Recoltarea singelui venos pentru principalele examene hematologice de laborator. Interpretarea rezultatelor.

Examene hematologice: VSH, hemoglobina, hematocrit, globule rosii, reticulocite, trombocite, globule albe, leucograma; timp de protrombina si indice Quick, timp de coagulare, timpul de singerare, timpul de tromboplastina activata. Indicatii: - examene de laborator hematologice - efectuarea probei de compatibilitate - donarea de singe - flebotomie Materiale necesare: - seringa de 2 ml - solutie citrat de sodiu 3,8% - stativ si pipeta Westerngren - eprubete - Monovette pt VSH cu ac incorporat, functionind cu piston de aspiratie sau cu vid - ace pentru punctia venoasa -ac epicranian (ac cu bizou scurt, lungime de 2-3cm, diametru 0,8-1,6mm) - material dezinfectant pentru tegumente alcool, tinctura de iod - tampoane - garou - leucoplast, comprese, manusi (sterile), vata - tavita renala, cimp steril, musama Etape si timpi de executie: 1.Pregatirea fizica si psihica a pacientului: - informarea pacientului cu 24 ore inainte asupra necesitatii recoltarii si a scopului acesteia - se recomanda pacientului sa nu manince inaintea recoltarii 2. Pregatirea materialelor necesare 3. Tehnica recoltarii - spalare pe miini - se aspira in seringa 0,4ml citrat de sodiu 3,8% - stabilirea locului de punctie pentru a usura evidentierea venei se deschide si se inchide pumnul de citeva ori, se palpeaza vena, se pozitioneaza mina in jos, se tapoteaza traiectul venos. La nevoie se poate introduce mina in apa calda in scopul dilatarii venelor slab vizibile. - aplicarea garoului- garoul se aplic cu 10 cm deasupra regiunii la nivelul creia urmeaz s se fac punctia venoasa - se antiseptizeaz tegumentele regiunii alese, prin micri circulare, din centru spre periferie. n cazul utilizrii soluiilor alcoolice se ateapt 30 sec pentru exercitarea efectului antiseptic. - se aspira 2 ml de singe - se retrage acul si se aplica tamponul cu alcool 4. Pregatirea produsului pentru laborator

- etichetarea eprubetei - transportul probelor biologice la laborator 5. Reorganizarea locului de munca VSH ( Viteza de sedimentare a hematiilor) - test nespecific pentru aprecierea prezentei si evolutiei procesului inflamator - Principiu: agregarea si sedimentarea eritrocitelor se realizeaza cu o anumita viteza care poate fi masurata la diferite intervale de timp - Cel mai frecvent se utilizeaza metoda Westergren citirea valorii VSH la 1 si 2 ore cu ajutorul unor eprubete gradate plasate vertical. Sedimentarea eritrocitelor se realizeaza in 3 etape: o In primele minute se formeaza agregate eritrocitare o In prima ora sedimenteaza rapid si masiv, dupa care se citeste prima valoare o In a doua ora sedimentarea se face lent, dupa care se citeste a doua valoare o La terminarea sedimentarii se disting trei straturi: plasma cu trombocite in partea superioara a tubului, stratul leucocitar, coloana de eritrocite inferior. Recoltare: se recolteaza singe venos in seringa de 2 ml care se amesteca prin rasturnari succesive cu 0,4 ml solutie de citrat de sodiu 3,8%. Se mai poate recolta cu VSH Monovette cu piston de aspiratie sau cu aspiratie cu vid. - Valori normale Barbat Femeie Sugari si copii mici Valori patologice : o Crescute: Infectii, tuberculoza, RAA Neoplazii Boli autoimune Infarct miocardic acut Leucemii Anemii Ultimile luni de sarcina 1 ora: 3-8 mm 2 ore: 5 18 mm 1 ora: 6 11 mm 2 ore: 6 20 mm 9 12 mm Anticonceptionale o Scazute: Hepatita epidemica Alergii Afectiuni ce evolueaza cu poliglobulie: BPOC, CPC, malformatii cardiace congenitale

Stratificarea in urma sedimentarii Plasma cu trombocite = inaltimea coloanei. Valoarea se citeste unde coloana de eritrocite este densa: Culoare normala: usor tulbure, roz/ galbui Continut crescut de lipide: tulbure/laptos Hemoliza: rosu/ maro Anemie: culoare deschisa Trombocitoza: tulbure Trombopenie: transparent

Stratul leucocitar Coloana de eritrocite Concentatie crescuta de Hb: rosu deschis Intoxicatie cu CO: visiniu

Hemoglobina Valori normale: - Barbati: 14 17 g% - Femei: 12 15 g% - Nou- nascuti: 25 16 g% - Sugari: 16 12 g% - Copii: 12 14 g% Globule rosii ( Eritrocite ) Valori normale: - Barbati: 4,7 milioane 500000/ mm3 - Femei: 4,2 milioane 500000/mm3 - Nou- nascuti: 5,5 milioane 1 milion/mm3 - Copii: 4,7 milioane 500000/ mm3 Reticulocite Valori normale: 0,5-1,5 %

Hematocrit Valori normale: - Barbati: 46 5% - Femei: 41 5% - Nou- nascuti: 54 10% - Sugari: 35 5% - Copii: 38 5% Indicii eritrocitari normali: Volum mediu eritocitar (VEM) = 85-95 3 Hemoglobin eritrocitar medie (HEM) = 27-32 pg/GR Concentraia de Hb eritrocitar medie (CHEM) = 32 - 34 g Hb % Reticulocite = 0,5-1,5 % Raport GR/GA = 500-1.000/1

Interpretare Globule rosii >6 milioane/ mm3 poliglobulie: boala Vaquez ( poliglobulia esentiala) secundara: hipoxie cronica ( BPOC, malformatii cardiace congenitale, viata la altitudine ridicata), anomalii ale hemoglobinei pseudopoliglobulie: deshidratare Anemie: Hb < 12 g% - i < 14 g% - Globule albe, leucograma Valori nomale: - adult 4 000-10 000/mm3 - sugar 8000 12000/mm3 - nou nascut: 12000 20000/mm3 Tipuri de leucocite: - Granulocite (60 % GA) prezint diverse incluziuni citoplasmatice (granule conintoare de histamin, serotonin, kinine) care le difereniaz n: Eozinofile (1-5 %); Bazofile (1%); Neutrofile (polimorfonucleare segmentate, adulte: 55%); Nesegmentate (< 1%); -Agranulocite/ leucocite mononucleate (40%): Limfocite (30 %); Mononucleare (5%); n esuturi specifice, monocitele devin macrofage. Leucograma ( formula leucocitara) Nr. Leucocite/mm3 Neutrofile nesegmentate Neutrofile segmentate Eozinofile Bazofile Limfocite Monocite Nou nascut 1500030000 1-5% 30 -70% 2-5% 0-1% 20-40% 2-8% Sugar 900015000 1-5% 25-30% 7% 1% 50-70% 6-8% Copil( 6 ani) 4000- 10000 5% 30-60% 4% 1% 30-60% 4-8% Adult 40009000 1-4% 50- 70% 1-4% 0-1% 20-40% 4-8% Val absolute adult 0 300 2500 6000 50 300 0 80 1200 2400 240 - 600

Leucocitoza reprezinta cresterea numarului total de leucocite peste 10000/mm3: - fiziologica: efort muscular intens si prelungit, hemoconcentratie, recoltare postprandiala - patologica: infectii, afectiuni inflamatorii

Reactia leucemoida reprezinta cresterea importanta a numarului de leucocite, tabloul hematologic sugerind leucemia, dar neexistind aceasta afectiune. Leucopenia: reprezinta scaderea numarului total de leucocite sub 3500/mm3: - fiziologica: batrini, surmenaj fizic - patologica: tratament cu citostatice, radioterapie, infectii virale, utilizarea indelungata de antibiotice, boli autoimune, ciroza hepatica Trombocite Valoare normala: 150000 350000/mm3 Recoltare: - 1,6ml singe venos pe 0,4ml solutie de citrat de sodiu 3,8% - 4 ml singe venos pe EDTA principiu: EDTA Na 2 determina liza hematiilor si impiedica aglutinarea trombocitelor Trombocitopenia reprezinta scaderea numarului de trombocite sub 100000/mm3: - purpura trombotica trombocitopenica - coagularea intravasculara diseminata - medicamente: chimioterapia, chinidina, diuretice tiazidice, heparina - alcool - boli autoimmune - afectiuni hepatice - leucemii Trombocitopeniile cu scaderea numarului sub 50000/mm 3 sint considerate severe cu risc important de hemoragie. Pseudotrombocitopenia este determinate de agregarea secundara contactului trombocitelor cu EDTA ( 0,3% cazuri). Trombocitoza reprezinta cresterea numarului de trombocite peste 350000/mm3: - primara - secundara: hemoragii, deficit de fier, interventii chirurgicale, splenectomie(tranzitorie), neoplazii, afectiuni inflamatorii cronice, convalescenta dupa boli infectioase. Timp de protrombina si indice Quick Timpul de protrombina (timpul Quick) exploreaza factorii II, V, VI, X ( complex protrombinic). Necesita recoltarea a 4 ml singe pe EDTA. Valori normale: 10 15. Indicele de protrombina ( IQ) IQ= (TQmartor/ TQ bolnav ) x 100 = 75 100% Test Koller consta in determinarea TQ dupa administrarea de vitamina K la un pacient cu TQ alungit. Valori patologice: - scaderea TQ anomalii ale absorbtiei si utilizarii vitaminei K - alungirea TQ afectiuni hepatice, supradozaj de anticoagulante, anomalii ale complexului protrombinic TQ si IQ sint utilizati: - ca examen preoperator, pentru evaluarea riscului hemoragic

urmarirea medicatiei anticoagulante ( Trombostop, Sintrom) utilizate in tratamentul tromboflebitelor, tromboemboliei, infarctului miocardic si la pacientii cu proteze valvulare cardiace. Tinta terpeutica este un IQ 25 35%. ( TP 1,5 x N).

Timp de coagulare

Timpul de coagulare pe lama exploreaza coagularea singelui capilar pe lama: pe o lama de ceas se pune o picatura de ser fiziologic peste care se lasa sa cada a doua picatura de singe aparuta dupa punctia capilara. Valoare normala 8 -10 minute. Timpul de coagulare in eprubeta se recolteaza 2 ml singe venos care se introduce intr-o eprubeta de hemoliza care se pune intr-o baie la 37 C daca se lucreaza la laborator sau se tine in mina daca proba se lucreaza la patul bolnavului. Se porneste cronometrul cind singele patrunde in seringa. Citirea se face dupa 4 minute din minut in minut, prin inclinarea tubului. Cronometrul se opreste cind single nu mai curge la inclinarea tubului. Valoare normala 6-10 minute. Metoda Lee White valoare normala: 8 -12 minute. Valori patologice: hemofilii, CID, tratament cu heparina. Timpul de singerare Se utilizeaza metoda Duke: se dezinfecteza lobul urechii sau pulpa degetului cu eter ( nu cu alcool), apoi se inteapa cu un ac de seringa steril, la 3-4 mm adincime pentru a leza numai capilarele. Se porneste cronometrul in momentul inteparii. Cu o hirtie de filtru se tamponeaza din 30 in 30 de secunde si se culeg picaturile care apar spontan. Se opreste cronometrul cind hirtia de filtru nu se mai pateaza. Timpul de singerare informeaza asupra a doi factori care intervin in hemostaza: numarul si calitatea trombocitelor si starea peretelui vascular. Valori normale: 2 4 Valori patologice: peste 5 , datorita fie de o alterare vasculara, fie de o anomalie cantitativa sau calitativa a trombocitelor. Timpul de tromboplastina activata (APTT) Se determina prin adaugarea la plasma citratata de fosfolipide (cefalina) si a unui activator ( caolin). Valoare normala: 30 50 sec. Valori patologice: deficit de factori tromboplastinici ( XII, XI, IX, X, VII), hepatopatii, tratament cu heparina. Se utilizeaza in monitorizarea tratamentului cu heparina : APTT = 1,5 2 N