Spikare cu extract de praf de muștar

1. Se cântărește 1 g de pulbere de mustar măcinată temeinic și se adaugă 20 ml de

tampon de extracție a alergenului preîncălzit (concentrație de pudră de muștar
de 50 mg / ml).

2. Se extrage conform instrucțiunii de utilizare R-Biopharm timp de 10 minute la

60°C. După aceea, se lasă proba să se răcească la temperatura camerei și se
centrifughează timp de 10 min / 2500 g / dacă este posibil la 4 ° C (39 ° F) și se
extrage extractul (alternativ, 2 ml din extract pot fi centrifugate cu viteză ridicată
timp de 10 min în capacele de reacție utilizând o microcentrifugă).

3 Se diluează extractul cu tampon de extragere a alergenului 1:25 (de exemplu, se

adaugă 200 μl de extract în 4800 μl de tampon de extracție a alergenului);
concentrație 2 mg pulbere muștar / ml (diluție A). Vortexam temeinic această
soluție.

4 diluție suplimentară extractului A 1:40 (de exemplu, se adaugă 100 μl de extract

A în 3900 μl tampon de extracție de alergen); concentrație de 50μg pulbere de
muștar /ml ppm(diluție B). Vortexam temeinic această soluție.

5 Se adaugă 100 μl de diluție B la 1 g de matrice fără muștar pentru a obține un

nivelul de spikare 5mg/kg (ppm). Pentru mirodenii, adăugarea a 1 g lapte praf
degresat poate spori recuperarea (vezi experimentele de recuperare din paragraf).
Ca un control al spikului, pipetați 100 μl din extract într-o fiolă goală.

Se extrage conform instrucțiunii de utilizare R-Biopharm

 cu 20 ml tampon de extracție a alergenului preîncălzit timp de 10
minute la 60 ° C.
 După aceea, se lasă proba să se răcească la temperatura camerei
 se centrifughează timp de 10 min / 2500 g / dacă este posibil la 4 ° C (39 °
F) și / sau se filtrează extractul (alternativ, 2 ml din extract pot fi
centrifugate cu viteză mare timp de 10 minute în capacele de reacție prin
utilizarea unei microcentrifuge). \
 Se utilizează 100µl din supernatant sau filtrat pe godeu în analiză.