Univeristatea Politehnica din Bucuresti

Facultatea de Chimie Aplicata si Stiinta Materialelor

Aplicatii ale Chimiei in Expertize Juridice

Cromatografia de lichide de inalta performanta,

utilizarea deviatiei standard relative

Ana Maria Dumitrescu

Cosmin Burlacu
Cromatografia de lichide
Termenul de cromatografie de lichide este utilizat pentru a denumi o gama extinsa de
sisteme cromatografice care au în comun faptul ca utilizeaza o faza mobila lichida.

 HPLC – metoda analitica utilizata in scopul separarii, identificarii si dozarii

substantelor organice si anorganice aflate in solutie

ANALIZE:

• farmaceutice
• clinice
• toxicologice
• de mediu
• industriale
• Alimentare

Comparativ cu cromatografia de gaze, cea de lichide are avantajul ca permite si

analizarea probelor greu volatile sau instabile termic, iar faptul ca si faza mobila
participa la separare ofera posibilitati suplimentare pentru realizarea unor separari
eficiente.

Cromatografia de lichide clasica a fost caracterizata de utilizarea unor coloane

cu diametre mari, umplute cu particule de faza stationara de o granulatie fina si prin
care faza mobila trecea sub influenta fortei gravitationale. Aceste sisteme, care se mai
folosesc azi în separarile cromatografice lichid-solid, au permis realizarea separarii unor
amestecuri complexe de substante în conditii foarte bune, însa viteza de separare este
mica iar analiza suplimentara a compusilor separati prin metode spectroscopice este
mai dificila. Aparitia cromatografiei de lichide de înalta performanta (HPLC) a permis
eliminarea acestor deficiente si chiar impunerea cromatografiei de lichide ca o metoda
mai performanta de analiza decât cromatografia de gaze.

2
 Principalele avantaje ale cromatografiei de lichide de înalta performanta sunt:

 Capacitate de separare ridicata

 Viteza ridicata a separarii
 Posibilitatea monitorizarii continue a efluentului coloanei
 Realizarea unor analize repetate si reproductibile utilizând aceeasi coloana
 Automatizarea procedurii analitice si a prelucrarii datelor.

Factorii care influenteaza separarea cromatografica

 Coloana: dimensiuni (L,d), T
 Faza stationara: natura, diametrul particulelor
 Faza mobila: tipul de elutie, debitul, solventii
 Analitul: polaritate, masa moleculara, concentratie

Deviatia standard
Definitie - Deviatia standard (S) a unui set de date ( D), ce contine N inregistrari si
avand valoarea medie MD, se calculeaza cu urmatoarea formula:

Formula pentru deviatia standard unde :

n ={1…N-1, N }.
MD – valoarea medie a setului de date D.
S2 = valoarea varianţei

Ţinând cont de definiţia varianţei unui set de date D, rezultă că, deviaţia
standard este rădăcină pătrată din valoarea varianţei.
Deviatia standard a unui set de date permite estimarea uniformităţii valorilor
acestuia, mai precis, cu cât valoarea acesteia este mai mică cu atât valorile setului sunt

3
grupate în jurul valorii medii. Invers, cu cât deviatia standard este mai mare, cu atât
valorile setului sunt mai depărtate faţă de valoarea medie.

Deviatia standard in Excel

Deviatia standard in Excel se calculează foarte simplu utilizând funcţia
statistică STDEV pentru un set de valori date.

Astfel, pe o coloană dintr-o foaie Excel se introduc valorile pentru care se doreşte a se
calcula deviaţia standard. Se dă click pe prima celulă goală de sub şirul de valori. Din
meniul Insert se selectează opţiunea Function – fig. 1

Deviatia standard Excel – fig.1

4
Din fereastra apărută se selectează categoria funcţiei, respectiv Statistical, din funcţiile
afişate se selectează STDEV – fig.2.

fig.2

Un dublu click pe STDEV şi sunt selectate automat celulele pentru care trebuie
calculată deviaţia standard. – fig. 3.

fig.3

5
 Fig. 4- Rezultat RSD

Exemple de utilizare ale deviatiei standard

Un exemplu practic al utilizării deviatiei standard, este acela al controlului calităţii.

În exemplul 1, valorile setului D1 reprezintă rezultatele parametrului de dozare al

unor probe. Rezultatele obtinute au fost realizate cu ajutorul unui cromatograf de lichide
de inalta performanta la diferite intervale de timp. Pentru ca probele să corespundă
calitativ, abaterea maxima impusa de Farmacopeea Europeana este de maxim 2%.

Exemplul 1

6
În exemplul 2, setul D2 nu mai respectă o deviaţie standard mai mică de 2%, deci
rezultatul RSD-ului este in afara parametrilor Farmacopeei Europene, ceea e inseamna
ca studiul nu indeplineste conditiile admise si probele nu sunt corespunzatoare .
Valoarea acesteia este de 2.779248819 %, mult mai mare decât valoarea impusă
de 2%. Acest lucru va impune oprirea automată a benzii de producţie pentru
recalibrarea aparatelor de dozare.

Exemplul 2

Calculul deviatiei standard relative – OCTAVE

7
 Concluzii

In domeniul Farmaceutic, RSD-ul este un indicator al

preciziei rezultatelor incercarilor obtinute in conditii de
repetabilitate.

• Ce face un rezultat să fie destul de fiabil încât să fie luat ca

sigur?

• Răspunsul este legat atât de importanţa statistică, cât şi de

standardele care ar avea sens în situaţia dată. Unitatea de
măsură folosită cel mai frecvent în discuţiile despre
importanţa statistică este deviaţia standard.