14/10/2018

NUTRITIA
CRESTEREA SI MULTIPLICAREA BACTERIANĂ

BACTERILOR 
asimilarea substantelor nutritive, organice si
anorganice, dinmediul extern, necesare
metabolismului
CURS 2 

nutrienti = substante a căror
 solutii pot traversa
 membrana citoplasmatică
 
participă la reactiile metabolice care
asigură cresterea si multiplicarea celulei

1 2

NUTRITIA NUTRITIA
BACTERIANĂ BACTERIANĂ
 
Compusi din care derivă nutrientii: a. intervin hidrolaze: proteaze, lipaze, amilaze etc.
 
 prin simplă solvire: săruri minerale, CO2, O2 b. nutrientii traversează membrana citoplasmatică prin:
 
  difuziune simplă sau facilitată (proteine carrier)
după digestia extracelulară prealabilă:  
diferente de concentratie

1. proteine → fragmente polipeptidice, aa 
 
transport activ contragradient
2. polizaharide → monozaharide   
cu consum de energie obtinută prin hidroliza ATP
  
3. lipide → acizi grasi si gicerol 
cu participarea unor enzime (permeaze)
conc. intracelulară
 a nutrientilor – până la 1000 ori mai mare decât în
4. acizi nucleici → nucleozide si fosfati anorganici mediu

3 4

1
 14/10/2018

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

necesităti nutritive de bază necesităti nutritive de bază
 
Principalele elemente cu rol structural si Surse de carbon:

 CO2 – bacterii autotrofe
functional:

 C - ≈ ½ din greutatea uscată a celulei bacteriene  
 compusi organici – bacterii 

  heterotrofe ( carbohidrati, proteine, lipide)
N – pt. sinteza proteinelor – 10% din greutatea
 
 uscată a celulei bacteriene compusi organici si CO2 – bacterii heterotrofe
  (capnofile sau carboxifile)
 O,
 
săruri minerale

5 6

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

necesităti nutritive de bază necesităti nutritive de bază
 
Surse de azot: Surse de oxigen:
  
 O2 molecular
azot atmosferic – bacterii autotrofe
 
în molecule biologice (aa, nucleotide, gliceride etc).

surse organice(peptide, aa) bacterii

surse anorganice heterotrofe
(săruri de amoniu, nitrati)

7 8

2
 14/10/2018

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

necesităti nutritive de bază necesităti nutritive de bază
 
Surse de elemente minerale: Surse de elemente minerale:

 sulf 
 fosfor
  prezent în - necesar pentru sinteza
  
  
aa – grupări tiol (-SH) acizi nucleici
    
vitamine – biotina, tiamina  fosfolipide membranare
   
 coenzima A  ATP
  asimilat din compusi - asimilat sub formă de fosfati anorganici
  
organici
 
anorganici

9 10

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

necesităti nutritive de bază necesităti nutritive de bază
 
Surse de elemente minerale: Surse de elemente minerale:
  
 alte elemente alte elemente
  Na, K, Mg, Cl - Ca
- asigură echilibrul fizico-chimic al bacteriei + acid picolinic → dipicolinat de Ca – în
 citoplasma endosporilor bacterieni
 Fe, Ni, Se
- Co, Cu, Mn, Mo
  intră în structura unor enzime
  activatori enzimatici
- citocromi  
necesari în cantităti foarte mici (oligoelemente)
- peroxidaze
- hidrogenaze
12
11

3
 14/10/2018

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

factori de crestere factori de crestere
 
Bacterii Asigurati:

care pot obtine toti
 compusii necesari 
 de altă specie bacteriană
metabolismului
    
mediu – apă, săruri minerale glucoză înglobati în mediul de cultură

care nu pot sintetiza factori esentiali
 - FACTORI DE
CRESTERE= bacterii fastidioase
  
necesari a fi prezenti în mediu
  
aa
  
baze purinice, pirimidinice
 
vitamine
14
13

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

factori de crestere
factori de crestere 
1. Asigurati de altă
specie bacteriană:
 2.Inglobati în mediul de cultură
care sintetizează
 
acel factor mutatie→ pierdere de enzimă → blocare secventă 
SINTROFIE, metabolică → oprire sinteză metabolit esential
 
SATELITISM  tulpina parentală = PROTOTROFĂ
Ex. S.aureus produce
factor V (NAD)  
necesar pentru
tulpina mutantă = AUXOTROFĂ
Haemophilus
influenzae

16
15

4
 14/10/2018

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

aplicatii practice aplicatii practice
 
  MEDII DE CULTURĂ
izolarea bacteriilor din produse patologice 
 mediu care asigură nutrientii si conditiile fizico- 
chimice necesare cresterii si multiplicării bacteriene
 
utilizarea unor medii de cultură optime CRITERII DE CLASIFICARE

 provenienta nutrientilor
 
valoare nutritivă

 consistentă
 
scopul utilizării
18
17

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

aplicatii practice aplicatii practice

MEDII DE CULTURĂ - valoare nutritivă 
MEDII DE CULTURĂ – consistentă

   
MEDII SIMPLE (DE BAZĂ) MEDII LICHIDE
- extract de carne, peptonă, NaCl - eprubete, baloane
- pentru bacterii nepretentioase - pentru culturi monobacteriene,
caractere biochimice
- bulion, geloză, apă peptonată 
MEDII SOLIDE


 
MEDII ÎMBOGĂTITE - cutii Petri, eprubete (pantă, coloană)
- adaos de sânge, ser, ou, extract de levuri etc. - colonii
 
- pentru bacterii exigente MEDII SEMISOLIDE
- eprubete (coloană)
- bulion-sânge; bilion-ser; bulion-glucozat; - studiul mobilitătii bacteriilor,
geloză-sânge caractere metabolice, conservare
20
19

5
 14/10/2018

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

aplicatii practice aplicatii practice
 
MEDII DE CULTURĂ – consistentă MEDII DE CULTURĂ – consistentă

 pt. consistenta mediului - AGAR
  - AGAR – caracteristici
fitocoloid obtinut din alge marine, speciile: 
  lichefiază la 100°C
- Gelidium 
 se solidifică la 42°C
- Gracilaria 
 
mentine starea solidă a mediilor la temp de 0 –
- Pterocladia 
80°C
 
nu este utilizat ca nutrient de către bacterii
21
22

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

aplicatii practice aplicatii practice
 
MEDII DE CULTURĂ – consistentă MEDII DE CULTURĂ - scopul utilizării

 pt. consistenta mediului 
 medii de izolare
- coagularea termică a proteinelor din ser sau ou 
 medii de identificare
 
medii de conservare

23
24

6
 14/10/2018

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

aplicatii practice aplicatii practice
 
MEDII DE CULTURĂ - scopul utilizării MEDII DE CULTURĂ - scopul utilizării

  
 medii de izolare
medii de izolare

 uzuale   selective
- gamă largă de bacterii de interes medical - contin substante cu actiune
- pt. produse inhibitorie asupra unor bacterii: antibiotice,
monobacteriene coloranti, săruri biliare, azid de Na etc.
cu floră asociată - favorizează izolarea preferentială unor
- pt. aprecieri calitative si cantitative a specii
bacteriilor în pp.
25 26

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

aplicatii practice aplicatii practice
 
MEDII DE CULTURĂ - scopul utilizării MEDII DE CULTURĂ - scopul utilizării
  
medii de izolare  medii de izolare
- de îmbogătire
- medii lichide - diferentiale
- favorizează multiplicarea unorbacterii - contin un substrat pentru unele enzime
- inhibă selectiv flora de asociatie în pp. bacteriene
- pt. izolarea unor bacterii aflate în nr. mic - permitând diferentierea acestora
în cultura primară
selective - pot fi utilizate în combinatie cu medii
27

28

7
 14/10/2018

NUTRITIA BACTERIANĂ – NUTRITIA BACTERIANĂ –

aplicatii practice aplicatii practice

MEDII DE CULTURĂ - scopul utilizării 
 
 MEDII DE CULTURĂ - scopul utilizării
 
medii de identificare
- contin  
- unul sau mai multe substraturi medii de conservare

pt. enzime bacteriene
- indicatori care evidentiază produsi 
intermediari sau finali de metabolism: indol, pt. păstrarea
în laborator a unor tulpini bacteriene în
cultură pură
H2S, acetoină etc.
- indicatori de pH: recunosc
degradarea unor zaharuri sau aa
- pt. identificarea de gen, specie
29 30

METABOLISMUL REACTII
BACTERIAN METABOLICE:
 

 catabolice – reactii
 prin care se
totalitatea proceselor biochimice prin care eliberează energie
celula bacteriană îsi procură materialul 

plastic si energetic din mediul înconjurător 
anabolice (asimilare) –
consumă energie pt. sinteza

constituentilor celulari

31 32

8
 14/10/2018

REACTII REACTII
CATABOLICE: CATABOLICE
 

 
= metabolismul energetic; respiratia bacteriană după calea prin care obtine energia:
 
procesele biochimice aerobe sau anaerobe 
 photobacterii – folosesc energia luminoasă, trăiesc la
lumină
prin care compusi organici cu structură complexă
 în compusi simpli cu eliberare de
se degradează 
 energie
scotobacterii (bacterii chimiosintetizante) –produc

energia prin oxido-reducere, trăiesc la întuneric
 
energia eliberată se stochează în molecula de ATP

33 34

REACTII CATABOLICE – REACTII CATABOLICE –

hidratii de carbon hidratii de carbon

 surse de energie: aa, purine,  
pirimidine, acizi grasi 
 RESPIRATIA CELULARĂ
foarte important – catabolismul carbohidratilor–
 glucoza – prin: 
proces generator de ATP


- moleculele sunt oxidate – acceptorul final de

- respiratie electroni este o moleculă anorganică:
- fermentatie - O2 – respiratie aerobă
- altă moleculă anorganică – respiratie
anaerobă
-ion nitrat NO3
- ion sulfat SO4
 
Catabolismul glucozei: serii de reactii de oxidoreducere,
în 3 etape: glicoliza, ciclul acizilor tricarboxilici, lantul
transportului de hidrogen

35 36

9
 14/10/2018

REACTII CATABOLICE – REACTII CATABOLICE –

hidratii de carbon hidratii de carbon
 
  RESPIRATIA CELULARĂ
RESPIRATIA CELULARĂ  
respiratie aerobă (resp. oxibiotică; metabolism aerob)
pierde H, electroni - acceptor final este oxigenul molecular
- necesară existenta membranei celulare
donor → acceptor - substratul reducător – NADPH
- enzime
- nicotinice – NAD (nicotin adenin
se oxidează se reduce dinucleotid) si NADP(nicotin adenin dinucleotid fosfat)
37 - flavinice – FMM (flavin mononucleotid)
sau FAD (flavin adenin dinucleotid)
- ferice (citocromi, citocromoxidază,
peroxidază etc).
- sinteza ATP – fosforilare oxidativă
38

REACTII CATABOLICE –
hidratii de carbon

RESPIRATIA CELULARĂ REACTII CATABOLICE –

respiratie anaerobă (respiratie anoxibiotică,
hidratii de carbon
metabolism anaerob) 

- acceptor final este substantă FERMENTATIA
 
anorganică proces de oxido-reducere biologică

(exceptând oxigenul) donorul si acceptorul final sunt compusi organici
- fosforilare la nivelul substratului 
 acidul piruvic convertit, în raport cu specia, la:
- bacteriile nu au enzime respiratorii
(catalază, peroxidază, citocromi) 39 - ac.lactic
- acid acetic
- etanol
- acid butiric etc.
40

10
 14/10/2018

REACTII CATABOLICE – REACTII CATABOLICE –

hidratii de carbon lipide, proteine
 

Clasificarea bacteriilor după tipul respirator
(după potentialul redox al substratului):
 
obligat aerobe energie din oxidarea acizilor grasi,
- exclusiv respiratia aerobă glicerolului, aa – ciclul Krebs

aerobe – facultativ anaerobe
- cale oxidativă si fermentatia

microaerofile
- concentratii reduse de O2

obligat anaerobe - exclusiv fermentatia 41 42

REACTII ANABOLICE REACTII ANABOLICE

 
  
metabolismul de sinteză; asimilare; nutritia după sursele folosite ca material de sinteză:
bacteriană
 1. autotrofe
 reactii de biosinteză a unor componente

celulare cu consum de energie: 2. heterotrofe
- polizaharide- glicoliza si ciclul Krebs 3. paratrofe
- lipide- din glicerol si acizi grasi
- aa si proteine- din catabolismul glucozei,
din mediu
- baze purinice si pirimidinice- din glicoliza si
ciclul Krebs
43 44

11
 14/10/2018

REACTII ANABOLICE REACTII ANABOLICE

 
Bacterii autotrofe Bacterii heterotrofe

 
depind de prezenta unor compusi organici
 
toti compusii organici din materie
 sintetizează folosesc surse
 organice de carbon; surse organice si
anorganică anorganice de N

 
 sunt chimiosintetizante
 folosesc CO2
 ca sursă de carbon; azotul atmosferic ca 
 se disting:
sursă de N - bacterii fixatoare de azot:

  - surse organice de carbon; azot molecular,
pot fi fototrofe sau chimiosintetizante
atmosferic
 - trăiesc în sol în simbioză cu plantele
bacteriisaprofite cu rol în circuitul materiei în
natură - bacterii care folosesc C organic si N din legături
anorganice (amoniu, săruri de amoniu)
- bacterii care folosesc C si N organic
- specii saprofite si potential patogene din 46
cavitătile naturale ale omului
45

- specii patogene pentru om

FACTORI CARE
REACTII ANABOLICE INFLUENTEAZĂ
 METABOLISMUL BACTERIAN
 
Bacterii paratrofe  pH – ul

 energia trebuie oferită de gazdă  
  presiunea osmotică
strict parazite intracelulare; nu se cultivă pe medii
 artificiale  
  temperatura

Rickettsia spp., Mycobacterium
leprae, Chlamydia spp.  
atmosfera de incubare

48
47

12
 14/10/2018

FACTORI CARE FACTORI CARE

INFLUENTEAZĂ INFLUENTEAZĂ
METABOLISMUL BACTERIAN METABOLISMUL BACTERIAN

pH – ul

- asigurat de mediile de cultură bacterii acidofile

- ≈ 7 - 7,5 pH – ul - pH 5 – 5,5

- influentează: tamponat cu - lactobacili

- fosfati bacterii bazofile
- structura tridimensională a - peptone (alcalinofile)
proteinelor, enzimelor metabolismului
- aminoacizi - pH 8,5 – 9
celular - genul Vibrio
- transportul nutrientilor
- transferul de electroni 49 50

FACTORI CARE FACTORI CARE

INFLUENTEAZĂ INFLUENTEAZĂ
METABOLISMUL BACTERIAN METABOLISMUL BACTERIAN

 presiunea osmotică  
 Temperatura
- asigurat de mediul de
cultură/mediul intern 
 bacterii psihrofile : 0-20°C
- mediu izoton 
 bacterii mezofile : 25-45°C
- mediu hipoton  
  bacterii termofile : 50-70°C
peretele celular
  
limitează - Mediu hiperton temperatura optimă: 37°C
pătrunderea apei 
 plasmoliză

micoplasme, bacterii cu  
bacterii halofile NaCl > 2%

perete modificat –
afectate 51 52

13
 14/10/2018

FACTORI CARE
INFLUENTEAZĂ
METABOLISMUL BACTERIAN
 
 atmosfera de incubare

 aer atmosferic

 anaerobioză

 
microaerofilie
 
CO2

53 54

CRESTEREA SI CRESTEREA SI
MULTIPLICAREA MULTIPLICAREA
BACTERIILOR BACTERIILOR
CRESTEREA BACTERIANĂ: MULTIPLICAREA BACTERIANĂ
 
mărirea tuturor componentilor, a volumului unui
 microorganism prin adăugare de substantă nouă diviziune simplă (directă,
 binară, sciziparitate) –
 modalitate frecventă

cresterea volumului celular raportată la cresterea   
suprafetei este mai mare → punct critic
 → diviziune înmugurire / ramificare – la un număr mic de specii
(restabilirea echilibrului) optim

55 56

14
 14/10/2018

Notiuni Notiuni
 

 
1. Inoculare
 1. timp de generatie 

  2. insamantare
2. rata de crestere
  
 3. colonia bacteriana 1. colonii de tip S( smooth)

  
4. cultura bacteriana 2. colonii de tip R(rough)
   
Cultura mixta
  3. colonii M
Cultura pura 
4. colonii untoase

5. colonii pufoase

57 6. fenomen de catarare 58

CRESTEREA SI CRESTEREA SI
MULTIPLICAREA MULTIPLICAREA
BACTERIILOR BACTERIILOR

 DIVIZIUNEA DIRECTĂ
DIVIZIUNEA DIRECTĂ  
  diviziune prin:
scindarea unui individ în 2 celule cresterea
numărului de germeni - formarea septului transversal derivat
 diviziunea precedată de:
 din membrana citoplasmatică
- cresterea cantitătii de ARN - strangularea, îngustarea mediană a celulei
- intensificarea sintezei proteinelor determinată de invaginarea membranei
- dublarea cantitătii citoplasmei si a citoplasmatice, cresterea spre interior prin
materialului nuclear invaginare a peretelui celular
- diviziunea substantei nucleare prin intermediul
mezozomilor 60
- alungirea celulei etc. 59

15
 14/10/2018

Curba de crestere
UNITATE Stationar
FORMATOARE
DE COLONII
Moarte
Log

Lag

TIME
61

16