CHIMIE GENERAL I FARMACEUTIC

TEHNOLOGIA MEDICAMENTELOR

ELABORAREA METODEI HPLC PENTRU STUDIU FITOCHIMIC AL SPECIEI

HYPERICUM PERFORATUM L.
Igor Casian, Ana Casian, Vladimir Valica
Centrul tiinific n domeniul Medicamentului al USMF Nicolae Testemianu
Summary
Elaboration of the HPLC method for the phytochemical
study of Hypericum perforatum L. species
The HPLC method with multiwavelength UV-VIS detection has been developed for the
quantification of pharmacologically active substances in herb of St. Johns Wort (Hypericum
perforatum L.) and in extractive products.
The procedure for preparation of raw material samples has been optimized, having in mind
instability of some active substances in solutions.
It was confirmed, that the greatest part of active substances can be found in flowers, smaller
amount - in leaves, but stems are practically deprived them.
Rezumat
S-a elaborat metoda HPLC cu detecia n UV-VIS cu mai multe lungimi de und pentru
dozarea substanelor farmacologic active n herba de suntoare (Hypericum perforatum L.) i n
produsele lor extractive.
Procedura de preparare a probelor de produs vegetal a fost optimizat, innd cont de
instabilitatea unor substane active n soluii.
S-a confirmat, c cantitatea major a substanelor active se afl n flori, mai puine n
frunze, iar tulpinile practic sunt lipsite de ele.
Actualitatea temei
Suntoarea (Hypericum perforatum L., familia Hypericaceae ) este o plant ce prezint n
continuare interes pentru studiu din punct de vedere att farmacologic, ct i fitochimic.
Preparatele din suntoare manifest un spectru larg de aciune farmacologic, inclusiv
antidepresiv, adaptogen, hepatoprotectoare, antimicrobian, antiinflamatoare . a [2, 3, 4]. De
asemenea componena chimic a plantei este destul de complex, incluznd substane din diferite
grupe, n primul rnd, compui fenolici [3, 5]. Nectnd la faptul, c suntoarea se consider o
plant suficient studiat, pn n prezent nu exist o prere unic despre componentul sau grupa
de componeni, care sunt responsabili pentru aciunile farmacologice. Din aceasta cauz nu
exist o abordare unic fa de standardizarea produselor farmaceutice obinute din herba de
suntoare. n orice caz, n studiile fitochimice existente i farmacognostice se prefer maximum
o descriere ct mai detaliat a compoziiei chimice i minimum determinarea substanelor
potenial active i celor caracteristice pentru specia studiat.
Un aport considerabil n soluionarea acestei sarcinii pot servi metodele analitice universale
i, n primul rnd, cromatografice. Alte metode, inclusiv i cele farmacopeice, destinate dozrii
unor grupe chimice aparte, i aplicate n studiile de rutin complexe a plantei sunt incomode i
ineficiente, cernd un volum enorm de operaiuni la etapele de preparare a probelor i de analiz
propriu-zis [1].
Obiectivele lucrrii
Scopul prezentei lucrrii a constat n elaborarea metodei HPLC pentru dozarea mai multor
substane din diferite grupe chimice ntr-o singur prob.
71

Materiale i metode
n lucru s-a utilizat cromatograful de lichide din seria Jasco LC-2000, alctuit din dou
pompe, amestector dinamic de presiune nalt, injector manual, termostat de coloane i detector
UV-VIS cu ir de diode (DAD). Separarea cromatografic s-a studiat pe coloane analitice cu faza
invers. Componenii tamponului au fost de gradul de puritate chimic pur, iar acetonitrilul
pentru HPLC. Substanele de referin au fost procurate de la Fluka i Sigma-Aldrich.
Rezultate i discuii
Alegerea condiiilor de separare a analizilor a fost dictat, mai nti de comportarea
cromatografic a derivailor de antracen condensai (hipericin i pseudohipericin). Avnd
molecule cu structura plat i dimensiuni majorate, aceti compui demonstreaz efecte de
excluzie pe sorbenii cu mrimea porilor 60-80 , care sunt utilizai pe larg. Pe de alt parte,
posednd cte 6 hidroxili fenolici ntr-o molecul, aceti compui fiind analizai pe coloane cu
faza C-8 sau C-18 formeaz picuri cromatografice cu forma alterat, posibil din cauza aportului
majorat de interaciuni nespecifice. Rezultate mai satisfctoare am obinut analiznd probele pe
coloana cu sorbent Kromasil 100 C-4. mbuntirea ulterioar a formei picurilor s-a atins cu
utilizarea concentraiilor nalte ale electrolitului puternic n faza mobil.
O alt dificultate este legat de diapazonul destul de larg a polaritii substanelor
determinate, fapt ce nu permite efectuarea analizei n regim isocratic sau n gradient scurt, iar
aplicarea gradientelor line mrete considerabil timpul analizei. Ca soluie de compromis am
90
10

15

11

gradient
programat

18

75
gradient
real

CACN, %;

A, mAU

12

60

45

13
1

30

5
2 4
3

15

16

6
7
8
9

14

19
17
280 nm
592 nm

0
0

10

15

20

t, min
Fig. 1. Cromatograma extractului din herb de suntoare i forma gradientului programat la
ntrarea n coloan i real (calculat) la ieirea din coloan. Componeni identificai: 1 acizi
oxicinamici; 2 acid clorogenic; 3 catehin; 5 epicatehin; 4, 6-9 proantocianidine
oligomerice; 10 rutozid; 11 hiperozid; 12 isocvercitrin; 13 glicozid flavonolic; 14
cvercetin; 15 biapigenin; 16 pseudohipericin; 17 hipericin; 18 hiperforin; 19
adhiperforin.
72

Hiperozida

Hipericin

Hiperforin
274

360
592

240

280

320

360

400

440

240

300

360

, nm

420

480

540

600

240

280

, nm

Acid
clorogenic

Epicatehin

320

360

400

, nm

Biapigenina

328

332

282

240

280
, nm

320

360

240

280

320
, nm

360

400

440

240

280

320

360

400

440

, nm

Fig. 2. Spectrele n UV-Vis ale substanelor principale din specia H. perforatum L.

propus aplicarea gradientului cu mai multe trepte, n care sectoarele de gradient lin sau eluarea
isocratic alterneaz cu sectoare de gradient abrupt, cum este redat n fig. 1.
Prezena componenilor chimici din diverse grupe cere i efectuarea deteciei la diferite
lungimi de und pentru a asigura selectivitatea i sensibilitatea necesar. Pe fig. 2 sunt prezentate
spectrele UV-VIS a unor substane din grupele principale, caracteristice pentru specia H.
perforatum L. Spectrele sunt extrase din cromatogramele, nregistrate cu DAD. Lungimea de
und 280 nm este preferabil pentru detecia proantocianidinelor i hiperforinei. Restul
componenilor interesai, de asemenea, posed absorban suficient n aceasta regiune a
spectrului, dar n acest caz selectivitatea determinrii lor va fi sczut, n special pentru
hipericin. Astfel, se recomand de efectuat detecia hipericinei i pseudohipericinei la lungimea
de und 592 nm, care este specific pentru grupa dat. Derivaii acidului cafeic se detecteaz la
328 nm, biapigenina la 340 nm, iar glicozide flavonolice la 360 nm. n cazul lipsei
detectorului cu mai multe lungimi de und, se poate efectua detecia aplicnd detectorul cu
scanare la cel puin 2 lungimi de und (280 i 592 nm), programnd schimbarea lor n timpul
nregistrrii cromatogramelor.
Ca rezultat al studiului efectuat, propunem urmtoarele condiii de separare cromatografic a
componenilor principali ai extractelor din herba de suntoare: Coloana Kromasil 100 C-4, 5 m,
100 x 4,6 mm. Faza mobil, pompat cu viteza volumetric 1,5 ml/min, se formeaz n
amestectorul dinamic de presiune nalt din doi componeni: A acetonitril; B soluie KH2PO4
0,1 M + H3PO4 0,02 M. Programul gradientului: 5-32% A n B, 0-8 min; 32-73% A n B, 8-10
min; 73% A n B, 10-13 min; 73-87% A n B, 13-15 min; 87% A n B, 15-18 min. Apoi coloana
se echilibreaz timp de 5 min cu faza iniial (5% A n B) nainte de a injecta proba urmtoare.
Timpul total al unui ciclu cromatografic este 23 min. Soluia de etalonare Nr 1 conine 20 mg/l
hipericin i cte 40 mg/l acid clorogenic, (-) epicatehin, hiperozid i apigenin n amestec
73

150

80

12
120

60

A, mAU

90
2

40

60
4

20

30
2

0
0

0
0

t, min

t, min

t, min

Fig. 3. Cromatoframele extractului din herb de suntoare n regim isocratic: a 18% acetonitril
n tampon fosfat: 1 rutozid, 2 hiperozid, 3 isocvercitrin; b - 72% acetonitril n tampon
fosfat: 1 pseudohipericin, 2 hipericin; c - 85% acetonitril n tampon fosfat: 1 hiperforin,
2 adhiperforin.
acetonitril ap (1:1). Soluia de etalonare Nr 2 conine 80 mg/l hiperforin n faza mobil cu
concentraia acetonitrilului 50%. La concentraii mai joase a acetonitrilului este posibil
precipitarea hiperforinei, sau sorbia hipericinei pe suprafaa vaselor.
Din lipsa substanei de
referin biapigenin, n soluia de etalonare s-a folosit apigenina, care are spectru UV
asemntor, dar elueaz cu 0,2 min naintea biapigeninei. n aceste condiii cromatografice
picurile glicozidelor flavonolice sunt separate incomplet, ceea ce nu prezint o problem pentru
standardizarea produselor dup suma glicozidelor n recalcul la hiperozid sau rutozid.
n cazul, cnd este necesar determinarea doar a unor grupe chimice aparte, se poate micora
considerabil timpul analizei, cu eluarea n regim isocratic la concentraia acetonitrilului n faza
mobil 18% pentru glicozide flavonolice, 72% pentru hipericin i pseudohipericin, sau 85%
pentru hiperforin i adhiperforin. Cromatogramele corespunztoare sunt prezentate n fig. 3.
O alt sarcin important este optimizarea tehnicii de preparare a probelor de materie
vegetal naintea separrii cromatografice. Exist doi factori care pot influena rezultatele
analizei: instabilitatea hiperforinei i a derivailor de antracen n soluiile hidroalcoolice i
legarea strns a hipericinei cu matricea vegetal.

74

Instabilitatea hiperforinei este condiionat de oxidarea ei uoar cu oxigenul din aer, care se
intensific n mediu bazic, de aceea se recomand acidularea extragentului. Pe de alt parte, n
mediu acid scade stabilitatea hipericinei i, n special, a pseudohipericinei. Ca variant de
compromis, s-a ajuns la utilizarea soluiei de acid citric 0,2% n alcool etilic 80% n calitate de
extragent. Acidul citric posed proprieti antioxidande i de tampon; pH-ul extractelor obinute
se afl n limitele 4,2-4,3. Concentraia nalt a etanolului micoreaz solubilitatea oxigenului n
extragent i uureaz extragerea componenilor lipofili, cum ar fi hiperforina. nclzirea
extragentului pn la 60C intensific procesul de extracie i, de asemenea, micoreaz
solubilitatea oxigenului. Aceti factori influeneaz favorabil stabilitatea compuilor activi. La
temperaturi mai ridicate de 60C crete pierderea extragentului din cauza evaporrii.
Din curbele cinetice (fig. 4) se vede, c timpul optim pentru o singur extracie este n jur de
40-45 min. Majorarea timpului de extracie duce la micorarea concentraiei hiperforinei.
Dependena randamentului hipericinei i hiperforinei de numrul de extracii este prezentat n
tabelul 1. Cu eviden variantele optime i timpul total necesar sunt 3 extracii cte 30 min sau 2
extracii cte 45 min. Ultima variant necesit mai puine operaiuni.
Tabelul 1
Randamentul compuilor principali la extracia repetat a 0,5 g herb de suntoare cu
poriuni a cte 50 ml extragent la temperatura 60C
Randamentul cumulativ, %

Nr. de
extracie

Hipericina

Hiperforina

Glicozide flavonolice

t=30 min

t=45 min

t=30 min

t=45 min

t=30 min

t=45 min

76,0

88,7

88,0

91,0

87,3

90,4

91,8

96,9

96,7

98,7

96,1

98,2

97,0

98,0

98,8

99,6

98,6

99,5

Pe baza datelor, expuse mai sus, se propune urmtoarea tehnica de preparare a probelor de
herba de suntoare pentru analiza cromatografic: Circa 0,5 g (masa exact) materie prim
mrunit, care trece prin sita cu diametru orificiilor 1 mm, se introduce n balon cu capacitatea
100 ml, se adaug 50 ml soluie acid citric 0,2% n alcool etilic 80%, se nclzete pe baie de ap
la temperatura 60 2C timp de 45 min, amestecnd periodic. Coninutul balonului se filtreaz
prin tampon de vat n balon cotat cu capacitatea 100 ml. Tamponul cu materia prim se
rentoarce n primul balon i extracia se repet nc o dat n aceleai condiii. Extractul sumar
1.0

Unitati relative

0.8
0.6
0.4
Hipericina + pseudohipericina
Hiperforina + adhiperforina
Glicozide flavonolice

0.2
0.0
0

20

40

60

80

t, min

Fig. 4. Curbele cinetice ale extraciei unor componeni principali la prepararea probelor de
materie prim.
75

se rcete pn la temperatura 20C i se completeaz pn la volumul de 100 ml cu extragent

pur. Alicota se centrifugheaz 5 min la 3000-4000 g. Cte 10 l prob i soluiei standard se
injecteaz n sistemul cromatografic. Toate operaiunile de preparare a probelor trebuie efectuate
n ncperi ntunecate pentru a preveni descompunerea hiperforinei sub influena luminii.
Produsele extractive din herba de suntoare pentru analiza cromatografic pot fi preparate n
modul urmtor: Tincturile i extractele lichide se dilueaz de 20-100 ori (n dependena de
concentraiile substanelor analizate) cu soluie acid citric 0,1-0,2% n alcool etilic 70-80%, sau
cu faz mobil cu concentraia acetonitrilului 40-50%. Extractele uscate i formele farmaceutice
solide se prepar prin dizolvarea probei de pulbere n unul din aceti solveni utiliznd baia cu
ultrasunet. Masa probei i diluarea necesar se calcul, reieind din diapazonul optim al
concentraiilor rezultante ale principalelor substane active: 10-50 mg/l pentru hipericin i 40200 mg/l pentru hiperforin.
Cu ajutorul metodei elaborate am studiat repartizarea substanelor potenial active n diferite
pri ale plantei nflorite H. perforatum L.: flori, frunze i tulpini. Din rezultate (tabelul 2) se
vede, c cantitatea major a acestor substane se afl n flori, mai puine n frunze, iar tulpinile
practic nu conin componeni activi. Rezultatele obinute denot raionalitatea colectrii prii de
sus a plantei nflorite, precum i necesitatea limitrii coninutului de tulpini n materia prim.

76

Tabelul 2
Coninutul compuilor principali n diferite organe ale herbei de suntoare
Organul
plantei

Coninutul, mg/g
Hipericina
+ pseudohipericina1

Hiperforina
+ adhiperforina2

Glicozide flavonolice3

Flori

4,63

48,0

30,8

Frunze

1,82

4,23

31,4

Tulpini

0,08

0,88

5,1

Nota: 1 n recalcul la hipericin; 2 n recalcul la hiperforin; 3 n recalcul la hiperozid.

Concluzii
S-a elaborat metoda HPLC UV-Vis care s-a dovedit a fi rapid i eficient pentru dozarea
diferitor grupe de substane farmacologic active n herba de suntoare i a produselor extractive.
Metoda permite dozarea hipericinei, pseudohipericinei, hiperforinei, biapigeninei, glicozidelor
flavonolici, acizilor oxicinamici, catehinilor i proantocianidinelor oligomerice ntr-o singur
prob.
Optimizarea procedurii de preparare a probelor de materie prim, asigur stabilitatea
substanelor active n timpul analizei.
S-a confirmat repartizarea neuniform a substanelor active ntre diferite organe ale plantei i
necesitatea limitrii coninutului de tulpini n materia prim.
Metoda elaborat poate fi util pentru standardizarea materiei prime herba de suntoare,
precum i ale preparatelor farmaceutice, ce conin produse extractive din specia dat.
Bibliografie
1. European Pharmacopoeia 6.0, vol. 2, 2008, p. 2958-2959.
2. Ichim Daniela Luminia, Nicua Daniela, Cpraru Gabriela. HYPERICUM PERFORATUM
L. in modern phytotherapy. Analele tiinifice ale Universitii Alexandru Ioan Cuza,
Seciunea Genetic i Biologie Molecular, tom VIII, 2007, p. 253-257.
3. WHO Monographs on selected medicinal plants. Hyperici Herba. Vol. 2, 2004, p. 149-171.
4. .., .., ..
: . , 6 (42), 2000.
5. .., ..
.
. 2008, 1, . 81-86.

77

APLICAREA METODELOR FIZICO-CHIMICE N STUDIUL CHIMICOFARMACEUTIC AL COMPRIMATELOR DE SOMNOL

Tamara Cotelea1, Serghei Ermolaev1, Efim Arama2, Oleg Bolotin3, Iurii Tihon1
1
Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic USMF N.Testemianu
2
Catedra Biofizic, informatic i Fiziologia omului N.Testemianu
3
Institutul de Chimie al A RM
Summary
Phisico-chemical methods applied in chemico
pharmaceutical study of Somnol tablets
The chromatography method on a thin layer was worked out to identify the zopiclone ( an
active principle of Somnol tablets) by utilizing four systems of solvents, the spectroscopy IR,
thermic effects have been registered applying the thermogravimetrical method, the
spectrophotometrical method of dosing in powders and tablets of 7,5mg as well as the HPLC
method to identify in powder. Due to the fact that, these utilized methods are specific and
reproductive , they are recommended for the study of zopiclone in biological fluids.
Rezumat
A fost elaborat metoda cromatografiei pe strat subire de identificare a zopiclonei
(principul activ din comprimate de Somnol) utiliznd 4 sisteme de solveni,metoda
spectroscopiei IR, au fost nregistrate efectele termice aplicnd metoda termogravimetric,
metoda spectrofotometric de dozare n pulbere i comprimate 7,5 mg, precum i metoda HPLC
de identificare n pulbere. Dat fiind faptul, c metodele folosite sunt specifice i reproductive ele
se recomand pentru studierea zopiclonei n lichidele biologice.
Actualitatea temei
Zopiclona se utilizeaz pe larg n medicin ca somnifer, anxiolitic, anticonvulsiv,
migrelaxant. Zopiclona posed aciune nemijlocit asupra regiunilor de legtur a receptorilor 1,
2, 3 i 5 a acidului gama aminobutiric (AGAB). La fel contribue la creterea permeabilitii
clorului n celul i provoac hiperpolarizarea membranelor i totodat frnarea puternic a
neuronilor. Spre deosebire de benzdiazepine nu acioneaz la durata somnului pentru restabilirea
funciei psihice, memoriei, dar prelungete faza latent a somnului important, pentru restabilirea
fizic a organismului.
n prezent comprimatele de Somnol cu coninut de zopiclon se administreaz n
tratamentul insomniei de situaie i cronic la maturi inclusnd dificulti la adormire i trezire
preventiv. n procesul terapiei cu zopiclon se micoreaz perioada adormirii i crete durata
somnului i eficacitatea.
Obiectivele lucrrii
Efectuarea studiului n vederea determinrii metodelor fizico-chimice de analiz, de
identificare i dozare a acestei substane, care ar putea fi aplicate i dup extragerea din lichidele
biologice.
Materiale i metode de cercetare
n cadrul cercetrilor s-a folosit zopiclon substana pur (cu grad de puritate pur pentru
analiza i chimic pur), comprimate somnol 7,5 mg AO Gridex (Letonia). n calitate de
reageni s-au folosit cloroform, acid clorhidric, alcool etilic, acetonitril, alcool metilic, hidroxid
de sodiu.
Pentru determinarea identitii am aplicat metoda cromatografiei pe strat subire (CSS),
folosind plci cromatografice cu coninut de silicagel G, n cadrul crui s-au utilizat 4 sisteme de
solveni: cloroform dioxan aceton soluie amoniac 25 % (47,5 : 45 : 5 : 2,5); toluen
aceton etanol - soluie amoniac 25 % (45 : 45 : 7,5 : 2,5); cloroform metanol (90 : 10);
78

cloroform aceton (80 : 20), pentru care s-a determinat valoarea Rf egal cu 0,80; 0,49; 0,55;
0,60. respectiv.
Spoturile de zopiclon pe placa cromatografic fluorisceaz n razele UV n culoare
verzue; cu reactivul Nessler culoare galben, cu Dragendorff i acid sulfuric rou-cafeniu.
Pentru aceasta 0,0016 g substan pur (m.e.) se trece ntr-un balon cotat cu volumul de 25 ml, se
dizolv n acid clorhidric 0,1 M i se aduce la cot cu acelai solvent (sol.A). 1 ml sol. A se trece
ntr-un balon cotat cu volumul 50 ml i se aduce la cot cu acelai solvent (sol. B). 2l soluie B
se aplic pe linia de start a plcii, placa se introduce n camera de cromatografiere, se
cromatografiaz ascendent n sistemul de solveni corespunztor. Cnd frontul de solveni va
parcurge 2/3 din lungimea total a plcii cromatografice ultima se scoate din vas, se usuc la aer
i se pulverizeaz cu reactivele respective. Sensibilitatea reactivilor ne d posibilitate s aplicm
aceast metod pentru cercetarea zopiclonei n extrasul organic din lichidul biologic.
n aspectul analizei, structurii moleculare a substanelor medicamentoase, identificarea i
controlul puritii lor este metoda spectrofotometriei de absorbie n UV.Astfel pentru
identificarea i aprecierea zopiclonei s-au nregistrat spectrele de absorbie n intervalul
lungimilor de und 220-350 nm n cuv cu drumul optic 10 mm.
n extractul cloroformic se compar spectrele de absorbie a soluiei de analizat i soluiei
standard. Spectrele au fost citite la spectrofotometru Perkin Elmer Lambda 400 n Soluia
standard are maxim de absorbie la lungimea de und 308,93 nm. Soluia de cercetat la 308,79
nm.
Pentru acesta 0,015 g (m.ex.) zopiclon se trece n balon cotat, cu volumul 100 ml se
dizolv n solventul respectiv (acid clorhidric, cloroform, metanol, hidroxid de sodiu 0,1 M) se
agit pn la dizolvarea complet pe baia cu ultrasunet i se aduce la cot cu solventul
corespunztor soluia A. 10 ml sol.A se plaseaz n alt balon cotat cu capacitatea de 100 ml i
se aduce la cot cu solventul corespunztor (soluia B). Se citete absorbana soluiei de analizat
la spectrofotometru Perkin Elmer Lambda 400 n cuv cu drumul optic 10 mm, n intervalul
lungimii de und 220-350 nm .
Spectrele de absorbie a soluiei zopiclon (15 g/ml) n aceti solveni are urmtoarele
maxime de absorbie: n acid clorhidric 0,1 M la lungimea de und 303 nm, n cloroform 305,5
nm, n metanol 304,0 nm, n hidroxid de sodiu 0,1 M 237 i 277,5 nm (fig.1,2,3,4).
Preventiv s-a cercetat dependena absorbanei de concentraia zopiclonei. Pentru aceasta
0,01 g zopiclon pulbere (masa exact) se plaseaz ntr-un balon cotat cu capacitatea de 50 ml se
dizolv n cloroform i se completeaz pn la cot (soluia A) 10 ml soluie A se plaseaz n alt
balon cotat cu capacitatea de 50 ml i se aduce cu cloroform pn la cot (soluia B 0,004 %).
Din soluia B se pregtesc o serie de soluiei cu concentraiile corespunztoare
1,5,10,15,20,25,30 g/ml. Se citete absorbana acestor soluii la lungimea de und 305 nm n
cuva cu drumul optic de 10 mm. n calitate de soluie de referin se utilizeaz cloroformul. n
baza acestor date s-a construit graficul absorbanei n funcie de concentraia zopiclonei n
soluie de cloroform Din curba de etalonare a zopiclonei reiese c legea Bouguer-Lambert-Beer
se respect n intervalul de concentraie 0,1-30 g/ml. n aceast faz s-a elaborat tehnica de
lucru pentru dozarea spectrofotometric n pulbere i comprimate. Eroarea relativ 1,48 %.
0,51
303,93
0,4

215,85

0,3
A
0,2
207,80
0,1
244,10
0,00
200,0

250

300

350
nm

400

450

500,0

Fig.1Spectrul de absorbie al zopiclonei

n acid clorhidric 0,1M

Fig.2 Spectrul de absorbie al zopiclonei

n cloroform

79

0,70

0,80

201,85
218,14

0,6

0,7

0,4
A

237,14

0,6

0,5

304,15

277,57

0,5

212,15
A

0,3

0,4
0,3

0,2

217,82

0,2

0,1

258,07

0,1

245,12
0,00

0,00

198,0

250

300

350
nm

400

450

500,0

215,0

Fig.3 Spectrulde absobie al zopiclonei

n metanol

250

300

350
nm

400

450

500,0

Fig,4 Spectrul de absorbie al zopiclonei n

hidroxid de sodiu 0,1M

A fost efectuat identificarea zopliconei prin metoda spectroscopiei IR n regiunea 400

4000cm. Spectrul IR al zopliconei a fost descifrat n baza datelor din literatur. Spectrele
principale s-au evideniat la urmtoarele lungimi de und: 1372, 1225-1075, 1463, 1600-1500,
1150-1180, 810, 720 i 701cm 1.
n cadrul cercetrilor pentru o investigaie mai profund a fost aplicat metoda
termogravimetric de analiz, metoda cercetrilor proceselor chimice i fizico chimice bazat
pe nregistrarea efectelor termice nsoite de transformrile compuilor n condiiile de
programare a temperaturii. Analiza termic este un instrument superior n determinarea
componenei chimice a obiectelor de analizat, dar i studierea proceselor chimice, fizice i fizicochimice n vederea stabilirii unor particulariti ale substanelor medicamentoase cu repercusiuni
directe asupra efectelor lor biologice. Pentru cercetarea comportrii termice a zopiclonei am
folosit derivatograful QD-102 (F. Paulik, V. Erdei) firma MOM (Ungaria ). S-au nregistrat
curbele de temperatur (T), analiza termic diferinial (ATD), termogravimetric (TG) i
termogravimetric diferinial.(TGD)
Condiiile de lucru: masa probei 20 mg. viteza temperaturii 10 oC/min, sensibilitatea
ATD 1/5, TGD 1/10. S-au utilizat locae pentru probe din platin. n calitate de etalon s-au
utilizat oxidul de aluminiu.Rezultatele derivatogramei obinute relev faptul, c zopiclona este o
substan relativ stabil termic. Pe curba ATD sunt nregistrate 2 efecte exotermice: termoefectul
1 n intervalul de temperatur 105 150 oC cu maximul la 145oC i termoefectul 2 n intervalul
235 285oC, cu maxim la 165OC este condiionat de perderea n mas a substanei, (curba TG),
descompunerea, trecerea n alte forme polimorfice.
Conform structurii chimice zoplicona este un compus ionic. Asemnrile de structur i
proprietile chimice ale zopiclonei cu alcaloizii ne decid s aplicm metoda cromatografiei
lichide de performan nalt (HPLC) folosind coloana. Zorbax eclipse XDB C 18, mrimea
particulelor 150 mm x 4,6 mm, rata curentului 1,5 ml/min, t o 30oC. Concentraia soluiei de
analizat 12g/ml timpul de retenie 2,97 min., faza mobil soluia A (5g laurilsulfat sodic, 1g
dihidrofosfat sodic ap pn la 1l. Se aduce la pH 3,4 cu acid fosforic 10%. Amestecul se
filtreaz cu ajutorul aparatului Millipore XF 5423050) i acetonitril n raport 52:48.
cromatograma zopliconei n concentraie 12g/ml se reprezint n figura 5.
n continuare am efectuat identificarea zopiclonei n mediul organic (cloroform) aplicnd
metoda HPLC (fig.6). n calitate de eluent se folosete amestec de acetonitril i soluie A care
const din laurilsulfat sodic i dihidrofosfat sodic la pH 3,4 n raport 52:48. Determinarea
zopiclonei se efectuiaz cu ajutorul detectorului UV la lungimea de und 303nm.Timpul de
retenie 2,58 min.
Metoda propus este exact i rapid n vederea identificrii zopliconei dup izolarea din
lichidele biologice.

80

Fig.5 HPLC. Cromatograma zopiclonei

Fig. 6.HPLC. Cromatograma zopiclonei n cloroform.

Concluzii
Pentru identificarea zopiclonei s-au propus metoda cromatografiei pe strat subire pe
plci cu silicagel n 4 sisteme de solveni, spectrofotometria n UV cu determinarea maximului
de absorbie n acid clorhidric 0,1 M metanol, hodroxid de sodiu 0,1M cloroform, metoda HPLC
aplicnd coloana Zorbax Eclipse XDB C-18.
Dozarea zopliconei n comprimate somnol a fost efectuat prin metoda
spectrofotometric UV. Greala relativ a rezultatelor cercetrilor constituie 1,48%.
Bibliografie
1. Bellomy L.J. The infrared spectra of complex molecules London, 1959 95 and New
York, 1996 590p.
2. Bodoga B. Maria Virginia coman. Cromatografia pe strat subire Bucureti: Ed. Tehnic,
1995 160p.
3. Dorian P., Sellers Em., Kaplan H.Hamilton C. Evalation of zoplicone physical dependence
liability in normal voleyiteers. Pharmacology 27. 1983; Suppl 2: 228 34p.
4. Holbrook AM., Crowther R., Lotter A., Cheng C., Meta analysis of bentodiazepine use in the
treatment of insomnia CMAJ. 2002.
5. Holmgren., H. Druid S. Hollander J., Ahlner., Fatal and non-fatal consehtrations of newer
antidepressants and hypnotics, post mortem femoral bload. Proccedings of 38 TIAFT
Meeting, Helsinki, 13 17 August 200; - 62p.
6. Skerritt Jh., Johnston G. Enancement of GABA binding by benzodiazepines and related
anxiolitics. European journal of pharmacologi 1983 May. 89 (34):193 8p.
7. Toniton Y. Sleep disorders and hypnotic agents : medical, social and economical impact. Ann
Pharm Fr. Jyly 2007; 65 (4):230 8p.
81

ANALIZA CHIMICO-TOXICOLOGIC A ZOPICLONEI

Tamara Cotelea1, Serghei Ermolaev1, Leonid Lsi2 Efim Arama3
1
Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic USMF N.Testemianu
2
Catedra Biochimie i Biochimie clinic USMF N.Testemianu
3
Catedra Biofizic, informatic i Fiziologia omului
Summary
Chemico-toxicological analysis of zopiclone
The optimum isolation and extraction conditions of zopiclonea from biological fluids. We
used physico chemical methods to identify zopiclone : chromatography on a thin layer by
utilizing four systems of solvents, spectrophotometrical method in UV, HPLCThe methods
processed by us for zopiclone in biological tests in vitro are specific and reproductive, and
they are recommended for the study of zopiclone in biological fluids.
Rezumat
Au fost determinate condiiile optime de izolare i extragere a zopiclonei din lichidele
biologice Am aplicat metodele fizico-chimice de identificare a zopiclonei: cromatografia pe strat
subire utiliznd patru sisteme de solveni, metoda spectrofotometric n UV, HPLC. Metodele
prelucrate de noi pentru zopiclon n probele biologice in vitro sunt specifice i reproductive
i ele se recomand pentru studierea zopiclonei n lichidele biologice.
Actualitatea temei
Zopiclona reprezentant din noua clas a compuilor chimici ciclopirolane. Spre
deosebire de benzodiazepine se leag numai cu receptorii centrali i nu posed afinitate cu
receptorii periferici. Proprietile farmacologice ale zopiclonei includ aciunea sedativ,
anxiolitic, anticonvulsiv i relaxiv.
n prezent zopiclona se administreaz n tratamentul insomniei cronice pentru maturi.
Cercetrile clinice au artat c zopiclona mbuntete indicii obiectivi i subiectivi ai somnului:
micoreaz perioada adormirii, mrete longevitatea somnului micoreaz frecvena de trezire,
mbuntete dinamica trezirii, calitatea somnului.
Metabolismul zopiclonei se petrece n ficat cu ajutorul citocromului P-450(3A i 2C).
Metaboliii principali sunt derivaii N-oxid (activ) i N-dismetil metabolit cu aciunea anxiolitic
i cu proprietile de inhibare a receptorilor nicotin-acetilcolinici, care protegaz dependena
psihic i fizic. Perioada de njumtire este de 4 ore. Prin urin se elimin 80% , prin intestine
-16% . Biotransformarea zopiclonei este redat n figura 1.

N desmetil zopiclon

N oxid zopiclon

Fig. 1 .Biotransformarea zopiclonei

Zopiclon N-oxid posed efect slab tranchilizant i sedativ.Ali metabolii ai zopiclonei sunt
lipsii de activitate.
Cercetrile rilor baltice marcheaz cazuri cu intoxicaii grave cu sfritul letal n urma
supradozrii. Administrarea zopiclonei concomitent cu alcoolul etilic duce la euforie.
82

Narcomanii primesc preparatul pentru a sinergiza aciunea narcoticelor. Simptomele de

intoxicaii includ disfuncia sustemului nervos central i sistemului respirator, hiperkaliemia,
hiperglicemia.Doza letal se consider 1,4-3,9 mg/l.
Cercetrile clinice din Bristol, Marea Britanie au artat, c pacienii cu disfuncii ale
ficatului risc intoxicaii acute cu zopiclon.Dup administrarea unei doze la bolnavii cu ciroz,
concentraia zopiclonei n snge este cu mult mai mare comparativ cu pacienii sntoi. La
pacienii cu ciroz clearensul zopiclonei se micoreaz cu 40% n corespundere cu micorarea
procesului de dismetilare Acesta se lmurete prin faptul c metabolismul i eliminarea
zopiclonei din organism este cu mult mai ncetinit i n cele din urm are loc cumularea
preparatului n organism. Totodat folosind preparate inhibitori ai citocromului ficatului se
micoreaz clearensul zopiclonei, mrind concentraia preparatului n snge. n baza acestor date
ne-am pus ca scop preculcrarea metodelor disponibile, specifice pentru determinarea zopiclonei
n materialul biologic. Analiza chimico-toxicologic se bazeaz pe analiza chimico-farmaceutic
a preparatului de determinare a calitii.
Obiectivele lucrrii
De a efectua studiul determinrii condiiilor de izolare i separare a zopiclonei din
lichidele biologice precum i aplicarea metodelor fizico-chimice de identificare i dozare.
Materiale i metode de cercetare
n cadrul cercetrilor s-a folosit zopiclon substana pur, comprimate somnol 7,5 mg.
A fost folosit plasma sanguin i urin ca lichide biologice. Au fost aplicate metode
chimice i fizico-chimice de analiz. Rezultatele au fost prelucrate dup criteriul student. Ca
reageni s-au utilizat n investigaiile experimentale cloroformul, acidul sulfuric, alcool etilic 95
%, acidul clorhidric, hidroxidul de sodiu, care au fost cu grad de puritate pur pentru analiza i
chimic pur.
Izolarea i extragerea zopiclonei din materialul biologic
Odat cu creterea numrului de intoxicaii n acela timp al intoxicaiilor cu zopiclon
este necesar prelucrarea noilor metode de determinare a preparatelor n materialul biologic.
n literatur sunt descrise metode multiple de izolare, extragere i identificare a
preparatelor din materialul biologic. Aceste principii de lucru au fost aplicate pentru
determinarea zopiclonei din lichidele biologice.
Am prelucrat metoda de determinare a zopiclonei n plasma sanguin dup extragere cu
cloroform i determinarea zopiclonei direct n plasm.
n scopul izolrii zopiclonei din lichidele biologice au fost folosite amestecuri modele din
plasma sanguin. Pentru aceasta la 10 ml plasm sanguin am adugat 1 ml soluie zopiclon
(1000 g), am agitat bine lsnd pe 1 or.
Metoda de izolare a zopiclonei
La 10 ml plasm sanguin cu coninut de zopiclon am adugnd 5 ml soluie acid
sulfuric 10 % dup 2 ore am adugat 5 ml acid tricloracetic 30 %, lsndu-l nc 1 or. Apoi
acest amestec se centrifugeaz timp de 10 minute (500 rot/min), sub controlul pH-ului (pH=2,0)
i de 3 ori se extrage cu eter dietilic cte 5 ml. Soluia apoas se alcalinizeaz cu soluie hidroxid
de sodiu la pH 11,0 i de 3 ori se extrage cu cloroform cte 10 ml. Extractele cloroformice se
unesc i se filtreaz prin filtru cu 1 g de sulfat de sodiu n colb cu volumul de 25 ml, unde se
adaug cloroform pn la cot.
n vederea identificrii zopiclonei n extrasul cloroformic am aplicat cromatografia pe
strat subire folosind plci cromatografice cu coninut de silicagel G. Am utilizat 4 sisteme de
solveni: cloroform dioxan aceton soluie amoniac 25 % (47,5 : 45 : 5 : 2,5); toluen
aceton etanol - soluie amoniac 25 % (45 : 45 : 7,5 : 2,5); cloroform metanol (90 : 10);
cloroform aceton (80 : 20), pentru care s-a determinat valoarea Rf egal cu 0,80; 0,49; 0,55;
0,60. Ca relevant s-a utilizat reactivul Dragendorff.Sensibilitatea reaciei este de 10-15 g/ml.
83

Spectrofotometria de absorbie n UV este o metod de identificare i apreciere a

substanelor medicamentoase bazat pe compararea cu spectrele substanelor de referin sub
aspectul analizei structurale. Astfel pentru identificarea zopiclonei n extractul cloroformic se
compar spectrele de absorbie a soluiei de analizat i soluiei standard. Spectrele au fost citite la
spectrofotometru Perkin Elmer Lambda 400 n regiunea 220-350 nm n cuv cu grosimea
stratului 10 nm. Soluia standard are maxim de absorbie la lungimea de und 308,93 nm. Soluia
de cercetat la 308,79 nm. Spectrul de absorbie a soluiei de analizat este redat n figura1.

Fig.1 Spectrul de absorbie al zopiclonei n extrasul cloroformic

Identificarea zopiclonei dup extragere din plasm sanguin aplicnd metoda
cromatografiei lichide de performan nalt
Identificarea zopiclonei n extractul cloroformic prin metoda Cromatografiei de
performan nalt a fost efectuat la aparatul Agilent Tehnologies 1200, coloana Zorbax eclipse
XDB-C 18, mrimea particulelor 150 nm x 4,6 cm. Rata curentului fazei mobile 1,5 ml/min,
temperatura 300 C.
n calitate de eluent am folosit amestec acetonitril i soluia A, constituit din amestec de
lauril sulfat i dihidrofosfat de sodiu la pH 3,4 n raport 52 : 48. Determinarea zopiclonei se
efectueaz cu ajutorul detectorului UV la lungimea de und 303 nm.
Timpul de retenie a soluiei de analizat corespunde cu timpul de reinere a soluiei
standard respectiv 2,6 min i 2,58 min. ( fig.2.).

Fig. 2. HPLC. Cromatograma zopiclonei dup extracie din plasma sanguin

Identificarea zopiclonei nemijlocit n plasma sanguin aplicnd metoda
cromatografiei lichide de performan nalt s-a efectuat n coloanei Zorbax eclipse XDB-C
18, mrimea particulelor 150 nm x 4,6 cm ml/min la temperatura 30 0 C. n calitate de eluent s-a
84

folosit amestec acetonitril i soluia A (amestec laurilsulfat sodic i dihidrofosfat sodic la pH 3,4
n raport 52: 48. S-a determinat cu ajutorul detectorului n UV la lungimea de und 303 nm.
Soluia de zopiclon (800 ng/ml) se adaug la plasma sanguin (1 : 1) i 2 ml acetonitril.
Amestecul obinut se centrifugeaz 10 min i se filtreaz. 20 l soluie filtrat se injecteaz n
precoloana cromatografului i se determin timpul de retenie(fig.3).
Soluia standard (1 ml sol.zopiclon i 3 ml acetonitril) se injecteaz la fel, obinnd
picul) cu timpul de retenie respectiv .

Fig. 3. HPLC. Cromatograma zopiclonei n plasma sanguin

Concluzii
Izolarea zopiclonei din materialul biologic se efectueaz la pH 2,0-2,5, precipitnd
proteinele cu soluie apoas acid tricloracetic 10 %, extragerea impuritilor cu eter dietilic la pH
2,0 i la pH 11,0 extragerea zopiclonei cu cloroform.
n scopul identificrii preparatului n extrasul cloroformic se propune CSS, metoda
spectrofotometriei UV, HPLC.
Bibliografie
1. Br. J. The excretion of zoplicone info breast milk Clin. Pharmac. 1990; 30, 26727p.
2. Roschke J., Mann K., Aldenhoff Jb. Benkert O., Funcional properties of the brain during
sleep
under
subchronic
zoplicone
administration
in
main.
European
neuropsychopharmacology:
the
journal
of
the
European
college
of
Neuropsychopharmacology. 2003 Aug.; 4(1): 21 30p.
3. Boniface P. J. And Russel S. G. Two cases of fatal zopiclone overdose. J. Analit. Toxicol.
1996; 20, 131 133p.
4. Caille G., Soush P. Spenard J., Iacasse I., Vezina M. Pharmacokinetic and trimipramine when
administered simultaneosly to volunteers. Biopharmaceutics and dryg disposition 200 oct;
5(2): 117 25p.
5. Van Der Kleijn E. Effects of zopiclone and temazepam on sleep, behaviour and mood during
the day. European journal of clinical pharmacology 1996 dec; 36(3): 247 51p.

85

STUDIUL INFLUENEI RADIAIILOR EMISE DE TELEFONUL MOBIL ASUPRA

PROPRIETILOR COLIGATIVE ALE SOLUIILOR
Mihail Anton
(Conductor tinific conf. univ., dr. n tiine chimice Vasile Srbu)
Catedra Chimie General USMF "Nicolae Testemianu"
Summary
The Study of the influence of emitted cell phone radiation
upon the colligative properties of solutions
Nowadays, the cell phone has become a mandatory attribute of everyday life. Although
widely used, the actions this device can influence on the humans and the processes that happen
inside it, are yet least studied. The human organism is a system organized so fine, that even the
smallest external influences can essentially disorder its functionality. In this context, we
proposed ourselves to study the influence of emitted cell phone's radiation on the colligative
properties of the solutions, given that most biochemical processes of the human organism happen
in the aqueous medium and the progress, speed and results of these processes depend on the
colligative properties.
Rezumat
Actualmente, telefonul mobil a devenit un atribut obligatoriu al vietii cotidiene. i, dei
utilizat pe larg, sunt deocamdat puin studiate aciunile pe care le poate determina aparatul dat
asupra omului i proceselor ce se petrec n interiorul acestuia. Organismul uman este un sistem
ntr-att de fin organizat, nct cele mai mici influene din exterior i pot deregla esenial
funcionalitatea. n acest context, ne-am propus a studia cum influeneaz radiaiile emise de
telefonul mobil asupra proprietilor coligative ale soluiilor, dat fiind faptul c majoritatea
proceselor biochimice din organism se petrec n mediul apos.
Actualitatea temei
La 26 de ani dupa lansarea primei reele de telefonie mobil, numrul abonailor acestor
servicii a ajuns la 3,3 miliarde la nivel mondial, echivalentul a 50% din populaia Globului [5].
n Republica Moldova, numrul persoanelor ce dein i utilizeaz activ telefonul mobil se ridic
la 2-2,5 milioane de persoane [2].
Ce este telefonul mobil? Telefonul mobil prezint un captator-transmitor de radiaii
electromagnetice, cu funcia de a menine legtura cu staiunea de baz. Ca i orice surs de
radiaii electromagnetice, el creaz mprejurul su un cmp electromagnetic care, dup cum a fost
demonstrat, are i aciune biologic. [3]
Reieind din particularitile de funcionare i utilizare, telefonul mobil se afl permanent
conectat n nemijlocita apropiere a corpului uman, ceea ce favorizeaz o eventual influen
asupra organismului uman de ctre acest aparat. n acest context, sunt posibile devieri a unei
game largi de reacii biochimice, inclusiv la capitolul farmacocinetic.
La moment, sunt ntreprinse n lumea ntreag o serie de studii care au drept scop
elucidarea riscurilor ce survin la utilizarea telefoanelor mobile. Exist suspiciuni privind faptul
c acest aparat ar putea genera starea de toxicemie general a organismului, surditate uni- i
bilateral, diferite tipuri de cancer, malformaii la nou-nscui etc. [3]
Obiectivul lucrrii
Ne-am propus a studia cum influeneaz radiaiile emise de telefonul mobil asupra
proprietilor coligative ale soluiilor, dat fiind faptul c majoritatea proceselor biochimice din
organism se petrec n mediul apos, iar de proprietile coligative depind mecanismul de
petrecere, viteza i rezultatele acestor procese.
Studiul nostru difer de celelalte din domeniul dat prin faptul c studiaz procesele ce au
loc la nivel molecular, care se petrec i n afara organismului, este uor de realizat i este rapid.
86

Materiale i metode
Drept criteriu de studiu a fost luat constanta de ionizare a acidului acetic, care poate s
se modifice sub aciunea diferitor factori exteriori. Constanta de ionizare a fost determinat prin
metoda conductometric, utiliznd puntea reohordic R-38 pentru msurarea rezistenei soluiei
de acid acetic cu concentraia molara c(CH3COOH) = 0,1 mol/l [4]. S-a procedat n felul
urmtor:
S-a determinat constanta celulei electrolitice cu ajutorul soluiei standard de clorur de
potasiu cu c(KCl) = 0,1 mol/l pregtit pe ap bidistilat, cu conductibilitatea electric
specific cunoscut [4]. Constanta celulei electrolitice se calculeaz folosind expresia:
D = H (KCl) R(KCl) ,
unde R(KCl) rezistena medie aritmetic a soluiei standard de clorur de potasiu, ;
H (KCl) conductibilitatea electric specific a soluiilor standard de clorur de potasiu,
S/m.
S-a msurat rezistena soluiei de cercetat a acidului acetic n condiiile absenei
radiaiilor electromagnetice ale telefonului mobil (telefonul mobil deconectat), a
prezenei telefonului mobil n stare de ateptare i n stare de funcionare activ (n timpul
convorbirilor). Drept surs de radiaii electromagnetice a servit telefonul mobil de marca
Siemens, modelul C75, produs n anul 2004. Rezistena soluiei s-a calculat dup
formula:
R2
Rm ,
Rx =
R1
R2
unde Rm valorile de pe braul de comparare;
- valorile de pe scara
R1
conductometrului.
Pe baza valorilor rezistenei soluiei i a constantei celulei electrolitice am calculat
valoarea conductibilitii electrice specifice dup expresia:
D

H sol = R
sol
Cunoscnd valoarea conductibilitii specifice a soluiei de acid acetic, am calculat
valorile conductibilitii electrice echivalente (c), iar folosind valorile conductibilitii
electrice ionice la diluia infinit [4], am calculat conductibilitatea electric echivalent la
diluia infinit (o):
X sol
c = 1000 c f ( x) ; o = H+o + CH3COO-o ;
echiv
unde 1000 - coeficientul de trecere de la concentraia molar a echivalentului, exprimat
n mol/l la mol/m3; Xsol - conductibilitatea electric specific a soluiei de acid acetic.
Cunoscnd valorile conductibilitii electrice echivalente i valorile conductibilitii
electrice echivalente limit, am calculat constanta de ionizare a acidului acetic n diferite
condiii:
2

c c
K=
o o c
Rezultate
La efectuarea calculelor s-au luat n consideraie urmtoarele date din ndrumar:

CH3COO-o = 40,9

S m2
;
mol

H+o = 349,8

Rezultatele obinute au fost incluse n Tab.1.

87

S m2
; T = 298oK
mol

Telefon mobil
deconectat
Telefon mobil n
stare de
ateptare
n timpul
convorbirilor

Timp ,
s
30
90
150
30
90
150
30
90
150

Rm ,

10

R2/R1
1,79
1,78
1,78
1,83
1,84
1,84
2,05
2,06
2,05

Rsol ,

17,9
17,8
17,8
18,3
18,4
18,4
20,5
20,6
20,5

H sol ,
S/m
0,23
0,23
0,23
0,22
0,22
0,22
0,2
0,2
0,2

Tab.1
K(CH3COOH),
mol/l
3,68 10-4
3,35 10-4
2,76 10-4

Opinii i discuii
Dup cum reiese din rezultatele obinute, radiaiile electromaagnetice emise de telefonul
mobil acioneaz ntro masur oarecare asupra principalelor proprieti coligative ale soluiilor,
deci i asupra celulei i organismului n ansamblu. E de menionat faptul c multiple procese
fiziologice depind de proprietile soluiilor care iau parte la aceste procese (cum ar fi transportul
oxidului de carbon (IV) prin snge, filtrarea glomerular etc.) [1], de aceea nu putem neglija
perturbrile pe care le poate provoaca telefonul mobil n derularea acestora.
n prezena telefonului mobil conectat n stare de ateptare se atest o modificare de circa
9% a constantei de ionizare a acidului acetic, ceea ce demonstreaz o influen nu chiar att de
mare. ns atunci cnd telefonul mobil funcioneaz la maximum (n timpul convorbirilor) se
atest o deviere a constantei de ionizare de circa 27% de la valoarea iniial, ceea ce presupune
deja o influen simitoare asupra proceselor unde aceast constant ar juca un rol esenial (spre
exemplu n procesele de transport transcelular [1]). Timpul expunerii la radiaiile
electromagnitice nu a influenat rezultatele (la variaii de timp de la 30 la 150 secunde rezultatele
intr n acelai diapazon al limitei de eroare), deci, putem afirma c timpul expunerii nu este un
factor de risc. ns, am dori s atenionm c experienele au fost efectuate n afara organismului,
unde nu se atest fenomenele de acumulare a factorului nociv. De aceea presupunem c n cadrul
organismului timpul de expunere ar influena i el puternic proprietile soluiilor biologice.
Generaliznd, am putea conchide c radiaiile electromagnetice emise de telefoanele
mobile nu au dus la schimbri radicale n sistema de analizat, ns modificrile induse sunt
suficiente pentru a putea clasa aceste aparate printre factorii de risc ai sntii.

1.
2.
3.
4.

Concluzii
Efectund analiza i sinteza rezultatelor obinute, putem concluziona urmtoarele:
Radiaiile electromagnetice emise de telefonul mobil acioneaz asupra proprietilor
coligative ale soluiilor;
Aciunea lor nu este ntr-att de puternic nct s fim nevoii s evitm aceste radiaii,
ns destul de semnificativ pentru a o lua n consideraie;
O influen decisiv o are tipul de activitate al telefonului mobil (n special frecvena
undelor electromagnetice) i nu durata acestei activiti;
Sunt necesare studii privind aciunea radiaiilor electromagnetice emise de telefoanele
mobile asupra sistemelor biologice;

Bibliografie
[1] Babski B., Zubcov A., Fiziologia omului, Chiinu Lumina, 1991
[2] Declaraia privind Internetul i telefonia mobil, Agenia Naional pentru Reglementare n
Comunicaii Electronice i Tehnologia Informaiei (ANRCETI);
[3] National Vulnerability Database http://www.securitylab.ru/news/302121.php
88

[4] Srbu V., Material didactic la chimia fizic. Electrochimia, Chiinu 1992
[5] Wall-Street, articol din 3 decembrie 2007, http://www.wall-street.ro/articol/IT-CTehnologie/35806/Numarul-abonatilor-la-telefonia-mobila-a-ajuns-la-3-3-mld-la-nivelmondial.html;

STUDIUL INTOXICAIILOR CU CLOZAPIN

Tamara Cotelea1, Ciorici Mihai1, Grigore Slonovschi2 Leonid Lsi3
1
Catedra de Chimie farmaceutic i toxicologic USMF N. Testemianu
2
Secia Toxico-Narcologic a Centrului de Medicin Legal
3
Catedra Biochimie i biochimie clinic USMF N. Testemianu
Summary
The study of intoxication with clozapine
Clozapine is a neuroleptic- antipsyhotic atipical derivative of dibenzodiazepine which
offered the patiens with schizophrenia the chance to a better life resistent to classic neuroleptics
but its treatment made also victims from the momentof its introduction in the treatment due both
to its side effets and interactions with other medicines. Clozapine has a strong neuroleptic action
with a sedation effect which occurs immediately after its administration which determined an
abuse of its taking as a drug to induce a narcotic intoxication state. Due to the close therapeutical
concentration (0,2-0,8 g/ml) and of the toxic one (0,8-1,3 g/ml) in blood plasma, numerous
cases of intoxication were described with this drug.
Rezumat
Clozapina este un neuroleptic- antipsihotic atipic, derivat de dibenzodiazepin i a oferit
ansa la o via mai bun pacienilor schizofrenici rezisteni la neurolepticele clasice, dar
tratamentul cu clozapin a fcut i victime din momentul introducerii n tratament att datorit
efectelor adverse ct i interaciunilor cu alte substane medicamentoase. Clozapina posed o
activitate neuroleptic puternic cu efect de sedare ce survine la scurt timp dup administrare
ceea ce a determinat abuzul utilizrii ei n calitate de substan pentru inducerea strii de
ebrietate narcotic. Datorit apropierii concentraiei terapeutice (0,2 - 0,8 g/ml) i a celei toxice
(0,8 1,3 g/ml) n plasma sanguin, sunt descrise numeroase cazuri de intoxicaie cu aceast
substan medicamentoas.
Actualitatea temei
Clozapina a oferit ansa la o via normal bolnavilor de schizofrenie dar pe parcursul
timpului tratamentul cu clozapin a fcut i victime n rezultatul intoxicaiilor sau datorit
efectelor toxice i a reaciilor adverse. n acest context studiile mecanismului aciunii i a
metabolismului clozapinei prezint interes pentru determinarea mecanismelor care stau la baza
aciunii toxice i apariia reaciilor adverse.
Rezultate
Preparatul manifest aciune slab de blocare a receptorilor pentru dopamin D 1, D2, D3, D5
i manifest aciune puternic de blocare a receptorilor D 4. n afar de aceasta posed proprieti
puternice -adrenolitice, anticolinergice (asupra receptorilor muscarinici), antihistaminice i
antiserotoninergice (blocheaz receptorii 5-HT2).
Efectul terapeutic i respectiv toxic sunt dependente de structura stereoelectronic a
substanei medicamentoase, concentraia plasmatica, de fora interaciunii medicament
receptor.

89

Tabelul 1
Afinitatea fa de receptori pentru diferite neuroleptice
Clozapina

D4 = 1 > 5 HT2 > D2 = D1

Haloperidol

D2 > D1 = D4 > 1 > 5 HT2

Clorpromazina

1 = 5 HT2 > D2 > D1

Clozapina practic nu produce reacii extrapiramidale, cum ar fi distonia acut. Efectele

secundare de tip Parkinson sunt rare. Tratamentul cu clozapin produce creteri mici sau nu
crete de loc nivelul prolactininei, evitndu-se astfel efecte secundare ca: ginecomastie,
amenoree, galactoree sau impoten [4,7].
Clozapina posed o cinetic linear n concentraii terapeutice. Aceasta nseamn c rata
absorbiei i eliminrii sunt proporionale cu concentraia substanei medicamentoase.
Biodisponibilitatea absolut a clozapinei este n mare msur variabil. Dupa administrare oral,
de la 27 la 60 % din doza clozapinei ajunge n circulaia sistemic nemodificat. Picul
concentraiei (Cmax) este atins ntre 0,4-4,2 ore, eliminarea este bifazic cu o perioad de
njumtire (T1/2) terminal medie de 12 -14 ore. La obinerea regimului de stabilitate volumul
mediu de distribuie (Vd) constituie de la 2-5 l/kg, iar clearance-ul (Cl) este de la 13 la 57 l/h.
Dup administrarea dozei date de 75 mg ntr-o singur priz pe zi timpul de njumtire
terminal medie constituie 7,9 ore. La obinerea regimului de stabilitate dup administrarea dozei
date de 75 mg/zi, n decurs de 7 zile, acest indice crete pn la 14,2 ore. n perioada regimului
de stabilitate obinut la creterea dozei de la 37,5 mg pn la 75 mg i 150 mg (administrat n 2
prize pe zi) s-a constatat o cretere doz-dependent a ariei de sub curb concentratietimp(AUC); creterea concentraiei plasmatice att minimale, ct i maximale.
Clozapina este aproape complet metabolizat nainte de excreie. S-a constatat c doar unul
dintre metaboliii principali metabolitul des-metil, este activ. Aciunile farmacologice ale
acestui metabolit sunt asemntoare cu cele ale clozapinei, dar sunt mult mai slabe i de scurt
durat. n urin i masele fecale se detecteaz doar urme slabe de substan medicamentoas
nemodificat. Circa 50% din doza administrat este excretat n urin, iar 30% n fecale.
Clozapina n mare parte este biotransformat prin N-demetilare i N-oxidare a ciclului
piperazinic obinndu-se N-desmetilclozapina i clozapina-N-oxid.
Clozapina este slab transportat de P-gp membranare , acest fapt este justificat de efectele
minime a ctorva Pg-p inhibitori, precum i de Km in vitro egal cu 58 M pentru activitatea Pgp ATP-azei pentru clozapin. O serie de studii in vitro demonstreaz c n metabolismul
clozapinei CYP1A2 este principala enzim ce catalizeaz formarea N-desmetil-clozapinei, iar
CYP3A4 catalizeaz formarea clozapinei N-oxid.

Fig. 1 Cile de metabolizare a clozapinei

90

Farmacocinetica clozapinei este variabil n dependen de organism. Conform unor studii

Tmax pentru N-desmetilclozapin este ntre 1,5-40 ore i acest metabolit este eliminat paralel cu
clozapina. Clearance-ul la brbai este mai mare dect la femei, fiind corectat n dependen de
masa corporal i doz acesta este cu 40% mai mare. La copii i aduli (vrsta ntre 9-16 ani) n
monoterapie cu clozapin clearanc-ul este similar cu cel al adulilor la efectuarea coreciei n
dependen de masa corporal i doz. Concentraia plasmatic s-a dovedit a fi de 2 ori mare la
ft dect cea din plasma matern sau lichidul amniotic, iar n laptele matern aproximativ de 3-4
ori mai mare.
Afeciunile ficatului duc la creterea concentraiei plasmatice a clozapinei. Conform unui
studiu, metastazele hepatice au fost asociate cu o cretere de 10 ori a concentraiei clozapinei.
Din cauza posibilitii interaciunilor cu alte medicamente clozapina nu se administreaz
mpreun cu medicamentele ce posed un potenial de deprimare a funciei mduvei osoase.
Clozapina poate potena efectele centrale ele alcoolului, inhibitorilor de MAO i ale
deprimantelor SNC cum ar fi narcoticele, antihistaminicele, benzodiazepinele. Este necesar o
precizie deosebit la administrarea clozapinei la pacienii care sunt (sau au fost recent ) tratai cu
benzodiazepine sau orice alte medicamente psihotrope deoarece acestea pot prezenta un risc de
colps circulator, care, n rare cazuri poate, poate fi profund i poate duce la stop cardiac i/sau
respirator. E necesar de luat msuri de precauie n cazul administrrii concomitente de
medicamente cu efecte anticolinergice, hipotensive sau deprimante respiratorii. Deoarece
clozapina se fixeaz n proporie mare de proteinele plasmatice, administrarea clozapinei unui
pacient care primete un alt medicament care deasemenea se fixeaz n proporie mare de
proteine (Ex. Warfarina), poate provoca o cretere a concentraiilor plasmatice ale acestui
medicament, avnd ca rezultat potenial efecte adverse. Similar , efecte adverse pot rezulta din
dislocarea clozapinei fixate pe proteine de ctre alte medimente care se fixeaz n proporie mare
pe proteine [1,3].
Deoarece metabolismul clozapinei este mediat n mare parte de citocromul CYP 1A2 i
posibil mai puin de CYP 2D6, administrarea de alte medicamente care posed afinitate fa de
una sau ambele izoenzime, poate determina creterea concentraiei plasmatice att a clozapinei
ct i a medicamentului dat. Administrarea concomitent a clozapinei cu antidepresivele
triciclice, fenotiazina i remediile antiaritmice clasa IC, caracterizeaz afinitatea fa de cit P450 2D6, nu a determinat interaciuni clinic relevante, dar teoretic este posibil creterea
concentraiei plasmatice a acestor preparate, ce presupune micorarea dozei administrate.
Administrarea concomitent a cimetidinei, poate crete nivelurile plasmatice ale clozapinei, iar
la adminisrarea concomitent a fluvoxaminei , concentraia plasmatic a clozapinei poate crete
de 10 ori, iar ali inhibitori ai recaptrii serotoninei aa ca paroxetina, sertralina, fluoxetina sau
citalopramul de 2 ori [3,5].
Medicamentele care induc sistemul enzimatic citocrom P-450 poate reduce nivelurile
plasmatice ale clozapinei. Suspendarea carbamazepinei, administrat concomitent conduce la
creterea concentraiei plasmatice a clozapinei, iar asocierea cu fenitoina conduce la scderea
concentraiei plasmatice. De asemenea prin studii clinice s-a determinat c utilizarea
concomitent a eritromicinei n tratamentul cu clozapin poate crete concentraia plasmatic a
clozapinei care s conduc la creterea toxicitii. Eritromicina este un inhibitor relativ specific
al CYP3A4. Pe de alt parte itraconazolul poate duce la creterea i mai semnificativ a
concentraiei plasmatice a clozapinei. Influiena cafeinei asupra concentraiei plasmatice a
clozapinei i N-desmetilclozapinei n care s-a determinat o cretere a concentraiei clozapinei i o
scdere a concentraiei N-desmetilclozapinei ceea ce se explic prin reducerea activitii de ctre
cafein a CYP1A2. Alte exemple de substane medicamentoase care servesc ca substrate pentru
izoenzimele CYP1A3 i CYP3A4 i care pot influiena metabolizarea clozapinei ct i a
concentraiei plasmatice snt aduse n tabelul 2.
n rezultatul evalurii supradozrii acute accidentale sau intenionate cu clozapin, incidena
mortalitii a constituit 12%. Majoritatea deceselor au fost determinate de insuficiena cardiac
sau pneumonia prin aspiraie n cazul tratamentului cu clozapin cu doze mai mari de 2000 mg.
91

Sunt descrise cazuri cnd pacienii i-au revenit dup administrarea mai mult de 10000 mg
preparat. Totui pentru aduli, care nu au administrat clozapin n antecedente, utilizarea dozei
de 400 mg poate cauza dezvoltarea comei sau poate duce la efect fatal. La copii administrarea
dozei de 50-200 mg clozapin provoac sedare marcat, sau dezvoltarea strii comatoase fr
deces [6,7,8,9].
Datorit capacitii de sedare marcate ce posed o activitate neuroleptic puternic cu efect
de sedare ce survine la scurt timp dup administrare ceea ce a determinat abuzul utilizrii ei n
calitate de substan narcotic. Cu toate acestea, datorit apropierii concentraiei terapeutice
(0,2 - 0,8g/ml) i a celei toxice (0,8 1,3 g/ml) n plasma sanguin, n literatur sunt descrise
numeroase cazuri de intoxicaie cu aceast substan .
Tabelul 2
Substrate pentru izoenzimele CYP1A2 i CYP3A4 a citocromului P450
Izoenzima

CYP1A2

CYP3A4

Substrate pentru izoenzimele citocromului P450

Acetaminofen
Amitriptilina
Cofeina
Clomipramina
Clozapina
Acetaminofen
Alprazolam
Amiodarona
Amitriptilina
Carbamazepina
Claritromicina
Ciclosporina
Clomipramina
Clonazepam
Clozapina

Haloperidol
Metadona
Teofilina
Tioridazina
R-Warfarina
Diazepam
Diltiazem
Estradiol
Eritromicina
Etosuximida
Felodipina
Imipramina
Lidocaina
Loratadina
Lovastatina

Midazolam
Nifedipina
Omeprazol
Quetiapina
Testosteron
Verapamil

Prin cercetrile pe animalele de laborator s-au determinat DL50 pentru soareci: la

administrare p/o este de 199 mg/kg, iar la administrare i/v 61 mg/kg. Pentru obolani acest indice
este 260 mg/kg la administrare p/o i de 58 mg/kg la administrare i/v.
Concluzii
Lund n consideraie particularitaile aciunii farmacologice, a dependenei parametrilor
farmacocinetici de organism, metabolizarea substanei i interaciunile posibile ale diferitor
substane medicamentoase cu clozapina este necesar studiul complex al diferitor factori att
pentru stabilirea tratamentului adecvat ct i n studiul reaciilor adverse i evitarea acestora, al
intoxicaiilor ca rezultat al tratamentului sau celor accidentale.
Bibliografie
1. Albers L.J., Hahn R.K., Reist K. Handbook of psyhiatric drugs.- Laguna Hills.- California.2004.- 72 p.
2. Atkinson A.J., Abernethy D.R., Daniels Ch.E. Principles of clinical pharmacology.- Second
edition
3. Burton M., Shaw L., Shentag J., Evans W. Applied pharmacokinetics and pharmacodynamics.Fourth edition.- Lppincott Williams & Wilkins.- 2005.- 867 p.
4. Cristea Aurelia Nicoleta, Tratat de farmacologie.- Ed- Medical.- Ediia I.- Bucureti 2006.1332 p.
92

5. Kari Raaska Pharmacokinetic interactions of clozapine in hospitalized patiens // Academic

dissertation.- Helsinki.-2003
6. Meltzer H., Okayli G. Reducting of suicidality during treatement of neuroleptic resistant
schizophrenia: impact ou risk-benefit assessment // American journal of psychiatry.- 1995.- p.
152-192
7. .. .- .- .- 2002.- I.- . 71
8. .. .- I.- 596 .
9. .. .- -.- .- 736 .

STEREOIZOMERIA I ACIUNEA FARMACOLOGIC A PREPARATELOR

MEDICAMENTOASE
Constantin Cheptnaru1, Mihai Ciorici2, Tamara Cotelea2
1
Catedra Chimie general USMF N. Testemianu
2
Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic USMF N. Testemianu
Summary
Stereoizomery and pharmaceutical action of medicinal substances
Due to the fact that the human body consists of many chiral compounds as: enzymes,
receptors, ionic canals, the effect of many enanthiomers, various pharmacokinetic and
pharmacodynamic features can take place which were demonstrated in various clinical studies.
Only one of the molecular stereoisomers of the preparation can interact with the proteins
receptor, while the other one can have a smaller activity due to the nonformation of complete
chemical links with the receptor, in this case we speak about stereoselectivity. When we use a
preparation as racemat , that means we use a mixture so we will obtain another effect that the
expected one. Contemporary methods permit to obtain medicinal substances of a pure form (of
one enanthiomer only) and the selection of the best pharmacological action and side effects with
minimum toxicity at the same time. The expression of pharmacodynamic and pharmacoinetic
properties of different isomers leads to the improvement of the existing medicinal substances.
Rezumat
Deoarece organismul uman este constituit dintr-o mulime de compui chiralici cum ar fi:
enzime, receptori, canale ionice efectul diferitor enantiomeri poate avea diferite proprieti
farmacocinetice i farmacodinamice demonstrate n diferite studii clinice. Doar unul din
stereoizomerii moleculei preparatului poate interactiona cu receptorul proteinei, n timp ce alt
izomer poate avea o activitate mai mic din cauza neformrii legturilor chimice complete cu
receptorul, n acest caz se vorbete despre stereoselectivitate. Dac vom folosi un preparat n
forma de racemat, nseamn c folosim un amestec, deci vom obine un alt efect dect cel
ateptat. Metodele moderne permit de a obine sub form pur (a unui singur enantiomer)
substanele medicamentoase, i alegerea celei cu cea mai bun aciune farmacologic, i totodat
cu reacii adverse i toxicitate minim. Exprimarea proprietilor farmacodinamice,
farmacocinetice a diferitor izomeri duce la perfecionarea substanelor medicamentoase deja
existente.
Actualitatea temei
La momentul actual se cunosc aproximativ 20 mln de compusi chimici precum i o mulime
de izomeri ai lor. Food and Drug Administration din Statele Unite ale Americii a stabilit n 1992
c numai enantiomerii activi terapeutic s fie comercializai i c fiecare enantiomer al substanei
medicamentoase chirale s fie testat farmacologic separat. Pentru comercializarea de substane
chirale ca racemai este necesar o cerere riguros justificat.
93

Obiectivele lucrrii
n legtur cu tendina companiilor farmaceutice de a crea medicamente noi dar i prin
valorificarea celor deja existente considerm necesar atragerea ateniei asupra importanei
cunoaterii structurii moleculelor i a activitii farmacologice a diferitor enantiomeri ai
substanelor medicamentoase.
Materiale i metode de studiu
Izomeri sunt compui chimici care au aceeai formul chimica dar se deosebesc dup
poziionarea spaial ale atomilor. Deosebim dou grupe principale de izomeri: izomeri
constitutionali si stereoizomeri. Partea de mister a compozitiei lor chimice este activitatea lor
biologic adic capacitatea de a participa n reaciile biochimice din organism, i influiena lor
asupra funciilor fiziologice. O grup important a compuilor biologic activi este reprezentat
de substanele medicamentoase i medicamente.
Stereochimia se ocup cu aranjarea n spaiu a atomilor componeni ai unei molecule i cu
studiul proprietilor fizice i chimice care decurg din aceast aranjare n spaiu. Stereochimia
este deci o parte integrant a teoriei structurii chimice; stereoizomeri sunt substanele care au
aceeai compoziie molecular i ordine de legare ntre atomi dar o diferit dispunere spaial a
atomilor; astfel, simpla cunoatere a modului de legare a atomilor ntre ei fr cunoaterea
amplasrii spaiale a atomilor n molecul este astzi de neconceput.

Fig.1 Interaciunea enantiomerilor cu receptorii

n natur moleculele se gsesc fie sub forma unui singur enantiomer, ca cele de proteine,
hidrai de carbon i ADN, fie sub forma a doi enatiomeri, ca mentolul, limonenul, carvona, etc.
Interacia cu organismul uman a enantiomerilor este diferit. Nu este surprinztor faptul c cei
doi enantiomeri ai unui medicament au efecte foarte diferite asupra organismului. Majoritatea
moleculelor naturale chirale folosite ca medicamente se gsesc n natur sub forma unui singur
enantiomer. Moleculele de sintez, chirale, folosite ca medicamente se comercializeaz ca
amestecuri racemice.
n aspect farmacocinetic stereoizomerii compuilor chimici se pot deosebi dup: absorbie,
distribuie, excreie, metabolizare, iar in aspect farmacodinamic acetea pot manifesta aciune
farmacologic diferit, aciune antagonist, pot s nu manifeste aciune farmacologic sau pot fi
toxici.
Ca exemple pentru demonstrarea stereoselectivitii receptorilor este folosit unul din cei mai
sensibili receptori ai organismului uman i anumereceptorii simului olfactiv: Exemplu 1: Rlimonenul este prezent n fructele de portocal i ofer mirosul caracteristic de portocale, pe cnd
L-limonenul posed miros de lamie i ofer mirosul specific acestor fructe. Un alt exemplu de
94

stereoselectivitate a enantiomerilor poate fi observat n gustul a doi compui: R-carvona posed

gust a uleiului de ment, pe cnd S-carvona posed gust de coriandru.

Fig.2 Deosebiri ntre substane enantiomere

Un alt exemplu este : losartan (inhibitor al angiotensinei II), doar R-enantiomerul posed
aciune farmacologic. n cazul citalopramului (aciune antidepresant): S-citalopram inhib
transportorul serotononei i este de 40 de ori mai activ dect R-citalopram.
Deosebirile n timpul absorbiei se observ n cazul metotrexatului: D-metrotexat i Lmetotrexat se absorb n cantiti mici din intestin dar L-metrotexatul este transportat activ prin
pereii intestinului pe cnd D-metrotexat nu este transportat. In acest fel L-metrotexat este
absorbit mai bine dect D-metrotexat. n cazul adrenalinei: R-(-)-adrenalina posed o absorbie
mai mare ca S-(+)-adrenalina i totodat este de 11-20 de ori mai activ.
n timpul distribuiei n organism fomarea complexului D-propanololului cu albumina
plasmatic are loc mai intens dect n cazul L-propanololului. S-warfarina se leag cu
albuminele mai intens dar legtura cu proteinele este mai stabil n cazul R-warfarinei. Aceasta
condiioneaz diferite viteze de distribuie i clearance pentru diferii enantiomeri.
Ca exemplu de substane ce posed activitate farmacologic poate servi warfarina. Formele
farmaceutice ale warfarinei constau din prezenta a S- i R- enantiomerilor n raport 50/50, dar
S- forma este de 4 ori mai activ dect R-Warfarina, i totodat posed o toleran mai bun. Alt
exemplu poate servi ibuprofenul. Forma S- a ibuprofenului posed proprieti analgezice i
antiinflamatoare mai mari ca R-izomerul. Dar n organismul uman R-izomerul este modificat n
S- forma.

95

Fig.3 Metabolizarea (R)-ibuprofenului

Aciune antagonist a stereoizomerilor posed labetololul. S,R-labetolol manifest
proprieti de blocant puternic al receptorilor -adrenergici, pe cnd R,R-labetolol blocheaz
receptorii - adrenergici, iar S,S- i R,S- izomerii sunt inactivi, iar forma R,R-labetolol posed
aciune hepatotoxic. Un alt exemplu este propanololul: forma S-propanolol are aciune
antihipertensiv pe cnd R-propanolol posed aciune contraceptiv. Alte substane pot manifesta
aciuni grave cum este n cazul etambutolului: S,S-etambutol posed aciune tuberculostatic iar
R,R-etambutol provoac orbirea.
Metabolizarea streoizomerilor cu participarea diverselor izoenzime ale citocromului P 450 se
ntlnete n cazul warfarinei: S-warfarina n organismul uman este metabolizat de ctre
izoenzima CYP2C9, iar R-warfarina de catre CYP 1A2, CYP3A4.
Argumente ale necesitii cunoaterii profunde a aciunii substanelor medicamentoase mai
ales a celor noi (originale) este cazul talidomidei care era utilizat n anii 60 ca hipnotic
(impotriva insomniei). Prescris multor femei gravide, talidomida a provocat nou-nscuilor
focomelii (malformatii ale membrelor, minile i picioarele fiind legate direct de trunchi). Astfel
S-talidomida are aciune teratogene pe cnd R-talidomida posed proprieti hipnotice i
sedative.

Fig.4 Copii cu focomelii ale membrelor

Prin nomenclatura medicamentelor se poate de neles care sunt medicamentele existente sub
forma unui singur enantiomer: dexametazon, dexamfetamin, dextrometorfan (substane
dextrogire) sau levamisol, levonorgestrel, levodopa s.a.
Producia de medicamente enantio-pure a crescut continuu ajungnd la vnzri de peste 100
mlrd de dolari SUA n cursul anului 2000. Multe medicamente se mai comercializeaz ca
amestecuri racemice i n continuare.
Concluzii
Exprimarea proprietilor farmacodinamice, farmacocinetice a diferitor izomeri duce la
perfecionarea substanelor medicamentoase deja existente. Pe piaa european a medicamentelor
numai 15% dintre substanele active sunt prezente sub forma de un singur enatiomer, restul
(85%) reprezint amestec de izomeri. Totodat metodele moderne permit de a obine sub form
96

pur (a unui singur enantiomer) substanele medicamentoase, i alegerea celei cu cea mai buna
aciune farmacologic, i totodat cu reacii adverse i toxicitate minim.
Bibliografie
1. Andrew J. Hutt Stereochemistry and biological activity.-Departementof Pharmacy.- Kings
College.- London.-2003
2. Andrew J. Hutt, Valentava J. The chiral swich: the development of single enantiomer
drugsfrom racemates.- Departament of Pharmacy.- Kings College.-London, Departament of
Chemical Theory of Drugs.- Faculty of Pharmacy.- Comenius University.-Bratislava.-2003
3. Chandra Sahajwalla Regulatory conciderations in drug development of stereoisomers.-Food
and Drug Administration.- Rockville.-Marylan.-USA.-2004
4. Chimie.- Revista trimestrial pentru elevi.- Nr.2, martie.- Bucureti.-2003
5. Jonathan McConathy, Michael J. Owens Stereochemistry in drug action.- Department of
Psychiatry and Behavior Science.- Emory University School of Medicine.- Atlanta.-2003
6. PhilipW. Salbutamolenantiomers: early clinical evidance in humans.- Division of
Respiratory Medicine.-London.-2008
7. ..
.- .- .- 1.-1998

DETERMINAREA SPECTROFOTOMETRIC A COEFICIENTULUI DE

DISTRIBUIE AL NITRATULUI DE PROPICONAZOL N SISTEMUL BINAR
OCTANOL AP LA VALORI DIFERITE ALE pH-ului FAZEI APOASE
Ghenadie Nistreanu1 , Petru Grosu2
1. Catedra Tehnologia medicamentelor,
2. Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic
Abstract
The spectrophotometric determination of distribution coefficient
of propiconazole nitrate in the binary system
octanol-water at different pH values of aqueous phase
In this paper is proposed and tested an UV spectrophotometric method for determination of
constant distribution of propiconazole nitrate between an aqueous buffer phase with different pH
value and a lipid phase(octanol). In the case of propiconazole nitrate incorporation in simple or
multiple pharmaceutical emulsioned systems is needed to know the octanol/water partition
coefficient of this substance because their liberation from this system is a result of the
partitioning phenomena between aqueous and lipid phase. This method can be applied also for
other active substances incorporated in various immiscible binary systems.
Rezumat
In aceast lucrare se propune i se testeaz o metod spectrofotometric n UV n vederea
determinrii coeficientului de partiie a nitratului de propiconazol ntre o faz apoas tamponat
la valori diferite de pH i o faz lipidic (octanol). Cunoaterea coeficientului de partiie al
nitratului de propiconazol n sistemul binar menionat este necesar n cazul ncorporrii acestuia
n sisteme farmaceutice emulsionate (simple sau multiple) pentru c cedarea sa se realizeaz n
urma fenomenelor de partiie ntre faza apoas i cea lipidic. Metoda prezentat n lucrare se
poate aplica i pentru alte substane active ncorporate n diverse sisteme binare nemiscibile.
Actualitatea temei
Din punct de vedere chimic, nitratul de propiconazol este (4-propil-2-(1H-1,2,4-triazol-1metil)-2-(2,4-diclorfenil)-1,3-dioxolan nitrat). Se prezint ca o pulbere cristalin alb sau alb cu
nuan glbuie fr miros; este uor solubil n dimetilsulfoxid, uor solubil n acid nitric diluat,
solubil n alcool etilic, foarte puin solubil n ap i cloroform, practic insolubil n hexan,
97

ciclohexan i tetraclorur de carbon [2]. Cunoaterea coeficientului de distribuie al nitratului de

propiconazol n sistemul lipid/ap este important n cazul prezicerii transportului prin
membrane biologice la nivelul tractului gastro-intestinal[1,3,4,5].
Scopul lucrrii a fost de a determina coeficientul de distribuie octanol/ap a nitratului de
propiconazol la valori diferite ale pH-ului fazei apoase.
Materiale i metode
Prepararea soluiei saturate
Se cntresc 1,5 g nitrat de propiconazol i se aduc ntr-un balon conic n care se adaug
apoi 200 ml octanol. Dispersia are loc la temperatura camerei, agitnd continuu timp de 6 ore.
Amestecul se filtreaz, iar soluia transparent obinut se pstreaz ntr-un recipient nchis, ferit
de lumin.
Prepararea amestecurilor binare
Se prepar 4 amestecuri binare, n baloane cotate cu capacitatea de 50 ml, prevzute cu
dop. n fiecare recipient se introduc 5 ml soluie saturat de nitrat de propiconazol n octanol i
urmtoarele volume de faz apoas: 5,0 ml, 10,0 ml, 15,0 ml, i 20,0 ml. Recipientele se nchid,
se agit timp de 48 de ore. Dup ncetarea agitrii i separarea fazelor, se preleveaz probele de
faz organic i dup diluiile corespunztoare se msoar absorbana la lungimea de und de
263 nm, la spectrofotometrul Agelent, utiliznd cuve de cuar cu grosimea de 1 cm, iar n
calitatea de soluie de compensare se utilizeaz octanolul(Ph.Eur.).
Rezultate i discuii
Dup separarea fazelor i prelevarea probelor din faza organic spectrofotometric se
determin concentraiile de nitrat de propiconazol n faza organic.
Concentraiile de echilibru ale nitratului de propiconazol n aceste probe sunt
[c]oct(1), [c]oct(2), [c]oct(3), .[c]oct(i), . [c]oct(N)
iar n fazele apoase corespunztoare
[c]ap(1), [c]ap(2), [c]ap(3), .[c]ap(i), . [c]ap(N)
Masa (m) de propiconazol, introdus n baloane (aceeai mas, avnd n vedere faptul c sa introdus acelai volum de soluie stoc n fiecare balon), se poate exprima dup cum urmeaz:
mtot= m oct(i) + m ap(i)
m=[c]oct(i) Voct(i) Mpropic + [c]ap(i) Vap(i) Mpropic
(1)
n relaia (1) volumul fazei organice Voct este acelai pentru toate amestecurile seriei.
Coeficientul de distribuie se poate exprima, n funcie de concentraiile stabilite n cele
dou faze din balonul nr. "i", dup cum urmeaz:
[c]oct(i)
D = [c]ap(i)
(2)
Dac se exprim concentraia de echilibru [c]oct(i) din relaia (2) i se substituie n relaia (1),
rezult:
mtot= m oct(i) + m ap(i)
Vap(i)

Voct(i)
D

m [c]oct(i) M

(3)

m masa total a nitratului de propiconazol din amestecul binar;

[c]oct(i) concetraia nitratului de propiconazol din amestecul binar;
Vap(i) volumul fazei apoase luat petru praparea amestecului binary;
Voct(i) volumul fazei organice luat petru praparea amestecului binary;

D coeficientul de partiie;
masa molar a nitratului de propiconazol;
Relaia (3) este echivalent cu relaia (4), care are forma ecuaiei unei drepte dac se
reprezint grafic valoarea reciproc a absorbanelor n funcie de volumele fazei apoase pentru
toate cele n soluii ale seriei.
M

98

M
1
Vap(i) M

[c]oct(i)
m D
m

oct(i)

(4)

prezentarea grafic a datelor menionate se determin panta (a) i ordonata la origine (b) a
dreptei (5).
1
a Vap(i) b
[c]oct(i)

(5)

unde;
a

M
m D

M
m

oct(i)

Raportul dintre mrimile b i a este proporional cu constanta de distribuie D.

b
D Voct(i)
a

(6)

Cunoscnd mrimile a, b i Voct(i), relaia (6) permite calcularea constantei de distribuie D

[2,4,6].
Rezultate i discuii
n tabelul 1 sunt prezentate valorile cantitilor de nitrat de propiconazol nitrat determinate
n faza uleioas, pentru 5 valori de pH ale fazei apoase mpreun cu valorile lor reciproce i cu
mrimile calculate conform celor prezentate mai sus.
Tabelul 1
Rezultatele obinute pentru 5 serii de determinri efectuate
la 5 valori diferite ale pH-ului ale fazei apoase
pH=3,5
Vap(i)

[c]oct(i)

pH=5

pH=6

pH=7

pH=8

1
1
1
1
1
[c]oct(i)
[c]oct(i)
[c]oct(i)
[c]oct(i)
[c]oct(i)
[c]oct(i)
[c]oct(i)
[c]oct(i)
[c]oct(i)

Figura 1 red reprezentrile grafice ale datelor n forma liniarizat la pH=5.

0 0,506 0,506 0,506 0,506 1,975 1,975 1,975 1,975 1,975 1,975
5 0,500 0,500 10,500 0,500 1,999 1,999 1,999 1,999 1,999 1,999
10 0,492 0,492[c]oct(i)
0,492 0,492 2,033 2,033 2,033 2,033 2,033 2,033
15 0,485 0,485 0,485 0,485 2,064 2,064 2,064 2,064 2,064 2,064
20 0,487 0,487 0,487 0,487 2,054 2,054 2,054 2,054 2,054 2,054
a
14,62
14,35
14,74
15,26
14,91
b
76,92
D
26,3
26,8
26,1
25,2
25,8

Vap(i)

figura 1
reprezentarea grafic a variaiei valorilor cantitilor determinate de
propiconazol nitrat n funcie de volumul fazei apoase (pH= 5.0)
99

Dependena valorilor D de pH-ul fazei apoase este redat n figura 2.

pH

Modul de lucru propus, aplicabil i n cazul altor sisteme ternare de tipul celui prezentat,
posed cteva avantaje, dup cum urmeaz:
- chiar dac n fazele apoase, avnd pH-uri diferite, nitratul de propiconazol poate exista n
diferite forme ionizate, forme pentru care absorbtivitile molare au valori diferite, aplicabilitatea
metodei nu este afectat, avnd n vedere faptul c msurtorile se execut numai n faza
organic, n care nitratul de propiconazol este n aceeai form molecular, indiferent de pH-ul
fazei apoase.
- nu este necesar cunoaterea explicit a valorii absorbtivitii molare e a nitratului de
propiconazol n faza organic.
- nu este necesar cunoaterea explicit a concentraiei nitratului de propiconazol n soluia
stoc. Prin urmare, nu este necesar cunoaterea explicit a solubilitii nitratului de propiconazol
n cele dou faze. Singura restricie la prepararea soluiei stoc este aceea de a se limita la
concentraii suficient de mici pentru a asigura un comportament cvasi-ideal al sistemului. Reuita
liniarizrii datelor conform relaiei (4) constituie confirmarea respectrii acestei restricii.
- la nceput substana de interes se dizolv n faza organic; n consecin se poate utiliza
aceeai soluie stoc n cazul n care se execut determinri la pH-uri diferite ale fazei apoase sau
la temperaturi diferite, deoarece nu este hotrtoare concentraia soluiei stoc.
- posibilitatea alegerii convenabile a volumului fazei organice (Vu) i a volumelor de faz
apoas (VAi), ofer acestei metode flexibilitatea necesar pentru acoperirea unei game extinse de
valori ale coeficientului de partiie D.
- n unele sisteme faza organic poate dizolva, ntr-o oarecare msur, apa din faza apoas.
Efectul acestui fenomen se poate compensa prin saturarea n prealabil a fazei organice cu ap la
temperatura de lucru i prin utilizarea fazei organice saturat cu ap drept referin la msurarea
absorbantelor.
Concluzii
Reprezentnd grafic valoarea reciproc a absorbantei n funcie de volumele fazei apoase n
form liniarizat, atest relaia liniar preconizat ntre aceste date precum i comportamentul
cvasiideal al sistemului octanol nitrat de propiconazol - ap.
Din analiza valorilor coeficientului de partiie al nitratului de propiconazol n sistemul
binar octanol - ap, obinute pentru cele 5 valori de pH diferite ale fazei apoase, se poate
concluziona c echilibrul de distribuie al substanei medicamentoase nu poate fi deplasat spre
faza apoas sau spre cea lipidic prin modificarea pH-ului fazei polare.
100

Metoda de lucru propus poate fi aplicat i n cazul altor sisteme de tipul celui prezentat
datorit avantajelor pe care le posed i care au fost menionate anterior.
Bibliografie
1. Beetge E., du Plessis J., Miiller D.G., Goosen C, Rensburg F.J. - The influence of the
physicochemical characteristics and pharmacokinetic properties of selected NSAID's on their
transdermal absorption, InternationalJour nai of Pharmaceutics, 2000, 193, 261-264.
2. Dnil Gh. - Chimie farmaceutic, vol.l, Ed. AII, Bucureti, 1996.
3. Dross Karl P., Mannhold Raimund, Rekker Roelof F. - Drug lipophilicity in QSAR practice:
II. Aspects of RM - Determinations; critics of RM - corrections; interrelations with partition
coefficients, Quant. Struct.-Act. Reiat, 1992, 11, 36 - 44.
4. Goosen C., du Plessis J., Miiller D.G., Janse van Rensburg L.F. -Correlation between
physicochemical characteristics, pharmacokinetic properties and transdermal absorption of
NSAID's, International Journal of Pharmaceutics, 1998, 163, 203 - 209.
5. Grassi M., Coceani N., Magarotto L. - Modelling partitioning of sparingly soluble drugs in a
two-phase liquid system, International Journal of Pharmaceutics, 2002, 239, 157 - 169.

STUDIUL METODELOR DE DEZAGREGARE A COMPRIMATELOR

ORODISPERSABILE CU SPIRONOLACTON
Allaa M. Fathi Baroud
Catedra Tehnologia medicamentelor
Summary
Study of the disintegration methods of orally
disintegrating spironolactone tablets
An alternative disintegration method for orally orodispersable tablets has been proposed. This
test is the nearest to in vivo conditions. The respective apparatus was proposed for this
investigation.

101

Rezumat
A fost elaborat o metod alternativ de evaluare a timpului de dezagregare a comprimatelor
orodispersabile. Acest test este cel mai apropiat de condiiile in vivo. S-a propus dispozitivul
respectiv pentru efectuarea acestei cercetri.
Actualitatea temei
n ultimii ani tot mai multe substane medicamentoase din diferite clase farmaco-terapeutice
sunt elaborate n comprimate orodispersabile, datorit avantajelor fa de comprimatele
obinuite: dezagregare rapid n cavitatea bucal cu eliberarea imediat a substanei
medicamentoase; lipsa efectului primului pasaj hepatic; nu este necesitate de ap; administrarea
n caz de disfagii etc. n piaa farmaceutic actualmente sunt autorizate circa 150 de produse, din
care: 40% sunt preparate utilizate n tratamentul maladiilor sistemului nervos central (depresii,
migrene, insomnii, boala Alzheimer etc.); 34 % n tratamentul dereglrilor traectului gastrointestinal; circa 10% n oncologie i 7% n trartamentul diabetului zaharat [4, 9, 10,11].
Formularea comprimatelor orodispersabile prevede o dezagregare rapid pentru cedarea
imediat a substanei medicamentoase n cavitatea bucal. Timpul de dezagregare trebuie s fie
n limitele de la 15 sec pn la 3 minute, care n mare msur depinde i de metoda folosit la
determinare. Att n USP ct i Eur. Ph. nu sunt descrise meode de determinare a timpului de
dezagregare pentru comprimatele orodispersabile [1, 2, 3, 8]. .
Metoda USP 29 disintegration test <701> descris pentru comprimatele orale nu prevede
o corelare exact cu datele in vivo, deoarece pentru dezagregare se folosesc 900 mL ap i n
aparate energic oscilante, condiii care nu sunt apropiate de cele din cavitatea bucal (cantitatea
de saliv circa 5 mL). n legtur cu aceasta sunt propuse diferite metode de evaluare a
dezagregrii comprimatelor orodispersabile [5,6,7].
Este foarte important, ca metodele pentru evaluarea dezagregrrii acestor comprimate s
posede atribute specifice: condiiile de testare s simuleze condiiile din cavitatea bucal,
caracteristice pentru suprafaa umed a limbii i volumului de saliv; o bun reproductibilitate
pentru diferii operatori; o corelare rezonabil in vitro/in vivo; evaluare rapid cu disozitive
simple [12,13 ].
Obiectivul acestui studiu a fost de a elabor o metod simpl in vitro de evaluare a timpului
de dezagregare a comprimatelor orodispersabile n comparaie cu unele existente.
Material i metode
Materiale
Substana activ: spironolacton (Ph.Eur.).
Substanele auxiliare folosite n studiu: sorbitol (C Sorbidex P, Cerestar); crospovidon
(PVP K30, Ph. Eur.); lactoz fin (Pharmatose 110M, BASF); siliciu dioxid coloidal (Aerosil
200, Degussa AG); stearat de magneziu (Magnesium stearate, Barlocher GmbH).
Metode
Comprimatele au fost obinute prin metoda de presare direct la presa hidraulic, la trei
valori ale forei de comprimare: 80, 120, i 160 N, diametrul comprimatelor fiind de 6 mm, iar
masa unui comprimat de 100 mg.
Rezistena mecanic a comprimatelor la rupere a fost determinat la dispozitivul hardnes
tester TBH 28 ERWEKA Co. LTD.
Friabilitatea comprimatelor a fost evaluat la dispozitivul cu palete model AK-8.
Timpul de dezagregare a comprimatelor a fost evaluat la dispozitivul tablet disintegration
tester ELECTROLAB ED 2 SAPO cu folosirea discurilor de ghidare (metoda Ph. Eur., 2004),
metoda cu palet USP 29 (aparatul Erweka DT 6), testarea in vivo la voluntari (comprimate
placebo) i metoda propus de autor (descris mai jos).
102

Rezultate i discuii
Reieind din cele expuse, au fost formulate 3 loturi de comprimate, folosind crospovidona,
lactoza, sorbitolul (excipieni de baz). Pentru mbuntirea calitii amestecului de comprimat
s-a apelat i la alte substane auxiliare, precum siliciul dioxid coloidal (1%), n vederea sporirii
proprietilor de legtur a particulelor i stearatul de magneziu ca lubrifiant (1%). Coninutul
spironolactonei 25 mg.
Formulele comprimatelor cercetate sunt prezentate n tabelul 1.
Tabelul 1
Formulele comprimatelor orodispersabile cu spironolacton
Denumirea
componentelor
Spironolacton
Crospovidon
Lactoz fin
Siliciu dioxid coloidal
Stearat de magneziu
Sorbitol q.s. pn la ....
mg

Sa

Sb

Sc

Placebo

25,0
25,0
10,0
1,0
1,0
100,0

25,0
30,0
10,0
1,0
1,0
100,0

25,0
35,0
15,0
1,0
1,0
100,0

35,0
30,0
1,0
1,0
100,0

Descrierea dispozitivului de determinare a timpuluii de dezagregare.

Dispozitivul (fig.1) a fost asmblat folosind aparatul B de msurare a timpului de nmuiere a
supozitoarelor lipofile Erweka. n tubul din sticl nchis la captul inferior cu un dop (2) se
introdic comprimatul (5) i 5 ml ap distilat, nclzit la 37 0,50 C. Deasupra comprimatului se
aplic tija (3) trecut prin tubul de ghidaj (4). Tubul 2 se introduce n baia de ap termostatat la
37 0,50 C a aparatului de evaluare a testului de dizolvare Erweka DT 6. Tija se cupleaz cu
mecanismul de rotaie (1) a aparatului Erweka DT 6 cu o vitez de 100 turaii pe minut. Se
msoar timpul ntre acest moment i momentul n care comprimatul este dezagregat n particule
care trec prin partea ngustat a tubului.

3
4

Fig. 1. Dispozitivul de determinare a timpului de dezagregare a comprimatelor orodispersabile: 1

mecanism de cuplare la rotor; 2 tub de dezagregare; 3 tij din oel inoxidabil ; 4 tub de
ghidaj din sticl; 5 comprimat; 6 particule dezagregate.
103

Comprimatele obinute la valoarea presiunii de 80 N nu au fost luate n lucru deoarece sunt

fragile.
Rezultatele din tabel demonstreaz c, odat cu creterea concentraiei crospovidonei se
micoreaz timpul necesar pentru dezagregarea comprimatelor, evaluat cu toate metodele de
investigare. Astfel, la concentraia de 35 % (formula Sc), timpul este cel mai mic i constituie
2,03 0,19 min, timp evaluat cu metoda propus. De asemenea, cel mai mic timp se observ i la
metoda in vivo, care constituie 1,88 0,15 min. Testul de evaluare a timpului de dezagregare
propus este cel mai apropiat de condiiile in vivo (p<0,05). Rezistena mecanic la rupere a
comprimatelor este sufucient, iar friabilitatea comprimatelor cercetate nu depete limita de
1%, admis de farmacopei.
Rezultatele investigaiilor sunt prezentate n tabelul 2.
Tabelul 2
Evaluarea timpului de dezagregare i a rezistenei mecanice
a comprimatelor orodispersabile
Parametrii
investigai
Metoda de
testare
Formula Sa
Formula Sb
Formula Sc

Presiunea de comprimare, 120 N

Presiunea de comprimare, 160 N
Timpul de dezagregare, min
USP 29 Ph. Eur.
Testul
in vivo*
USP 29 Ph. Eur.
Testul
in vivo*
propus
propus
4,11
3,46
2,32
2,13
4,41
3,60
2,55
2,43
0,12
0,13
0,19
0,16
0,18
0,19
0,16
0,19
3,50
3,03
2,10
2,05
3,70
3,33
2,31
2,26
0,09
0,09
0,24
0,11
0,22
0,17
0,10
0,24
3,11
2,45
2,03
1,88
3,38
2,61
2,21
1,98
0,23
0,21
0,19
0,15
0,15
0,17
0,17
0,12

p<0,05
Formula Sa
Formula Sb
Formula Sc

Rezistena mecanic
la rupere, Pa
4,790,17
4,730,14
4,320,17

Friabilitatea, %
0,54
0,84
0,46

p<0,05
Rezistena mecanic
la rupere, Pa
5,190,19
6,320,10
6,100,13

Friabilitatea, %
0,52
0,52
0,57

Not: * au fost testate comprimatele placebo la 6 voluntari

Concluzie
Metoda de evaluare a timpului de dezagregare a comprimatelor orodispersabile elaborat i
dispozitivul respectiv poate fi propus pentru cercetri, deoarece este cel mai apropiat de
condiiile in vivo.
Bibliografie
1. " Disintegration 701," in USP 29 (US Pharmacopieal Convention, Rockville, MD) p.
2670-2672.
2. "Orally Disintegrating Tablet and Film Technologies: Technologies, Market Analysis, &
Business Opportunities," in Market Study Reports, 4th ed (Technology Catalysts
International Corp. Falls Church, VA) 2006, p. 5-6.
3. Abdelbary G. et al., "Determination of the In Vitro Disintegration Profile of Rapidly
Disintegrating Tablets and Correlation With Oral Disintegration," Int. J. Pharm. 2005,
Vol. 292, Nr.12, p. 2941.
4. CDER Data Standards Manual, Dosage Forms, C-DRG-00201, version 008 (April,
1992).
5. Dor J.M. et al., "A New In Vitro Method to Measure the Disintegration Time of a FastDisintegration Tablet," Proc. Intl. Rel. Bioact. Mater. 1999, Vol. 26, p. 939940.
6. Draft Guidance for Industry Orally Disintegrating Tablets (FDA, Rockville, MD),
www.fda.gov/cder/guidance/index.htm , April 2007.
104

7. el-Arini S. and Clas S., "Evaluation of Disintegration Testing of Different Fast Dissolving
Tablets Using the Texture Analyzer," Pharm Dev Technol. 2002, Vol. 7, p. 361371.
8. Fang F. et al., "Desktop Disintegration Test for Orally Disintegrating Tablets (ODTs): A
Rapid and Simple Method for Observing the Disintegration Behavior for the Regulatory
Review Scientist in the Evaluation of Drug Applications," presented at the 12th Annual
FDA Science Forum, April 1, 2006.
9. Gohel M. et al, "Formulation Design and Optimization of Mouth Dissolve Tablets of
Nimesulide Using Vacuum Drying Technique," AAPS Pharm. SciTech. 5 (3), 1-6 (2004).
10. Habib W. et al., "Fast-Dissolve Drug Delivery Systems," Critical Reviews in Therapeutic
Drug Carriers Systems, 2000, Vol. 17, Nr. 1, p. 6172.
11. Li B. and J Robinson., "Chapter 2: Preclinical Assessment of Oral Mucosal Drug
Delivery Systems," in Drugs and Pharmaceutical Sciences, Vol. 145: Drug Delivery to
the Oral Cavity , Molecules to Market (Taylor & Francis, Oxford, UK, 2005), p.145
147
12. Park J. and Wu S., "Should Orally Disintegrating Tablets (ODTs) Have A Weight Limit?,"
poster presentation, AAPS Annual Meeting and Exposition, San Diego, CA, Nov. 2007,
p. 1923.
13. Segado Ferran J. et al., "Orally Disintegrating Tablets and Process for Obtaining Them,"
WO 103629 (2003).

STUDIUL DISPONIBILITII FARMACEUTICE A SPIRONOLACTONEI DIN

COMPRIMATE
Liliana Dogotari, Angela Iapr
Catedra Tehnologia medicamentelor
Summary
The study of pharmaceutical bioavailability of spironolactone in tablets
The pharmaceutical bioavailability study of spironolactone from tablets was effected by
different manufacturers. The tablets underwent the dissolution test. The best release had
spironolactone from Verospirone (94,19 %), by Gedeon Richter, Hungary. The tablets by
OZONE, Romania and Obolenskoe, Russia are identically.
Rezumat
A fost petrecut studiul disponibilitii farmaceutice a spironolactonei din comprimate de
diferii productori precum i demonstrarea barierii ntre similaritate i non-similaritate a
preparatelor medicamentoase cercetate. Comprimatele 25mg au fost supuse testului de
dizolvare. Cel mai bine a fost cedat spironolactona din Verospiron (94,19 %), produs de firma
Gedeon Richter, Ungaria. Comprimatele produse de ctre Uzinele farmaceutice Ozone, Romnia
i Obolenskoe, Rusia sunt similare.
Actualitatea temei
Numeroase date din literatur atest importana utilizrii preparatelor diuretice n unele
maladii cardiovasculare, ce acestea constituie una din cauzele principale a decesului n lume.
Tendina de cretere a afeciunilor cardiovasculare a devenit evident si la noi n ar.
De aceea terapia cu diuretice prezint numeroase particulariti solicitnd o deosebit
atenie att la alegerea dozelor i duratei tratamentului, ct i selectarea unui preparat cu eficien
maxim. Cunoaterea vitezei de dizolvare a substanei medicamentoase din forma farmaceutic
este el mai important factor de prevedere a biodisponibilitii i unul dintre cele mai importante
determinri pentru evaluarea calitii formelor farmaceutice. Viteza de dizolvare crete odat cu
105

creterea constantei de vitez a dizolvrii (Kdiz), cu creterea suprafeei de contact i solubilitii

substanei.
O disponibilitate mare a substanei medicamentoase se asigur atunci cnd procesul de
comprimare devine reversibil n momentul n care comprimatul vine n contact cu lichidele
gastro-intestinale.
Dizolvarea substanelor medicamentoase este un proces care precede absorbia lor n
circulaia general, dup administrarea medicamentului, poate fi o etap limitant a absorbiei n
circulaia general. Deaceea dizolvarea este important pentru disponibilitatea medicamentelor.
Cedarea substanei medicamentoase din forma farmaceutic poate fi influenat semnificativ de
proprietile fizico-chimice ale substanei medicamentoase i ale formei farmaceutice. Cedarea
substanei medicamentoase este determinat n principal de viteza de cedare din forma
farmaceutic.
Obiectivele lucrrii
Studiul vitezei de dizolvare a spironolactonei din trei sortimente de comprimateSpironolactona (Ozone, Romnia), Veropiron (Ghedeon Rihter, Ungaria) i Verospilacton
(Obolenscoe, Rusia) dup 45 i 60 min scurse din momentul nceperii testului de dizolvare
conform FR-X;
Calcularea procentului dizolvat n funcie de timp n grafic numeric (cartezian) pentru
toate sortimentele cercetate n ambele medii de dizolvare;
Determinarea n grafic semilogaritmic a procentului care mai rmne s se dizolve;
Calcularea constantei vitezei de dizolvare pentru fiecare sortiment;
Compararea valorilor obinute pentru toate sortimentele cercetate;
Demonstrarea barierii ntre similaritate i non-similaritate a preparatelor
medicamentoase.
Material i metode de cercetare

Aparatul de determinare a vitezei de dizolvare (Erweka), oficializat de FR

X.
Trei sortimente de comprimate de spironolacton de diferii productori.
Soluie de clorur de hidrogen 0,01 mol/l (mediul de dizolvare), lauril sulfat de sodiu.
Spectrofotometru UV-VIS.
n vasul cilindric al aparatului de dizolvare se introduc 1000 ml mediu de dizolvare. Se
nclzete la temperatura de 37 o C. Se introduc n coul rotitor: un comprimat 25 mg
spironolacton, care apoi se amplaseaz n mediul de dizolvare care conine 1000 ml HCl 0,1 M i
1 g laurilsulfat de sodiu. Se regleaz agitarea la 100 rpm. Se iau produse a cite 5 ml dup
5,10,15,20,25,30,45 i 60 minute, cu o pipet i se filtreaz prin hrtie filtru, nlturnd primele
poriuni de filtrate. Pentru o dozare: 1.5 ml filtrate din prob se introduc n balon cotat de 100 ml
i se complecteaz la cot cu soluie de clorur de hidrogen 0.01mol/l. Se citete absorbana
soluiei la spectrofotometru n UV la lungimea de und 257 nm n cuva cu grosimea stratului de
10 mm, folosind n calitate de soluie de referin soluia de clorur de hidrogen 0.01 mol/l.
Coninutul de spironolacton (X %), care a fost cedat n mediul de dizolvare, se calcul dup
formula, unde:
A mst Vst1 V1 V3 100%
X ,% x
Ast Vst 2 Vst 3 mx V2
Ax absorbana soluiei de cercetat;
Ast absorbana soluiei standartd (0,2364);
mst masa probei standard de spironolacton (0,025 g);
mx masa spironolactonei n comprimat (0,025g);
Vst1 volumul soluiei standard luat pentru analiz (0,5 ml);
106

Vst2 volumul soluiei n care a fost dizolvat proba standard (50 ml);
Vst3 volumul diluiei soluiei standard (50 ml);
V1 volumul mediului de dizolvare (1000 ml);
V2 volumul filtratului luat pentru analiz (1,5 ml);
V3 volumul balonului cotat n care a fost diluat proba de analizat (100 ml).
Rezultate obinute
1. Se alctuiesc curbe ale procentului dizolvat n funcie de timp n grafic cartezian pentru
cele trei sortimente de comprimate.
Figura 1
C,% 100

90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
5

10

15

20

25

30

45

60
t ,min

Spironolacton

Verospiron

Verospilacton

2. Coninutul procentual de spironolacton cedat n mediul de dizolvare din comprimate

peste 45 minute i peste 60 minute
Figura 2

3. Se calculeaz constanta vitezei de dizolvare (Kd) dup urmtoarea formul:

ln C1 ln C2
, min 1
t1 t 2
K diz (Spironolacton 25 mg) = 0,035 min -
K diz (Verospiron 25 mg) = 0,064 min -
Kdiz (Verospilacton 25 mg) = 0,035min -
Determinarea similaritii i non-similaritii ntre comprimatele cu spironolacton se
petrece prin determinarea factorulul f2 i distana dintre curbe (graficul cantitii de substan
dizolvate n dependen de timp). Un factor f2 > 50 justific decizia de similaritate.
K diz

107

;
Exemplu pe comprimatele preparate de Obolenskoe, Rusia i Ozone, Romnia:

Figura 3

Figura 4

108

Figura 5

Concluzii
1.n baza rezultatelor obinute experimental putem afirma c disponibilitatea farmaceutic a
comprimatelor cu spironolacton produs de trei productori scade n urmtoarea ordine :
Verospiron 25mg (Gedeon Richter) 94,19%;
Spironolacton 25mg (Ozone, Romania) 93,06%;
Verospilacton (Obolenskoe, Rusia) 25mg - 90,08%.
2.Comprimatele produse de ctre uzinele farmaceutice Ozone, Romnia i Obolenskoe, Rusia
sunt similare, deoarece factorul de similaritate constituie 89,5, mai mare ca 50.
Bibliografie
1. Aurelia Nicoleta Cristea Farmacologie General, Editura Didactic i Pedagocic.- Bucureti.2.
3.
4.
5.
6.
7.

2004.
Constantin Mircioiu, Dalia Miron, Flavian Radulescu, Cristina Ghiciuc si al., - Elemente de
biofarmacie i farmacoconetic. Editura Universitar Carol Davil. Bucureti.- 2008.- Vol.2.P.34-37.
Farmacopeea Romn.- Ediia a X-a.- Editura Medical. Bucureti. - 1998.
Matcovschi C., Procopiin V., Parii B. Ghid Farmacoterapeutic.- Chiinu.- 2006.
Mihai Alecu, Silvia Alecu Reacii alergice la medicamente.- Editura Medical.- Bucureti.- 2002.
Leucua S.E Biofarmacie i Farmacocinetic.- Editura Dacia.- Cluj Napoca.- 2002.
Valentin Stroescu Farmacologie.- Ediia a VIII.- Editura BIC ALL.- Bucureti.- 2005.

STUDIUL ECHIVALENEI FARMACEUTICE A COMPRIMATELOR CU

NORFLOXACIN I FAMOTIDIN
Livia Uncu, Liviu Movil, Olga Suvorchina, Artiom Osipov, Svetlana Srtmaci
Laboratorul Analiz, Standardizare i Controlul medicamentului, CDM
Summary
Study of pharmaceutical equivalence of tablets with norfloxacin and famotidin
The profiles of dissolution test were recorded for the assessment of pharmaceutical
equivalence of Norfloxacin and Phamotidin in comprimattes yelding by diffrent producings.
Estimation of value of analogue and differentiation coefficients by aid of Weibuls mathematical
model put in evidence a very close Norfloxacin and Phamotidin bioavailability being reported
with reference substances.

109

Rezumat
Au fost determinate profilurile de dizolvare pentru evaluarea echivalenei farmaceutice a
comprimatelor cu norfloxacin i famotidin, obinute de la diferii productori. Evaluarea
coeficienilor de analogie i difereniere, calculai cu ajutorul modelulu matematic Weibul
demonstreaz o biodisponibilitate foarte apropiat a acestor preparate n raport cu
medicamentele de referin.
Introducere
Problema echivalenei farmaceutice preparatelor medicamentoase are o mare importan
clinic, farmaceutic i economic, deoarece una i aceeai substan medicamentoas se
produce de multiple (uneori zeci) de firme cu utilizarea diverselor substane suplimentare n
diverse cantiti i conform diverselor tehnologii. Aceeai problem uneori apare i la
compararea diverselor serii de substane medicamentoase al unui i aceluiai productor, n
special a celor, cu absorbie complicat, greu solubile i cu aciune puternic [1].
Preparatul-generic este un preparat medicamentos, pentru care deja a expirat termenul
proteciei de brevet i care nu mai este proprietatea exclusiv a companiei farmaceutice, care l-a
elaborat sau a deinut prima licen pentru comercializare [2]. Preparatul-generic conine aceeai
substan medicamentoas activ (substane active), ca i preparatul original (brevetat), ns se
deosebete de acesta prin substanele suplimentare (ingrediente neactive), materiale de
umplutur, conservani, colorani etc.. n afar de aceasta, diferenele se observ i n cadrul
procesului tehnologic i a condiiilor de producere a preparatelor generice.
Pentru evaluarea echivalenei farmaceutice in vitro a formelor farmaceutice perorale
(comprimate, capsule), se recomand determinarea profilurilor de dizolvare ale acestora.
Profilurile de dizolvare se determineaz pentru preparatele medicamentoase, obinute de la
diferii productori. Cu acest scop se petrece determinarea cantitativ a substanelor
medicamentoase, care se elibereaz din forma farmaceutica peste un anumit interval de timp.
Determinarea coninutului principiilor active s-a efectuat prin metoda spectrofotometric n
UV-VIS, descris n documentele de normare a calitii pentru aceste preparate. Pe baza
rezultatelor obinute se construiete dependena grafica dintre procentul de eliberare a
substanei active de timpul de dizolvare [4].
Materiale i metode
Pentru analiza spectral au fost utilizate spectrofotometre UV-VIS Agilent - 8453 n
intervalul de und 350 450 nm. Determinarea indicelui de dizolvare se efectueaz conform
Ph.Eur., utiliznd aparatul cu palete. Mediul de dizolvare tampon acetat pH 4,00,05, volumul
mediului de dizolvare 750 ml, viteza de rotaie a paletelor 100 rot/min, temperatura 37C0,50.
Rezultate
A fost petrecut evaluarea comparativ a profilurilor de dizolvare a comprimatelor cu
Famotidin i Norfloxacin de la diferii productori (tabelul 1).
Tabelul 1
Obiecte pentru cercetarea profilurilor de dizovare
Preparatul cercetat
Denumirea
Productor
produsului
Norfloxacin-RNP
IMRNP Pharmaceuticals
400mg, comprimate SRL, Republica Moldova
filmate

Preparatul de referin
Denumirea
Productor
produsului
Nolicin 400mg,
KRKA, Slovenia
comprimate

Famotidin-RNP
20mg, comprimate

Quamatel 20mg, Gedeon Richter,

comprimate
Ungaria

IMRNP Pharmaceuticals
SRL, Republica Moldova
110

Rezultatele determinrilor concentraiilor peste anumite intervale de timp n procesul

evalurii testului de dizolvare a comprimatelor sunt indicate n tabelul 2.
Tabelul 2
Valorile concentraiilor principiilor activi n procesul evalurii
testului de dizolvare a comprimatelor
Coninutul de substan activ, care s-a eliberat n mediul de dizolvare,
%
Timpul,
min
NorfloxacinNolicin 400mg,
Famotidin-RNP Quamatel 20mg,
RNP 400mg
KRKA
20mg
Gedeon Richter
0
5
10
15
20
30
45

0
86,70
90,23
90,22
90,31
90,45
90,67

0
84,45
84,89
85,58
86,49
87,05
87,51

85,23
87,96
90,36
92,56
94,46
96,49

95,05
96,20
96,81
98,32
99,54
100,22

n baza rezultatelor obinute a fost construit graficul dependenei concentraiei de de timpul

de dizolvare (figura 1).

Fig. 1. Profilurile de dizolvare ale comprimatelor studiate

Att pentru norfloxacin, ct i pentru famotidin profilurile de dizolvare sunt apropiate,
ceia ce denot o cinetic de dizolvare aproape identic cu preparatele de referin.
Suprapunerea profilurilor obinute n testul de dizolvare a fost estimat cu ajutorul
coeficienilor de difereniere i a celui de analogie dup modelul matematic Weibul.
Coeficient de difereniere (f1) reflecta procentul erorii dintre doua curbe prin toate punctele
timpului de dizolvare si se calculeaz prin formula:

(1)
unde n numrul momentelor de timp, Rj Tj coninutul (in procente) a substanei
dizolvate din substana 1 si 2 n fiecare moment j.
Coeficientul de difereniere are valoare nul, daca profilurile substanei de analizat repeta si
se suprapune cu profilul substanei standard. Pe msura creterii spaiului dintre cele doua
profiluri, coeficientul de difereniere creste.
111

Coeficientul de analogie (f2) aceasta valoare exprima suma logaritmica a ptratelor

erorilor. care este calculat prin diferena dintre proba de cercetare Tj de cea standard Rj in toate
momentele de timp. Coeficientul de analogie se calculeaz dup formula:

(2)
unde n numrul momentelor timp, Rj Tj coninutul de substana dizolvata din prima
si a doua substana medicamentoasa in momentul de timp j.
Valoarea coeficientului de analogie poate fi calculat in intervalul de la 0 pana la 100.
Pe msura ne suprapunerii profilurilor si a devierii curbelor coeficientul de analogie se apropie
de 0.
Profilurile de dizolvare sunt considerate identice, daca valoarea f1 se gsete in limita
diapazonului de la 0 la 15 si valoarea f2 se gsete n limitele intervalului de la 50 la 100 [3,4].
Valorile numerice ale acestor coeficieni, calculai prin metoda modelului matematic
Weibul sunt oglindite n tabelul 4.
belul 4
Valorile coeficienilor de difereniere si analogie
Denumirea preparatului

Coeficientul de
difereniere, f1

Coeficientul
de analogie,
f2

Corespunder
ea
profilurilor

Norfloxacin 400mg

4,19

69,75

Famotidin 20mg

7,25

58,08

Cercetarea profilurilor de dizolvare i evaluarea coeficienilor de analogie i difereniere

ne demonstreaz echivalena farmaceutic a comprimatelor Norfloxacin RNP 400 mg cu
comprimatele Nolicin produse de KRKA (Slovenia).
i pentru comprimatele Famotidin RNP 20 mg i Qvamatel (Ghedeon Rihter) valorile
coeficienilor de analogie i de difereniere se ncadreaz n limitele admisibile, astfel aceste
forme farmaceutice manifest o disponibilitate farmaceutic apropiat.
Concluzii
1. Cercetarea profilurilor de dizolvare a comprimatele Famotidin RNP 20 mg n raport cu
Qvamatel (Ghedeon Rihter) i a comprimatelor Norfloxacin RNP 400 mg n raport cu Nolicin
(KRKA) demonstreaz o cinetic de dizolvate apropiat pentru aceste forme farmaceutice.
2. Studiul echivalenei farmaceutice a comprimatelor cu Norfloxacin i Famotidin cu
ajutorul testului de Dizolvare i evaluarea coeficienilor de analogie i difereniere
demonstreaz o disponibilitate foarte apropiat a acestor preparate n raport cu medicamentele
de referin.
Bibliografie
1. Investigation of bioavailability and bioequivalence The rules governing medicinal products
in the European Community (1992). Vol. III, p. 149-168.
2. Multisource (generic) pharmaceutical products: guidelines on registration requuirements to
establish interchangeability. WHO Technical Report Series, - 1996. - 863. - . 114154.
3. .., .., ..
. . 2003. . 7-10.
112

4. .., ., ..
// . - 1997. - 1. - . 39 - 40.

EVALUAREA UNOR PARAMETRI FIZICI I FIZICO-CHIMICI PENTRU LICHIDUL

SINOVIAL N PROCESUL DE TRATAMENT AL OSTEOARTROZELOR CU
PREPARATE CORTICOSTEROIDIENE
1
Livia Uncu, 2Valeriu Uncu, 1Tatiana Bostan
1
Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic
2
IMSPCNPMU
Abstract
Evaluation of some physic and physical-chemical parameters of synovial liquid in
process of treatement of osteoarthrosis with corticosteroid medications
Of all the indices that determine the physical and chemical changes of the pathological
synovial liquid for study were selected: viscosity, because it ensures adequate joint mobility,
decreases the friction force and provides a matching function, refractive index, pH and the study
of tribometric force of friction following treatment of osteoarthrosis with corticosteroid drugs.
These parameters present a significant dependence versus pathologic process resulting in joints.
Rezumat
Din totalitatea indicilor ce determin modificri fizice i chimice ale lichidului sinovial
patologic pentru studiu au fost selectai: viscozitatea, pentru c ea asigur mobilitatea adecvat a
articulaiei, micoreaz fora de frecare i asigur o congruen funcional; indicele de refracie,
pH-ul, precum i studiul tribometric al forei de frecare n urma tratamentului osteoartrozelor cu
preparate corticosteridiene. Aceti parametri prezint o dependen important fa de procesul
patologic, care decurge n articulaie.
Introducere
O cauz important a incapacitii temporare de munc, care preced deteriorarea calitii
vieii, precum i variate complicaii este osteoartroza. Terapia medicamentoas a artrozelor i
osteoartrozelor cu preparate corticosteroidiene constituie una din variaiile de tratament ale
acestei maladii [1,2].
Din punct de vedere biochimic, modificri mai importante prezint licidul sinovial, care i
poate schimba parametrii fizici i funcionali n raport cu gravitatea i durata maladiei, prezena
sau lipsa procesului inflamator. Lichidul sinovial sau sinovia este un lichid (gel) interstiial
elastic i vscos specializat, care ocup cavitatea articular a diartrozelor i care ndeplinete o
funcie dubl: nutriia cartilajului i lubrificarea articulaiei [9].
n procesul utilizrii n practica curativ a corticosteroizilor pentru tratamentul
osteoartrozelor asociate cu proces inflamator sau fr s-a observat o diversitate a aciunii
preparatelor medicamentoase, ceia ce prezint un impact direct asupra duratei i eficacitii
tratamentului [5,6].
Din acest motiv ne-am propus drept scop studiul comparativ pentru trei preparate din grupul
corticosteroizilor n procesul tratamentului: Flosteron, Kenalog i Dexametazon. innd cont de
faptul, c proprietile fizico-chimice ale preparatelor variaz n legtur cu diversitatea
structurii, cauznd modificri de intensitate diferit a parametrilor lichidelor biologice, au fost
evaluai unii parametri biofizici ai lichidului sinovial n procesul de tratament cu acesta preparate
[7,8].
Materiale i metode
113

Pentru realizarea studiului farmaceutic i clinic au fost utilizate urmtoarele preparate:

Flosteron- suspensie injectabil 7 mg/ml (compania KRKA, Slovenia), Kenalog- suspensie
injectabil 40 mg/ml (compania KRKA, Slovenia), Dexametazon- soluie injectabil 4 mg/ml
(compania KRKA, Slovenia). Kenalog i Dexametazon au fost selectate n calitate de preparate
de referin. Pentru evaluarea indicilor fizici i chimici n cercetare au fost incluse 27
artrocenteze (puncii) a cte 5 ml ale lichidului sinovial de la 25 pacieni cu osteoartroze, artrite
i sinovite de diferite grade de evoluie i localizri articulare. Pentru determinarea viscozitii
lichidului sinovial a fost utilizat viscozimetrul capilar tip VK 4. Indicele de refracie a
lichidului sinovial n procesul tratamentului cu Flosteron a fost determinat la refractometrul IPF454-B2M, utiliznd apa purificat n calitate de soluie etalon. Pentru deteminarea pH-ului a fost
utilizat pH metrul Consort C861. Determinarea forei de frecare n urma tratamentului
osteoartrozelor cu preparate corticosteridiene a fost efectuat prin metoda tribometric, utiliznd
tribometrul cu pendul cu o singur pereche de frecare.
Rezultate
Determinarea viscozitii lichidului sinovial n osteoartroze
Scopul prezentei cercetrii a fost evaluarea i cercetarea legitilor de abatere a vscozitii
lichidului sinovial de la norm n cazul diferitelor procese patologice.
Analiza rezultatelor studiului vscozitii relative a artrocentezelor prezint variaii
semnificative ale acestui indice n cazul diferitelor procese patologice n osteoartroz.
Astfel n cazul n care afeciunea este nsoit de proces inflamator (artrite, sinovite) se
urmrete o micorare a valorii vscozitii () :
Tabelul 1
Valorile vscozitii lichidului sinovial n funcie de prezena sau absena procesului
inflamator pn la tratament
Valoarea vscozitii, mm2/s
Prezena procesului inflamator
<7,4
Cu artrite, sinovite
7,0 < < 26,3
Fr proces inflamator pronunat
=26,33,13
n norm
Pacienii au fost supui tratamentului cu preparate corticosteroide. S-a efectuat injectarea
intraarticular la pacienii cu osteoartroze asociate cu proces inflamator (bursite, epicondilite,
gonartrite, etc.) i periarticular la pacienii cu osteoartroze fr proces inflamator. n afar de
medicamentul corticosteroid, la pacienii fr sinovit, n aceeai sering s-a introdus soluie de
lidocain de 2% - 2 ml i soluie de cianocobalamin 500 mcg/ 1ml (0,05%)-2 ml pentru blocada
periarticular. Rezultatele determinrilor sunt prezentate n tabelul 2.
Tabelul 2
Valorile vscozitii lichidului sinovial pn i dup blocade
(mm2/sec) pn la blocad
(mm2/sec) dup blocad
Proces inflamator
Prep.
medicamentos
prezent
lips
prezent
lips
Kenalog
suspensie inj. 40
mg/ml
12,58
15,91
15,17
20,72
Flosteron
Susp. inj. 7 mg/ml
12,58
15,54
22,94
26,27
Dexametazona
sol. inj. 4 mg/ml
12,58
15,91
14,80
19,24
Din tabel se observ o variaie a valorii vscozitii lichidului sinovial n cazul osteoartrozei
i artritei. Dinamica variaiilor depistate este asociat cu particularitile structurale ale acidului
114

hialurinic din componea lichidului sinovial. Totodat, se observ o ameliorare a vscozitii dup
blocad cu preparatele nominalizate mai sus, ns revenire la norm se manifest doar la
utilizarea Flosteronului.
innd cont de faptul c Flosteronul a ameliorat vscozitatea lichidului sinovial cel mai
semnificativ n comparaie cu celelate preparate, a fost efectuat cerecetarea indicelui de refracie
i a pH-ului acestuia numai n urma tratamentului cu acest preparat.
Indicele de refracie este un parametru fizico-chimic, care scade odat cu apariia procesului
patologic, deaceia poate fi evaluat cu scopul caracterizrii lichidului sinovial pn i dup
tratament. Rezultatele determinrilor sunt redate n figura 1.
Se cunoate, c valoarea indicelui de
refracie a lichidului sinovial n articulaii
sntoase constitie 1,3450, n aceast ordine
de idei rezultatele obinute demonstreaz
apropierea valorii indicelui de refracie dup
blocada cu Flosteron ctre norm.
Fig. 1 Modificarea indicelui de
refracie a lichidului sinovial pn i dup
blocad cu Flosteron

n urma proceselor degenerative i

reparative n cartilagiul articular, asociate cu fomarea marginal de osteofite i cu un proces
inflamator, se modific i pH-ul lichidului sinovial, acesta fiind un parametru, ce poate fi evaluat
cu scopul caracterizrii eficacitii unui tratament medicamentos. Au fost cercetate legitile de
modificare a valorilor pH-ului lichidului sinovial n cazul diferitelor procese patologice fa de
norm.
Pn la blocad cu Flosteron, pH-ul lichidului sinovial a constituit 4,8, iar dup blocad a
crescut pn la 5,8 (figura 2).

Fig.2 Modificarea pH-ului

lichidului sinovial pn i
dup blocad cu Flosteron

Se cunoate, c valoarea pH-ului lichidului sinovial n articulaii sntoase constitie 7,297,45, astfel rezultatele obinute demonstreaz o tendin de apropiere a valorii pH-ului dup
blocada cu Flosteron spre norm.
115

Studiul tribometric al forei de frecare n urma tratamentului osteoartrozelor cu preparate

corticosteridiene
La funcionarea normal a articulaiei fora de frecare corespunde forei de greutate aplicate
articulaiei. Respectiv, aceeai for de greutate acioneaz i n cadrul unui proces patologic
articular, doar c fora de frecare se modific, suprafaa articular fiind lubrifiat insuficient de
lichidul sinovial. Anume evaluarea forei de frecare n articulaie n urma tratamentului cu
diferite remedii denot ameliorarea strii fiziologice a lichidului sinovial.
Tribometria cuprinde metode de msurare a forei sau a coeficientului de frecare, valorile
limit de frecare extern i a valorilor de uzur a suprafeelor de frecare. Msurrile tribometrice
se mpart n dou categorii: de laborator, n care are loc evaluarea forelor de frecare i de
rezisten la uzur a materialelor, n anumite condiii, i naturale, care evalueaz fora de frecare
n condiii naturale [3,4].
Principiul de lucru aprecierea coeficientului de frecare dup parametrii oscilaiilor
pendulului (metoda de msurare a decrementului logaritmic de stingere a oscilaiilor). Perechea
de frecare const dintr-o baz plat cu o gropi, confecionat din plastic aprobat pentru utilizare
n traumatologie i ortopedie (pentru proteze); pendulul este confecionat din oel marca H9 sau
H8 cu raza de 2 mm. n zona de frecare s-a aplicat o for de greutate, echivalent cu cea
fiziologic asupra articulaiei genunchiului omului n micare. Masa pendului este de 2,0 kg;
viteza de alunecare - 1 m/sec [10].
Rezultatele determinrilor sunt prezentate n tabelul 3 i figura 3.
Tabelul 3
Valorile forei de frecare i a coeficientului de frecare pentru cele
trei preparate luate n studiu
Preparatul
Fora de frecare
Coeficientul de frecare
F (N)

Dexametazon
1,65
0,085
Kenalog
2,91
0,150
Flosteron
1,03
0,058
Preparatul Flosteron, n cadrul acestui studiu, a demonstrat comparativ cea mai mic for de
frecare i respectiv, cel mai mic coeficient de frecare

0,12
0,1
0,08
0,06
0,04
0,02
0
5

10

15

, dexam etazon

20

25

30

, Kenalog

35

40

t, min

, Flosteron

Fig. 3 Modificarea coeficientului de frecare() n timp

Studiul tribologic a demonstrat dependena direct a coeficientului iniial de frecare de
componena chimic (structura principiilor active) i proprietile fizico-chimice ale preparatelor
utilizate. Un coeficient de frecare destul de nalt l posed Dexametazona i Kenalogul, deoarece
se produce stratificarea rapid a suspensiilor acestor preparate n lichidul sinovial; are loc
formarea n timp a unui precipitat cristalin pe suprafaa de frecare i deplasarea fazei lichide din
116

gropia nodului de frecare. Ca rezultat stratul de pe perechea de frecare const preponderent din
faz cristalin de Dexametazon i Kenalog, care se comport ca un abraziv.
Cel mai mic coeficient de frecare iniial este constatat la Flosteron, care scade n timp odat
cu prelucrarea perechii de frecare cu lichid sinovial. Aceasta poate fi explicat prin faptul, c
componentele Flosteronului se prezint sub form de suspensie de particule de dimensiuni mult
mai mici, viteza de precipitare a crora este cu mult mai mic i, ca rezultat, proprietatea de
lubrifiere este mai mare. Totodat s-a determinat, c efectul lubrifiant este n dependen de
polaritatea moleculei de substan medicamentoas: cu ct compusul este mai polar, cu att fora
de frecare este mai mic.
Concluzii
1. n rezultatul studiului unor indici fizici i fizico-chimici ai lichidului sinovial n procesul
tratamentului cu preparate corticosteroidiene s-a demonstrat influena particularitilor
structurale ale Flosteronului asupra eficacitii tratamentului, demonstrat prin evaluarea
vscozitii, indicelui de refracie i a pH-ului nainte i dup tratament, afirmndu-se o
tendin marcat de revenire spre norm a acestor parametri.
2. Studiul tribometric al forei de frecare n urma tratamentului osteoartrozelor cu preparatul
Flosteron a demonstrat comparativ cea mai mic for de frecare i respectiv, cel mai mic
coeficient de frecare, ceia ce condiioneaz ameliorarea semnificativ a proprietii de
lubrifiere n articulaie.
Bibliografie
1. Balch H.W., Gibson J. M. Repeated corticosteroid injections into knee joints//
Rheumatol. Rehabil. 1999, pp. 348-390.
2. Centeno L.M, Moore M.E. Preferred intraarticular corticosteroids and associated
practice: a survey of members of the American College of Rheumatology.// Arthritis Care
& Research. - 1994.- 7(3), pp.151-155.
3. Challen J.M, Oxley P.L.B. An explanation of the different regimes of friction and wear
using asperity deformation models.// Wear. 1975. - 53, pp. 229-243.
4. Creu S., Mecanica contactului. // Editura "Gh. Asachi", Iai, 2002.
5. David J. Samson. Treatment of Primary and Secondary Osteoarthritis of the Knee.//
AHRQ publication. - Sept. 2007. - No. 07-E012.
6. Gosal H.S, Jackson A.M., Bickerstaff D.R. Intra-articular steroids after arthroplasty for
osteoarthritis of the knee. //Journal of Bone and Joint Surgery, 2000. - 82-B(5): pp.775776;
7. Journal of Molecular Structure: THEOCHEM. // December 2002. - Volume 619, Number
1, 9, pp. 195-205.
8. Noerdlinger, M.A., Fadale P.D. The role of injectable corticosteroids in orthopedics.
Orthopedics.// 2001. - 24: pp. 400405. [PubMed];
9. .
- . //, 2007.
10. .., .. -
.//
, 75, . 5, , 2005, . 119-122.

117

IDENTIFICAREA BENZITURONULUI PRIN METODE OPTICE SPECTRALE

Iurie Tihon, Livia Uncu, Vladimir Valica, Liudmila Chirciu
Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic
Summary
Optical spectral methods of identification of benzituron
The new chemical component from izotioureic derivative group is researched. The
elaborated methods for identification will be included in normative analytical documents of
quality of this substance.
Rezumat
Este cercetat un nou compus chimic din grupul derivailor izotioureici. Metodele de
identificare elaborate vor fi incluse n documentele analitice de normare a calitii pentru aceast
substan.
Introducere
n ultimii ani, s-au descoperit substane medicamentoase cu structur izotiureic nu
numai cu aciune hipertenisiv (profetur, difetur, metiferon) dar i cu aciune antihipertensiv.
Benzioturonul, ce posed aciune farmacologic vasodilatatoare, antihipertensiv
pronunat i de lung durat, datorit influenei directe asupra musculaturii netede a peretelui
vascular.
Materiale i metode
Pentru analiza spectral au fost utilizate spectrofotometre UV-VIS Perkin Elmer
Lambda-40 i Agilent Technologies 9500. Spectrele IR au fost determinate la spectrofotometrul
FT/IR-4100 TypeA.
Rezultate
Pentru identificarea Benzituronului au fost determinate spectrele UV a soluiilor apoase
n regiunea 190-320nm. Benzioturonul compui ce aparin grupului de compusi cu structura
izotioureica. Din punct de vedere a structurii chimice substana se prezinta ca sare de anion
anorganic de clorura(benzioturon) si partea organic de benzoilizotiureic.
Tabelul 1 Caracteristicile spectrale ale unor cromofori
Substana

Sisteme
cromofore
S

NH2+
NH2 Cl

-NH2
-SH
C6H5-

Tranzacia
electronica
Amina
Tiol
Fenil

n*
n*

Lungimea de
unda de
absorptie
195-200
220
198, 255

Electronii atomului de sulf sunt mai puin legai de nucleele lor proprii dect n cazul
electronilor de azot, deaceea tranzaciile electronice (n*) pe segmentul tiolic are loc n
intervalul 2202nm. Acest valoare de absorbie este bine pronunat pentru Benzioturon pe
aceasta valoare a lungimei de und se observ un punct de inflexiune care modific curbura
traiectoriei spectrului de absorbie. Acest punct de inflexiune este putin observabil datorita
moleculei de acid clorhidric care interfereaza si reactioneaza steric cu strucrura izotiureic.
n molecula de Benzioturon este prezent structura aromatica fenilic care pe deplin va
influena manifestarea benzilor de absorbie din domeniul 200nm. Valoarea 200 nm nu poate fi
considerata drept analitica din considerente c acest domeniu este favorabil si pentru molecula de
ap.
118

Benzenul este format din trei sisteme cu electroni care condiioneaz apariia efectului
inductiv negativ i deplasarea legturilor duble aceasta calitativ fiind demonstrat prin apariia
n diapazonul de lungime de und lung a transferului de benzi 1A1g1B2u i 1A1g1B1u i
1
A1g1E1u . Electronii sunt mobili sunt implicai n tranziii * care au loc n regiunea 180200 nm. Tranziia elecronic n * ce deriv din electronii neinplicai n legturi chimice este
prezent in ambii compui datorit trecerii unui electron dintr-un dublet n al atomilor de N
(prezent n sistemul aminic) i S(prezent n sistemul tiolic) pe un nivel * de antilegatur.
Intensitatea abosorbiei este influenat de conjugarea electronilor a grupelor grupelor
auxocrome cu electronii de legtur (C-S-; C=N) i antilegtur *
Spectrele soluiilor analizate au fost nregistrate n diapazonul 190-300 nm.
A

221nm

nm
Figura 1. Spectrul UV de absorbie al soluiei apoase Benzituron 20 g/ml
Alegerea solvenilor pentru pregtirea probei joac un rol important n stabilirea texturei
spectrului de absorbie care nsumeaz o totalitate de benzi ce se abpsorb de ctre lumin la
diferite lungimi de und. Pentru excluderea apariiei unor benzi inproprii analitului este necesar;
utilizarea solventilor de o inalt puritate; alegerea unui solvent mai puin polar pentru a preveni
interaciunile intramoleculare.
Ne-am propus ca s vedem efectul solvenilor organici asupra poziiei, intensitatea i forma
benzilor de absorbie n spectrele soluiilor de Benzituron de aceeai concentraie 20 g ml-1
n acest caz cel mai favorabil ar fi alcoolul etilic (95g/v) i apa care sunt accesibil costisitoare.
Spectrele IR pentru Benzituron au fost determinate la spectrofotometrul FT/IR4100TypeA (Germania) n regiunea 400-4000 cm-1 sub form comprimat . Pentru aceasta 10
mg Benzituron se amestec 1 g bromura de sodiu. Spectrul IR al Benzituronului este redat n
figura 2. Pentru caracteristica benzilor de absorbie a fost aleas regiunea 1700-400 cm -1, adic
aa numita zona amprentelor degetale. Aici caracterul spectrului se schimb chiar i la devieri
nensemnate n structur. Benzituronul are o caracteristic spectral individual.
n regiunea 1400-1450 cm-1 apare o absorbie puternic (1420.32-1454.06 cm-1), cauzat de
devieri de valen NH2+ i in regiunea 3300-3000 cm -1 sunt devieri deformate a grupei - NH - .
In segmentul 1640-1690 cm-1 se vd clar devieri deformate a grupelor C = N mai bine
pronuntate cu banda 1639.2 cm-1. Prezena benzii de absorbie la 568.89 cm-1 este legat de
devierile de valen ale grupei C-S. Benzile de intensitate medie de la 2200-2300 cm -1, se
datoreaz vibraiilor de deformare a grupei CH2

119

Figura 2 Spectrul IR de absorbie al Benzituronului

Poziia frecvenelor caracteristice n spectrul IR al Benzituronului este redat n tabelul 2
Sistemul aromatic este indicat pe spectru prin aparitia benzilor de absorbtie la 1550.49 si
1639.2 cm-1. Banda 704.85 cm-1 confirma sistemul benzenic monosubstituit. Rezultatele
spectrelor IR ale Benzituronului demonstreaz structura acestei substane, precum i utilizarea
spectroscopiei IR pentru identificare.
Tabelul 2 Frecvenele caracteristice a Benzituronului n spectrul IR
maxime, cauzate de grupele, cm-1
Substana

Benzituron

Ciclu benzenic
1500-1600, 700

NH2+ ; NH
1400-1450,
3300-3000

- CH2
-CH2
1000-1100;
2200-2300

CS,C=N
550-580;
1640-1690

Concluzii
1. A fost cercetat spectrul UV de absorbie a Benzituronului, s-a artat specificul lui i
posibilitatea folosirii pentru identificare.
2. A fost cercetat spectrul IR de absorbie a Benzituronului, evideniind benzi de absorbie,
care deosebesc Benzituronul de alte substane i permit folosirea lor pentru demonstrarea
structurii i identificarea substanei.
Bibliografie
1. Liviu Roman, Marius Boji, Robert Sndulescu, Validarea metodelor de analiz i
control, Editura medical, 1998,283p.
2. Uncu L., Valica V., Cheptanaru Z. Analiza spectral a difeturului i profeturului //
Realizrile farmacologiei naionale n perioada anilor 1971-2001. - Chiinu.- 2001.- P.
208-210.
3. Douglas A.Skoog, F.James Holler, Timothy A.Nieman Principles of Instrumental
Analysis, Saunders Golden Sunburst Series

120

IDENTIFICAREA BENZITURONULUI PRIN REZONA MAGNETIC NUCLEAR

PROTONIC (1H) I CARBONIC (13C)
Iurie Tihon
Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic
Summary
Identification of benzituron by 1H and 13 C nuclear magnetic resonance
In order to identify and confirm the sterical structure of Benzituron 1H and
were used.
Rezumat
Metode de Rezonan Magnetic nuclear cu tehnica 1H protonic i
fost utilizat pentru a elucida i confirma structura steric a Benzituronului.

13

13

C NMR

C carbonic a

Metode i materiale
Spectroscopia de Rezonan Magnetic Nuclear RMN se bazeaz pe msurarea
absorbiei radiaiei electromagnetice. RMN- Rezonana magnetic nuclear este o metod
analitic instrumental de nalt performan care permite identificarea structurii compuilor
organici de orice complexitate. Presupunerea i confirmarea scheletul molecular se realizeaz
cu ajutorul spectrelor RMN care ntrunesc semnalele de rezonant ce rezult din interaciunea
spinului nuclear a atomului analizat ntr-un cmp magnetic cu o radiaie electromagnetic cu
lungime de und mare (unde hertziene) i energie mic. Ambiana chimica determinat de
totalitatea nucleelor grupele funcionale influeneaz absorbia radiaiei electromagnetice i
coreleaz cu intensitatea deplasrii chimice, respectiv cu structura chimic a compusului
analizat. Aceast ambian chimic perturb uor valoarea cmpului magnetic exterior cu care
vine n contact. Electronii de legtur dintre atomi produc un cmp magnetic care se opune
cmpului magnetic exterior, fenomen succedat de o ecranare magnetic dintre nuclee finisat cu
blindaj. Efectul de blindaj se manifest prin variaii locale ale intensitii cmpului magnetic,
ceea ce are drept consecin decalarea frecvenilor de rezonan n raport cu procesele similare
care se petrec n vid. Intensitatea i forma benzilor de rezonan din spectrogramele este
influenat de: natura solvetului deuterizat, sandardul intern, temperatura , intensitatea cmpului
magnetic.
Spectrele RMN a Benzioturonului au fost nregistrate la spectrometru de Rezonan
Magnetic Nuclear cu Transformare Fourer (RMNFT)
La formularea concentraiei soluiei de Benzioturon s-a luat n consideraie masa molecular
a substanei. Deoarece masele lor moleculare nu difer n ordinul de sute de uniti de mas, ci
doar numai n cteva zeci de uniti va fi de ajuns ca masa ambelor substane pentru obinerea 1H
spectru cu TF s fie 10 mg, iar pentru 13C specrul cu TF s fie 50 mg.
Tehnica de lucru
Benzioturonul a fost recristalizat n aceton pentru a purifica substanele i exclude prezena
substantelor nrudite chimic.
Substana medicamentoas au fost uscate timp de 2 ore la o temperatur de 105 OC. Probele
de substane au fost dizolvate n ap deuterizat i filtrate printr-un filtru Millipore 0.2 m sub
vid. Soluiile obinute sunt transferate n tubul de sticl (produs de Wilmad) de lungime 15 cm
cu diametrul 5 mm; stratul soluiei de analizat este de 2-3 cm. Tubul trebuie s fie curat i lipsit
de impuriti paramagnetice altfel, acestea vor influena frecvenele de rezonan, vor genera
benzi de rezonan suplimetare care pot interfera cu benzile principale ale substanei i implicit
poziiile semnalelor n spectrele RMN. n calitate de standard intern se adaug
TMS(tetrametilsilanul) care este introdus in tubul cu soluia de analizat. Tubul cu soluia de
analizat este ataat intre polii magnetului, fiind meninut in poziia vertical cu ajutorul tubului
de intrare.
121

Rezultate
Spectrul de rezonan magnetic nuclear -1H-protonic ce conine semnale de intensitate
mare demonstreaz prezena abundent a atomilor de hidrogen n molecula Benzituronului.
Pe spectru se observ patru semnale de rezonan cu raportul a intervalelor de integrare (1:4:3:2)
ceea ce arat prezena a 4 tipuri de atomi de hidrogen la diferite grupe funcionale. Semnalul la
4.06 p.p.m.( ) care se prezint n form de diplet aparine grupei metilenice(-CH2-). Zona de
rezonan 4.56 p.p.m corespunde grupei aminice (NH2) i iminice (NH), se prezint ca un semnal
comun datorit suprapunerilor bezilor de rezonan (2+1=3). Semnalele atomilor de hidrogen din
7.20; 7.21; 7.22; 7.24 p.p.m. incluse n multiplet sunt atribuite atomilor de hidrogen din sistemul
benzenic.
Fig.2 Spectrul de rezonan magnetic nuclear1H-protonica Benzituronului

Fig3. Spectrul de rezonan magnetic nuclear 13C carbonic Benzituronului

120
115
110
128. 86
129. 53

105
100
95
90
85
80
75
70
65
60
55

127. 82

30.30

50
45
40
35
30
25
20
155. 83

15

135. 73

10
5
0

170

160

150

140

130

120

110

100

122

90

80

70

60

50

40

30

20

Spectru 13C carbonic a Benzituronului prezint 6 semnale de rezonan de diferit

intensitate. Benzile 2 i 3 sunt ngroate ceea ce denot suprapunerea semnalelor de rezonan
datorit existenei simetriei n molecula Benzituronului. Semnalul analitic din zona joas de
frecven a spectrului 30.03p.p.m. corespunde atomului de carbon din grupa metilenic(-CH 2-).
Totalitatea semnalelor (n numr de 4 ) din regiunea 128.86; 129.53 i 128.86; 129.53 p.p.m.
aparin atomilor simetrici de carbon(2,3,5,6) din entitatea benzenic. Primul atom de carbon care
este nesaturat i cuaternar este deplasat spre zona de frecvena mai nalt a spectrului
135.73p.p.m. Atomul de carbon nr 3 din benzen este identificat prin semnalul 127.82 p.p.m.
Atomul de carbon incorporat n grupa funcional carbaminic i va avea valoarea deplasrii
chimice n zona de frecven cea mai mare. Toate aceste semnale confirm prezena a 8 atomi de
carbon n structura Benzituronului.
Concluzii
1. A fost cercetat spectrul 1H protonic i 13C carbonic a Benzituronului, s-a artat specificul
lui i posibilitatea folosirii pentru identificare.
2. A fost cercetat spectrul 1H protonic i 13C carbonic a Benzituronului, evideniind benzi
de absorbie, care deosebesc Benzituronul de alte substane i permit folosirea lor pentru
demonstrarea i confirmarea structurii sterice.
Fig. Confirmarea structurii sterice a Benzituronului prin rezonan magnetic
nuclear 1H-protonica i 13C carbonic.

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Bibliografie
Boji Marius, R. L. (2003). Analiza i Controlul Medicamentelor. Cluj Napoca:
Intelcredo Deva.
Curea, C. B. (1983). Controlul Medicamentelor. Bucureti : Editura Didactic i
Pedagogic.
Dudley H. Williams, F. I. (1995). Spectroscopic Methods in Organic Chemistry. London:
McGraw-Hill Publishing Company.
Gzeresi Arpad, K. H. (1996). Analiza spectral n infraroie a substanelor
medicamentoase. Trgu Mure: Universitatea de medicin i famacie Trgu Mure.
Livia Uncu, Vladimir Valica (2002). Analiza i Standardizarea Difeturului i Profeturului
i a formelor lor farmaceutice; Chisinau: Tez de doctor n tiine famaceutice.
Robinson W. James, E. M. (2007). Undergraduate Instrumental Analysis . New York :
Marcel Dekker.
Skoog A.Douglas, H. F. (1998). Principles of Instrumental Analysis. Philadelphia:
Saunders College and Harcourt Brace College.

123

STUDIUL STABILITII COMPRIMATELOR CU NORFLOXACIN,

FAMOTIDIN, NIMESULID I BISEPTOCID
Liviu Movil, Livia Uncu, Oxana Vslouh, Vladimir Valica, Iurie Tihon
Laboratorul Analiz, Standardizare i Controlul medicamentului, CDM
Summary
Study of stability of tablets with Norfloxacin,
Famotidin, Nimesulid and Biseptocid
The factor of humidity and temperature influencing the stability of medications
Norfloxacin, Phamotidin, Nimesulid and Biseptocid were researched. The modifications of the
mean mass of tablettes in the function of the storage time, as well as the depression of
concentration of active substances in the conditions of the high temperature were studied. The
results of this research were used as for the determination of valability term and for the optimal
conditions of storage for medications taken in research.
Rezumat
Este cercetat stabilitatea preparatelor Norfloxacin, Famotidin, Nimesulid i
Biseptocid la aciunea umiditii i temperaturii. S-a studiat modificarea v alorilor masei medii
a comprimatelor n funcie de timpul de depozitare, precum i scderea concentraiei principiilor
activi din comprimate la temperaturi ridicate. Cercetrile efectuate au stat la baza determinrii
termenilor de valabilitate i a condiiilor optime de depozitare pentru medicamentele luate n
studiu.
Introducere
Orice productor care dorete s fabrice i s introduc pe piaa un medicament are
responsabilitatea de a furniza autoritii de reglementare date, care s ateste ca produsul respectiv
este conform cu declaraiile menionate pe etichet i ca este stabil n toate sensurile pn la
sfritul perioadei de valabilitate. Acest lucru poate fi dovedit prin studiile de testare a stabilitii,
efectuate n cursul dezvoltrii produsului si reglementate n prezent de ghidurile ICH (Conferinta
Internationala pentru Armonizare a Cerintelor Tehnice in vederea inregistarii Produselor
Farmaceutice pentru Uz Uman). Studiile de stabilitate sunt destinate obinerii de informaii
asupra stabilitii unui produs farmaceutic, cu scopul de a defini perioada de valabilitate atunci
cnd produsul este condiionat intr-un anumit ambalaj (ambalajul comercial) si meninut n
anumite condiii de pstrare [6].
Calitatea unui medicament poate fi definit ca fiind suma factorilor care contribuie la
sigurana, eficacitatea i acceptabilitatea produsului.
Meninerea stabilitii substanelor medicamentoase se realizeaz prin pstrarea lor n
condiii bine stabilite, iar statornicia medicamentelor n timp se determin n funcie de factorii
care pot duce la degradarea lor.
Astfel, fiind definit ca insuirea medicamentelor de a-i pstra proprietile fizicochimice i activitatea farmacologic n cursul timpului de depozitare determinat conform
cerinelor DTN, stabilitatea unui medicament reprezint, alturi de eficacitate, puritate i
inocuitate, un factor important n asigurarea calitii acestuia. Practic, un medicament este
considerat stabil dac, pstrat n condiii corespunztoare, i menine caracteristicile de calitate
conferite la preparare n limitele prevzute de normele oficiale, pentru o perioad de timp
determinat, denumit perioad de valabilitate.
Factori care provoac instabilitatea medicamentelor pot fi clasificai dup provenien i
impactul lor asupra calitii medicamentului:
- factori externi: A) factori ce in de condiiile de depozitare temperatur, umiditate,
lumin, presiune, bioxidul de carbon i oxigenul din aer, microorganismele; B) alt grup
de factori externi, dar care in de forma farmaceutic final adic ambalajul (sticl, hrtie,
blistere, mas plastic). - Factori interni: A) Atribuii substanei medicamentoase
124

structura, proprietile fizico-chimice, coninutul de impuriti i caracterul lor; B)

atribuii formei farmaceutice tipul formei farmaceutice, solvenii, excipienii, procesul
tehnologic, aparatajul i utilajul.
Norfloxacina, Famotidina, Nimesulidul i Biseptocidul fac parte din diferite grupe chimice i
farmacoterapeutice, posed proprieti fizico-chimice specifice, care condiioneaz diverse
interaciuni cu factorii de mediu. Excipienii care intr n componena comprimatelor sunt i ei
diferii, la fel i procedeele tehnologice utilizate la preparare sunt specifice. Toate acestea ne-au
determinat s stabilim gradul de influen a celor mai importani factori externi, ce iniiaz un
proces de degradare: temperatura i umiditatea.
Materiale i metode
Pentru analiza spectral au fost utilizate spectrofotometre UV-VIS Agilent - 8453 n
intervalul de und 350 450 nm. La identificarea prin metode chimice au fost utilizai reageni i
solveni n corespundere cu cerinele Farmacopeei Europene.
Rezultate
naintea pstrrii experimentale s-a petrecut analiza calitii preparatelor cercetate
conform cerinelor MFT corespunztoare. Pentru analiza preparatelor cercetate a fost folosit
metod spectrofotometric n UV. Aceast metod permite determinarea exact a coninutului
cantitativ de substan activ, este o metod sensibil, care ne ofer posibilitatea detectrii
schimbrilor minore pe parcursul depozitrii. Totodat este i o metod reproductiv.
Pentru identificarea principiilor activi din comprimate au fost nregistrate spectrele de
absorbie n UV, iar valorile absorbanei n maximele de absorbie au servit la dozarea acestor
preparate prin metoda spectrofotometric. Soluiile analizate de comprimate au fost preparate
dup cum este indicat n compartimentul Dozare ale Monografiilor Farmacopeice. S-au
nregistrat spectrele de absorbie n UV a preparatelor n intervalul lungimilor de und 240
380 nm pentru Norfloxacin, 220 320 nm pentru Famotidin, 350 450 nm pentru Nimesulid
i n intervalul 210 360 nm pentru Biseptocid. Spectrele obinute sunt artate n figura 1.
(1)

(2)

(3)

(4)

Fig.1. Spectrele de absorbie n UV ale

comprimatelor cu Norfloxacin (1), Famotidin (2), Nimesulid (3) i Biseptocid (4).
Maximele de absorbie obinute sunt utilizate n calitate de lungimi de und analitice la
dozarea spectrofotometric a preparatelor.
125

Umiditatea sczut, urmat de mrirea temperaturii, scade coninutul apei din substana
medicamentoas i excipieni, ceia ce duce la micorarea masei medii n cazul cnd
medicamentul se prezint sub form de comrimate.
innd cont de faptul, c masa medie a comprimatului este un indice obligatoriu de
calitate pentru aceast form farmaceutic, ne-am propus evaluarea acestuia n timp i n raport
cu temperatura de depozitare. n figura 2 sunt oglindite modificrile maselor medii a
comprimatelor cercetate n procesul depozitrii la temperaturi ridicate (40 i 600C).

Fig. 2. Modificrile maselor medii ale comprimatelor cercetate n procesul

depozitrii la temperaturi ridicate (40 i 600C)
Conform datelor obinute, observm micorarea masei medii a comprimatelor pe
parcursul perioadei de depozitare. n acelai timp, la depozitarea la temperatura 60C masa
medie scade mai repede, fapt lmurit prin pierderea sporit a apei la o temperatur mai ridicat.
n procesul cercetrilor s-a obsevat modificarea valorilor masei medii nu doar la
temperaturi ridicate, ci i la depozitarea n condiii obinuite la 20 0C n timp real. Am evaluat
modificarea maselor medii pe ntreaga perioad de depotitare la trei temperaturi (20, 40, 60 0C)
pentru a cte trei serii de preparat. Dup cum se vede din diagrame (figura 3), pierderea n
greutate este cauzat de influena umiditii asupra stabilitii comprimatelor luate n studiu, iar
modificrile valorilor masei medii demonstreaz elocvent acest fenomen. Este foarte important,
ca valorile indicelui uniformitii masei s nu depeasc limitele prevzute n DAN. Devierea
masei individuale a unui comprimat n raport cu masa medie a comprimatelor nu trebuie s
depeasc -5% cu excepia a dou comprimate, pentru care se admit devieri pn la -10%.

126

Fig.3. Modificrile maselor medii ale comprimatelor cercetate pe ntreaga

perioad de depozitare
S-a determinat uniformitatea masei pentru 3 serii de fiecare preparat analizat pe ntreaga
perioada de depozitare. Analiznd rezultatele, observm, c devierile masei individuale a
comprimatului fa de masa medie nu depete limitele prevzute de MFT.
Este cunoscut faptul, c n condiii de cretere a temperaturii, are loc o marire a vitezei
reaciilor de degradare a medicamentelor, ceia ce duce la micorarea concentraiei i scderea
eficienei farmacologice. Astfel, este absolut necesar stabilirea unui regim strict de temperatur
pentru depozitarea substanei medicamentoase.
Ne-am propus evaluarea modificrii coninutului principiilor active n comprimate la
aciunea temperaturii cu scopul selectrii condiiilor optime de pstrare i determinrii
termenului de valabilitate. Preparatele au fost cercetate n procesul depozitrii a cte trei serii la
temperaturi de 40 i 60. Peste intervale de timp, echivalente cu 6 luni de pstrare n condiii
obinuite, s-a efectuat dozarea principiului activ din comprimate prin metoda spectrofotometric
conform tehnicilor de lucru, descrise n documentaia de normare a calitii. Rezultatele
determinrilor sunt redate n figura 4.
Din figur se observ o scdere a concentraiilor de principii active la depozitare prin
metoda izotermic la temperaturi ridicate pentru toate comprimatele cercetate. Dinamica
degradrii este diferit, fiind influenat de viteya diferit a reaciilor de degradare, de natura i
proprietile substanelor medicamentoase.
Astfel, aceste rezultate stau la baza calculrii termenului de valabilitate pentru produsele
cercetate prin metoda degradrii accelerate. Totodat pot fi stabilite condiiile optime ale
temperaturii de pstrare pentru formele farmaceutice luate n studiu sub 250C.

127

Fig.4. Modificrile coninutului principiilor activi n comprimatele cercetate pe ntreaga

perioad de depozitare
128

3.
4.
5.
6.

Concluzii
Modificarea masei medii a comprimatelor cu norfloxacin, famotidin, biseptocid li
nimesulid n condiii de umiditate sczut se observ la diferite valori de temperatur; acest
indice scade pronunat n procesul depozitrii la 600C.
Evaluarea indicelui uniformitii masei denot, c valorile abaterilor de la masa medie nu
depesc limitele prevzute de DAN.
n condiii de temperatur ridicat coninutul principiului activ n comprimate scade n
rezultatul mririi vitezei reaciilor de degradare.
Studiul cineticii reaciilor de degradare pentru Norfloxacin, Famotidin, Nimesulid i
Biseptocid n comprimate a permis determinarea termenului de valabilitate a acestor
produse prin metoda Degradrii accelerate i stabilirea condiiilor optime ale temperaturii
de pstrare pentru aceste forme farmaceutice.
Bibliografie
1. Farmacopeea romn, ed. X. Editura Medical, Bucureti, 1993.
2. Farmacopea European, ed. 3RD, 2001
3. MFT MD-08/0868-02.07
4. MFT MD-08/075303.06
5. MFT MD-08/0907-08.07
6. Carstensen T. Jeans//Stabilitatea medicamentelor. Medison. Wisconsin, 2001.

129