patru canale de separare pentru a efectua separarea on-line i splare. Dup introducerea substratului,
amestecul a fost livrat pentru a nregistra semnale CL. Strategia de susinere rezoluie utilizate tuburi de sticl i a
mesajelor private ca suporturi pentru anticorpii de imobilizare i n mod automat diferite separate analii de o splare
simpl i etapa de captare magnetic. Acest roman automatizat strategie de sprijin rezolutie si-flow prin CL sistem
multiplex test imunologic a indicat o practicabilitate promitoare n ecran rapid automat i diagnostic clinic.

Datorit zonelor lor de suprafa mari i o manevrare uoar sub form de suspensie i de captare de magnet [57-60],
particulele magnetice

Fig.2 Dually accelerated immunoreaction by infrared heating and passive mixing[51]

Fig.3 Channel and substrate zone two-dimensional resolution for multiplex immunoassay of tumor markers [14]

(MP) au fost utilizate pe scar larg pentru dezvoltarea metodelor de imunotestare uidic. Lin i colab [61] anticorpi
imobilizai pe mesajele private i tuburi acoperite, respectiv, pentru a detecta AFP, i a comparat meritele analitice.
Avantajele oferite de MP a devenit vizibil evidente. Mai mult dect att, folosind MP faze ca solide, aceast metod
a detectat 59 de probe umane i a obinut o bun corelaie cu rezultatele unui test imunologic kit
electrochemiluminescent comercial.
In ultimii ani, datorit dezvoltrii de poli-N-isopropylacrylamide (PNIP), PNIP sensibile termo pot fi separate atunci
cnd temperatura este mai sczut dect temperatura soluiei critic inferioar (LCST). Kang et al [16] a propus o
metod de CLIA bazat pe tehnologii i temperatur rezolvat-substrat pentru a detecta patru proteine (Fig.4). Ei au
folosit doi purttori diferii omogene, care sunt PNIP termo-sensibil i perle magnetice (MB), i dou substraturi
CL diferite pentru ALP i HRP. O pereche de anticorpi de captur a fost imobilizat pe PNIP i un altul a fost legat
la MB. Amestecul de ALP- i anticorpi marcai cu HRP a fost introdus pentru a forma patru imunocomplexe tip
sandwich, iar apoi au fost livrate substraturile iar semnalele CL au fost nregistrate secvenial. Cu toate acestea,
aceast metod implic manipularea complex, care aduce dificulti n funcionarea automat, i testul de detectare
are nevoie de timp ndelungat.

Liu et al [62] a dezvoltat un microplci CL immunoassy enzim (CLEIA) pentru detectarea stafilococice
enterotoxina B (SEB). Cu ajutorul unei roi de fiiere, viteza de analiz a fost rapid, plac de aproximativ 2 min pe
fiecare cu 96 de prob (1 s per eantion). Aceast detectare de mare tranziteaza este ideal pentru practica clinica.
Totui, aceast metod de detecie secvenial poate determina efectul de acumulare de timp, care este un interval
lung ntre detectarea primei probe i ultima.
Strategia de rezolvat-o zon este o metod de a imobiliza diferite immunoreagents pe diferite locuri ale
immunoreactor, astfel nct imunoreacie poate avea loc n diferite locuri, iar apoi cu ajutorul detectorului matrice,
detectarea multiplexate poate fi atins. Aplicarea CCD face CLIA mai convenabil, dar i accelereaz dezvoltarea
tehnicii de detectare imagistica CL. Integrarea senzorului de imagine CCD CLIA i poate satisface cerina de a
detecta simultan o cantitate mare de probe ntr-un timp scurt. Urbanowska i alii [63] au folosit o plac cu 96 de
godeuri ca faz solid pentru a imobiliza anticorpi i detectat ase proteine prin detecie imagistica CL. Magliulo i
alii [64] proiectat un nou polistiren cu 96 de godeuri format de plac de microtitrare, n care fiecare godeu principal
conine patru sub-puuri din partea de jos. Anticorpii de captare au fost imobilizate pe microtitrare i s-au adugat
probele i anticorpi marcai cu peroxidaz pentru a forma imunocomplexele tip sandwich. Dup introducerea
substratului CL, semnalul a fost nregistrat de un senzor de imagine CCD, i 96 x 4 din probele au fost detectate
simultan (Fig.5).

Fig.4 Homogeneous temperature- and substrate-resolved technologies for the CL detection of four proteins[16]
Fig.5 New 96 4 well microtiter plate for multiplexed chemiluminescent imaging immunoassay [64]

Aplicarea metodei lab-on-a-chip CLIA ajut la dezvoltarea unor sisteme multianalyte. Integrarea sistemului de cip i
CLIA mbuntete capacitatea de detecie, i realizeaz detecia multiplexate, care este disponibil pentru diagnostic
medical si screening-ul de droguri. Sun i colaboratorii [10] proiectat un cip tridimensional, care ar putea detecta 96
de probe printr-o camer CCD. Wolter et [11] Al a depit dezavantajele de detecie statice CCD, cum ar fi
consumul de timp i dificulti n automatizare, i a dezvoltat un nou sistem de microarray CL flow-through. Ei au
proiectat un microarray 6 x 7 imobilizai anticorpii de captare pe poli (etilen glicol) substraturi de sticl -modified.
Recunoaterea celulelor a fost realizat prin legarea anticorpilor biotinilai specifice speciilor. detecie CL a fost
realizat printr-o streptavidin-HRP reacia catalizat de luminol i H2O2. Prelevarea de probe, splare i procesul
de separare prin toate tehnica low prin cu ajutorul unei supape de distribuie acionat manual i o celul de curgere
schimbtoare. Semnalul CL a fost nregistrat de o camer CCD. ntregul test a fost terminat n 13 min (Fig.6)

Fig.6 A flow-through chemiluminescence microarray readout system for the detection of three bacteria [11]

3.3 test imunologic cu chemiluminiscen deosebit de sensibil

Pentru detecia practic, sensibilitatea i specificitatea metodelor de detectare existente nu sunt foarte satisfctoare,
deci extrem de sensibil si selectiv metode de detectare s-au artat importana lor. Dezvoltarea nanotehnologiei a
oferit o mare oportunitate pentru mbuntirea CLIA extrem de sensibile. Nanoparticulele au fost aplicate pe scar
larg n bio-etichetarea pentru a dezvolta mai multe metode de amplificare a semnalului de analiz extrem de
sensibile.

Zhang i colab [21] a constatat c coloizilor de aur cu nanoparticule de dimensiuni diferite pot spori CL sistemului
de luminol H2O2, iar semnalele cele mai intense CL au fost obinute cu AuNPs 38 nm diametru. Wang et al [22]
sintetizate cu form special, nanoparticule de aur neregulate (IGNPs) i a constatat eficiena catalitic pe luminolul
CL s fie de 100 de ori mai mare dect cea a AuNPs sferice. Ei au stabilit metoda analitic de tip sandwich
imunoanaliz rapid, simpl, selectiv i sensibil folosind IGNPs-modificat anti-IgG ca sonde.

Ambrosi i colaboratorii [65] au raportat un roman dublu codificat nanolabel (DC-AuNPs) pe baza AuNPs
modificate cu anticorpul conjugat cu HRP anti-uman IgG. Eticheta DC-AuNPs a demonstrat o specificitate
excelent i au oferit performane mbuntite. Yang et al [24] a introdus aceast DC-AuNPs n CLIA, i, de
asemenea, a adugat 4- (4'-iod) fenilfenolul (IPP), ca un nou potenator de semnal (Fig.7). Combinaia dintre
sensibilitatea remarcabil a metodei CL mbuntit i utilizarea AuNPs ca purttor de anti-AFP-HRP pentru
amplificarea semnalului enzimatic furnizat o serie de rspuns liniar de AFP de la 0,08 g L-1 pentru 0,3 g L-1 cu un
limita de detecie extrem de redus de 5 ng L-1.

Pentru c AuNPs au dimensiuni mici, ele nu pot transporta un numr mare de enzime. Ca urmare, oamenii de tiin
au nceput s ncerce multe alte nanomateriale pentru a ncrca mai multe enzime. Bi i colab. [27] mai multe
straturi de enzime folosite, asamblate nanotuburi de carbon multiwall (MWCNTs) ca etichete de amplificare a
semnalului pentru a dezvolta o metoda CLIA ultrasensibil. In acest studiu, HRP a fost asamblat pe MWCNTs
abloane strat-cu-strat prin interaciuni electrostatice cu poli (clorur de dimethyldially-lammonium) (PDDA) i
conjugat n continuare cu anticorpi secundari AFP ca eticheta enzimei. Sub
condiii optime, un domeniu liniar de la 0,02 g L-1 pentru 2,0 g L-1 a fost obinut cu o limit de detecie de 8,0 ng
L-1, care a fost de dou ordine de mrime mai mici dect cele ale metoda standard de testare de imunosorbie legat
de enzim.

Ca anticorpi marcai cu enzime posed mai mare obstacol steric, oamenii au nceput s lege enzime i anticorpi n
anumite proporii cu suprafaa nanomaterialelor direct, care a asigurat c un numr mare de enzime pot fi modificate
pentru fiecare nanomaterial, astfel nct oamenii au nceput s lege enzime pentru suprafaa nanomaterialelor n mod
direct, i imobiliza anticorpi ca proporie, care a asigurat c nanomaterialele pot conecta un numr mare de enzime
i, de asemenea, s scad blocada stereospecific. Wu et al [28] coimmobilized HRP i AFP pe suprafaa
nanoparticulelor de SiO2 cu ajutorul -glicidoxi-propiltrimetoxisilan (GPTMS) ca linker-ul. Sinteza particulelor
mbuntit folosind o "cretere de semine de particule" particule de trecere a dat distribuie a dimensiunilor
nguste, ceea ce a permis de ncrcare consecvent a HRP i anti-AFP pe fiecare microsfer i a asigurat
immunosensing ulterioare poseda o sensibilitate ridicat i reproductibilitate. Utilizarea nanoparticule de siliciu mari
ca o etichet poate reduce adsorbia fizic i ncrcai o cantitate mare de HRP, care a sporit sensibilitatea. Aceast
strategie a oferit o metod simpl, rentabil, specific i puternic pentru detectarea AFP n probele practice. Yang i
colab [66] a propus un roman CL dispozitiv de analiz care utilizeaz capacitatea de ncrcare mare a tri-
dimensional de film nanoporos SiO2 comandat. Filmul a fost preparat nanoporos SiO2 cu auto-asamblarea sfere de
polistiren ca matri i 5-nm nanoparticule de SiO2 pe o lamel de sticl, urmat de un proces de calcinare.
funcionalizarea cu streptavidin a fost realizat prin utilizarea GPTMS ca un element de legtur, iar apoi
recunoscut cu anticorpul marcat cu biotin pentru a construi n continuare CLIA extrem de eficiente (Fig.8).
condiii optime, un domeniu liniar de la 0,02 g L-1 pentru 2,0 g L-1 a fost obinut cu o limit de
detecie de 8,0 ng L-1, care a fost de dou ordine de mrime mai mici dect cele ale metoda standard de
testare de imunosorbie legat de enzim.

Ca anticorpi marcai cu enzime posed mai mare obstacol steric, oamenii au nceput s lege enzime i
anticorpi n anumite proporii cu suprafaa nanomaterialelor direct, care a asigurat c un numr mare de
enzime pot fi modificate pentru fiecare nanomaterial, astfel nct oamenii au nceput s lege enzime
pentru suprafaa nanomaterialelor n mod direct, i imobiliza anticorpi ca proporie, care a asigurat c
nanomaterialele pot conecta un numr mare de enzime i, de asemenea, s scad blocada
stereospecific. Wu et al [28] coimmobilized HRP i AFP pe suprafaa nanoparticulelor de SiO2 cu
ajutorul -glicidoxi-propiltrimetoxisilan (GPTMS) ca linker-ul. Sinteza particulelor mbuntit folosind o
"cretere de semine de particule" particule de trecere a dat distribuie a dimensiunilor nguste, ceea ce
a permis de ncrcare consecvent a HRP i anti-AFP pe fiecare microsfer i a asigurat immunosensing
ulterioare poseda o sensibilitate ridicat i reproductibilitate. Utilizarea nanoparticule de siliciu mari ca o
etichet poate reduce adsorbia fizic i ncrcai o cantitate mare de HRP, care a sporit sensibilitatea.
Aceast strategie a oferit o metod simpl, rentabil, specific i puternic pentru detectarea AFP n
probele practice. Yang i colab [66] a propus un roman CL dispozitiv de analiz care utilizeaz
capacitatea de ncrcare mare a tri-dimensional de film nanoporos SiO2 comandat. Filmul a fost
preparat nanoporos SiO2 cu auto-asamblarea sfere de polistiren ca matri i 5-nm nanoparticule de
SiO2 pe o lamel de sticl, urmat de un proces de calcinare. funcionalizarea cu streptavidin a fost
realizat prin utilizarea GPTMS ca un element de legtur, iar apoi recunoscut cu anticorpul marcat cu
biotin pentru a construi n continuare CLIA extrem de eficiente (Fig.8).

Fig.7 Ultrasensitive enhanced chemiluminescence enzyme immunoassay amplified by double-codified gold nanoparticles
labels[24]

Fig.8 Three-dimensional ordered nanoporous silica film for highly efficient chemiluminescent immunosensing [66]

Utilizarea CA 125 ca model, este extrem de eficiente CLIA au prezentat o serie liniar de trei ordine de mrime, 0.5-
400 U ml-1. Aceast lucrare a oferit un nanostructuri poros biofunctionalized pentru promitatoare aplicatii
biosensing.

enzime naturale i pierd de obicei activitatea catalitic din cauza modificri minore n conformaia lor n timpul
depozitrii. In plus, activitatea catalitic a unor enzime naturale este adesea limitat datorit ncastrarea centrului
activitii n peptide macromoleculare. Astfel, un mare efort a fost pus n dezvoltarea imita de enzime artificiale,
realiznd cataliz cu stabilitate operaional ridicat i reutilizabil. metode noi, cum ar fi amplificarea DNAzyme
[67], amplificare de rulare cerc [68] i metode de hibridizare in situ [69] ofer noi oportuniti pentru CLIA pentru a
realiza amplificarea semnalului.

4 Outlook

CLIA a fost aplicat pe scar larg n domenii diferite, inclusiv monitorizarea mediului, diagnosticul clinic, sigurana
alimentar i analiza farmaceutic datorit specificitii sale bune, sensibilitate ridicat, vitez i echipament simplu.
n analiza practic, este necesar s se detecteze eantioane complexe, cu cantiti mari i abunden sczut, astfel
nct cercettorii au urmat tendina de a se dezvolta rapid, de mare tranziteaza si CLIA sensibil. Aceast opinie a
rezumat progresul aplicrii CLIA n ultimii cinci ani, care implic detectarea rapid, analiz multipl i amplificare a
semnalului. Toate aceste exemple s-au dovedit c CLIA are perspective mari de aplicare i operabilitatea.

n plus, combinaia de imagistic, CLIA i separare tehnologia CL poate spori n mare msur de selectivitate,
sensibilitatea, viteza i debitul de CLIA. Este necesar s se dezvolte n miniatur, integratoare i instrumente de
CLIA auto pentru aplicarea mai bun n clinic, de mediu, produse alimentare i de analiz farmaceutic. Odat cu
progresul biologiei moleculare, nanotehnologie i biosenzori, noi CLIA
teorii i metode au fost dezvoltate rapid. Exploatarea enzimelor i substraturi cu activitate catalitic mai mare, o mai
bun stabilitate i mai mult o cinetic corespunztoare, dezvoltarea de noi competene de etichetare i construirea de
noi metode CLIA fac obiectul ateniei pentru cercetare viitoare.