Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Caractere de cultur:
Caractere biochimice:
Produce diferii pigmeni, dintre care mai importani sunt piocianina
(albastru) i pioverdina sau fluoresceina (galben-verzui fluorescent).
Caractere de patogenitate:
n condiii naturale vibrionul holeric este patogen numai pentru om. Doza
infectant este de 1081010 microorganisme. Holera nu este o boal invaziv.
Germenii nu ajung n torentul circulator ci rmn cantonai la nivelul tractului
intestinal; colonizeaz marginea n perie a celulelor epiteliale, se multiplic i
elibereaz toxina holeric. Dup o perioad de incubaie de 14 zile apar brusc
grea, vrsturi, diaree abundent (20-30 litri / zi) i crampe abdominale.
Scaunele apoase, riziforme (ap de orez) conin mucus, celule epiteliale i un
mare numr de vibrioni. Exist o pierdere rapid de fluide i electrolii care duce
la deshidratare, colaps circulator i anurie. Rata mortalitii n lipsa tratamentului
este 25-50%.
Diagnosticul de laborator n holer este bacteriologic, direct, trebuie realizat ct
mai rapid posibil (urgen din punct de vedere epidemiologic) i include etapele
cunoscute.
Diagnosticul unui caz grav de holer este uor de realizat, n special n contextul
unei epidemii. Cu toate acestea, cazurile uoare sau cazurile izolate sunt relativ
dificil de difereniat de alte boli diareice acute.
1.
Recoltarea i transportul produsului patologic trebuie s se realizeze
respectnd regulile cunoscute (vezi capitolul 6), n special recoltarea ct mai
rapid dup debutul bolii i nainte de iniierea antibioterapiei. Produsul patologic
este reprezentat cel mai frecvent de materii fecale, dar s-ar putea recolta i
lichid de vrstur. Din punct de vedere macroscopic materiile fecale sunt
apoase, riziforme (ap de orez), de culoare verzuie, cu miros fetid, conin
flocoane de mucus. Transportul trebuie s fie realizat rapid, n maxim 1-3 ore. Se
poate folosi ca mediu de transport mediul bacteriostatic Cary-Blair. Mediul ap
peptonat alcalin (pH 9-9,5) poate fi utilizat att n calitate de mediu de
transport ct i de mediu de mbogire.
2.
Examinarea microscopic a produsului patologic include realizarea unui
preparat proaspt ntre lam i lamel (nu se efectueaz frotiuri din produsul
patologic). Preparatul se examineaz la microscopul optic cu obiectivul 40.
Esenial este faptul c nu se evideniaz prezena leucocitelor. Vibrionii sunt n
numr mare i prezint micri active, de rostogolire sau micri haotice.
Suplimentar, p.p. ar putea fi tratat cu Ac specifici; dac mobilitatea este
stopat, se confirm diagnosticul.
3. Cultivarea pe medii de cultur a produsului patologic se realizeaz n aa fel
nct s se poat obine colonii izolate i respectiv o cultur pur, care se va
identifica (vezi i capitolele 9 i 10). Abordarea diagnosticului de holer se
realizeaz n mod difereniat, respectiv prezumtiv (la nivelul unui laborator
periferic) i de certitudine (la nivelul laboratorului de referin). Este
recomandat utilizarea att a unui mediu moderat selectiv (ex. Bile Salts Agar /
BSA) ct i a unui mediu nalt selectiv (ex. Thiosulphate-Citrate-Bile salts-Sucrose
/ TCBS).
Lund n considerare situaia n care se ridic suspiciunea unei infecii cu V.
cholerae se recomand nsmnarea p.p., direct sau dup transportul n mediul
Cary Blair, n ap peptonat alcalin (APA). Dup incubare pentru o durat de 6-8
ore la 35-37, facem trecerea pe mediul selectiv (TCBS i / sau BSA) lund 2 anse
de la suprafaa APA (n acest interval, la suprafaa APA poate s apar un vl,
respectiv cultura de vibrioni).
Caractere de cultur:
Caractere biochimice:
Testul uviei de ADN se poate utiliza pentru a diferenia tulpini care sunt
oxidazo-pozitive i formeaz colonii cu aspect asemntor (V. cholerae i
Aeromonas spp.); n acest scop suspensionm o colonie suspect ntr-o pictur
de soluie 0,5% dezoxicolat de sodiu, pe o lam de microscop. n cazul n care
este vorba de o colonie de vibrioni, acetia sunt lizai i elibereaz ADN-ul care
poate fi tras cu ansa ca o uvi
alte teste biochimice, prin metode clasice sau utiliznd galeriile manuale
sau automate (ex. API 20E, ID 32E), se efectueaz la nivelul unui laborator de
nivel superior sau la nivelul centrului naional de referin; testele biochimice pot
diferenia biotipul clasic de biotipul El Tor (se apreciaz c V. cholerae O:139 este
un mutant al biotipului El Tor)
Caractere antigenice: