H-1047 Budapest, Attila u. 126.

BILIRUBINA TOTALĂ
+36-1-369-0739, +36-1-380-4500
Reactiv lichid stabil
+36-1-369-4383 Nr.cat: 74274T
Prezentare: 2x150 ml
business@diagnosticum.hu
(2x125 ml + 1x50 ml)

Set de reactivi pentru determinarea cantitativă a bilirubinei totale din ser, prin DCon-N) şi DunaCont P (nr. catalog DCon-P) de la Diagnosticum.
metoda Diazo - Acid sulfanilic.
PERFORMANŢELE METODEI
Principiu
Acidul sulfanilic reacţionează cu nitritul de sodiu pentru a forma acid sulfanilic diazotat. În Următoarele date au fost obţinute pe un analizor Olympus 600. Factor de conversie:
prezenţa dimetilsulfoxidului, bilirubina totală reacţionează cu acidul sulfanilic diazotat, [μmol/l]=17,1×[mg/dl]
pentru a forma azobilirubină. În absenţa dimetilsulfoxidului, numai bilirubina directă
reacţionează pentru a forma azobilirubină. Absorbanţa măsurată la 555 nm este Linearitate
proporţională cu concentraţia bilirubinei. Testul este linear in intervalul de 3,5 – 340 µmol/l (0,2 -20,0 mg/dl).
Valori biologice de referinţă
Adulți 3-17 µmol/l (0,17-1,0 mg/dl) Limita de detecție este de 0,31 µmol/l (0,18 mg/dl)
Nou născuți, 24h <150 μmol/l (<8,8 mg/dl)
ziua a 2-a 22-193 μmol/l (1,3-11,3 mg/dl) Sensibilitate
ziua a 3-a 12-217 μmol/l (0,7-12,7 mg/dl) Este recomandat ca fiecare laborator să-şi stabilească propriile valori de sensibilitate,
zilele 4-6 1,7-216 μmol/l (0,1-12,6 mg/dl) deoarece acestea sunt limitate de sensibilitatea spectrofotometrului folosit. În condiţii de
Copii, >1 lună 3,4-17 μmol/l (0,2-1,0 mg/dl lucru manual, o schimbare de 0,001 a absorbanţei este echivalentă cu 1,42 µmol/l (0,08
Este recomandat ca fiecare laborator să-şi determine propriile intervale de referinţă. mg/dl) concentraţie de bilirubină la 540 nm.

Reactivi Precizie
1. Reactiv (RT1)
Acid sulfanilic 3,2 mmol/l Reproductibilitate
Acid clorhidric 165 mmol/l n = 20 concentraţie medie (µmol/l) SD CV%
Dimetilsulfoxid 7 mol/l proba 1 18,9 0,756 4,00
2. Reactiv (R2)
Nitrit de sodiu 8,6 mmol/l proba 2 82,3 2,902 3,53

Probă
Ser nehemolizat. Repetabilitate
Bilirubina din ser este sensibilă la lumină, de aceea se recomandă ca probele să fie păstrate n = 20 concentraţie medie (µmol/l) SD CV%
la întuneric. Bilirubina din ser și controale se descompune repede. Stabilitate: 7 zile la 2- proba 1 14,02 0,14 0,99
8°C proba 2 91,9 0,80 0,88
Reactivul nu este potrivit pentru determinarea bilirubinei la nou-născuţi.
Corelaţie
Stabilitatea reactivilor S-au efectuat studii de comparare pentru a compara reactivul nostru cu un alt rectiv
nedeschişi: până la data inscripţionată pe eticheta produsului comercial pentru bilirubina totală.
după deschidere: 10 zile Rezultatele sunt detaliate mai jos.
frecvenţă de calibrare: 3 zile Coeficient de corelatie: r = 0,9998
stabilitate la bord: 3-10 zile
Regresie liniară: y(µmol/l) = 0,988x - 0,979
Stabilităţile de mai sus sunt valabile doar în cazul când se utilizează flacoane noi.
(x = alt reactiv comercial, y = reactiv propriu)
PROCEDURA
Specificitate
Reactivii sunt gata de utilizare. Evitați expunerea directa la lumină! Lipide 400 mg/dl, glucoză 55,5 mmol/l (1000 mg/dl) şi acidul ascorbic 2,84 mmol/l (50
Prepararea reactivului de lucru mg/dl) nu interferă cu determinarea până la concentraţiile menţionate.
Raport de amestecare a RT1 cu R2: 125 ml / 25 ml
Reactivii se folosesc numai în forma amestecată! Observaţii
Nu folosiţi reactivii după data expirării înscrisă pe fiecare recipient.
Stabilitatea reactivului de lucru Nu folosiţi produsele, soluţiile test şi reactivii menţionaţi în alt scop decât cel descris aici.
Dacă absorbanţa reactivului de lucru depăşeşte 0,02 la 546 nm, acesta nu mai poate fi
folosit A se utiliza numai în scop de diagnostic in vitro!

Condiţii de lucru Pe etichete puteți găsii următoarele simboluri

Lungime de undă: 555 nm (540-560 nm)
Lungime de undă secundară: 600 nm Aparat technico-medical pt.
Temperatură: 37°C Codul lotului
diagnostic in vitro
Calea optică: 1 cm
Mod de măsurare: punct final Producător Număr de catalog

Pipetare Direcţie de
Marcaj CE
păstrare/depozitare
Probă Calibrator
Reactiv de lucru 1,0 ml 1,0 ml Limite de temperatură pentru
Risc biologic
păstrare
Probă 75 µl -
Calibrator - 75 µl Termen de utilizare (an/luna)
Se amestecă şi se citeşte absorbanţa (A) după exact 3 minute de incubare.

Calibrare: (37°C, Diazo cu acid sulfanilic) Bibliografie

S1: Apă distilată Hijmans Van den Bergh A. A., Muller P.: Biochem, 77; 90, (1916).
S2: Calibrator DunaCal de la Diagnosticum cu nr. catalog Dcal sau Walters M. I., Gerarde R. W.: Microchem., 15; 231 (1970).
Randox Calibration Serum Level I sau Level II sau Szabó A.: Klinikai laboratóriumi vizsgálatok és paraméterek (2010) (ISBN 978-963-9879-
Roche C.F.A.S. (Calibrator pentru sisteme automate) 75-1)

Freecvența calibrării
Se recomandă calibrarea în două puncte:
- la schimbarea lotului de reactiv
- atunci când procedura de control al calităţii o cere
Calcule folosind calibratorul

APr obă
xCCalibrator  CPr obă
ACalibrator
A = absorbanţa, C = concentraţia

Controlul calităţii
Un program de control al calităţii este recomandat pentru toate laboratoarele clinice. Se
recomanda analiza unor materiale de control atât în intervalul normal cât şi în cel patologic,
pentru toate metodele de determinare, pentru monitorizarea performaţei procedurii.
Fiecare laborator trebuie să stabilească măsuri corective pentru situaţiile în care valorile de
control cad în afara limitelor acceptabile. Controale recomandate: DunaCont N (nr. catalog

Bilirubină totală reactiv lichid stabil Data reviziei: 2018-09 37-DL-EN-2016-12 Trad RO 2015-10 p.1/1
 BILIRUBIN TOTAL
STABLE LIQUID REAGENT
Cat. No.: 4274T, 74274T
Size: 2x150 ml
(2x125 ml + 1x50 ml)

Reagent kit for the quantitative determination of total bilirubin in serum. Diazo- A quality control program is recommended for all clinical laboratories. The analysis of
sulfanilic acid method. control material in both the normal and abnormal ranges with each assay is recommended
for monitoring the performance of the procedure. Each laboratory should establish
Principle corrective measures to be taken if values fall outside the limits. Recommended controls:
Sulfanilic acid reacts with sodium nitrite to form diazotized sulfanilic acid. In the presence Diagnosticum DunaCont N (Cat. No.: Dcon-N) and DunaCont P (Cat. No.: Dcon-P)
of dimethylsulfoxide, total bilirubin reacts with diazotized sulfanilic acid to form
azobilirubin. In the absence of dimethylsulfoxide, only the direct bilirubin reacts to give PERFORMANCES DATA
azobilirubin.The absorbance measured at 555nm is proportional to the bilirubin
concentration. The following data were obtained using the Olympus 600 analyzer. Conversion factor:
[μmol/l]=17,1×[mg/dl]
Reference value
Adult 3-17,0 μmol/l (0,17-1,0 mg/dl) Linearity
Neonates, 24h <150 μmol/l (<8,8 mg/dl) The test is linear between 3,5 - 340 μmol/l (0,2 - 20,0 mg/dl).
2nd day 22-193 μmol/l (1,3-11,3 mg/dl)
3rd day 12-217 μmol/l (0,7-12,7 mg/dl) Limit of detection 0,31 mmol/l (0,018 mg/dl)
4-6th day 1,7-216 μmol/l (0,1-12,6 mg/dl)
Children, >1 month 3,4-17 μmol/l (0,2-1,0 mg/dl) Sensitivity
It is recommended that each laboratory should assign its own normal range. It is recommended that each laboratory establishes its own range of sensitivity as this is
limited by the sensitivity of the spectrophotometer used. Under manual conditions however,
Reagents a change of 0.001 Abs is equivalent to 1.42 μmol/l (0,08 mg/dl) Bilirubin concentration at
540 nm.
A) Total Bilirubin
1. Reagent (RT1) Precision
Sulfanilic acid 3,2 mmol/l
Hydrochloric acid 165mmol/l
Reproducibility
Dimethylsulfoxide 7 mol/l
2. Reagent (R2) n=20 Average concentration (μmol/l) SD CV%
Sodium nitrite 8.6 mmol/l sample I 18.9 0.756 4.00
sample II 82.3 2.902 3.53
Sample
Serum free of haemolysis.
Bilirubin in serum is light sensitive and it is recommended that serum be stored in the dark. Repeatability
The bilirubin decomposes fast in the serum and controls. Stability: 7 days at 2-8°C. n=20 Average concentration (μmol/l) SD CV%
The reagenst is not suitable for bilirubin determination of infants. sample I 14.02 0.14 0.99
sample II 91.9 0.80 0.88
Stability
without opening: till the expiry date indicated on the label
Correlation
after opening: 10 days
Comparative studies were done to compare our reagent with another commercial Bilirubin
calibration frequency: 3 days
Total reagent.
onboard stability: 3-10 days
The results from these studies are detailed below.
Stability data are valid only when using new system bottle!
Correlation coefficient: r=0.9998
Linear regression: y (mol/l)= 0.988x-0.979
PROCEDURE (x= other commercial reagent, y= own reagent).

All reagents are ready for use. Avoid direct exposure to light! Specificity
Lipid 400 mg/dl, glucose 55.5 mmol/l (1000 mg/dl) and ascorbic acid 2.84 mmol/l (50
Preparation of working reagent mg/dl) don’t interfere with the assay up to the given levels.
Mixing ratio of RT1 and R2: 125 ml/25ml
Reagents can only be applied with previous mixing! Note
Do not use reagents after the expiry date stated on each reagent container label. Do not use
Stability of working reagent products, test solutions and reagents described above for any purpose other than described
If absorbance of working reagent is higher than 0.02 at 546 nm the reagent can not be used. herein.

Assay Conditions For in vitro diagnostic use only!

Wavelength: 555 nm (540-560 nm)
Secondary wavelength: 600 nm
Temperature: 37 °C The following symbols can be used on the labels
Cuvette: 1 cm light path
Measure: end point.
In vitro diagnostic device Batch code
Pipette into cuvette
Manufacturer Catalogue number
Sample Calibrator
Working reagent 1.0 ml 1.0 ml
CE-marking This way up
Sample 75μl -
Calibrator - 75μl
Temperature limitations Biological risk
Mix and read the optical density (A) after exactly 3 minutes incubation.
Use by (year/month)
Calibration: (37°C, Diazo with Sulfanilic Acid)
Bibliography
S1: Dist. water Hijmans Van den Bergh A. A., Muller P.: Biochem, 77; 90, (1916).
S2: Diagnosticum DunaCal Cat. No.: Dcal or Walters M. I., Gerarde R. W.: Microchem., 15; 231 (1970).
Randox Calibration Serum Level I or II or Szabó A.: Klinikai laboratóriumi vizsgálatok és paraméterek (2010) (ISBN 978-963-9879-
Roche C.F.A.S. (Calibrator for automated system) 75-1)
Calibration frequency
Calibration is recommended:
- after reagent lot change,
- as required following quality control procedures.

Calculation using calibration

ASample
xC Calibrator  C Sample
ACalibrator
A = optical density, C = concentration

Quality control

Bilirubină totală reactiv lichid stabil Data reviziei: 2018-09 37-DL-EN-2016-12 Trad RO 2015-10 p.1/1