Noi sperane n prevenia cancerelor ereditare.

Oncogenetica poate salva viei i n Romnia

Prof.univ.dr. Doina Azoici
UNIVERSITATEA DE MEDICINA SI FARMACIE GR.T.POPA
DEPARTAMENTUL DE ONCOGENETICA

Cluj Napoca
31 ianuarie 2015

Cancerul este o boal multifactorial

Factorii de risc in cancer
SPORADIC 2/3
Sporadice multifactoriale : 60 - 85%
Mod de via : 66%
Vrsta
Tabagism
Via reproductiv i hormoni endocrini
Alimentaie: 30-60%
Sedentarism/obezitate: 10-30% ?
Mediu: 2% ?
Stres
Radiaii ionizante
Toxici chimici (aer, ap, alimentaie)
Infecii: 16-25 % (2/3 virus, 1/3 bacterii,
parazii)
Deficiene imunitare

FAMILIAL 1/3
5-10 % predispoziii ereditare
monogenice multifactoriale

10-30 %
susceptibiliti
ereditare
multigenice
multifactoriale
FAMILIALE

Adapted from Yves-Jean Bignon, 2012

Riscul ereditar oncogenetic vs modul de via

Riscul nutriional in cancerul ovarian : de la 1/100 la 1/75 :
crete de 1,3 ori
Riscul ereditar in cancerul ovarian:de la 1/100 la 1/2 :
crete de 50 ori
Riscul ereditar in cancerul la sn: 90% din femei dezvolta boala

FACTORUL EREDITAR DEFINETE

UN RISC DEMONSTRAT A FI IMPORTANT!
1. Vo C, Carney ME Ovarian cancer hormonal and environmental risk effect. Obstet.
Gynecol Clin N Am 2007; 34 : 687-700. ; 2. Mok S.C., Kwong J., Welch W.R. et al.
Etiology and pathogenesis of epithelial ovarian cancer. Dis. Markers 2007; 23 : 367376. 3. Prowse A., Frolov A., Godwin A.K. The genetics of ovarian cancer. In
American Cancer Society Atlas of Clinical Oncology. B.C. Decker Inc., Publisher, 2003.

Cele mai comune sindroame cu risc ereditar:

HBOC (Hereditary Breast and Ovarian Cancer) :

Gene principale implicate: BRCA1, BRCA2

Alte gene posibile: CHEK2, PALB2, ATM, PTEN, RAD51C,
CDH1, STK11 etc
HNPCC (Hereditary Non-Polyposis Colorectal Cancer) :
Gene principale implicate : MMR (DNA mismatch repair genes)
(MSH2 35%, MLH1 25%, MSH6 15%)

PAF (Familial adenomatous polyposis) :

Gene principale implicate : APC

Riscul de a dezvolta un cancer pe durata vieii

asociat mutaiilor BRCA1

Cancer la sn 50%-85% (adesea timpuriu)

Al doilea cancer la sn 40%-60%
Cancer ovarian 20%-40%

ted from Antoniou et al., 2010, Cancer Res

Alte cancere (colon, etc.)

- riscuri variabile -

Riscul de a dezvolta un cancer pe durata vieii

asociat mutaiilor BRCA2

Cancer la sn
(50%-85%)

Cancer ovarian
(10%25%)

Cancer de sn
la brbai (7%)

Cancer de
prostat (14%)

Risc crescut de cancer la prostat,

pancreas, vezic biliar, stomac,
laringe, cap, gt, piele
( frecventa necunoscut)

ted from Antoniou et al., 2010, Cancer Res

Riscul cumulativ de a dezvolta un cancer pe durata

vieii asociat mutaiilor BRCA

Adapted from Antoniou et al., 2003, Am J Hum genet

Oncogenetica
Monitorizarea medical i diagnostic a pacienilor i a familiilor acestora, care
prezint un risc de cancer/tumori, ereditar monogenic (sau cauzat de o gen
mutant de nalt penetran) sau familial.
Debut - anii 90, prin descoperirea genelor majore de predispoziie la cancer.
Centrul Jean Perrin unul din pionierii oncogeneticii n lume.
Eficacitatea oncogeneticii demonstrat n lumea occidental n cazul
pacienilor diagnosticai cu cancer mamar, ovarian, sau de colon.
Prevenie beneficiu major pentru individ/familii si sistemele de sntate.

Oncogenetica poate salva viei la nivelul grupurilor de

pacieni cu risc!

Departamentul de Oncogenetic Organizare

Laborator de Licenta 2009, Departament UMF Iasi , 2013
Un serviciu de cercetare si clinic multidisciplinar nalt specializat;
Sistem bio-informatic Gataca de stocare / comunicare a informa iei
Reea interdisciplinar de medici pentru punerea in practica a PSOP
Program de Supraveghere Oncogenetic Personalizat
Laborator acreditat de diagnostic molecular

Departamentul de Oncogenetic
- activitati : lanul Oncogenetic

Secretariat

CONSULTAIE
ONCOGENETIC

DIAGNOSTIC
MOLECULAR

PACIENT

Psiholog

Grup de Consultan
Pluridisciplinar
(GCP).

CERCETARE

Specialist BioMol

Cine este inclus in supravegherea oncogenetic ?

CARACTERISTICI CLINICE ALE CANCERELOR
CU PREDISPOZIIE EREDITAR
- Mai multe cazuri n aceeai linie familial;
- Vrsta precoce la momentul diagnosticului;
- Cancere multifocale / bilaterale;
- Cancere multiple

Departament oncogenetic
Monitorizarea familiilor (PSOP)
Supraveghere preventiv Cancer mamar (BRCA)
Examinare clinic a snilor la 6-12 luni;
Mamografie/RMN anual ncepnd cu 18 ani.

Supraveghere preventiv Cancer ovarian (OVCA)

Dozarea anual a CA-125 seric ncepnd cu 25 de ani;
Examinare ginecologic la 6 luni, Ultrasonografie transvaginal anual.

Modificarea stilului de via diet, alcool, etc.

Chemoprevenie (BRCA & OVCA)
Tamoxifen, contraceptive orale

Mastectomie profilactic bilateral

Reduce riscul de BRCA cu >90%

Ovariectomie profilactic bilateral

Reduce riscul OVCA cu >95%
La pre-menopauz, reduce riscul de BRCA cu ~ 50%

Departament Oncogeneticdiagnosticul molecular

1. EXTRACIA ADN
2. AMPLIFICAREA PCR A REGIUNILOR DE INTERES
3. PURIFICAREA PRODUILOR PCR
4. SECVENIEREA AMPLICONILOR
5. PURIFICAREA PRODUILOR DE SECVENIERE
6. ELECTROFOREZA CAPILAR
7. INTERPRETAREA REZULTATELOR

Departamentul de Oncogenetic
- diagnostic molecular : dificult i 1.
2.
3.
4.
5.
6.

Gene foarte mari (mii de nucleotide), numeroi exoni

Mii de mutaii diferite deja identificate
Aproximativ 100.000 de nucleotide de citit la un test BRCA
Numeroase polimorfisme benigne la nivelul genelor analizate
Aproximativ 50% din variantele de secven identificate sunt incerte din punct
de vedere patogenic (unclassified variants)
Numeroase situaii de fals-pozitive / fals-negative

Responsabilul diagnostic nalt specializat + sim de rspundere

Cost (aprox. 3000 EUR / test BRCA)
Durat a interpretrii (8-12 luni)
Organizare coerent a fluxului de activiti

DISTRIBUIA MUTAIILOR BRCA N

EUROPA
Europa occidental
Proporie important a mutaiilor unice / familiale
Puine mutaii recurente / cu efect fondator
(Excepie cazuri izolate, Islanda sau evrei Ashkenaze)
Mii de mutaii diferite repertoriate n bazele de date
Secvenierea complet fiind singura metod de diagnostic

Janavicius, 2010

Distribuia mutaiilor BRCA n Europa

Europa Central i de Est
Puine mutaii unice / familiale [Janavicius, 2010]
Cteva zeci de mutaii diferite repertoriate n bazele de date
majoritatea familiilor HBOC sunt datorate ctorva mutaii
recurente / cu efect fondator (mutaii estice):
BRCA1 185delAG, 5382insC, 300T>G, BRCA2 6174delT
Identificate in Polonia ex. 60% mutatii estice in familiile cu HBOC[Gorski et al., 2000],
Slovacia [Ciernikova et al., 2006], Cehia [Machackova et al., 2001], Ungaria [Van der Looij
et al., 2000], Slovenia [Krajk et al., 2008], Belarus [Oszurek et al., 2001], Rusia [Loginova et
al., 2003],Grecia [Kataki et al., 2005], Turcia [Yazici et al., 2000], etc

Prezena mutaiilor cunoscute permite

identificarea lor rapid prin tehnici mai
puin costisitoare(pre-screening mutaional)

Lista mutaiilor identificate n Romnia

Bilan local actual:

[L. Negura et al., Fam Canc, 20

4 mutaii noi (nu exist n bazele de date internaionale)

2 mutaii recurente (c.5266dupC i c.181T>G) si in modelul de tip Estic
3 mutaii ce se gsesc fiecare n cte 2 familii diferite
5 mutaii unice (familiale)
n consecin:
mutaii cunoscute, previzibile : pre-screening justificat
mutaii necunoscute, noi : pre-screening nejustificat secven iere
*Care este adevrata proporie a acestor muta ii n
populaia Romniei?
* Exist mutaii cu efect fondator Romnesc ?

Interpretarea rezultatelor
Diferitele tipuri de secven identificate (secventiere)
VARIANTELE NECLASIFICATE (UV) patogenicitate incert i efect priori
necunoscut (mutaii premature la nivel terminal, alterarea unor aminoacizi
neeseniali, afectarea situsurilor de splicing, delins, substitu ii, etc..) aprox.
50% din variantele BRCA identificate sunt UV !!!

[L. Negura et al., Fam Canc, 2010]

Care este adevrata proporie a acestor variante n

populaia Romniei?
Exist variante tipice locale, Romneti ?

Interpretarea rezultatelor
Diferitele tipuri de secven identificate (secveniere)
POLIMORFISMELE (SNP) COMUNE (substituii)
Cu certitudine nepatogene, prezente n proporie diferit n popula ii
Care este proporia lor n populaia Romniei ?
Care este frecvena lor la pacienii purttori de mutaii ?
Care este frecvena lor la pacieni nepurttori ?
Care este frecvena lor la persoane sntoase sau cu alte patologii ?
Care ar putea fi contribuia lor la modificarea riscului de cancer?
Cum ar putea ele influena riscul de cancer n asociere cu alte polimorfisme
(context polimorfic modificator) ?

Date legate de polimorfisme BRCA au

fost publicate pt modelul Europa
occidentala si nu
exista studii pt Europa
Centrala si de Este
cercetarile de la Iasi
sunt primele din Europa de Est

Polimorfismele (SNP) comune BRCA

rezultate obtinute pana in prezent in cercetarea oncogenetica la Iasi

[L. Negura et al., ICHG 2011

[L.

Negura et al., ICHG 2011

Polimorfisme BRCA definesc haplotipuri BRCA1

Date preliminare - Negura et al.,

ICHG, 2011 raportat la Judkins et
al., 2004

Care este proporia haplotipurilor BRCA1 n populaia

Romniei , comparativ cu alte populaii ?
Care sunt haplotipurile BRCA2 ?
Care sunt mutaiile asociate acestor haplotipuri ?

Datele preliminare arat prezena unor

haplotipuri noi, locale, nedescrise pn acum n
alte populaii.

Alte polimorfisme (SNP) studiate

(10 polimorfisme care nu sunt BRCA)
p53 Codon 72 Arg / Pro, CYP1A1 Ile/Val, CYP1A1 MspI [Matei
et al., 2012]
CYP19A1 c.1531C>T (rs10046), c.1673T>G (rs4646), c.145G>T
(rs727479), c.1673T>G (rs700518) [Miron et al., 2011]
IL-1 A (-889) (rs 1800587), IL1 B (-511) (rs 16944), IL-1 B
(+3954) (rs 1143634), IL-6 (-174) (rs 1800795), TNF (-308) (rs
1800629)

Evaluarea comparativ a frecvenelor

acestor polimorfisme la nivelul unor
esantioane de pacieni / martori

Polimorfisme (SNP) n perspectiv

Modificatori ai riscului de cancer mamar la purttorii de mutaii BRCA
RAD51 135GrC : creste riscul de cancer mamar la purtatori BRCA2
FGFR2 (rs2981582) : creste riscul de cancer mamar la purtatori BRCA2
TNRC9 (rs3803662) : creste riscul de cancer mamar la purtatori BRCA1 &
BRCA2
MAP3K1 (rs889312) : creste riscul de cancer mamar la purtatori BRCA2
Modificatori ai riscului de cancer ovarian la purttorii de mutaii BRCA
rs10088218 (8q24), rs2665390 (3q25), rs717852 (2q31), rs9303542 (17q21),
IRS1 (Insulin Receptor Substrate) rs1801278 (Gly972Arg), IRS1 rs13306465

Evaluarea comparativ a frecvenelor

acestor polimorfisme la nivelul unor loturi
sau esantioane mult mai ample de pacieni/
martori

Concluzii : componenta organizationala

necesiti i soluii
Dezvoltrea oncogeneticii medicale n Romnia; formarea medicilor specialiti
Generarea unei reele nationale conectat cu reelele similare europene
Identificrea i recrutrea grupurilor int de pacieni pentru monitorizare: cancer
de sn i de ovar ereditar (HBOC), cancer colorectal ereditar nepolipozic
(HNPCC), polipoza colic familial (PAF).
Necesitatea analizei prin biologie molecular a factorilor genetici de risc
(BRCA1, BRCA2, MMR)
Identificarea i interpretarea: mutaiilor deletere, polimorfismelor, variantelor cu
patogenicitate incert (unclassified variants UVs).
Necesitatea interpretrii rezultatelor obinute (mutaii, SNP, UV, haplotipuri) prin
studiu epidemiologic extins asupra factorilor de risc pentru cancer n populaia
din Romania.
Necesitatea dezvoltrii Sistemului de Monitorizre Oncogenetica Personalizata a
a persoanelor cu risc i a familiilor acestora.

Concluzii: - componenta molecular nelegerea locului ocupat de factorul ereditar n apariia i dezvoltarea cancerelor
Compararea populaiilor din punct de vedere al: incidenei cancerelor; vrstei mediane la
diagnostic;
Contribuia factorului genetic: proporiei cazurilor datorate mutaiilor; comparri fenotipice
la cancere i tumori cu sau fr mutaii.
Activitatea molecular de laborator const n :
Detecia mutaiilor deletere i elaborarea unui diagnostic molecular de predispoziie
ereditara in cancer (BRCA1, BRCA2, MSH2, MLH1, MSH6, APC).
Detecia altor variante de secven la nivelul acestor gene, stabilirea patogenicitii
probabile prin studii in-silico de predicie funcional.
Detecia unor polimorfisme comune (SNP), posibil implicate n dezvoltarea patologiei
oncologice, acionnd asupra fenotipului patologic, ori ca modificatori de risc la purttorii
de mutaii deletere.
Studiul expresiei genice la nivel tumoral i asocierea profilului de expresie genic cu
variantele de secven i cu contextul polimorfic al pacientului .

Concluzii : - componenta epidemiologic- In prezent - puine informatii cunoscute cu privire la caracterizarea molecular i la particularitile
populaiei din Romania n comparaie cu celelalte ri din Uniunea European.
- Abordarea epidemiologic precizarea contributiei factorilor de risc genetici in populatia Romaniei

Sunt vizate urmtoarele aspecte:

Incidena i vrsta median de diagnostic

Contribuia genetic
Proporia cazurilor familiale datorate mutaiilor
Compararea fenotipic a cancerelor cu sau fr mutaii
Prezena, distribuia, recurena i prevalena mutaiilor fondatoare
Profilul mutaional al populaiei studiate, comparativ cu alte populaii
Distribuia diferitelor polimorfisme la cazuri diagnosticate in
populatie.
nelegerea contextului polimorfic individual ca modificator de risc.

Universitatea de Medicina si Farmacie

Gr.T.Popa Iasi
Departamentul de Oncogenetica
Laboratorul de Epidemiologie Moleculara , etj.3

Grupul de Consultanta Multidisciplinar

Scoala de vara avansata de Oncogenetica
Slanic Moldova 2013

INVITATIE
FORMATION AVANCEE EN ONCOGENETIQUE
NOMBRE DE CANDIDATS : entre 20 et 30 participants
MODALITES PRATIQUES :
Les enseignements sont en franais et en anglais.
Remise de support de cours
Formation sanctionne par une attestation de formation dlivre par la Facult
de Mdecine de lUniversit dAuvergne
RENSEIGNEMENTS ET INSCRIPTION :
Renseignements pdagogiques : Pr Yves-Jean BIGNON E-mail : YvesJean.BIGNON@cjp.fr
Inscription : Fiche dinscription retourner accompagne des pices jointes
lUnit Mixte de Formation Continue en Sant 04 73 17 80 25 E-mail :
umfcs.sante@udamail.fr
CALENDRIER ET LIEU DE LA FORMATION :
Septembre / Octobre 2015. Les enseignements ont lieu lUniversit de Mdecine et de
Pharmacie GR. T. Popa de Iasi, Roumanie. TARIFS : 300 EUROS