CONSIDERAII PRIVIND FOLOSIREA O.M.G.

-URILOR

Autor: KELEMEN ALEXANDRU

2013
Pagina | 1

CUPRINS

INTRODUCEREpag. 3 CAPITOLUL I 1. Ingineria genetic....pag. 5 CAPITOLUL II 2. Ce este un O.M.G?.....pag.10 2.1. Istoria O.M.G. urilor..pag.10 2.2. Etape pentru obinerea O.M.G. urilorpag.13 2.3. Metode pentru transferul genelor..pag.14 2.4. Exemple de O.M.G. uri..pag.16 CAPITOLUL III 3. Aplicaiile O.M.G. urilor.pag.18 3.1. Medicinapag.18 3.2. Cercetarea..pag.20 3.3. Industria.pag.23 3.4. BioArta i divertisment.pag.24 3.5. Agriculturapag.24 3.5.1. Situaia O.M.G. urilor n agricultura mondial..pag.25 3.5.2. Exempe de O.M.G. uri din agricultur...pag.27 CONCLUZII...pag.29 BIBLIOGRAFIEpag.30

Pagina | 2

INTRODUCERE
n anul 2011, la editura Tehnic s-a publicat cartea Lumea pe marginea prpastiei scris de Lester R. Brown, preedintele organizaiei Earth Policy Institute din Washington, D.C. Aa cum sugereaz titlul acestei crti, contextul actual n care se afla omenirea este unul de risc iminent. Din afirmaia precedent decurge necesitatea definirii termenilor de context actual i risc. Contextul actual presupune prelucrarea i mprirea resurselor planetei la o populaie de 7.000.000.000 de suflete omeneti, cifr n continu cretere, care necesit din ce n ce mai mult aer curat, apa potabil i pentru irigaii, hran conform cu cerinele nutriionale, teren pentru locuit i agricultura, etc, n timp ce Pmntul nu poate suferi procese de cretere cantitativ (dei exist i astfel de teori). Riscul care ne pate este tendina tot mai accentuat de dezechilibru, la nivel planetar, alimentat de practici de obinere a resurselor, sub form de produs finit, neeficiente. Subliniez c dezechilibrul se refer i la creterea potenial infinit a necesitilor omului vis--vis de capacitatea limitat a planetei de a i le satisface, fenomen ce ne poate mpinge peste buza prpastiei dac nu sunt luate masurile potrivite. Este uor de dedus c, n asemenea condiii, agricultura joac un rol important pentru omenire, putndu-i fii mum sau cium n funcie de cum alege aceasta s o practice. n prezent, moartea prin inaniie nu este ceva rar ntlnit, acest fenomen fiind un indicator al faptului c agricultura practicat astazi, i modul de valorificare al produciei nu sunt att de eficiente precum am fi tentai s credem, dac lum n calcul faptul c n S.U.A. recoltele de porumb depesc 10 tone/ha [5]. i totui, o producie de porumb (una din cele mai cultivate trei cereale

Pagina | 3

la nivel mondial, alturi de gru i orez) de 10 tone/ha este una uimitoare i d sperane c omenirea poate fi nc salvat. Principalele trei cauze care au condus la creterea productivitii soiurilor de cereale sunt [5]: utilizarea irigailor; folosirea pe scara larg a ngrmnitelor chimice; cultivarea unor soiuri de cereale de mare productivitate. Lucrarea de fa se va ocupa de cea din urm cauz, viznd, aa cum sugereaz i titlul, organismele modificate genetic i impactul acestora n eficientizarea agriculturii. Menionez c am ales porumbul pentru a face legtura dintre contextul actual n care traete omenirea i subiectul acestui referat, O.M.G.-urile, datorit urmtoarelor motive: 1) porumbul este o cereal care i-a sporit productivitatea i prin intermediul ingineriei genetice, fiind, alturi de soia una din principalele resurse alimentare i totodat un O.M.G.; 2) n alimentaia omului i a

animalelor are caracter aproape ubicuitar, neexistnd pe rafturile din supermarketuri aproape nici un aliment care s nu conin porumb sau produse obinute din porumb modificat genetic.

Pagina | 4

CAPITOLUL 1
INGINERIA GENETIC Ingineria genetic reprezint tehnica ce implic transferul unei anumite informaii genetice de la un organism la altul, schimbarea selectiv i intenionat a genelor (materialului genetic) de ctre om [19], cu scopul ca organismul asupra cruia se acioneaz s manifeste proprieti utile omului precum o productivitate mai mare, producia de substane de uz medical, n cantiti relativ mari (ex: hormonul insulin, interferon), rezisten sporit la influena anumitor factori stresori, etc.

Manipularea materialului genetic Cariotipuri sintetice au fost obinute nc din 1963 la specia Bombyx mori. Geneticianul Y. Tamiza semnaleaz la aceast specie o mutant natural caracterizat prin faptul c larvele purttoare femele, prezentau pete pe corp ca efect al translocrii unui segment cromozomal din perechea 2 pe hetertosomul W (ntlnit numai la femele) [11]. Importana acestei descoperiri este n primul rnd una practic deoarece permitea sexarea i eliminarea indivizilor cu o productivitate sczut (femelele). Totui indivizii mutani prezentau unele dezechilibre la nivelul ntregului organism. Din acest motiv Y. Tamiza a obinut cariotipuri sintetice printr-un proces de iradiere al acelor mutante, respectiv indivizi care, n segmentul translocat prezentau doar gena responsabil de ptarea corpului. Tot n acest sens, prin iradiere, s-a reuit transferul unei gene pe cromozomul W al crei efect este culoarea neagr a oulor din care urmeaz s se dezvolte femele [11]. Himerele (chimera or chimaera). Provine de la himer, o creatur mitologic cu cap de leu, corp de capr i coad de arpe. Organism ale crui

Pagina | 5

celule nu sunt toate derivate din acelai zigot. 1. Animal. Individ care manifest dou sau mai multe genotipuri din doi sau mai muli embrioni. Individ derivat din doi embrioni prin intervenie experimental. 2. Plant. Partea unei plante cu o constituie genetic diferit, comparativ cu alte pri ale aceleai plante: poate rezulta din zigoti diferiti, care cresc mpreun sau din fuziune artificial (altoire); poate fi chiar himer periclinal, n care un esut este amplasat deasupra altuia, precum mnua mbrcat pe mn; himer mericlinal, la care esutul extern nu acoper complet esutul intern; himer sectorial, n care esuturile se afl unul lng altul. 3.Molecul ADN recombinat, care conine succesiuni din diferite organisme [19]. Un exemplu de organism himer sunt oarecii alofenici, obinuti din combinarea blastomerelor provenite de la doi embrioni diferii din punct de vedere al informaiei genetice responsabil de culoarea blnii (figura 1) [11]. Etape [11]: - cei doi embrioni, n stadiul de 8 celule, sunt disociai n celulele componente prin intermediul enzimei pronaz; - acestea se amestec i se incubeaz pe un mediu de cultur la 37OC ; - embrionii astfel constituii, n stadiul de 126 260 de celule, sunt reimplantai n uterul unei femele receptor unde se vor dezvolta pn la ftare.

Pagina | 6

Fig. 1. Metoda de obinere a oarecilor alelomorfici (dup Tomia Drgotoiu, 2008)

Pagina | 7

Transferul artificial de gene presupune elementele [11]: enzime care s realizeze scindarea macromoleculei de A.D.N. n diferite puncte, denumite enzime de restricie sau endonucleaze de restricie; enzime care determin adiia de nucleotide la capetele macromoleculei de A.D.N., denumite terminal transferaze; enzime responsabile de realizarea legturilor dintre nucleotidele

complementare, denumite polinucleotid-ligaze; vectori pentru transferul de gene, respectiv plasmide, virusuri cu A.D.N., lipozomi, etc. Plasmidele sunt molecule circulare de A.D.N. care exist n celulele bacteriene i sunt capabile de replicare autonom [19]. Cel mai utilizat virus pentru transferul de gene, este virusul tumoral SV 40. Acesta are o dimensiune de 5248 perechi de nucleotide [11]. Lipozomi sunt picaturi foarte mici de grsime n care se pot include gene, enzime, medicamente, etc [11]. Culturile de celule animale se realizeaz pentru producia de diverse substane cu rol n terapeutic (ex: interferonul). Procesul de obinere al acestor culturi este mai dificil deoarece celula animal are o structur foarte complex i necesit un timp mai ndelungat de incubare, un mediu de cultur bine echilibrat n nutrieni i o temperatur constant de 37OC. n acest sens au fost proiectate bioreactoare speciale care regleaz automat parametrii enumerai mai sus. Tehnica hibridrii celulelor somatice animale s-a pus la punct plecnd de la observaiile fcute de cercettorul francez Georges Baraski n anul 1960. Acesta a cnostatat c, uneori, n culturile de celule animale are loc fuziunea spontan a unora dintre ele [11]. Plecnd de la aceast constatare, Georges Baraski i col. au reuit s obin hibrizi celulari la oarice .
Pagina | 8

n 1962, Y. Okada folosete virusul Sendai, inactivat cu radiaii ultraviolete pentru facilitarea fuziunii celulare (figura 2) [11].

Fig. 2. Hibridarea celulelor somatice cu ajutorul virusului Sendai inactivat (dup Tomia Drgotoiu, 2008)

Pagina | 9

CAPITOLUL 2
CE ESTE UN O.M.G.? Acronimul O.M.G. desemneaz sintagma Organism Modificat Genetic, care poate fi definit ca un organism care, prin inginerie genetic, a suferit una sau mai multe alterri (n sensul de modificri) la nivelul materialului su genetic pentru a-i conferi noi proprieti.

Fig. 3. O.M.G. stilizat (sursa:

http://saltcuantic.wordpress.com/2010/01/10/13-minciuni-despre-organismele-modificate-genetic/)

2.1 . Istoria O.M.G.-urilor Se poate spune c omul a nceput s influeneze genofondurile speciilor de plante i animale cu multe mii de ani n urm, aproximativ 10.000 16.000 ani [10], cnd a trecut de la stadiul de culegtor la cel de cultivator, ns istoria O.M.G.-urilor propiu-zise, obinute prin intermediul ingineriei genetice, i are startul n anul 1970 cnd Gobin Khorana i echipa sa au realizat sinteza unei gene alctuit din 77 de nucleotide de A.D.N. la drojdia de bere [11]. Paul Berg a creat prima molecul de A.D.N. recombinat din virusul tumoral SV40 i bacteriofagul lambda [14]. Primul organism transgenic a fost creat n anul 1973 de Herbert Boyer i Stanley Cohen prin inserarea unor gene care confera rezisten la antibiotic n plasmida unei bacterii E. coli [1].
Pagina | 10

n 1974 a fost creat primul mamifer transgenic de ctre cercettorul Rudolf Jaenisch (figura 4) care a introdus n genomurile unor embrioni de oarice poriuni de A.D.N. strin [21]. oarecii transgenici au manifestat proprieti noi datorate genelor strine.
Fig. 4. Rudolf Jaenisch (sursa: http://wi.mit.edu/about/history/founders)

Urmtorul eveniment important privind O.M.G.-urile a fost nfiinarea primei compani de inginerie genetic de ctre Herbert Boyer i Robert Swanson n anul 1976. Un an mai trziu a fost produs prima protein uman numit somatostatin cu ajutorul unor bacterii E. coli transgenice. Genentech a anunat c a obinut insulin uman prin inginerie genetic n anul 1978 [13]. n anii 70, D.C Arny, C. Upper i Stephen Lindow descoper c bacteriile din specia P. syringae joc rol n creterea rezistenei plantelor la nghe. n anul 1977 identific gena responsabil pentru creterea rezistenei la nghe i reuete s obin o molecul de A.D.N. recombinat care s conin aceast gen. ase ani mai trziu, Advanced Genetic Sciences cere guvernului Statelor Unite ale Americii s aprobe teste n cmp pentru creterea rezistenei la nghe a culturilor cu ajutorul O.M.G.-urilor, ns nceperea acestor experimente este ntrziata de protestatari [4]. n 1987, P. syringae a devenit primul organism modificat genetic eliberat n mediul nconjurtor cnd dou culturi, una de cpuni, iar cealalt de cartof din California au fost stropite cu o soluie care coninea aceast bacterie transgenic, ns activitii au distrus ambele culturi.

Pagina | 11

Prima plant transgenic cultivat pe cmp a fost tutunul rezistent la erbicide, n 1986, n Frana i Statele Unite ale Americii [7]. Prima ar care a comercializat plante transgenice a fost China. Aceasta a produs i comercializat o plant de tutun care avea rezisten mrita la virusuri n anul 1992 [8].

Fig. 5. Tutun modificat genetic (sursa: http://sanatate.bzi.ro/cercetatorii-au-obtinut-anticorpi-impotriva-virusului-hiv-din-tutun-modificat-genetic8449)

n anul 1994, Calgene a obinut aprobarea s comercializeze tomate modificate genetic pentru a i menine prospeimea i aspectul vandabil pentru o perioad mai mare de timp [6]. Tot n anul 1994, organismele modificate genetic au ptruns n Uniunea European sub form de tutun transgenic n vederea mriri rezistenei la erbicide [15]. n 1995, Agenia Pentru Protecia Mediului din S.U.A. i F.D.A. aprob cultivarea cartofului Bt, cartof productor de pescticide. Ritmul dezvoltrii O.M.G-urilor s-a meninut astfel nct n anul 2009 se cultivau pe scar larg 11 specii transgenice n 25 de ri precum: S.U.A, Brazilia, Argentina, India, Canada, China, Paraguay i Africa de Sud [9]. n 2010, cercettorii de la institutul J. Craig Venter au anunat c au creiat primul genom artificial pe care l-au introdus ntr-o celul care nu coninea A.D.N.

Pagina | 12

Bacteria astfel obinut a devenit prima form artificial de via, primind numele de Synthia [12, 18]. 2.2. Etape pentru obinera a O.M.G.-urilor Primul pas este identificarea genei care determin proprietiile pe care dorim s le transferm organismului ce urmeaz a fi modificat genetic. De obicei, aceste gene cresc rezistena la boli, la condiiile de cultur, la pesticide, insecte, erbicide, etc n cazul plantelor, iar n ceea ce privete animalele sunt urmrite genele care mresc producia hormonului de cretere. Alte gene spre care cercettorii i ndreapt atenia sunt cele care codific diferii hormoni cum ar fi insulina. Dup stabilirea poriunilor de A.D.N. care prezint interes, acestea trebuie izolate. Exist diverse metode de izolare a acestor segmente printre care: - utilizarea enzimelor de restricie alturi de electroforeza n gel pentru separarea moleculelor de A.D.N. n funcie de lungimea lor; - reacia P.C.R. (reacia n lan a polimerazei), care permite obinerea rapid a unui numr mare de copi a poriunii de A.D.N. care prezint interes, urmat de izolarea acestora cu ajutorul electroforezei n gel; - sinteza artificial a secvenei A.D.N studiat, dac aceasta este cunoscut dar nu exist nici o copie disponibil. Genele care urmeaz s fie incluse n genotipuri strine trebuie s fie combinate cu alte elemente ajuttoare pentru a se integra corect i a funciona n organismul modificat genetic. Spre exemplu, este necesar indicarea inceputului i sfritului poriunii de A.D.N. care definete gena n cauz cu ajutorul unor regiuni promoter (iniiaz trascripia informaiei genetice) i terminator (are rol n stoparea procesului de transcripie). Un alt element este gena marker selectabil
Pagina | 13

care are rolul de a scoate n eviden organismele M.G.-uri reuite din multitudinea de organisme supuse tehnicilor de inginerie genetic. Markerul selectabil este reprezentat, de obicei, de o gen care d rezisten la un anumit antibiotic, astfel scond n eviden organismele transgenice.

Fig. 6. Porumb transgenic scos n eviden cu ajutorul unui marker selectabil (culoare galben intens) (sursa: http://www.isaaa.org/resources/publications/pocketk/36/default.asp )

n majoritatea cazurilor, ingineria genetic, presupune inserarea genelor dorite la ntmplare n genomul gazd, ns, exist tehnici care permit materialului genetic transferat s se insere n locuri specifice la nivelul genotipului gazd.

2.3.

Metode pentru transferul genelor Dup cum se poate observa n figura 7, exist diverse metode prin care

genele dorite pot fi mutate din genomul unui individ n genomul altui individ. a) Hibridarea convenional este cunoscut relativ de mult timp omului, fiind utilizat nc din antichitate ntr-un mod foarte simplu. Varianta prezentat schematic n figura 7 este mai complex dect un simplu amestec de gene i presupune urmtoarele etape:

Pagina | 14

Fig. 7. Comparaie ntre hibridarea convenional cu transgeneza i cisgeneza (sursa: http://en.wikipedia.org/wiki/Genetic_engineering)

- identificarea unei rude salbatice a organismului int. Ruda salbatic trebuie s fie compatibil din punctul de vedere al reproduciei cu organismul int; - dup o prim ncruciare a indivizilor din cele dou populaii ncep o serie de ncruciri de tip back-cross. ncruciarea de tip back-cross presupune ncruciarea organismului hibrid cu un organism care face parte din una dintre cele dou forme parentale; - ncruciri back-cross repetate pn cnd se obine un individ care difer de forma parental a organismului int doar prin prezena genelor vizate, care n mod normal sunt caracteristice rudei salbatice.

Pagina | 15

b) Transgeneza prezint urmtoarele etape generale: - identificarea unui organism nenrudit cu organismul int, dar care manifest caractere utile omului, determinate de prezena anumitor gene; - izolarea genelor care prezint interes; - transferul genelor dorite n plasmida unei bacterii, ale crei gene suplimentare, dar utile, faciliteaz procesului de inginerie genetic; - transferul materialului genetic astfel preparat n organismul int. c) Cisgeneza reprezint o combinaie a celor dou metode explicate mai sus n sensul c utilizeaz o rud ndeprtat a organismului int i metode de inginerie genetic propriu-zis: - identificarea rudei salbatice; - izolarea genelor dorite; - ncorporarea genelor n plasmida unei bacterii; - transferul propriu-zis al materialului genetic n organismul int.

2.4.

Exemple de O.M.G.-uri

Petele zebr fosforescent Este primul organism transgenic care a fost acceptat ca animal de companie. A fost obinut prin ncorporarea unor gene strine n genomul cunoscutului pete Zebra, nainte de eclozarea icrei. Genele aparin unor vieti marine care eman
Fig. 8. Primul animal OMG crescut ca animal de companie (sursa: http://www.bihon.ro/special/animale/articol/organismemodificate-genetic-duse-la-extrem/cn/news-20080404-09071279)

Pagina | 16

lumin. S-au obinut astfel zebre roii i verzi care n timpul zilei absorb lumina, iar noaptea devin fosforescente. Au fost create iniial pentru a fi folosite drept sistem de avertizare n cazul polurii, dar cu timpul au ptruns pe piaa petilor de acvariu. Trandafirul albastru Trandafirul albastru este rezultatul a 30 de ani de cercetri ale companiei australiene Florigene i companiei japoneze Suntory. Acesta a aprut n 2004 i este un O.M.G. celebru. Pigmentul care i confer culoarea, a fost obinut dup ce s-au adugat dou gene i i s-a modificat determinismul unei a treia.
Fig. 9. Trandafirul albastru (sursa: http://en.wikipedia.org/wiki/Blue_rose#Genetically_engineered_roses )

oaricele ciripitor Acest oarice a fost creat prin intermediul ingineriei genetice cu scopul de a studia modul cum a aprut limbajul uman. De aceea, acest oarice, n loc s chiie, ciripete. Roztoarea a fost obinut dup mperecheri generaii.
Fig. 10. oarice modificat genetic pentru a ciripi (sursa: http://www.ziare.com/magazin/incredibil/soarece-modificat-ge netic-care-ciripeste-precum-o-pasare-video-1064323)

succesive

ntre

oareci

modificai genetic, timp de mai multe

Pagina | 17

CAPITOLUL 3
APLICAIILE O.M.G.-urilor Organismele modificate genetic au aplicaii n domenii diverse precum: Medicin; Cercetare; Industrie; Agricultur, etc.

3.1.

Medicina

Pentru medicin au fost create o serie de organisme transgenice utilizate pentru producerea n cantiti mari a insulinei (figura 11), hormonului uman de cretere, hormonului mpotriva fertilitii, albuminei umane, anticorpilor mononucleari, factorilor antihemofilici, vaccinurilor i multe alte substane terapeutice [2]. n cazul vaccinrii, pn n prezent, oamenii erau imunizai cu ajutorul unor vaccinuri care conin tulpini virale atenuate, moarte, inactivate sau toxine produse de aceste virusuri. Actualmente, se dorete obinerea unor vaccinuri din virusuri modificate genetic care i-au pstrat capacitatea de imunizare, dar din al cror genom a fost deletat secvena responsabil pentru inducerea bolii. Organisme modificate genetic sunt obinute pentru a fi folosite ca modele animale n studiul bolilor umane. Cele mai comune animale modificate genetic n acest sens sunt oaricii. Acetia au fost utilizai n studiul cancerului, obezitii, bolilor cardiace, diabetului, dependenei de droguri, anxietii, mbtrnirii i afeciunii Parkinson. Deasemenea, n cercetarea medical sunt folosii cu succes i

Pagina | 18

Fig.11. Etapele de obinere a bacteriilor productoare de insulin uman (sursa:

http://www.bbc.co.uk/bitesize/standard/biology/biotechnology/reprogramming_microbes/revision/2/ )

Pagina | 19

porcii modificai genetic n vederea transplantului de organe de la acetia la om. Marele avantaj al folosirii modelelor animale n studiile medicale, este posibilitatea testrii potenialelor tratamente fr riscuri foarte mari pentru subiecii umani. i oamenii au fost direct implicai n procese de inginerie genetic prin nlocuirea genelor umane nefuncionale cu copi funcionale ale acestora. Acest proces poate avea loc att n celulele somatice ct i n cele haploide (caz n care modificrile materialului genetic pot fi transmise descendenei). Aceast terpie cu gene a fost folosit pentru tratarea deficienelor de imunitate i au loc studii pentru tratarea afeciunilor genetice. Totui, acest tip de terapie nu a nregistrat succese majore pn n prezent, iar dezvoltarea acesteia este frnat de aspectele de etic pe care le ridic. Se pune problema dac aceast tehnologie, odat devenit posibil, ar trebui folosit pentru obinerea de oameni transgenici, adic oameni proiectai s arate ntr-un anumit fel, s aib o inteligen crescut, un comportament predeterminat, etc. n evaluarea acestei probleme etice se constat dificulti reale n trasarea unei linii de distincie clar ntre mbuntirea indivizilor umani prin inginerie genetic i mult mai acceptata idee de tratare a acestora prin terapia cu gene [3].

3.2.

Cerecetarea

Ingineria genetic este unul dintre cele mai importante mijloace de studiu, mai ales, n domeniul geneticii, pe care cercettorii l au la dispozitie. Spre exemplu, informaia genetic, indiferent de proveniena ei, poate fi izolat, stocat i modificat n bacteriile transgenice. Aceste bacterii pot fi cultivate, multiplicate cu rapiditate i depozitate cu uurin pentru o perioad de timp aproape nelimitat. Cercettorii modific genetic anumite organisme cu scopul de a descoperii funciile anumitor gene. Astfel se poate afla ce efect fenotipic determin acea gen,
Pagina | 20

i se pot stabilii relaiile acesteia cu alte gene. Aceste experimente presupun pierderea unor funcii, amplificarea unor funcii, experimente de urmrire i experimente de expresie a genelor. Experimente de tipul pierderea funciior: n acest tip de experiment, organismele sunt modificate genetic astfel nct, activitatea uneia sau unor gene din genom s fie reprimat. Un astfel de experiment presupune asamblarea unei molecule A.D.N. in vitro care nu este altceva dect o copie a genei dorite, dar care a fost modificat astfel nct s fie nefuncional. Celulele stem embrionare care conin genele alterate sunt injectate n blastocite, care la rndul lor sunt implantate n mame surogat. Produii de concepie obinui n urma acestor experimente prezint defectele fenotipice datorate mutaiilor induse i astfel dau indicii despre rolul genelor implicate. Experimente de tip amplificarea unor funcii: acestea pot fi definite ca fiind opusul experimentelor de tipul pierderea unor funcii. Prin urmare, ele presupun amplificarea funciilor unor gene. Etapele sunt aceleai ca i cele din cazul anterior, cu excepia faptului c cercettorul obine efectul de amplificare a funciilor unei gene prin inserarea unui numr de copi ale genei respective n genom, ori prin mrirea frecvenei cu care proteina determinat de gena respectiv este sintetizat. Experimentele de urmrire: au ca scop obinerea de informaii privind localizarea i interaciunea proteinelor n cauz. Aceasta se poate obine prin nlocuirea genei slbatice cu o poriune de material genetic obinut prin fuzionarea genei respective cu un element indiciu, cum ar fi proteina verde fosforescent (GFP), care permite identificarea uoar a organismelor modificate genetic. Dei aceast tehnic este una util, ea prezint riscul alterrii funciei genei implicate putnd crea efecte secundare care pun sub semnul ntrebrii rezultatele experimentelor. n prezent, sunt dezvoltate tehnici mai sofisticate de identificare,

Pagina | 21

cum ar fi ataarea unor elemente de foarte mici dimensiuni care permit legarea proteinelor de anticorpi monoclonali.

Fig.12. Celule umane n care unele proteine sunt fuzionate cu GFP pentru a fi scoase n eviden (sursa:

http://en.wikipedia.org/wiki/Genetic_engineering)

Experimentele de expresie a genelor: urmresc s descopere unde i cnd anumite proteine specifice sunt produse. n acest tip de experimente este necesar izolarea secvenei de A.D.N. promotor care precede gena implicat propriu-zis n sinteza proteinei, i reintroducerea acesteia ntr-un alt organism al crui genotip a fost modificat prin nlocuirea genei implicate n sinteza proteinei cu o gen indiciu (GFP, enzime care catalizeaz anumite reacii).

Pagina | 22

3.3.

Industria

Utiliznd tehnicile de inginerie genetic s-a reuit transformarea anumitor microorganisme, precum bacteriile i drojdiile, care conineau gene ce codificau anumite proteine utile (ex: enzime), astfel nct acestea s produc n exces proteina respectiv. n prezent, se pot produce cantiti uriae de astfel de produse prin cultivarea acestor organisme modificate n bioreactoare [17] de fermentaie industriale (figura13). n acest scop se pot folosii, pe lng celulele bacteriene i drojdii, celule de insecte sau mamifere. n urma acestor tehnologii s-au obinut produse precum hormoni, aminoacizi, produse utilizate n industria alimentar sau combustibili. O alt aplicaie a O.M.G urilor n industrie, este folosirea bacteriilor modificate, spre exemplu, n neutralizarea anumitor deeuri toxice.

Fig.13. Schema general a unui bioreactor industrial (sursa:

http://en.wikipedia.org/wiki/Bioreactor)

Pagina | 23

3.4.

BioArta i divertisment

i n acest domeniu ingineria genetic a produs inovaii. Spre exemplu, s-au produs bacterii modificate genetic cu ajutorul crora au fost obinute fotografii (figura 14). Tot aici pot fi ncadrate i primele dou exemple de O.M.G. uri prezentate n capitolul anterior (petii zebr i trandafirul albastru).

Fig.14. Fotografi vii realizate cu ajutorul bacteriilor (sursa:

http://www.utexas.edu/features/2005/bacteria/index.html)

3.5.

Agricultura

Se poate afirma c agricultura este domeniul care a beneficiat cel mai mult de pe urma ingineriei genetice. Bineneles c tot n acest domeniu sunt i cele mai aprinse controverse cu referire la etic, sntate uman i risc pentru mediu nconjurtor. Viteza dezvoltrii O.M.G. urilor care sunt utile agriculturii este mare, iar principalele scopuri vizate de aceste tehnologii sunt urmtoarele [20]: crearea unor organisme modificate genetic (importante pentru agricultur) care s aib o rezisten sporit fa de capriciile climei, duntori, erbicide, anumii fungi patogeni, sau chiar virusuri; Un alt motiv pentru aplicarea tehnologiilor de inginerie genetic n agricultur este mbuntirea diferiilor parametrii de calitate ai produselor realizate sau obinerea unui spor semnificativ al productivitii organismului

Pagina | 24

vizat. n acest sens pot fi date spre exemplu urmtoarele dou organisme transgenice: ~ Vacile de lapte modificate genetic n scopul producerii unei cantiti mai mari de protein n lapte, pentru facilitarea produciei de brnz [22]; ~ Soia modificat genetic pentru sporirea produciei de ulei; Agricultura bazat pe organisme transgenice presupune i modificarea genetic a unor indivizi cu scopul producerii unor substane utile, pe care n mod normal, organismele nu le produc. Caprele i, din nou, vacile, au fost modificate genetic pentru a produce n laptele lor diverse medicamente sau proteine [16]. n 2009, F.D.A a aprobat folosirea unui medicament produs n laptele de vac; Nu n ultimul rnd, ingineria genetic, asigur creterea productivitii organismelor exploatate n agricultur prin sporirea ritmului de cretere, a vigurozitii i a toleranei la diveri factori. 3.5.1. Situaia O.M.G. urilor n agicultura mondial Urmrind graficul 1 se poate observa tendina de cretere tot mai rapid a ariilor pe care se cultiv organisme transgenice. n S.U.A. spre exemplu, n urm cu 3 ani (anul 2010) 93% din producia de soia, 93% din producia de bumbac, 86% din producia porumb i 96% din producia de sfecl de zahr era realizat de soiuri modificate genetic [23]. n 2011, suprafaa folosit n acest scop a ajuns la 1,6 milioane de kilometri ptrai. Avnd n vedere datele de mai sus, nu e de mirare faptul c The Grocery Manufactures of America a estimat, n anul 2003, c 70 75% din toate alimentele din America conin ingrediente M.G. [23].

Pagina | 25

Graficul 1. Suprafaa cultivat cu O.M.G. uri pe ri (1996 2009) n milioane hectare (sursa: http://en.wikipedia.org/wiki/File:Gmo_acreage_world_2009.PNG )

n Europa situaia este diferit, n sensul c, cultivarea de organisme transgenice este mai slab raspndit, fiind un subiect sensibil. Spania este o excepie, o cincime din producia de porumb din aceast ar provine din porumb M.G [23].

Pagina | 26

Tabel. 1. Situaia cultivrii suprafeelor agricole cu O.M.G. uri [24; 25]

SUPRAFAA CULTIVAT CU O.M.G

ARA S.U.A. Canada Brazilia Spania Portugalia Romnia India China Pakistan Egipt Africa de Sud Australia 66.8 8.8 25.4 0.1 0.1 0.1 9.4 3.5 2.4 0.1 2.2 0.7

(milioane hectare)

PLANTE CULTIVATE 69.0 10.4 30.3 0.1 0.1 0.1 10.6 3.9 2.6 0.1 2.3 0.7
Soia, bumbac, porumb, canola, lucern, sfecl de zahar, etc Bumbac, soia, canola Soia, porumb, bumbac Porumb Porumb Porumb Bumbac Bumbac, tomate, piper dulce, etc Bumbac Porumb Soia, porumb, bumbac, etc Bumbac, canola

Anul 2010

Anul 2011

3.5.2. Exemple de O.M.G. uri din agricultur [23] LUCERNA: prezint rezisten la erbicide pe baz de glicofosfat sau glufosinat; noul caracter se datoreaz unor gene transferate n genomul plantei; CANOLA i RAPIA: prezint rezisten la erbicide pe baza de glicofosfat sau glufosinat, iar canola produce acid Oleic; noile caractere se datoreaz unor gene transferate n genomul plantei; PORUMB: prezint rezistenta la erbicide pe baza de glicofosfat sau glufosinat, la insecte (produce Bt, proteine folosite n trecut n compoziia pesticidele destinate culturilor organice); caracterele provin de la anumite

Pagina | 27

gene caracteristice bacteriei Bacillus thuringiensis, transferate n genomul plantei; BUMBAC: caracterul adugat este reprezentat de capacitatea bumbacului de a distruge insectele duntoare; aceasta datorit transferului unor gene care determin sinteza de proteine Bt cristaline; CARTOF: caracterele induse cartofului M.G. sunt rezistena la: gndacul de Colorado, dou virusuri i un antibiotic folosit n selecie alturi de modificri ce vizeaz o mai bun producie de amidon; caracterele au fost dobndite prin gene transferate de la bacterii sau modificri ale materialului genetic deja prezent n genomul cartofului; OREZUL: a fost modificat genetic pentru a produce -caroten; acest tip de orez a fost obinut prin transferul de gene de la porumb sau microorganisme comune care triesc n sol; SOIA: modificat genetic n direcia creterii rezistenei la erbicide, producerii unei proporii mai mici de acizi grai nesaturai i distrugerii insectelor duntoare; creterea rezistenei la erbicide s-a obinut prin transferul de gene bacteriene n genomul plantei; scderea proporiei de acizi grai saturai s-a obinut prin anularea efectului genelor care catalizeaz saturarea; SFECLA DE ZAHR: idem lucern; TOMATE: n cazul acestor plante s-a indus suprimarea enzimei poligalacturonaza (PG) care avea rolul de a produce nmuierea fructelor dup cules; pentru a se obine acest deziderat s-a introdus n genomul plantei o gen antisens a genei responsabil de producerea PG; GRUL: idem lucern.

Pagina | 28

CONCLUZII

1. Lumea se afl ntr-o situaie de dezechilibru, iar ingineria genetic reprezint un aspect care, n acest context, poate fi pozitiv sau negativ; 2. Obinerea O.M.G. urilor presupune folosirea unor tehnologii complexe de inginerie genetic;

3. Istoria O.M.G. urilor autentice (presupun folosirea unor tehnologii de inginerie genetic) este relativ scurt i din acest motiv sunt necesare studii cu privire la impactul lor asupra mediului n continuare; 4. O.M.G. urile sunt utilizate n foarte multe domenii, pe scara foarte larg;

5. Agricultura este unul dintre cele mai sensibile domenii n care O.M.G. urile sunt utilizate intens.

Pagina | 29

BIBLIOGRAFIE 1. Arnold, P., - History of Genetics: Genetic Engineering Timelain,

www.bringhthub.com/ science/ genetcs/ artcles/ 21983.aspx; 2. Avise, J., C., 2004 The hope, hype & reality of genetic engineering: remarkable stories from agricultur, industry, medicine and enviorement. Ed. Oxford University Press; 3. Bergeson, Emilie, R., 1997 The Ethics of Gene Therapy, www.ndsu.edu/ pubweb/ ~mcclean/ plastic431/ students/ Bergeson.htm; 4. Bratspies, Rebecca, 2007 Some Thougts on the American Aproach to Regulating Genetically Modified Organisms. Kansas Journal of Low and Public Policy, www.nationalaglowcenter.org/ assets/ bibarticles/ bratspies _ some.pdf; 5. Brown, L., R., 2011 Lumea pe marginea prapastiei: Cum sa prevenim colapsul ecologic si economic. Ed. Tehnica, Bucuresti; 6. Bruening, G., Lyons, J., M., 2000 The case of the FLAVAR SAVR tomato. California Agriculture 54(4) 6-7, California.

http://ucanr.org/repositori/CAO/landingpage.cfm?article=ca.v054n04p6fullt ext=yes;

Pagina | 30

7. Clive, J., 1996 Global Review of the Field Testing and Comercialization of Transgenic plants: 1986 1995. The International Service for the Acquisition of Agri-biotech Aplications. Retrieved 17 Julay 2010. www.isaaa.org/kc/Publications/pdfs/isaaabriefs/Briefs.1.pdf;

8. Clive, J., 1997 - Global Stasus of Transgenic Crops in 1997. ISAA Briefs No. 5:31. www.isaaa.org/resources/publications/briefs/05/download/isaaabriefs-05-1997.pdf;

9. Clive, J., 2010 - Global status of Comercialized Biotech/GM Crops: 2009. ISAAA Brief 41-2009, 23 February 2010, Retrieved 10 Agugust 2010.http://www.isaaa.org/resources/publications/briefs/41/executivesumma ry/default.asp; 10.Dinu. D., I., 1996 Animalele i omenirea. Ed. Tehnic Agricol, Bucureti; 11.Drgotoiu, Tomia, 2008 Genetic animal. Ed. Elisavaros, Bucureti;

12.Gibson, D., et all, 2010 - Creation of a Bacterial Cell Controled by a chemically Sinthesized Genome. Science 329 (5987): 52-56.;

13.Goeddel, D., V., et all, 1978 - Expression in E. coli of Chemically sinthesized genes for human insulin. Prac. Nat. Acad. Sci. USA, Vol. 76, No. 1, pp. 106 - 110, Biochemistry. www.pnas.org/content/76/1/106.full.pdf;

Pagina | 31

14.Jackson, A., D., Symons, R., H., Berg, P., 1972 - Biochemical Method for Inserting New Genetic Information into DNA of Simian Virus 40: Circular SV40 Molecules Containing Lambde Phage Genes and Galactose Operon of Escherichia coli. Prac. Nat. Acad. Sci. USA, Vol. 69, No. 10, pp. 2904 2909. www.ncbi.nlm.nih.gav/pmc/articles/PMC389671/pdf/pmas00088-0154.pdf;

15.MacKenzie, Debora, 1994 - Transgenic tabacco is European first . http://www.newscientist.com/article/mg14219301.100-transgenic-tobacco-iseuropean-first.html;

16.Marvier, Michelle, 2008 - Pharmaceutical crops in California, benefits and risks. A reviw. Argon. Sustain. Dev: 28: 1-9: 10. 1051/argo: 2007050. http://www.agronomy-journal.org/index.php?option=com_article&access=doi &doi= 10.1051/agro:2007050&Itemid=129; 17.Pana, C., O., 2000 - Biotehnologii n nutriia i alimentaia animalelor. Ed. Coral Sanivet, Bucureti;

18.Sample,

I.,

2010

Craig

Venter

creates

synthetic

life

form.

www.londonguardian.co.uk/science/2010/may/20/craig-venter-synthetic-lifeform; 19.Scorpan, V., Lozan, Angela, 2005 - Dicionar de termeni biotehnologici, Ed. Chiinu, Chiinu;

20.Suszkin, J., 1999 - Tifton Georgia: A Peanut Pest Showdown. Agricultural Reserch Magazine;
Pagina | 32

21.Travis, A., Miller, Michelle, 2008 - Transgenic Animals: An Interactiv Qualifying Project Report Submitted to the Faculty of Worcester Polytehnic Institute. www.wpi.edu/Pubs/E-project/Available/e-project-083108021836/unrestricted/IQPfinal.pdf;

22.Whitman, Deborah, B., 2000 - Genetically Modified Foods: Harmful or Helpful. http://www.csa.com/discoveryguides/gmfood/overview.php; 23.*** http://en.wikipedia.org/wiki/Genetically_modified_crops; 24.*** http://chartsbin.com/view/578; 25.*** http://chartsbin.com/view/9193.

Pagina | 33