CURS 8 4.2.5.

Proprieti chimice ale aminoacizilor

Proprietile chimice sunt determinate de natura grupelor funcionale existente n molecul, respectiv grupa amino (-NH2) i grupa carboxil (-COOH). 4.2.5.1. Reacii datorate grupelor funcionale carboxil a) Reacia aminoacizilor cu hidroxizii cu formare de sruri:
H2N CH2
glicocol

COOH + NaOH

H2N

CH2

COONa + H2O

glicocolat de sodiu

b) Reacia aminoacizilor cu alcoolii cu formare de esteri:

O H2N CH2 COOH + HO R H2N CH2 C O R
+ H2O

ester al glicocolului

c) Reacia aminoacizilor (sau a esterilor aminoacizilor) cu amoniac cu formare de amide:

O H2 N CH2 C O H
+

O HNH2 H 2N CH2 C NH2

+

H 2O

glicocolamid

Reacia de formare a amidelor are o mare importan biochimic, reprezentnd una dintre cile de reglare a coninutului de amoniac din organismele vegetale, deoarece o concentraie prea mare de amoniac devine toxic pentru plante. Prin formarea amidelor, plantele realizeaz blocarea amoniacului n exces, prin reacia invers, amoniacul fiind la nevoie, pus n libertate. d) Decarboxilarea aminoacizilor cu formare de amine biogene:
H2N CH2 COOH
glicocol

CO2 + H2N

CH3

metilamina

Decarboxilarea aminoacizilor este biocatalizat n organismele vii de enzime din clasa liazelor (aminoaciddecarboxilaze). Unele dintre aminele biogene rezultate sunt compui toxici, altele sunt precursori ai unor coenzime. Astfel, -alanina rezultat din acid aspartic este component a coenzimei A i a acidului pantotenic, din histidin se formeaz histamina, din aminoacizii diaminomonocarboxilici ornitina i lizina se formeaz heterocicli cu azot (pirol, piridin) prezeni n structura vitaminelor sau a unor alcaloizi cu rol fiziologic.
HS H2C CH COOH
cistein
1

NH2

- CO2

HS

CH2

CH2

NH2

cisteamin component a coenzimei A

HOOC

H2C

CH NH2

COOH

- CO2

HOOC

H2C

CH2

NH2

acid aspartic

-alanina component a coenzimei A i a acidului pantotenic

H2N CH2 (CH2)2 CH

ornitin

NH2

- CO2

H2N CH2 (CH2)2 CH2 NH2

putrescein

- NH3

pirolidina

pirol

COOH

H2N CH2 (CH2)3 CH

lizin

NH2

- CO2

H2N CH2 (CH2)3 CH2 NH2

- NH3

piperidin

piridin

COOH

cadaverin

4.2.5.2. Reacii ale aminoacizilor datorate grupei funcionale amino a) Reacia aminoacizilor cu acizii cu formare de sruri Aceast reacie a aminoacizilor se datoreaz caracterului bazic (acceptor de protoni, datorit electronilor neparticipani ai azotului aminic). n funcie de tipul acidului se formeaz sruri numite: clorhidrai, sulfai, azotai etc. ai aminoacizilor.
HOOC CH2 NH2 + HCl [HOOC CH2 NH3] Cl

acid aminoacetic glicocol

clorhidrat de glicocol

b) Alchilarea aminoacizilor Alchilarea aminoacizilor (de exemplu metilarea) cu derivai halogenai, conduce la derivai de amoniu cuaternar, denumii betaine.
HO - 2HI

CH3 HOOC CH2 N

HOOC

CH2

NH2

+ 3 CH3I

CH3 I CH3

betaina glicocolului

Aceti derivai au o mare importan fiziologic, fiind donatori de grupe metilice. n cazul glicocolului, metilarea complet conduce la formarea glicocol-betainei (cu structur amfionic), care se gsete n sfecla de zahr. c) Acilarea aminoacizilor Acilarea aminoacizilor decurge prin tratarea aminoacizilor cu cloruri acide sau cu anhidride acide n mediu bazic i conduce la formarea de N-acilderivai. Astfel, din glicocol i clorur de benzoil (C6H5-CO-Cl) rezult acidul hipuric (benzoilglicocolul). HOOC-CH2-NH2 + Cl-CO-C6H5 HOOC-CH2-NH-OC-C6H5 + HCl

d) Condensarea aminoacizilor cu aldehide cu formare de baze Schiff Aceast reacie prezint importan biochimic deosebit, deoarece reprezint o cale de biosintez a aminoacizilor (transaminarea cetoacizilor rezultai la biodegradarea aerob a glucidelor prin ciclul Krebs).
R CH

NH2 + O

R
- H 2O

CH

CH

COOH
aminoacid

H
aldehid

COOH
baza Schiff

e) Dezaminarea aminoacizilor Dezaminrile aminoacizilor sunt reacii catalizate enzimatic i constau n principiu n eliminarea grupei amino (sub form de NH3 sau de N2) i conservarea grupei carboxil. Se formeaz substane aparinnd unor clase diferite de derivai funcionali. Reaciile de dezaminare au loc n organismele vii vegetale i animale i sunt deosebit de importante n metabolismul aminoacizilor introdui prin alimentaie sau rezultai n metabolismul proteic. Dezaminrile aminoacizilor sunt de mai multe tipuri:
Dezaminarea oxidativ, conduce la formarea, pe lng NH3, a cetoacidului cu acelai numr de atomi de carbon ca aminoacidul:
H3C CH NH2
aminoacid (-alanin)

COOH

enzim -2H

H3C

C NH

COOH

+ H2O -NH3

H3C

C O

COOH

iminoacid

cetoacid (acid piruvic)

Dezaminarea hidrolitic, conduce la obinerea, pe lng amoniac a unui hidroxiacid cu numr de atomi de carbon egal cu cel al aminoacidului iniial:
H3C CH NH2
-alanin

COOH

+ H2O / enzim -NH3

H3C

CH OH

COOH

acid lactic

Dezaminarea reductiv are ca produs de reacie un acid saturat care pstreaz numrul de atomi de carbon:
H3C CH NH2
-alanin

COOH

+2 H / enzim -NH3

H3C

CH2

COOH

acid propionic (acid saturat)

Dezaminarea desaturant (intramolecular) conduce la formarea unui acid nesaturat cu acelai numr de atomi de carbon:

H3C

CH NH2
-alanin

COOH

enzim -NH3

H2C

CH

COOH

acid acrilic (acid nesaturat)

4.2.5.3. Proprieti chimice ale aminoacizilor care implic participarea ambelor grupe funcionale

a) Reacia aminoacizilor cu ionii metalelor (Cu, Ni, Pb, Ca, Mg, etc.) cu formare de compleci de tip chelatic:
O C H2C OH NH2 Cu2+ H2N HO CH2 C O O C H2C O N H2 Cu H2 N O CH2 C O
+ + 2H

glicocol

glicocol

glicocolat de cupru

Compuii chelatici sunt combinaii stabile, nedisociabile, frumos colorate, utilizate n chimia analitic. b) Reaciile de condensare ale aminoacizilor pot fi de mai multe feluri:
condensarea intermolecular cu formarea de legturi peptidice -CO-NH-, implic eliminarea apei ntre o grup -COOH a unui aminoacid i grupa NH2 a altui aminoacid. Se formeaz astfel: di-, tri-, tetra-, ..., polipeptide. Trebuie precizat n cazul legturii peptidice, caracterul de legtur dubl a legturii covalente C-N, datorat conjugrii electronilor neparticipani de la atomul de azot cu electronii de tip ai legturii carbonil (conjugare p-), ceea ce se poate reprezenta prin structuri de rezonan.
CH3 O H2N CH C O OH + HNH CH2 C - H2O HOH2C OH + HNH CH - H2 O O C OH CH3 O H2N CH O HOH2C O

C HN CH2 C

HN CH C OH

alanin

glicin

serin

alanil-glicil-serin (tripeptid)

Datorit mpiedicrii sterice a rotaiei libere, impus de caracterul parial de legtur dubl C=N, apare posibilitatea apariiei izomeriei sterice geometrice (cis-trans, sau E-Z), evideniat prin existena n proteinele naturale doar a izomerului trans (E).
C
O

H
R
C
O

H
R

condensarea intermolecular a dou molecule de aminoacizi care implic ambele grupe funcionale ale acestora, conduce la compui cu ciclu dicetopiperazinic.

OH + HNH O C CH2

H2 C C O
- H2O

NH O C CH2

CH2 NH

NHH + HO
glicin

dicetopiperazin

condensarea intramolecular implic grupele funcionale -COOH i -NH2 ale aceluiai aminoacid, aflate cel puin, n poziie una fa de alta; se formeaz compui denumii lactame. 4.2.5.4. Proprieti ale aminoacizilor datorate radicalului R

Aminoacizii liberi, peptidele i proteidele prezint i reacii chimice care depind de natura radicalului R i a grupelor funcionale grefate pe el.
Reacii ale nucleelor aromatice

Acidul azotic concentrat acioneaz asupra nucleului aromatic al aminoacizilor cu structur aromatic: triptofan, fenilalanin, tirozin etc. sau al aminoacidului cu structur heterociclic histidin, formnd nitroderivai de culoare galben (reacia xantoproteic de recunoatere a proteinelor).
Reacii ale grupelor funcionale grefate pe radicalul R

Acest tip de reacii pot fi de exemplu, reacii de formare de legturi hidrofobe n care sunt implicate catenele hidrocarbonate sau reacii de esterificare a grupelor hidroxil din hidroxiaminoacizi cu formare de fosfoproteide. n medii puternic bazice grupa -SH a cisteinei i grupa -OH fenolic a tirozinei pot disocia elibernd protoni. Grupele funcionale polare din catenele laterale ale aminoacizilor contribuie la formarea de legturi de hidrogen ntre diferitele pri ale lanului peptidic, stabiliznd molecula proteinei.

4.3. PEPTIDE (POLIPROTIDE INFERIOARE)

Peptidele sunt poliprotide inferioare, constituite dintr-un numr relativ mic de aminoacizi (monoprotide) unii prin legturi peptidice -CO-NH-. Acestea se stabilesc ntre grupa amino de la carbonul al unui aminoacid i grupa carboxil a altui aminoacid, prin eliminare de ap. Dup numrul unitilor structurale de aminoacizi coninui, peptidele se mpart n: oligopeptide; polipeptide; peptone; albumoze.

4.3.1. Oligopeptide
Sunt constituite dintr-un numr mic de aminoacizi (convenional 2-10) i denumite n consecin: di-, tri-, tetra-, ..., decapeptide. Datorit naturii aminoacizilor constitueni, a succesiunii (secvenei) i conformaiei lor, peptidele se pot prezenta sub forma unui numr foarte mare de izomeri (de exemplu, o pentapeptid format din 5 aminoacizi diferii, prezint 120 de izomeri). Existena unei asemenea

diversiti de forme izomere, explic enorma variabilitate structural, configuraional i funcional a diferitelor forme de proteine din organismele vegetale i animale. Orice peptid se caracterizeaz prin prezena legturilor peptidice, n care sunt implicate toate grupele carboxil i amino grefate la C, cu excepia unei grupe carboxil i a unei grupe amino care rmn la capetele catenei peptidice (polipeptidice). Aceste dou grupri funcionale neimplicate n formarea legturilor peptidice sunt denumite grupare carboxil C-terminal (aminoacid C-terminal), respectiv, grupa amino N-terminal (aminoacid N- terminal). Prin convenie, aminoacidul N-terminal dintr-un lan peptidic (polipeptidic) se consider a fi primul aminoacid din structura respectiv. Numele peptidelor se stabilete prin indicarea succesiv a denumirii fiecrui aminoacid component, cu adugarea sufixului il i terminnd cu numele ntreg al aminoacidului care are gruparea carboxil intact. Denumirea poate fi acordat i prin utilizarea prescurtrii numelui aminoacidului, respectiv primele trei litere din denumire: H2N-Ala-Ala-Glu-Arg-Val-Ser-Arg-COOH
aminoacid N-terminal aminoacid C-terminal heptapeptida alanil-alanil-glutamil-arginil-valil-seril-arginin

Pentru a preciza faptul c este vorba de o molecul de sine stttoare, se scrie: H-Ala-Ala-Glu-Arg-Val-Ser-Arg-OH ceea ce nseamn c, atomul de hidrogen din grupa -NH2 a primului aminoacid i grupa -COOH a ultimului aminoacid nu particip la formarea altor legturi peptidice. Datorit grupelor funcionale terminale (-NH2 i -COOH), peptidele manifest caracter amfoter. Prin hidroliz acid sau enzimatic (cu enzimele peptidaze), peptidele sunt scindate n aminoacizii componeni.
4.3.1.1. Proprieti fizico-chimice ale oligopeptidelor

Peptidele sunt rspndite att n regnul vegetal ct i n cel animal, unde ndeplinesc un anumit rol fiziologic, sau se formeaz n metabolism ca faze intermediare, sau intr n compoziia unor hormoni, antibiotice etc. Ciupercile i bacteriile produc antibiotice care conin i peptide. Se cunoate un mare numr de oligopeptide i polipeptide cu funcii fiziologice importante: hormonal, endorfine i encefaline din sistemul nervos central etc. Peptidele prezint proprieti intermediare ntre cele ale aminoacizilor i cele ale proteinelor. Peptidele cu mas molecular mare sunt solubile n ap i insolubile n alcool, solubilitatea scznd odat cu creterea masei moleculare. Sub aciunea cldurii nu coaguleaz i nu sunt denaturate. Hidroliza enzimatic a peptidelor (sub influena enzimelor peptidaze) conduce, n cazul homopeptidelor, la aminoacizii din care s-au format, iar n cazul heteropeptidelor, se obine, pe lng aminoacizi, i o component neproteic (component prostetic). Proprietile chimice ale peptidelor sunt determinate de prezena grupelor funcionale amino i carboxil libere, de la capetele sistemului, manifestndu-se sub forma reaciilor specifice acestor grupe funcionale. Legtura peptidic se caracterizeaz i prin mobilitatea atomului de hidrogen aminic care poate fi substituit cu halogeni sau cu metale.

4.3.1.2. Reprezentani naturali ai oligopeptidelor

Glutationul, un reprezentant important al oligopeptidelor este o tripeptid, i anume, glutamil-cisteinil-glicina, cu rspndire universal.

n regnul vegetal, glutationul se gsete n special n semine, unde coninutul su crete n timpul ncolirii. In embrionul de gru i n esuturi, glutationul se gsete att sub form redus, ct i sub form oxidat.
HOOC CH CH2 CH2 CO NH CH CO NH CH2 COOH NH2 CH2 SH
glutamil-cisteinil-glicina

Glutationul, prezent n semine, drojdie de bere, ficat, este o substan solid, de culoare alb, solubil n ap, alcool. Prezint activitate optic i un pronunat caracter acid, datorat celor dou grupe carboxil libere. Importana biologic a glutationului deriv din uurina cu care se poate oxida grupa funcional -SH (tiol). Oxigenul molecular, n prezena urmelor de metale cu rol catalitic (de exemplu, Fe), determin oxidarea formei R-SH, iar reducerea formei R-S-SR este biocatalizat de glutation-reductaz, enzim prezent n toate organismele vii.
2 Glutation SH
oxidare reducere

Glutation

S S Glutation

2 Glutation

SH

glutation redus

diglutation (glutation oxidat)

glutation redus

Glutationul ndeplinete n organism roluri biochimice complexe: rol de sistem redox neenzimatic, rol antioxidant, de protejare a unor substraturi (de exemplu, acid ascorbic) fa de procesele de oxidare, component al coenzimei donatoare de atomi de hidrogen n procese redox etc.
Neuropeptidele reprezint o grup de peptide ntlnite n sistemul nervos central. Un interes deosebit prezint endorfinele, deoarece se leag de receptori care pot lega i morfina. Cel mai simplu reprezentant este grupul pentapeptidelor denumite encefaline.

Insulina i proinsulina sunt hormoni peptidici care joac un rol foarte important n reglarea metabolismului glucidic. Insulina a fost prima protid a crei secven de 51 de aminoacizi a fost clarificat n 1953, constituind din punct de vedere tiinific un pas foarte important n cercetarea biochimic.
Antibiotice peptidice. Din aceast clas fac parte substane produse de ciuperci sau microorganisme care conin tipuri de aminoacizi neproteinogeni. Una dintre cele mai cunoscute substane din aceast serie este penicilina (care are n structur aminoacizii valin i cistein). Gramicidina este o peptid ciclic format din 10 aminoacizi, printre care fenilalanina. O structur complicat (un colorant legat de o pentapeptid) prezint actinomicina, care manifest proprieti antibiotice i citostatice. Otrvuri. O serie de otrvuri de origine vegetal sau animal sunt de natur peptidic. Amanitina i faloidina secretate de ciuperci sunt peptide ciclice formate din 7 aminoacizi. Veninul de arpe conine neurotoxine de origine peptidic.

4.3.2. Polipeptide
Polipeptidele sunt peptide n compoziia crora intr peste 10 aminoacizi, (pn la 100 de aminoacizi). Delimitarea ntre oligopeptide i polipeptide, ca i fa de proteine este relativ, fiind greu de stabilit, pe baza unor reacii chimice specifice. O astfel de reacie este de exemplu
7

reacia biuretului (reacie de culoare ntre peptide i o soluie alcalin de CuSO4). Oligopeptidele se coloreaz roz-rou, poliprotidele se coloreaz violet, iar aminoacizii nu dau aceast reacie. Biuretul este compusul rezultat din dou molecule de uree, care n reacia cu Cu din CuSO4 prezint o coloraie albastr.

H2N-CO-NH2 + H2N-CO-NH2 H2N-CO-NH-CO-NH2 + NH3

4.3.2.1. Substane intermediare ntre peptide i proteide

Prin hidroliza menajat a proteinelor, sau la biosinteza acestora, se formeaz ca substane intermediare, albumozele i peptonele.
proteine albumoze peptone peptide aminoacizi

Albumozele i peptonele sunt substane cu mase moleculare situate ntre cele ale peptidelor i proteinelor, cu structur asemntoare peptidelor. Albumozele formeaz cu apa soluii coloidale, precipit sub aciunea acizilor, a sulfatului de amoniu, coaguleaz la temperaturi ridicate, asemnndu-se mai mult cu proteinele, n timp ce peptonele, care nu prezint aceste proprieti se aseamn mai mult cu peptidele.