Demonstrarea efectelor soluiilor de toniciti diferite asupra hematiilor Scopul lucrrii: Soluiile care au aceeai presiune osmotic cu cea

a lichidului intracelular i extracelular se numesc soluii izotone - ex. sol. NaCl 0,9%, sol. glucoz 5%. Celulele suspendate n soluii izotone nu i modific volumul. Soluiile care au o presiune osmotic mai mare dect cea a lichidului intracelular i extracelular se numesc soluii hipertone - ex. sol. NaCl >0,9%, sol. glucoz >5%. Celulele suspendate n soluii hipertone i micoreaz volumul prin ieirea apei din celule n soluia de suspensie. Soluiile care au o presiune osmotic mai mic dect cea a lichidului intracelular i extracelular se numesc soluii hipotone - ex. sol. NaCl <0,9%, sol. glucoz <5%. Celulele suspendate n soluii hipotone i mresc volumul prin intrarea apei din soluia de suspensie n celule, eventual pn la liza (plesnirea) celulelor. Lucrarea demonstreaz cele de mai sus prin suspendarea hematiilor n soluii de toniciti diferite. Materiale necesare: 4 ml snge uman recoltat pe anticoagulant, 2 ml soluie de ser fiziologic NaCl 0,9%, 2 ml soluie de glucoz 5%, 2 ml soluie de glucoz 33%, 2 ml ap distilat, eprubete de centrifug notate cu 1,2,3,4, pipete, centrifug. Tehnica lucrrii: Se pune cte 1 ml de snge n 4 eprubete de centrifug. Se centrifugheaz 5 min la 4000 rot/min. Se ndeprteaz supernatantul (plasma). Se pun peste sediment (hematii) cte: 2 ml de ser fiziologic n eprubeta 1 2 ml sol. glucoz 5 % n eprubeta 2 2 ml sol. glucoz 33% n eprubeta 3 2 ml ap distilat n eprubeta 4 Se agit bine coninutul fiecrei eprubete. Se centrifugheaz cele 4 eprubete timp de 5 min. la 4.000 rotaii/min. Se scot eprubetele din centrifug i se observ c: n eprubeta 1 s-a depus un sediment de culoare roie - hematiile, iar supernatantul este un lichid incolor - serul fiziologic; n eprubeta 2 s-a depus un sediment de culoare roie - hematiile, iar supernatantul este un lichid incolor - soluia de glucoz 5%; n eprubeta 3 s-a depus un sediment de culoare roie - hematiile, iar supernatantul este un lichid incolor - soluia de glucoz 33%; n eprubeta 4 nu exist un sediment, ci numai un lichid de culoare roie. Se agit bine coninutul eprubetelor 1, 2 i 3. Se observ c: n eprubetele 1 i 2 sedimentul se resuspend cu uurin, rezultnd un lichid de culoare roie; n eprubeta 3 resuspendarea este foarte dificil, dup agitare ndelungat i numai parial. Interpretare: n eprubetele 1i 2, hematiile suspendate n soluii izotone i-au pstrat integritatea, dovad c au aprut ca sediment, spre deosebire de hematiile din eprubeta 4, suspendate n soluie hipoton (mai exact n acest caz aton), care au fost hemolizate, dovad c la centrifugare nu a mai aprut un sediment, iar soluia rezultat are culoarea roie datorit hemoglobinei dispersate n apa distilat. Pentru eprubeta 3, n care hematiile au fost suspendate n soluie hiperton, aspectul dup centrifugare nu se difereniaz de eprubetele 1 i 2, dar la ncercarea de resuspendare rezultatul a fost mult mai greu de obinut comparativ cu eprubetele 1 i 2. Aceasta deoarece n soluii hipertone hematiile se zbrcesc, capt un aspect

exterior neregulat, iar la sedimentare aceste hematii se agat unele de altele i sunt mai greu de resuspendat.