1

METODE METODE
SPECTROSCOPICE SPECTROSCOPICE
UMF Cluj - Radu Oprean 2 2010- 2011
Spectroscopia Spectroscopia
tiin tiin a care se ocup cu interac a care se ocup cu interac iunea iunea
radia radia iei cu materia iei cu materia
frecven mare
lungime de und mic
frecven mic
lungime de und mare
lungime de und
m
Energie
kcal/mol
Efecte moleculare Efecte moleculare
ionizare
tranziii electronice
vibraii moleculare
micri de rotaie
tranziii nucleare de
spin
UMF Cluj - Radu Oprean 3 2010- 2011
Radia Radia ia electromagnetic ia electromagnetic
Lumina Lumina o form de energie a crui o form de energie a crui
comportament este descris de comportament este descris de
dualitatea dualitatea particul particul und und
Propriet Propriet ile de tip ile de tip und und ale radia ale radia iei iei
electromagnetice electromagnetice
Radia Radia ia electromagnetic ia electromagnetic cmpuri electrice cmpuri electrice
i magnetice care se propag liniar i magnetice care se propag liniar i cu o i cu o
vitez constant vitez constant
In vacuum viteza luminii este In vacuum viteza luminii este
c = 2,99792 c = 2,99792 10 10
8 8
m/s m/s
2
UMF Cluj - Radu Oprean 4 2010- 2011
Unda electromagnetic Unda electromagnetic
UMF Cluj - Radu Oprean 5 2010- 2011
Lumina Lumina polari polarizat zat
UMF Cluj - Radu Oprean 6 2010- 2011
Viteza luminii Viteza luminii n medii diferite n medii diferite
3
UMF Cluj - Radu Oprean 7 2010- 2011
Propriet Propriet ile ile undei undei
elctromagnetice elctromagnetice
frecven frecven a ( a ( ) ) - -
numrul de oscila numrul de oscila ii ii
al al undei undei
elctromangnetice elctromangnetice
per secund per secund
lungimea de und lungimea de und
( ( ) ) distan distan a dintre a dintre
2 maxime sau 2 maxime sau
minime minime

c v
UMF Cluj - Radu Oprean 8 2010- 2011
Propriet Propriet ile ile undei undei
elctromagnetice elctromagnetice
numrul de und numrul de und ( ( ) ) reciproca reciproca
lungimii de und lungimii de und
puterea (P) puterea (P) fluxul de energie pe fluxul de energie pe
unitatea de timp unitatea de timp
intensitatea (I) intensitatea (I) - - fluxul de energie pe fluxul de energie pe
unitatea de timp pe arie unitatea de timp pe arie

1
UMF Cluj - Radu Oprean 9 2010- 2011
Interferen Interferen e e distructive distructive
4
UMF Cluj - Radu Oprean 10 2010- 2011
Interferen Interferen e e constructive constructive
UMF Cluj - Radu Oprean 11 2010- 2011
Interferen Interferen e e di di- - i i con con- - (1) (1)
UMF Cluj - Radu Oprean 12 2010- 2011
Interferen Interferen e e di di- - i i con con- - (2) (2)
5
UMF Cluj - Radu Oprean 13 2010- 2011
Interferen Interferen e e di di- - i i con con- - (1) (1)
UMF Cluj - Radu Oprean 14 2010- 2011
Frecven Frecven e diferite e diferite
UMF Cluj - Radu Oprean 15 2010- 2011
Filtrarea folosind Filtrarea folosind
transformanta transformanta Fourier Fourier
Zgomotul are frecven Zgomotul are frecven mai mare mai mare
dect semnalul dect semnalul
6
UMF Cluj - Radu Oprean 16 2010- 2011
Analiza prin Analiza prin transformanta transformanta
Fourier Fourier
UMF Cluj - Radu Oprean 17 2010- 2011
Propriet Propriet ile de tip ile de tip particul particul ale ale
radia radia iei electromagnetice iei electromagnetice
radia radia ia electromagnetic const ia electromagnetic const ntr ntr- -
un flux de particule energetice numite un flux de particule energetice numite
fotoni fotoni
fiecare foton are o fiecare foton are o enrgie enrgie
propor propor ional cu constanta lui ional cu constanta lui Planck Planck
(h = 6,626 (h = 6,626 10 10
- -34 34
J J s s) )

hc
hc
h E
UMF Cluj - Radu Oprean 18 2010- 2011
Spectrul electromagnetic Spectrul electromagnetic
7
UMF Cluj - Radu Oprean 19 2010- 2011
Spectroscopia Spectroscopia
Propriet Propriet ile radia ile radia iei electromagnetice iei electromagnetice
energia energia
viteza viteza
amplitudinea amplitudinea
frecven frecven a a
unghiul de faz unghiul de faz
polarizarea polarizarea
direc direc ia de propagare ia de propagare
schimbarea a cel pu schimbarea a cel pu in unei propriet in unei propriet i i
la interac la interac iunea fotonului cu proba iunea fotonului cu proba
UMF Cluj - Radu Oprean 20 2010- 2011
Spectroscopia cu transfer de Spectroscopia cu transfer de
energie energie
Spectroscopie de absorb Spectroscopie de absorb ie ie
energia purtat de foton este absorbit de energia purtat de foton este absorbit de
prob prob
analitul analitul trece de la starea energetic trece de la starea energetic
fundamental la cea excitat fundamental la cea excitat
Spectroscopie de emisie Spectroscopie de emisie
emisia fotonilor la trecerea de la starea emisia fotonilor la trecerea de la starea
excitat la cea fundamental excitat la cea fundamental
Fotoluminiscen Fotoluminiscen emisia care urmeaz emisia care urmeaz
absorb absorb iei uni foton iei uni foton
Chemiluminiscen Chemiluminiscen a a emisia indus chimic emisia indus chimic
UMF Cluj - Radu Oprean 21 2010- 2011
Metode spectroscopice cu Metode spectroscopice cu
transfer de energie (1) transfer de energie (1)
spectroscopie de rezonan spectroscopie de rezonan
magnetic nuclear magnetic nuclear
unde radio unde radio
spectroscopie de microunde spectroscopie de microunde
spectroscopie de rezonan spectroscopie de rezonan
electronic de spin electronic de spin
microunde microunde
spectroscopie spectroscopie n infraro n infraro u u
spectroscopie spectroscopie raman raman
infraro infraro u u
spectroscopie spectroscopie UV UV- -Vis Vis
spectroscopie de absorb spectroscopie de absorb ie ie
atomic atomic
UV UV- -Vis Vis
spectroscopie cu absorb spectroscopie cu absorb ie de ie de
raze X raze X
raze X raze X
spectroscopie spectroscopie Mossbauer Mossbauer raze raze absorb absorb ie ie
Tehnica spectroscopic Tehnica spectroscopic Regiunea Regiunea
spectral spectral
Tipul de transfer de Tipul de transfer de
energie energie
8
UMF Cluj - Radu Oprean 22 2010- 2011
Metode spectroscopice cu Metode spectroscopice cu
transfer de energie (2) transfer de energie (2)
spectroscopie de fluorescen spectroscopie de fluorescen
spectroscopie de spectroscopie de
fosforescen fosforescen
spectroscopie de fluorescen spectroscopie de fluorescen
atomic atomic
UV UV- -Vis Vis
fluorescen fluorescen de raze X de raze X raze X raze X fotoluminiscen fotoluminiscen
spectroscopie de emisie spectroscopie de emisie
atomic atomic
UV UV- -Vis Vis emisie (excit emisie (excitare are
termic termic) )
Tehnica spectroscopic Tehnica spectroscopic Regiunea Regiunea
spectral spectral
Tipul de transfer de Tipul de transfer de
energie energie
UMF Cluj - Radu Oprean 23 2010- 2011
Metode spectroscopice fr Metode spectroscopice fr
transfer de energie transfer de energie
nefelometrie nefelometrie
turbidimetie turbidimetie
mpr mpr tiere tiere
dispersie de rota dispersie de rota ie optic ie optic dispersie dispersie
refractometrie refractometrie refrac refrac ie ie UV UV- -Vis Vis
difrac difrac ie cu raze X ie cu raze X difrac difrac ie ie raze X raze X
Tehnica spectroscopic Tehnica spectroscopic Tipul de Tipul de
interac interac iune iune
Regiunea spectral Regiunea spectral
UMF Cluj - Radu Oprean 24 2010- 2011
Spectre Spectre
Spectru de absorb Spectru de absorb ie ie reprezentarea reprezentarea
absorban absorban ei ei n func n func ie de lungimea de ie de lungimea de
und und (sau (sau numrul de und numrul de und) )
9
Spectroscopia Spectroscopia
UV UV- -vis vis
UMF Cluj - Radu Oprean 26 2010- 2011
Absorb Absorb ia luminii ia luminii
UMF Cluj - Radu Oprean 27 2010- 2011
Spectre de absorb Spectre de absorb ie ie
10
UMF Cluj - Radu Oprean 28 2010- 2011
Instrumenta Instrumenta ia (1) ia (1)
monofascicol monofascicol
UMF Cluj - Radu Oprean 29 2010- 2011
Instrumenta Instrumenta ia (2) ia (2)
ir de diode ir de diode
UMF Cluj - Radu Oprean 30 2010- 2011
Instrumenta Instrumenta ia (3) ia (3)
dublu fascicol dublu fascicol
11
UMF Cluj - Radu Oprean 31 2010- 2011
Surse de radia Surse de radia ie ie
electromagnetic electromagnetic (1) (1)
Surse continue Surse continue emite radia emite radia ii pe un ii pe un
domeniu larg de lungimi de und domeniu larg de lungimi de und, cu o , cu o
varia varia ie relativ redus a intensit ie relativ redus a intensit ii ii
UMF Cluj - Radu Oprean 32 2010- 2011
Surse de radia Surse de radia ie ie
electromagnetic electromagnetic (2) (2)
Surse liniare Surse liniare emite radia emite radia ii pe ii pe cteva cteva
domenii domenii nguste de lungimi de und nguste de lungimi de und
UMF Cluj - Radu Oprean 33 2010- 2011
Selectarea lungimii de und Selectarea lungimii de und
12
UMF Cluj - Radu Oprean 34 2010- 2011
Detectori Detectori
Fotomultiplicator Fotomultiplicator Fotodiod Fotodiod
UMF Cluj - Radu Oprean 35 2010- 2011
Analiza calitativ Analiza calitativ
informa informa ii calitative limitate ii calitative limitate
cromofori cromofori - - g grupele rupele de de atomi atomi care care
absorb absorb radia radia ii ii cu cu o o anumit anumit lungime lungime
de de und und caracteristic caracteristic
UMF Cluj - Radu Oprean 36 2010- 2011
Cromofori Cromofori
3 - 25 285 - 400; 184 - N =N - Azo
1000 - 200; 10 220 - 230; 300 - 400 - ONO Nitrit
puternic 210 - NO
2
Nitro
puternic; 11 - 18 210; 280 - 300 - CH =O Aldehid
1000; 18 - 30 195; 270 - 285 C =O Ceton
2800 195 - NH
2
Amin
199000; 7900 252, 375 idem Antracen
112000; 5600; 175 220, 275, 312 idem Naftalin
46700; 6900; 170 184, 202, 255 nucleul Benzen
8000 190 C =C Eten

maxim

max
, nm Grupa Cromoforul
13
UMF Cluj - Radu Oprean 37 2010- 2011
Transmitan Transmitan a a i i absorban absorban a a
Transmitan Transmitan a a procentul de radia procentul de radia ie ie
transmis transmis
T [%] = I/I T [%] = I/I
0 0
100 100
Absorban Absorban a a antilogaritmul antilogaritmul
transmitan transmitan ei ei
A [ A [u.a u.a.] = .] = - - log T log T
UMF Cluj - Radu Oprean 38 2010- 2011
Spectre derivate Spectre derivate
UMF Cluj - Radu Oprean 39 2010- 2011
Legea Legea Lambert Lambert- -Beer Beer- -Bouguer Bouguer
T = I/I T = I/I
0 0
= = e e
- -kbc kbc
A = A = - - log T = log T = - - log(I/I log(I/I
0 0
) = ) = bc bc
14
UMF Cluj - Radu Oprean 40 2010- 2011
A = -log (P/P
0
)
A=bC
Spectre derivate Spectre derivate
UMF Cluj - Radu Oprean 41 2010- 2011
Legea Legea Lambert Lambert Beer Beer A = A = a ab bc c
Rela Rela ia cu lungimea drumului optic ia cu lungimea drumului optic, b , b
Absorbana
0.00
Sursa
Detector
UMF Cluj - Radu Oprean 42 2010- 2011
Legea Legea Lambert Lambert Beer Beer A = A = a ab bc c
Rela Rela ia cu lungimea drumului optic ia cu lungimea drumului optic, b , b
Absorbana
0.22
Sursa
Detector
b
Proba
15
UMF Cluj - Radu Oprean 43 2010- 2011
Legea Legea Lambert Lambert Beer Beer A = A = a ab bc c
Rela Rela ia cu lungimea drumului optic ia cu lungimea drumului optic, b , b
Absorbana
0.42
Sursa
Detector Proba
UMF Cluj - Radu Oprean 44 2010- 2011
Legea Legea Lambert Lambert Beer Beer A = A = a ab bc c
Rela Rela ia cu lungimea drumului optic ia cu lungimea drumului optic, b , b
Absorbana
0.62
Sursa
Detector Proba
UMF Cluj - Radu Oprean 45 2010- 2011
Legea Legea Lambert Lambert Beer Beer A = A = ab abc c
Rela Rela ia cu concentra ia cu concentra ia ia, , c c
Absorbana
0.00
Sursa
Detector
16
UMF Cluj - Radu Oprean 46 2010- 2011
Legea Legea Lambert Lambert Beer Beer A = A = ab abc c
Rela Rela ia cu concentra ia cu concentra ia ia, , c c
Absorbana
0.22
Sursa
Detector
b
Proba
UMF Cluj - Radu Oprean 47 2010- 2011
Legea Legea Lambert Lambert Beer Beer A = A = ab abc c
Rela Rela ia cu concentra ia cu concentra ia ia, , c c
0.42
b
Absorbana
Sursa
Detector
Proba
UMF Cluj - Radu Oprean 48 2010- 2011
Legea Legea Lambert Lambert Beer Beer A = A = a ab bc c
Dependen Dependen a de lungimea de und a de lungimea de und, a , a
0.00
Absorbana
Sursa
Detector
17
UMF Cluj - Radu Oprean 49 2010- 2011
Legea Legea Lambert Lambert Beer Beer A = A = a ab bc c
Dependen Dependen a de lungimea de und a de lungimea de und, a , a
0.30
b
Absorbana
Sursa
Detector
Proba
UMF Cluj - Radu Oprean 50 2010- 2011
Legea Legea Lambert Lambert Beer Beer A = A = a ab bc c
Dependen Dependen a de lungimea de und a de lungimea de und, a , a
0.05
b
Absorbana
Sursa
Detector
Proba
UMF Cluj - Radu Oprean 51 2010- 2011
y =0.075x +0.003
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Conc / mg/l
A
b
s
Curba de calibrare Curba de calibrare
18
UMF Cluj - Radu Oprean 2010- 2011
Limita Limita iile iile legii legii Lambert Lambert- -Beer Beer
limit limitat at de factori chimici de factori chimici i i instrumental instrumentali i
devia devia ie la concentra ie la concentra ii mari ii mari (>0.01M) (>0.01M)
mpr mpr tierea lumini datorit particulelor tierea lumini datorit particulelor
din solu din solu ie ie
fluorescen fluorescen a a or or f fos osf forescen orescen a a
deplasri ale deplasri ale e ech chilibr ilibrului ului ch chi imic mic n func n func ie ie
de concentra de concentra ie ie
radia radia ie care nu este monocromatic ie care nu este monocromatic
radia radia ii parazite ii parazite
UMF Cluj - Radu Oprean 53 2010- 2011
Analize Analize multicomponent multicomponent
y y x x y x totala
c b c b A A A
UMF Cluj - Radu Oprean 54 2010- 2011
Cuantificare indirect Cuantificare indirect
derivatizare derivatizare
titrri titrri spectrofotometrice spectrofotometrice
cinetic cinetic enzimatic enzimatic
19
Spectroscopia Spectroscopia
n infraro n infraro u u
UMF Cluj - Radu Oprean 56 2010- 2011
Domeniul spectral Domeniul spectral
780 nm (0,78 780 nm (0,78 m) m) pn pn la la 300 300 m m
3 domenii 3 domenii
IR IR apropiat apropiat (0,8 (0,8 - - 2,5 2,5 m) m)
IR IR mijlociu mijlociu sau sau mediu mediu ( (IR IR- -NaCl NaCl) ) (2,5 (2,5 - - 16 16
m) m)
IR IR ndep ndep rtat rtat (>16 (>16 m) m)
Domeniul analitic Domeniul analitic
ntre 1 ntre 1,5 ,5 i i 2 2,5 ,5 m m ( (4000 cm 4000 cm
- -1 1
- - 650 cm 650 cm
- -1 1
) )
UMF Cluj - Radu Oprean 57 2010- 2011
Absorb Absorb ia radia ia radia iei iei
Condi Condi ii pentru ca o molecul s ii pentru ca o molecul s
absoarb radia absoarb radia ia ia n domeniul IR: n domeniul IR:
s s aib aib o o structur structur de de dipol dipol sau sau s s poat poat
dobndi dobndi o o astfel astfel de de structur structur prin prin excita excita ie ie
perioada perioada de de vibra vibra ie ie trebuie trebuie s fie s fie n n faz faz cu cu
perioada perioada de de oscila oscila ie ie a a radia radia iei iei incidente incidente
cantitatea cantitatea de de energie energie a a radia radia iei iei IR IR trebuie trebuie s s
fie permis de fie permis de restric restric iile iile cuantice cuantice
20
UMF Cluj - Radu Oprean 58 2010- 2011
Tipuri de tranzi Tipuri de tranzi ii ii
vibraii de
ntindere
asimetrice
vibraii de
ntindere
simetrice
molecul
triatomic;
molecul
biatomic;
vibraiede
valen
vibra vibra ii de valen ii de valen
vibra vibra ii de deformare ii de deformare
vibraii de
forfecare
vibraii de
torsiune(rsucire)
nafaraplanului
+ -
vibraii de
rotaienafara
planului
vibraii de
balansare
(legnare)
nplan
UMF Cluj - Radu Oprean 59 2010- 2011
Vibra Vibra ii de absorb ii de absorb ie ie
specifice specifice
UMF Cluj - Radu Oprean 60 2010- 2011
Analiza calitativ Analiza calitativ
A = amestec A = amestec
B = B = manitol manitol (baza (baza
de date) de date)
C = A C = A B B
D = D = cocain cocain
hidrocloric hidrocloric (baza (baza
de date) de date)
E = C E = C - - D D