Folosind materialele primite la începutul semestrului, vă rog să răspundeți următoarelor cerințe:

1. Completați tabelele următoare cu informațiile regăsite la toate produsele vegetale descrise în

LP1 și LP2, conform exemplelor:
LP1. Produse naturale cu compuși aromatici de tip C6 (Derivați de benzen)
Produse naturale cu compuși aromatici de tip C6-C3 (Fenilpropanici)

Produs vegetal
Nr. Denumire Efecte
utilizat (denumirea Principii active
Crt. latină farmacologice
completă în latină)
Derivați de benzen:
Vaccinium vitis
1. Vitis idaeae folium Arbutozida, metil- Dezinfectant urinar
idaea
arbutozida
2. Arctostaphylos Uvae-Ursi folium Arbutozida 4-14%, Antiseptic urinar şi
uva-ursi hidrochinona, antilitiazic
metil-arbutozida,
pirozida
3. Humulus Lupuli glandulae Humulonă, Antioxidantă
Lupulus L. Lupulonă, Hipnotică
oleorezină, metil- Sedativ blândă
butenol
4. Cynara Cynarae folium Compuși Colagog-Coleretică
scolymus fenilpropanici: Amficoleretică
derivați cafeoil- Hepatoprotectoare
chinici 1-2%, acid
cafeic, acid chinic
5. Vaccinium Myrtilli folium Derivați de benzen:
myrtillus Arbutozida, metil- Dezinfectant urinar
arbutozida

LP2. Produse naturale cu derivați de benzopironă

Produs vegetal
Nr. Denumire Efecte
utilizat (denumirea Principii active
Crt. latină farmacologice
completă în latină)
Cumarine:
Mellilotus Emolient,
1. Melliloti herba Acid cumaric, acid
officinalis aromatizant
melilotic
2. Asperula Asperulae herba Cumarine simple- Sedativ,
odorata sin. cumarină și derivați Antispastic
Galum hidroxilați,
odoratum Furanocumarine, Iridoide
3. Angelica Angelicae radix Cumarine simple- Analgezic,
archangelica ostol,ostenol, antiinflamator,
angeliconă, tonic, stomahic,
 Furanocumarine liniare și fotosensibilizant al
angulare (angelicina), pielii
ulei volatil
4. Fraxinus Fraxini folium Derivaţi cumarinici: Diuretic, uricozuric,
excelsior Fraxetol, izofraxetol, antiinflamator,
fraxozidă antireumatic,
antialgic
5. Peucedanum Impeatoria Rhizoma Furanocumarine- Stomahică,
officinale peucedanină, Diuretică,
oxipeucedanină, Diaforetică,
ostrutină, ostrulol, ostol, Antineoplazică
aurapten
6. Ammi majus Ammi majoris Furanocumarine: Fotosensibilizant
fructus Bergapten, xantotoxina, pentru
izopimpinelina, depingmetarea
imperatorina pielii, tratametul
leucodermei, în
vitiligo

2. Calculați Rf pentru compușii regăsiți în cromatograma atașată și denumiți compușii regăsiți

în probă. Centralizați rezultatele în tabelul atașat.
Identificarea cromatografică a unor compuși fenilpropanici din Cynarae folium
Soluția de analizat: 1g produs vegetal se extrage, prin refluxare pe baia de apă cu 10 mL
metanol, timp de 10 minute.
Soluții standard: acid cafeic (B) și acid clorogenic (A) (soluții 1%, în metanol)
Faza staționară: silicagel G
Faza mobilă: acetat de etil: acid acetic: acid formic: apă distilată (100:11:11:26)
Revelare: lumină UV sau în vizibil, după relevare cu soluție clorură ferică 1%
Rezultate: Compușii fenilpropanici prezintă fluorescență în UV și colorații diferite după
revelare cu clorură ferică. Rf acid cafeic = 0,9 și Rf acid clorogenic = 0,4.
 Denumire compus
Rf
Standard A 0,38 Acid clorogenic
Standard B 0,88 Acid cafeic
0,86 P1 (acid cafeic)
Probă P2 (acid clorogenic)
0,38

Distanța de la linia de start la linia frontului (D)

Distanța de la linia de start la centrul spotului ac
clorogenic (A)
Distanța de la linia de start la centrul spotului ac
cafeic (B)
Distanța de la linia de start la centrul spotului P1

Distanța de la linia de start la centrul spotului P2

𝐴 𝐵 𝑃1 𝑃2
𝑅𝑓(𝐴) = 𝐷 =0,4 𝑅𝑓(𝐵) = 𝐷 =0,9 𝑅𝑓(𝑃1) = 𝑅𝑓(𝑃2) =
𝐷 𝐷

D=5 A=1,8 B=4,4 P1=4,3 P2=1,9

Interpretare:
Se observă vizual că proba conține atât acid clorogenic, cât și acid cafeic datorită spoturilor,
apărute după developare, de mărimi și culori aproximative cu ale standardelor aplicate pe
cromatogramă.
Următorul pas este măsurarea disttanțelor de la linia de start la linia frontului, și de la linia de
start la centrul spotului atât pentru standarde cât și pentru probă.
Se calculează apoi coeficientul de retenție (Rf) pentru standarde și pentru probă ca raportul dintre
distanța de la linia de start la centrul spotului și distanța de la linia de start la linia frontului.
Rf ul pentru probă este aproximativ egal cu Rf ul standardului, putem afirma că proba conține
substanțele luate în calcul.
Folosind materialele primite la începutul semestrului, vă rog să răspundeți următoarelor cerințe:

1. Completați tabelele următoare cu informațiile regăsite la toate produsele vegetale descrise în LP3 și
LP4, conform exemplelor:

LP3. Produse naturale cu flavonoide

 Produs vegetal
Nr. Denumire
utilizat (denumirea Principii active Efecte farmacologice
Crt. latină
completă în latină)
Astringent,
Alchemilla Flavonoide glicozidate,
1. Alchemillae herba hemostatic, tonifinant
vulgaris antociani, taninuri
uterin
2. Creșterea rezistenței și
Sophora scăderea permeabilității
Sophorae flos 3-rutinozida cvercetolului
japonica peretelui capilar

3. Crataegus Flavonoide libere: Acțiune sedativă asupra

monogyna și cvercetol, camferol SNC,
Crataegus Crataegi folium, flos, Flavonoide glicozidate coronarodilatatoare,
oxyacantha fructus (de tip O glicozide sau bradicardizantă și
C-glicozide): vitexine antihipertensivă.
4. Betula
Betulae folium Flavonoide Acțiune diuretică
pendula
5. Acțiune colagog
coleretică, diuretică,
Taraxacum Taraxaci herba cum Flavonoide și triterpene
laxativă,
officinale radicibus amare
hipocolesterolemiantă
și hipoglicemiantă
6. Cerasus
Cerasorum stipites Flavonoide Acțiune diuretică
vulgaris
7. Flavonoide: ginkgetina
Diterpenoide:
Ginkgo Acțiune vasoreglatoare
Ginkgo bilobae folium bilobalide
biloba și angioactivatoare
Sescviterpenoide:
ginkgolide
8. Acțiune antiinfecțioasă,
antiedematoasă,
Flavonoide libere:
Propolis epitelizantă și
crizina
imunostimulentă

9. Flavonoide:
izocvercitrozida și
ecvisetina Acțiune diuretică,
Equisetum
Equiseti herba Compuși anorganici: remineralizantă și
arvense
antianemică
derivați de acid silicic
Saponine
LP4. Produse naturale cu taninuri

Produs vegetal
Nr. utilizat
Denumire latină Principii active Efecte farmacologice
Crt. (denumirea completă
în latină)
Taninuri:
Ac galic, ac elagic, ac
Astringent,
cvercitanic (amestec de
1. Quercus robur Quercus cortex hemostatic,
catechină, epicatechină,
antidiareic
galocatechină,
leucoantociani)
2. Hamamelis Hamamelidis folium
Taninuri
virginiana
3. Taninuri galice și
catechice.
Acid galic și acid elagic în
stare liberă Proprietăți
Geum urbanum Gei rhizoma Glicozidă: geozidă astringente și
Ulei volatil antiseptice
Principii amare
Mucilagii
Oze
4. Krameria triandra Utilizare în ORL și
Ratahniae radix Tanin catechic
stomatologie
5. Acțiune astringentă,
cicatrizantă,
hemostatică,
Corylus avellana Coryli folium Taninuri și flobafene
decongestionantă
prin vasoconstricție
venoasă periferică
6. Acțiune astringentă,
Agrimonia Taninuri elagice și antidiareică,
Agrimoniae herba
eupatoria catechice, flobafene cicatrizantă, colagogă
2. Știind că:
Rf acid elagic = 0,33
Rf epicatechină = 0,49
Rf catechină = 0,77

Identificați compușii notați cu A, B și C, conform cromatogramei atașate. Centralizați rezultatele în

tabelul atașat.

Denumire compus
Compus Rf

A 0,33 Acid elagic

B 0,77 Catechină
C 0,49 Epicatechină
Folosind materialele primite la începutul semestrului, vă rog să răspundeți următoarelor cerințe:
3. Completați tabelele următoare cu informațiile regăsite la toate produsele vegetale descrise în
LP5, LP6 și LP7, conform exemplelor:
LP5. Produse naturale cu monoterpenoide atipice
Produs vegetal
utilizat
Nr. Efecte
Denumire latină (denumirea Principii active
Crt. farmacologice
completă în
latină)

Valerianae Iridoide (valepotriați): valtrat,

Valeriana
1. rhizoma cum didrovaltrat, acevaltrat și Acțiune sedativă
officinalis
radicibus izovaleroxi-hidroxididrovaltrat

2.
Secoiridoide: gentiopicrozida, Efect tonic amar,
Gentiana lutea Gentianae radix amarogentina, swertiamarina, stomahic,
swerozida antipiretic

3. Acțiune
Menyanthes Menyanthidis Secoiroide: foliamentina, emenagogă,
trifoliata folium swerozida, mentiafolina antitiroidiană,
febrifugă, diuretică
4.
Centaurium Iridoide: swertiamarina, Proprietăți tonice
Centaurii herba
umbellatum gentiopicrozida, amarogentina amare

5. Pyrethrum Esteri ai piretrolonei,

cinerariaefolium cinerolonei cu acizi Insecticid de
Pyrethri flos
(Chrysanthemum crizantemici mono și contact
cinerariaefolium) dicarboxilici(piretrine,cinerine)

LP6. Produse naturale cu saponine

Produs vegetal
utilizat
Nr. Efecte
Denumire latină (denumirea Principii active
Crt. farmacologice
completă în
latină)
Panax ginseng,
Panax repens, Stimulent neuro-
Saponine triterpenice tetraciclice
1. Panax japonicum, Ginseng radix endocrin și
(ginsenozide)
Panax cardiovascular
quinquefolium
2. Proprietăți
Primula
Saponine triterpenice expectorante și
officinalis(Primula Primulae rhizoma
pentaciclice(acid elatioric,acid fluidificante ale
veris), Primula cum radicibus
primulic) secrețiilor
elatior
bronșice
3. Proprietăți
Saponaria Saponariae rubrae Saponine triterpenice pentaciclice expectorante,
officinalis radix (saporubină) diuretice,
depurative
4. Saponine triterpenice pentaciclice,
Gypsophila Saponariae albae Acțiune
glicozide ale gipsogeninei
paniculata radix expectorantă
(gipsofilasaponina=sapoalbumina)
5. Proprietăți
Aesculus Hippocastani
Saponine triterpenice (escină) vasoprotectoare,
hippocastanum semen
antiedematoase
6. Proprietăți
Polygala senega Senegae radix Saponine triterpenice (senegine) antiinflamatoare,
expectorante
7. Proprietăți
Liquiritiae expectorante,
Saponine triterpenice (glicirizina,
Glycyrrhiza glabra radix(Glycyrrhizae antispastice,
acidul glicirizinic)
radix) antiinflamatoare,
diretice
8. Proprietăți
Solidaginis herba
Saponine triterpenice pentaciclice diretice,
Solidago virgaurea (Virgaureae
(virgaurea saponina) depurative,
herba)
aniinflamatoare

LP7. Produse naturale cu glicozide cardiotonice

Produse naturale cu carotenoide

Produs vegetal
Nr. Denumire
utilizat (denumirea Principii active Efecte farmacologice
Crt. latină
completă în latină)

Creșterea capacității de
Tagetes adaptare a ochiului la
1. Tagetes flos Helenienă
patula variația intensității
luminoase
2. Acțiune colagog-
Carotenoide: licopen, α,
Calendula coleretică, spasmolitică,
Calendulae flos β – caroten, xantofile –
officinalis emenagogă,cicatrizantă,
luteina
antimicrobiană
 Proprietăţi
antiinflamatoare şi
calmante

3.
Carotenoide:
protocrocină
Crocus (picrocrocozidă), Proprietăți colorante,
Croci Stigma
sativus crocina (crocozida),alfa stomahice
β caroten, , crocetină,
licopină
Produse
naturale cu
glicozide
cardiotonice
4. Digitalis Digitalis purpureae
Cardenolide Acțiune cardiotonică
purpurea folium
5. Digitalis Digitalis lanatae Glicozide cardenolidice Acțiune cardiotonică mai
lanata folium (lanatozida C) intensă ca D. purpurea
6. Strophanthus
kombe, Glicozide cardenolidice Acțiune cardiotonică
Strophanthi semen
Strophanthus (strofantozide) rapidă
gratus
7. Glicozide cardenolidice Acţiune cardiotonică
Adonis
Adonidis herba (adonitoxozida, rapidă, dar de scurtă
vernalis
cimarozida) durată
8. Glicozide cardenolidice
(convalatoxozida Acţiune cardiotonică
Convallaria
Convalariae herba convalozida similară strofantinei, mai
majalis
convalatoxolozida intensă
glucoconvalatoxolozida)
9. Efecte cardiotonice
Scilla
intermediare între
maritima Glicozide
Scillae bulbus digitalice și strofantice
(Urginea sciladienolidice
ca acțiune, latență și
maritima)
acumulare
10. Helleborus
niger,
Hellebori rhizoma Sciladienoide(helebrina) Acțiune cardiotonică
Helleborus
purpurascens

4. Știind că:
Rf lanatozidă = 0,26
 Rf digitoxină = 0,66
Rf cimarină = 0,81

Identificați compușii notați cu A, B și C, conform cromatogramei atașate. Centralizați

rezultatele în tabelul atașat.

Denumire
Compus Rf
compus
A 0,66 Digitoxină
B 0,261 Lanatozidă
C 0,809 Cimarină

D=4,2
A=2,8
B=1,1
C=3,4
𝐴 2,8
𝑅𝑓𝐴 = = = 0,66
𝐷 4,2

𝐵 1,1
𝑅𝑓𝐵 = = = 0,261
𝐷 4,2

𝐶 3,4
𝑅𝑓𝐶 = = = 0,809
𝐷 4,2

Determinarea cantitativă a flavonoidelor totale din produse vegetale

Tehnica determinării:
La 1,00 g pulbere produs vegetal se adaugă 100 mL alcool etilic 50%, într-un balon cu fund
rotund și se încălzește la fierbere, pe baia de apă, la reflux, timp de 30 min. Soluția fierbinte se
filtrează prin vată într-un balon cotat și după răcire se completează la 100 mL, prin spălarea
reziduului cu același solvent (Soluția A).
 10 mL soluție A se diluează cu etanol la 25 mL, într-un balon cotat. Se agită timp de 2-3
min și se lasă în repaus timp de 10 min. Se filtrează și se îndepărtează primele porțiuni din filtrat.
La 5 mL filtrat se adaugă 5 mL acetat de sodiu 100 g/L și 3 mL clorură de aluminiu 25 g/L, se agită
și se completează cu etanol la 25 mL, într-un balon cotat. După 15 min dacă este cazul se
completează din nou cu etanol la 25 mL și se determină absorbanța soluției la 430 nm, folosind ca
lichid de compensare o soluție obținută în aceleași condiții ca soluția probă, din 5 mL filtrat, 8 mL
apă și etanol la 25 mL, într-un balon cotat.
Concentrația în flavonoide a probei de analizat se calculează cu ajutorul unei curbe etalon,
stabilite în paralel și în aceleași condiții cu soluția probă, luând în lucru: 1, 2, 3, 4, 5 mL soluție
etalon rutin 0,1 g/L în etanol, 5 mL acetat de sodiu 100 g/L, 3 mL clorură de aluminiu 25 g/L la 25
mL, în fiecare balon cotat. Se folosește ca lichid de compensare o soluție obținută în aceleași
condiții cu soluția probă, din 8 mL apă și metanol la 25 mL, într-un balon cotat.
Cu valorile absorbanțelor și a concentrațiilor corespunzătoare se trasează curba etalon.
Flavonoidele totale se vor exprima în mg echivalenți rutin / 5 mL (probă).

Date obținute:
Scara etalonare Lichid
compensare Probă
Balon cotat 25 mL, nr: 1 2 3 4 5
Sol. etalon rutin 0,1 g/L 1 mL 2 mL 3 mL 4 mL 5 mL - -
CH3COONa 100 g/L 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL
AlCl3 25 g/L 3 mL 3 mL 3 mL 3 mL 3 mL 3 mL 3 mL
Etanol Se aduce balonul cotat la 25 mL
Timp așteptare 15 min
Absorbanța 430 nm 0,124 0,247 0,401 0,526 0,695 - 0,458

Calcul cantitate de rutin în baloanele cotate aferente scării etalon: Balon

cotat 25 mL (1):
0,1 g rutin ....................... 1000 mL soluție etalon
x g rutin ....................... 1 mL soluție etalon x =
0,0001 g rutin = 0,1 mg rutin în 25 mL

Balon cotat 25 mL (2):

0,1 g rutin ....................... 1000 mL soluție etalon
x g rutin ....................... 2 mL soluție etalon x =
0,0002 g rutin = 0,2 mg rutin în 25 mL
 Balon cotat 25 mL (3):
0,1 g rutin ....................... 1000 mL soluție etalon
x g rutin ....................... 3 mL soluție etalon x
= 0,0003 g rutin = 0,3 mg rutin în 25 mL

Balon cotat 25 mL (4):

0,1 g rutin ....................... 1000 mL soluție etalon
x g rutin ....................... 4 mL soluție etalon x =
0,0004 g rutin = 0,4 mg rutin în 25 mL

Balon cotat 25 mL (5):

0,1 g rutin ....................... 1000 mL soluție etalon
x g rutin ....................... 5 mL soluție etalon x =
0,0005 g rutin = 0,5 mg rutin în 25 mL

Trasare curbă etalon:

Curba etalon se poate trasa pe hârtie milimetrică, în Microsoft Excel sau cu ajutorul unor
aplicații corespunzătoare. Aceasta trebuie să fie atașată rezolvării indiferent de modul de
obținere.

Exemplu interpretare curbă etalon obținută în Microsoft Excel:

0.8

0.7
y = 1.421x - 0.0277
0.6

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
Concentrație (mg rutin /25 mL)

Ecuația dreptei:

y = 1,421x − 0,0277
 Unde:
y = absorbanța citită la 430 nm
x = concentrația de rutin exprimată în mg rutin în 25 mL

Pentru a afla concentrația flavonoidelor în probă:

y = 1,421x − 0,0277 → x = y +0,0277

1,421

Absorbanța citită pentru probă este 0,458. Deci:

x= → x = 0,342 mg rutin/25 mL

Flavonoidele totale se exprimă în mg echivalenți rutin / 5 mL (probă).

0,342 mg rutin ...................... 25 mL

a mg rutin ...................... 5 mL

a = 0,0684 mg rutin / 5 mL

Concluzie:
Flavonoidele totale regăsite în proba analizată sunt în cuantum de 0,0684 mg echivalenți
rutin / 5 mL.

Determinarea cantitativă a polifenolilor totali din produse vegetale

Tehnica determinării:
La 1,00 g produs vegetal pulverizat se adaugă 15 mL etanol 50% într-un balon cu dop
rodat, se încălzește la fierbere, la reflux, timp de 30 min, agitând din când în când și apoi se răcește.
Soluția se filtrează într-un balon cotat și se completează la 25 mL, prin spălarea reziduului cu
același solvent (Soluția A).
5 mL de soluție A se diluează cu etanol la 25 mL, într-un balon cotat. Într-un balon cotat
de 50 mL se introduc 5 mL din această soluție și 1 mL reactiv Folin – Ciocâlteu. Se agită și se
aduce la semn balonul cotat cu o soluție de carbonat de sodiu 150 g/L. După 2 min de la adăugarea
ultimului reactiv se determină absorbanța soluției de polifenoli totali la 715 nm, folosind ca lichid
de compensare o soluție obținută în aceleași condiții ca proba din 5 mL etanol, 1 mL reactiv Folin
– Ciocâlteu și până la 50 mL soluție carbonat de sodiu 150 g/L.
Concentrația în polifenoli totali a probei de analizat se calculează cu ajutorul unei curbe
etalon, stabilite în paralel și în aceleași condiții cu soluția probă. Într-un balon cotat de 50 mL se
iau în lucru: 1, 2, 3, 4, 5 mL soluție etalon acid galic 0,2 g/L în etanol, 1 mL reactiv Folin –
Ciocâlteu și se aduce la semn fiecare balon cotat cu soluție de carbonat de sodiu 150 g/L.
Cu valorile absorbanțelor și a concentrațiilor corespunzătoare se trasează curba etalon.
Polifenolii totali se vor exprima în mg echivalenți acid galic / 5 mL (probă).

Date obținute:
Scara etalonare Lichid
Probă
Balon cotat 50 mL, nr: 1 2 3 4 5 compensare
Sol. etalon acid galic
1 mL 2 mL 3 mL 4 mL 5 mL - -
0,2 g/L
Reactiv Folin -
1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL
Ciocâlteu
NaCO3 150 g/L Se aduce balonul cotat la 50 mL
Timp așteptare 2 min
Absorbanța 715 nm 0,125 0,215 0,358 0,501 0,699 - 0,318

Balon cotat 50 mL (1):

0,2 g acid galic....................... 1000 mL soluție etalon
x g acid galic ....................... 1 mL soluție etalon
x = 0,0002 g acid galic = 0,2 mg acid galic în 50 mL

Balon cotat 50 mL (2):

0,2 g acid galic ....................... 1000 mL soluție etalon
x g acid galic ....................... 2 mL soluție etalon
x = 0,0004 g acid galic = 0,4 mg acid galic în 50 mL

Balon cotat 50 mL (3):

0,2 g acid galic ....................... 1000 mL soluție etalon
x g acid galic ....................... 3 mL soluție etalon
x = 0,0006 g acid galic = 0,6 mg acid galic în 50 mL

Balon cotat 50 mL (4):

0,2 g acid galic ....................... 1000 mL soluție etalon
x g acid galic ....................... 4 mL soluție etalon
x = 0,0008 g acid galic = 0,8 mg acid galic în 50 mL

Balon cotat 50 mL (5):

0,2 g acid galic ....................... 1000 mL soluție etalon
x g acid galic ....................... 5 mL soluție etalon
x = 0,001 g acid galic = 1 mg acid galic în 50 mL

Am verificat valoarea cu ecuația dreptei calculată pentru graficul de mai sus

Se determină mai întâi ecuația dreptei

Luăm 2 puncte de pe dreaptă

A(0,2; 0,125) B(0,6; 0,358) unde punctul este definit ca X(xi;yi)
Ox- axa reprezentă de valorile concentrației
Oy- axa reprezentată de valorile absorbanței

𝑦2−𝑦1
y-y1 = 𝑥 x(𝑥 − 𝑥1 )
2 −𝑥1

0,358−0,125
y-0,125= x(𝑥 − 0,2)
0,6−0,2

y-0,125 = 0,58x – 0,116

Ecuația dreptei este y= 0,58x + 0,009

 y= absorbanța probei citită la 714 nm= 0,318

x= (0,318-0,009)/ 0,58

x= 0,532 mg acid galic/ 50 ml

Polifenolii totali se vor exprima în mg echivalenți acid galic / 5 mL (probă)

0,532 mg acid galic ...................... 50 mL

a mg acid galic ...................... 5 mL

a = 0,0532 mg acid galic / 5 mL

Concluzie:
Polifenolii totali regăsiți în proba analizată sunt în cuantum de 0,0532 mg acid galic / 5 mL.

Determinarea cantitativă a compușilor fenilpropanici din produse vegetale

Tehnica determinării:
4,0 g pulbere de produs vegetal se extrag prin refluxare pe baia de apă cu 80 mL alcool
etilic. Se cântărește flaconul și se menține pe baia de apă la reflux 30 minute. După răcire se aduce
flaconul la greutatea inițială cu alcool de 50 grade și se filtrează prin hârtie de filtru. 5 mL filtrat
se diluează cu alcool 50 grade la 50 mL într-un balon cotat (soluția A). La 1 mL din soluția A se
adaugă 1 mL acid clorhidric 0,5N, 1 mL reactiv Arnow, 1 mL hidroxid de sodiu 1N și se
completează la 10 mL cu apă distilată. După 10 minute se citește absorbanța la 500 nm, față de un
lichid de compensare.
Curba etalon: Într-o serie de baloane cotate de 10 mL se adaugă 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 și 0,5 mL
dintr-o soluție etalon de acid cafeic 0,0125% (m/V) peste care se adaugă câte 1 mL acid clorhidric
0,5N, 1 mL reactiv Arnow, 1 mL hidroxid de sodiu 1N și se completează la 10 mL cu apă distilată.
După 10 minute se citește absorbanța la 500 nm.
Cantitatea compușilor fenilpropanici regăsiți în probă se vor exprima în mg echivalenți
acid cafeic / mL (probă).

Date obținute:
Lichid
Scara etalonare compensare Probă
Balon cotat 10 mL, nr: 1 2 3 4 5
Sol. etalon acid cafeic
0,0125% (m/V) 0,1 mL 0,2 mL 0,3 mL 0,4 mL 0,5 mL - -

HCl 0,5N 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL
Reactiv Arnow 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL
NaOH 1N 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL
Apă distilată Se aduce balonul cotat la 10 mL
Timp așteptare 10 min
Absorbanța 500 nm 0,100 0,205 0,315 0,420 0,533 - 0,294

Balon cotat 10 mL (1)

0,0125 g acid cafeic........100mL soluție etalon x
g acid cafeic................0,1mL soluție etalon
x=0,0000125 g acid cafeic = 0,0125 mg ac.
cafeic

Balon cotat 10 mL (2)

0,0125 g acid cafeic........100mL soluție etalon
y g acid cafeic................0,2mL soluție etalon
y=0.000025 g acid cafeic = 0,025 mg ac. cafeic
Balon cotat 10 mL (3)
0,0125 g acid cafeic........100mL soluție etalon z g
acid cafeic................0,3mL soluție etalon => z =
0,0000375 g acid cafeic = 0,0375 mg ac. cafeic

Balon cotat 10 mL (4)

0,0125 g acid cafeic........100mL soluție etalon t
g acid cafeic................0,4mL soluție etalon t
= 0,00005 g acid cafeic = 0,05 mg ac. cafeic

Balon cotat 10 mL (5)

0,0125 g acid cafeic........100mL soluție etalon v g
acid cafeic................0,5mL soluție etalon v =
0,0000625 g acid cafeic = 0,0625 mg ac. cafeic
 0.6

0.5
y = 8.648x - 0.0097
0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07
Concentrație (mg acid cafeic /10 mL)

y=8,648x-0,0097

Unde :
y= absorbanța citită la 500nm
x= concentrația de acid cafeic exprimată în mg acid cafeic în 10mL

Pentru a afla concentrația compușilor fenilpropanici în probă: y=8,648x-0,0097

x= (y+0,0097)/8,648

Absorbanța citită pentru probă este 0,294, deci:

x = (0,294+0,0097)/8,648
x = 0,035 mg acid cafeic/ 10 mL

Compușii fenilpropanici se exprimă în mg echivalenți acid cafeic/ mL (probă).

0,035 mg acid cafeic………………………………10 mL

x g acid cafeic……………………………………...1mL

x= 0,0035 mg acid cafeic / 1mL

Concluzie:
Compușii fenilpropanici regăsiți în proba analizată sunt în cuantum de 0,0035 mg
echivalenți acid cafeic/mL.
 Atenție!
• Este diferență între cantitatea de acid cafeic regăsită în probă și cantitatea de compuși
fenilpropanici exprimați în echivalenți acid cafeic regăsită în probă.
• În cazul nostru, am realizat o analiză pentru a doza compușii fenilpropanici dintr-un
produs vegetal, astfel încât rezultatul va trebui exprimat în echivalenți acid cafeic.

Analiza cantitativă a cumarinelor din produse vegetale

Tehnica determinării:
0,50 g produs vegetal pulverizat se triturează cu 1g nisip de mare și 1 mL apă distilată. Se
lasă o oră în repaus la termostat la 40℃, apoi se triturează cu un amestec de 5 mL etanol și 10 mL
eter, adăugat în picături. Se lasă să sedimenteze și se filtrează. Operația se repetă de 2 ori. Soluțiile
extractive reunite se lasă în repaus 24 ore la temperatura camerei (pentru evaporarea eterului), apoi
se introduc într-un balon cotat de 100 mL. Se completează la semn cu acid sulfuric 0,05N, se agită
pentru omogenizare și se menține 30 minute la 70℃, într-o baie de apă. Se răcește și se filtrează,
astfel obținându-se soluția A.
Într-un balon cotat de 50 mL se introduc 5 mL soluție A, se adaugă 5 mL carbonat de sodiu
7% și se încălzește 5 minute la 85℃, în baia de apă. Se răcește la temperatura camerei, se adaugă
5 mL acid sulfuric 0,05N (se agită) și 5 mL clorură de p-nitrobenzen-diazoniu. Apare o colorație
roșie. Se completează cu apă la semn și se măsoară imediat absorbanța la 510 nm.
Calcularea cantității de cumarine se realizează prin raportarea la curba etalon.
Stabilirea curbei etalon: Într-o serie de 6 baloane cotate de 50 mL se introduc 0,5; 1; 2; 3;
4 și 5 mL dintr-o soluție de cumarina 0,02% (m/V) peste care se adaugă 5 mL mL carbonat de
sodiu 7% și se procedează ca mai sus.
Calculați cantitatea de cumarine regăsită în probă și exprimați rezultatul în procente de
cumarine folosind următoarea formulă de calcul.
500000 · 𝑐
𝐶𝑢𝑚𝑎𝑟𝑖𝑛𝑒 % =
𝑚·𝑉

Unde:
c = concentrația de cumarină explicitată din curba de etalonare, exprimată în mg/mL
m = masa produsului vegetal luat în lucru, exprimat în mg
V = volumul de soluție A folosit în analiză, exprimat în mL
500000 = coeficient rezultat din calculul diluțiilor

ATENȚIE!
 • Pentru a avea toate datele necesare pentru calcularea cumarinelor folosind formula de
calcul de mai sus trebuie să trasați curba de etalonare și să explicitați cantitatea de cumarina
din probă.
• Concentrația luată în calcul în formulă este exprimată în mg/mL.
• Masa produsului vegetal luat în lucru este exprimat în mg.
• Volumul care trebuie luat în formulă este volumul de soluție A folosit.

Completați tabelul următor cu datele lipsă:

Scara etalonare Lichid
Probă
Balon cotat 50 mL, nr: 1 2 3 4 5 6 compensare
Sol. etalon cumarină 0,02
0,5 1 2 3 4 5 - -
% (m/V), mL
Carbonat de sodiu 7%,
5 5 5 5 5 5 5 5
mL
Baia de apă la 85 ℃, min 5 minute
Acid sulfuric 0,05N, mL 5 5 5 5 5 5 5 5
Clorură de p-nitrobenzen- 5 5 5 5 5 5 5 5
diazoniu, mL
Apă distilată, mL Se aduce balonul cotat la 50 mL
Absorbanța 510 nm 0,0211 0,324 0,438 0,551 0,679 0,801 - 0,573
Cumarine % - - - - - - - 10,072

Balon cotat 50 mL (1):

0,02 g cumarine....................... 100 mL soluție etalon
x g cumarine ....................... 0,5 mL soluție etalon
x = 0,0001 g cumarine = 0,1 mg cumarine în 50 mL

Balon cotat 50 mL (2):

0,02 g cumarine ....................... 100 mL soluție etalon
x g cumarine ....................... 1 mL soluție etalon
x = 0,0002 g cumarine = 0,2 mg cumarine în 50 mL

Balon cotat 50 mL (3):

0,02 g cumarine ....................... 100 mL soluție etalon
x g cumarine ....................... 2 mL soluție etalon
x = 0,0004 g cumarine = 0,4 mg cumarine în 50 mL
Balon cotat 50 mL (4):
0,02 g cumarine ....................... 100 mL soluție etalon
x g cumarine ....................... 3 mL soluție etalon
x = 0,0006 g cumarine = 0,6 mg cumarine în 50 mL

Balon cotat 50 mL (5):

0,02 g cumarine ....................... 100 mL soluție etalon
x g cumarine ....................... 4 mL soluție etalon
x = 0,0008 g cumarine = 0,8 mg cumarine în 50 mL

Balon cotat 50 mL (6):

0,02 g cumarine ....................... 100 mL soluție etalon
x g cumarine ....................... 5 mL soluție etalon
x = 0,001 g cumarine = 1 mg cumarine în 50 mL

0.9
0.8 y = 0.631x + 0.1747
0.7
Absorbanta 510 nm

0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
Concentratia (mg cumarine/50 mL)

Ecuația dreptei
y=0,631x + 0,1747

Unde:
y = absorbanța citită la 510 nm
x = concentrația de cumarine exprimată în mg cumarine în 50 mL

Concentrația cumarinelor în probă:

 𝑦−0,1747
𝑥= 0,631
0,573−0,1747
Absorbanța citită pentru probă este 0,573. Deci: 𝑥 = ⇒ x= 0,6312
0,631

500000 · 𝑐
𝐶𝑢𝑚𝑎𝑟𝑖𝑛𝑒 % =
𝑚·𝑉
Unde:
c = concentrația de cumarină explicitată din curba de etalonare, exprimată în mg/mL
m = masa produsului vegetal luat în lucru, exprimat în mg
V = volumul de soluție A folosit în analiză, exprimat în mL
500000 = coeficient rezultat din calculul diluțiilor
m = 0,5 g= 500 mg
V= 5 mL sol A
0,6312 g cumarine………………..50 mL
c g cumarine………………. 1 mL

c=0,0126 mg/mL

500000·0,0126
𝐶𝑢𝑚𝑎𝑟𝑖𝑛𝑒 % = =2,52 %
500·5

1. Determinarea cantitativă a taninurilor din produse vegetale

Tehnica de lucru și modul de calcul a concentrației taninurilor se regăsesc în documentul atașat -
Analiza cantitativă a taninurilor.
Calculați concentrația în tanin a următoarelor produse vegetale exprimată în procente, având la
dispoziție următoarele date experimentale:

Ratanhiae Gei Quercus Hamamelidis

Produs vegetal
radix rhizoma cortex folium
Masa luată în lucru (mg) 503 499 507 505
Absorbanța soluției de polifenoli
0,315 0,457 0,557 0,472
totali
Absorbanța soluției polifenoli
0,120 0,131 0,375 0,356
neabsorbiți pe pulberea de piele
Absorbanța soluției de pirogalol
0,115
standard

Atenție!
În formula de calcul se va înlocui valoarea masei produsului vegetal în g.

C%=13,12(A1-A2)/A3 x m
Pentru Rathanhiae radix : 503 mg=0,503 g
C%= 13,12(0,315-0,120)/0,115x0,503 = 2,5584/ 0,115 x 0,503= 11,1902
Pentru Gei rhizoma: 499 mg= 0,499 g
C%= 13,12(0,457-0,131)/0,115x0,499= 4,27712/ 0,115 x 0,499= 18,5589
Pentru Quercus cortex 507 mg= 0,507 g
C%= 13,12(0,557-0,375)/0,115x0,507= 2,38784/ 0,115 x 0,507= 10,5272
Pentru Hamamelidis folium : 505 mg= 0,505 g
C%= 13,12(0,472-0,356)/0,115x0,505= 1,52192/ 0,115 x 0,505= 6,6832

2. Analiza cromatografică a monoterpenoidelor de tip secoiridoidic din Gentianae radix și a

iridoidelor din Valerianae rhizoma cum radicibus (CSS)

Se cunosc următoarele:
Gențiopicrozida – Rf = 0,45 (spot brun)
Swertiamarina – Rf = 0,40 (spot brun)
Amarogenina – Rf = 0,80 (spot roșu-violet)
Valtrat – Rf = 0,76 (spot albastru)
Didrovaltrat – Rf = 0,62 (spot albastru-cafeniu)
Izovaleroxi-hidroxididrovaltrat – Rf = 0,39 (spot albastru)

Precizare: Culorile spoturilor reprezentate în cromatograme sunt aproximative față de cele

enunțate mai sus.

Identificați compușii regăsiți în produsele vegetale amintite mai sus folosind următoarele
cromatograme pe strat subțire și completați tabelele.

Gentianae radix
Denumire
Rf
compus
0,80 Amarogenina
0,45 Gențiopicrozidă
0,40 Swertiamarină

Gentianae radix

D=3 cm
d1(spot rosu violet)= 2,4 cm Rf=0,8
d2(spot brun)=1,35 cm Rf= 0,45
d3(spot brun)=1,2cm Rf = 0,40

Valerianae rhizoma cum radicibus

Rf Denumire compus
0,3888 Izovaleroxi-
hidroxididrovaltrat
0,6111 Didrovaltrat
0,75 Valtrat

Valerianae rhizoma cum radicibus

D=3,6 cm
d1(spot albastru)=1,4 cm Rf=0,3888
d2(spot albastru cafeniu)=2,2 cm Rf=0,6111
d3(spot albastru)= 2,7 cm Rf=0,75
Determinarea concentrației azulenice din Millefolii aetheroleum

Într-un balon cotat de 25 mL se introduc 0,05 mL ulei volatil și se completează la semn cu benzen.
Se citește absorbanța dată de soluția albastră, la 625 nm. Se calculează concentrația azulenică prin
explicitare din curba etalon construită pe baza absorbanțelor date de soluții preparate în același fel,
cu 0,01 g, 0,02 g, 0,04 g, 0,08 g și 0,1 g azulenă în 100 mL benzen.
Calculați concentrația de azulenă exprimată în mg azulenă/ 0,05 mL ulei volatil.

Completați următorul tabel cu informațiile corespunzătoare:

Balon cotat, nr: 1 2 3 4 5 Probă
Cantitate sol. etalon
0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 -
azulenă, g
Concentrație sol.
5 10 15 20 25 -
etalon, mg/25 mL
Absorbanță, 625 nm 0,210 0,408 0,605 0,801 0,995 0,558

Balon cotat 100 mL (1):

0,02 g azulenă....................... 100 mL benzen
x g azulenă ....................... 25 mL benzen
x = 0,005 g azulenă = 5 mg azulenă în 25 mL
 Balon cotat 100 mL (2):
0,04 g azulenă ....................... 100 mL benzen
x g azulenă ....................... 25 mL benzen
x = 0,01 g azulenă = 10 mg azulenă în 25 mL

Balon cotat 100 mL (3):

0,06 g azulenă ....................... 100 mL benzen
x g azulenă ....................... 25 mL benzen
x = 0,015 g azulenă = 15 mg azulenă în 25 mL

Balon cotat 100 mL (4):

0,08 g azulenă ....................... 100 mL benzen
x g azulenă ....................... 25 mL benzen
x = 0,02 g azulenă = 20 mg azulenă în 25 mL

Balon cotat 100 mL (5):

0,1 g azulenă ....................... 100 mL benzen
x g azulenă ....................... 25 mL benzen
x = 0,025 g azulenă = 25 mg azulenă în 25 mL
1.200
y = 0.0393x + 0.0149
1.000

0.800
Absorbanța

0.600

0.400

0.200

0.000
0 5 10 15 20 25 30
Concentrația

Ecuația dreptei: y = 0.0393x + 0.0149

Unde
y= absorbanța la 625 nm= 0,558
x= conc probei (mg/25 mL)
0,558=0,0393 x + 0,0149
0,0393 x= 0,5431
x= 13,81 mg azulenă la 0,05 mL ulei volatil