Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Secu
CELULA PROCARIOT
1. Noiuni generale
2. Organizarea general a celulei procariote
2.1 Particularitile peretelui celular:
2.1.1 Bacteriile Gram+
2.1.2 Bacteriile Gram-
2.2 Flagelii i pilii:
3. Genomul bacterian:
3.1 Funciile materialului nuclear :
4. Noiuni despre expresia genetic la procariote:
5. Elemente mobile la procariote:
6. Plasmidele:
7. Reproducerea bacteriilor
8. Mutaiile. Recombinarea bacterian.
9. Antibioticele
9.1 Mecanisme generale de aciune a antibioticelor:
9.2 Mecanisme generale de rezisten a bacteriilor la antibiotic:
1
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
CELULA PROCARIOT
1. Noiuni generale
Procariot ( pina i nucleu): organism primitive (bacterii,unele alge) cu structura
celular simpla la care nucleul nu este delimitat .
Plasmid: Elemente genetice (molecule circulare de ADN) extracromosomiale, capabile de
replicare autonom. Confer bacteriei caractere suplimentare.
Nucleoid: Echivalentul nucleului la procariote.
Protoplasma: Citoplasma i nucleul celulei.
Mureina (peptidoglacan): Structur particular rigid a peretelui celular bacterian.
Spatiul periplasmic: este considerat un compartiment pericelular adaptativ, in care are loc
degradarea enzimatica a nutrientilor (eficien mai mare a procesului de nutriie).
Genofor: cromosomul bacterian.
Transcripie: Process de sintez ARN, folosind ca matrice, ADN.
Translaie: Proces de sintez a unui peptid n ribozom, utiliznd ca matrice ARNm, iar ca
material de construcie aminoacizi.
Transpozon: Secven de ADN ce poate migra n genom.
Celulele procariote, dei au o organizare relativ mai simpl, posed toate nsuirile
organismelor vii i se supun postulatelor celulare. O deosebire esenial a procariotelor este
faptul c nu posed membrane celulare interne, ci doar extern ce le delimiteaz de mediul
nconjurtor, ca consecin n structura acestor celule nu se intlnesc organite ca: mitocondrii,
aparat Golgi etc., tot de aici reiese i faptul ca nucleul nu este bine conturat (lipsa membranei).
Materialul genetic este reprezentat de o molecul inelar de ADN numit nucleoid. Procariotele
sunt organisme foarte mici, iar reprezentani ai acestora sun bacteriile i algele cianofite.
2
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
3
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
Figura 3.
4
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
5
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
Pilii: sunt nite excrescene subiri situate la suprafaa bacteriilor Gram-, fiin formi
dintr-un grup de proteine umite, piline. Acetia sunt de 2 tipuri: 1)Particip la adeziunea celular.
2) Particip la conjugare
Flagelii: excrescene filiforme, mai des prezente pe suprafaa bacililor, reprezentnd nite
tubuli cu grosimea de 10-60nm formi din 3-11 filamente asamblate din proteina globular
flagelina, la procariote flagelii nu sunt acoperii cu membran plasmatic. Flagelina neavnd
activitate ATP-azic, flagelii nu sunt capabili de a efectua micri ondulatorii, doar rotiri n jurul
axului, datorate gradientului de pH. De menionat c flagelii posed proprieti antigenice.
n dependen de numrul de flageli deosebim urmtoarele tipuri de bacterii:
monotrihi cu un singur flagel (Vibrio ohoterae);
lofotrihi cu un mnunchi unipolar (situat la un singur capt) de flageli (Bartonella
bacilliformis);
amfitrihi cu mnunchiuri bipolare (la dou capete) de flageli (Spririllum serpens);
peritrihi cu flageli n jur (Escherichia coli).
Figura 5
6
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
3. Genomul bacterian:
Figura 6
Nucleoidul (analogul nucleului eucariot) dup cum s-a menionat este compus dintr-o
molecul circular de ADN. De specificat terbuie faptul c:
o ADN este asociat cu proteine; dar mecanismul de condensare a ADN-ului difer de modelul
eucariotic (nu se cunoate mecanismul exact, ns se presupune implicarea moleculelor de
ARN specific). Una din ipoteze despre compactizarea acestuia ar fi modelul de mpachetare
propus de Stonington i Pettijohn, 1971 ce demonstreaz c prin nchiderea moleculei,
aceasta i reduce diametrul la 350 m, apoi sub aciunea topoizomerazelor molecula sufer o
pliere (engl. folding) n ~ 50 domenii sau bucle, diametrul reducndu-se la 30-35m, prin
suprarsucirea (supercoiling) domeniilor diametrul se reduce la 3 m, iar prin suprapunerea
acestora la 1m. Spiralizarea moleculei se realizeaza cu ajutorul topoizomerazelor.
Figura 7
o Celula bacterian nu posed microtubuli, ceea ce face imposibil diviziunea de tip mitoz, iar
rolul de segregator al materialului genetic n timpul diviziunii celulare -i revine membranei
plasmatice.
o Segvene repetitive sunt foarte puine sau nu sunt deloc, majoritatea segvenelor fiind
codante, unice.
o Dimensiunile difer de la un procariot la altul.
Spre exemplu genomul E. Coli const din 4,6 Mb pe cnd genomul unei celule umane conine
3200Mb.
n general genomul procariot conine 139 Kb-13,000 Kb.
7
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
Conform unor studii, genomul bacterian are un nivel foarte mare de organizare, contrar ideei
nalt acceptat c acesta ar avea o organizare aleatorie.
8
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
Astfel pentru procariote, specific este operonul, acesta reprezentnd un lan de gene ce nu au
spaii ntre ele sau acestea sunt foarte mici i care de regula codifica pentru un lan metabolic, ca
exemplu poate fi adus operonul lactozei la E. Coli
Transcripia i Translaia la procariote este cuplat, adic aceste procese pot avea loc
simultan, ceea ce este imposibil n celula eucariot (datorit membranei nucleare).
Figura 10
9
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
Figura 11
Translaia la procariote nu difereniaz mult de cea ntlnit la eucariote, nsa sunt cteva
particulariti: ribozomul la procariote 70) este compus din 2 subuniti, cea mare, 50S, compus
din ARNr 23S, ARNr 5S i 31 proteine, iar subunitatea mic, 30S, conine ARNr 16S i 21
proteine.
Viteza de translaie este de 12-17 aminoacizi pe secund.
10
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
Transpozonii: sunt elemente mai complicate, care au la capete IS-elemente i pot fi de 2 tipuri:
composite i noncomposite, adic compui i simpli. De obicei acetia duc gene sensibile la
antibiotice sau ali factori contra crora se necesit rezisten.
11
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
6. Plasmidele:
12
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
7. Reproducerea bacteriilor
Complexul primozom:
Complexul primozom este format dintr-o serie de proteine ce determin iniierea
replicrii ADN. Cele mai importante proteine sunt:
Primaza: la bacterii este denumit DnaG i este codificat de gena dnaG; aceast enzim
sintetizeaz scurte fragmente de ARN ce au funcie de primeri, adic ofer capul 3-OH liber
pentru polimerizare.
Proteinele de iniiere: n, n, n, DnaA, DnaB, DnaC i DnaT Iniierea replicrii
presupune detaarea secvenei oriC de membrana plasmatic, dup ce, n prealabil, a fost atins o
anumit mas celular (denumit mas de iniiere) i n urma acumulrii unei cantiti
substaniale de fosfolipide acide pe faa intern a membranei plasmatice.
Secvena oriC din nucleoidul de E.coli are 245 bp i prezint 2 regiuni importante:
- o regiune cu 4 cutii dnaA (sunt formate din cte 9 bp) la care se va ataa proteina
DnaA
- o regiune cu 3 cutii, bogate n adenin-timin, la care se vor ataa complexe proteice
DnaB-DnaC Zece pn la 12 molecule de DnaA se leag la cutiile dnaA, determinnd
buclarea moleculei de ADN i, ca atare, desfacerea dublului helix n cutiile dnaB.
13
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
Replicarea plasmidelor:
Indiferent dac confer bacteriei gazd caractere eseniale sau neeseniale, toate
plasmidele au n structura lor o regiune foarte important pentru replicarea i meninerea stabil
a plasmidului respectiv n populaia bacterian. n prezent se consider c aceast regiune
esenial ar conine secvene de origine a replicrii plasmidiale, denumite convenional oriV (fata
de oriC (originea replicrii nucleoidului bacterian). O secven oriV trebuie s indeplineasca
urmatoarele conditii:
regiunea ADN minimal, cu activitate n cis, ce poate susine replicarea
plasmidial
regiunea ADN n care cele 2 catene se despart pentru a iniia procesul de
replicare
nucleotidul/nucleotidele la care incepe sinteza catenei lider
gene implicate n controlul replicrii plasmidiale (multe plasmide codific
o protein implicat n iniierea replicrii plasmidiale, denumita proteina
de tip Rep).
14
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
Transferul i recombinarea genetic este cea de a doua cale de a obine mutani, prin
care, o celula donoare face transfer de material genetic la o celul receptoare, prin transmiterea
unor fragmnte de ADN sau al ntregului genom al celulei donoare la celula receptoare.
Transferul i recombinarea genetic pot fi realizate prin trei modaliti: transformare, transducie
i conjugare, pe care le vom descrie n continuare.
n cazul transformrii, mutantul preia ADN-ul din cromozomul donorului, n starea fiziologic
numit starea de competen, n care ADN-ul transformat strbate peretele i membrana
plasmatic. Este un mecanism genetic care determina, de exemplu, rezistena la antibiotice.
Figura 18.
15
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
Figura 19.
n fine, cea de-a treia metod de transfer i recombinare genetic o constituie conjugarea, care
reprezint un proces ce determin unirea (sinapsa) unor cromozomi n meioza de la materialul
donor la acceptor prin episomi F+ si F(plasmide autonome libere n citoplasm cu funcii
sexuale). Celula donoare
posed factorul F+ pe care l
trece n celula receptoare care
conine factorul F-, prin pilii
sexuali. Spre deosebire de
celulele fiinelor superioare, la
care zigotul se formeaz din
genoamele integrale ale celor
doi parteneri, la bacterii,
donorul las, de obicei, numai o
parte din genomul sau
acceptorului. n acest caz,
fenomenul de transfer parial
genetic se numete meromixis,
iar zigotul parial merozigot.
Figura 20
16
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
9. Antibioticele
Antibiotic: substan organic solubil, produs de unele microorganisme animale i
vegetale, care are capacitatea de a distruge anumii microbi sau de a le opri dezvoltarea, fapt
pentru care se utilizeaz n tratamentul bolilor infecioase.
Antibioticele au fost clasate i in funcie de modul lor de aciune distingem patru categorii de
molecule:
antibiotice care inhib sinteza peretelui bacterian;
antibiotice care inhib sinteza proteinelor;
antibiotice care inhib functionarea acidului dezoxiribonucleic (ADN);
antibiotice care antreneaz distrugerea membranei citoplasmice.
Exist mai multe mecanisme prin care acest fenomen se poate manifesta:
Inactivarea sau distrugerea antibioticului - de exemplu inactivarea Penicilinei prin producerea
unor enzime (beta-lactamaze) care rup o legtur beta-lactamic din molecula acesteia;
Modificarea intei (locului de legare a antibioticului) asftel nct molecula antibioticului s nu
mai poat reaciona cu componentele celulare - de exemplu ribozomi sau enzime implicate n
sinteza peretelui bacterian;
Modificarea cilor metabolice la nivelul crora acioneaz antibioticele - cazul unor bacterii
rezistente la sulfamide, care n loc s sintetizeze acidul folic pornind de la acid para-
aminobenzoic, folosesc acid folic preformat, ca celulele mamiferelor;
Inhibarea ptruderii antibioticului n celul prin modificarea membranei externe (deficit de
expresie a porinelor)- de exemplu mecanismul de rezisten a E. coli la macrolide;
Eliminarea antibioticului (efluxul activ, gena norA codifica o pompa de eflux, iar expresia
acesteia se intensific) - observat la unele specii de E. coli i S. aureus;
Operonul MAR (Multirezistenta la antibiotice).
Aceste mecanisme sunt nlesnite de specifice de recombinare genetic a bacteriilor, dar i de
necesitatea sporit de a supraveui a acestora n urma utilizrii foarte intense a antibioticelor n
scopuri curative, iar rezultatul este c la momentul actul un numr foarte mari de bacterii posed
rezisten la un spectru foarte larg de antibiotice.
Bibliografie/Webografie:
1. Galechi P., Buiuc D., Plugaru .. Ghid practic de microbiologie medical. Chiinu, Bucureti,
1997.
2. Universitatea din Bucureti, Facultatea de biologie, Curs: Microbiologie general, 2014
18
Biologie Molecular Celula Procariot S.Capcelea Gh.Secu
19