Analiza chimica calitativa a solutiei

extractive apoase
Are ca scop stabilirea principalelor grupe de principii active ,prin reactii
chimice specifice.
Realizarea acestui obiectiv presupune doua etape:
- produsul vegetal este supus unor extractii succesive cu solventi de polaritati
diferite ,de la apolar la polar (in general eter etilic,metanol,apa);
- in fiecare solutie extractiva se efectueaza reactii chimice specifice diferitelor
clase de principii active.
Deoarece producatorul recomanda administrarea amestecului de produse
vegetale sub forma de infuzie ,analiza chimica s-a realizat pe solutie apoasa.
Tehnica de lucru:
Obtinerea infuziei:
Peste o lingurita de produs vegetal se adauga 200 mL apa clocotita si se
lasa la infuzat 15 minute dupa care se filtreaza prin vata.
Pe solutia apoasa s-au analizat urmatoarele principii active:
substante cu caracter reducator
oze si poliholozide
mucilagii
salicozida
ODP-uri
flavone
saponozide
taninuri
alcaloizi
carotenoide

1.Substante cu caracter reducator

Identificarea substantelor cu caracter reducator se realizeaza prin reactia
cu reactivul Fehling.
Principiul reactiei: are la baza proprietatea ozelor de a reduce hidroxidul
amino-cupric la oxid cupros.
Reactivi necesari: reactiv Fehling I, reactiv Fehling II.
Tehnica de lucru: peste 1 ml solutie extractiva adusa in prealabil in
eprubeta se adauga 1 ml reactiv Fehling (obtinuta prin amestecarea extempore a
0,5 ml reactiv Fehling I cu 0,5 ml reactiv Fehling II). Amestecul se incalzeste la

flacara mica .Se observa aparitia unui precipitat rosu- caramiziu (oxid de
cupru) care sedimenteaza in timp.

2. Oze si poliholozide
Identificarea se realizeaza atat prin reactia cu reactivul Fehling cat si prin
cea cu reactivul Molisch.
Principiul reactiei: sub actiunea acidului sulfuric concentrat ,ozele se
deshidrateaza cu formarea furfuralului (pentozele) sau a hidroximetilfurfuralului (hexozele); acestia ,prin cuplare cu timol ,genereaza compusi
colorati in rosu-purpuriu.
Reactivi necesari: H2SO4 conc. , timol 10 g/L.
Tehnica de lucru : 3-5 mL solutie extractiva se concentreaza in capsula
pana la sicitate.Peste reziduul format (racit in prealabil) se adauga 1mL acid
sulfuric concentrat si proba se mentine in repaus cel putin 5 minute (pentru
deshidratare), dupa care se trateaza cu 1-2 picaturi timol 10g/L.
Se formeaza un compus colorat in rosu-portocaliu (dependent de
concentratia ozelor din proba).

3.Mucilagii
Identificarea se realizeaza prin precipitare in alcool sau acetona.
Tehnica de lucru: intr-o eprubeta continand 10 mL metanol sau acetona
se toarna in fir subtire, sub continua agitare ,2-3 mL solutie apoasa
concentrata.Precipitatul format se separa prin filtrare (pe hartie de filtru) si se
aduce intr-o eprubeta.
In cazul prezentei mucilagiilor se observa un precipitat.

4.Carotenoide
Reactia Carr-Price
Principiul reactiei: la tratare cu triclorura de stibiu , carotenoidele
formeaza compusi colorati in albastru ,care trec in rosu purpuriu si apoi in rosubrun.
Reactiv necesar : reactiv Carr-Price

Tehnica de lucru: 1-2 mL solutie extractiva se aduce la reziduu intr-o

capsula de portelan, pe baie de apa. Peste reziduu se adauga 1-2 picaturi reactiv
Carr Price.
In cazul unei reactii pozitive se observa aparitia unei coloratii albastre,
care vireaza rapid in rosu-purpuriusi apoi in rosu-brun.
Reactia Winterstein
Principiul reactiei:la tratare cu acid sulfuric concentrat carotenoidele
formeaza compusi colorati in albastru-verzui.
Reactiv necesar: acid sulfuric concentrat.
Tehnica de lucru: 1-2 mL solutie extractiva se aduce la reziduu intr-o
capsula de portelan,pe baie de apa.Dupa racire , peste reziduu se adauga 1-2
picaturi acid sulfuric concentrat.
In cazul unei reactii pozitive se observa aparitia unei coloratii albastreverzui.
Reactia cu acid clorhidric concentrat
Principiul recatiei: la tratare cu acid clorhidric concentrat carotenoidele
cu structura epoxidica formeaza compusi colorati in verde albastrui.
Reactiv necesar: acid clorhidric concentrat
Tehnica de lucru: 1-2 mL solutie extractiva se aduce la reziduu , intr-o
capsula de portelan, pe baia de apa.Dupa racire, peste reziduu se adauga 1-2
picaturiacid clorhidric concentrat.In cazul unei reactii pozitive se observa
aparitia unei coloratii verde-albastrui.

5.Salicozida
Se identifica prin reactia cu clorura de fer (III).
Principiul reactiei :salicozida are capacitatea de a forma coloratie
specifica, rosie-portocalie, la tratarea cu clorura de fer (III) .
Reactiv necesar: clorura de fer (III)10g/L.
Tehnica de lucru:0,5g produs vegetal maruntit (sita II,III) se supune
extractiei prin refluxare cu apa.Dupa fiecare extractie ,se filtreaza.Filtratelor
reunite li se adauga 5 mL acetat de plumb 100 g /L.Proba se mentine pe baie de
apa pana cand precipitatul format se concretizeaza , apoi se filtreaza.Solutia
partial purificata, rezultata in urma indepartarii taninului se trateaza cu 1 g
Na2CO3 pentru indepartarea excesului de ioni de plumb.Dupa filtrare, solutia
extractiva purificata se trateaza cu 1 mL clorura de fer (III) 10g /L.
Se obtine o coloratie specifica rosu-portocalie.

6.ODP-uri
Se identifica prin reactia cu reactivul Arnow.
Principiul reactiei: formarea nitrozoderivatilor (in mediu acid) si
tautomerizarea spontana a acestora la oximele corespunzatoare, care prezinta
coloratie rosie si se solubilizeaza in mediu alcalin.
Reactivi necesari: acid clorhidric 0,5 N sau 1N ,reactivul Arnow,hidroxid
de sodiu 0,5 N sau 1 N.
Tehnica de lucru:0,5 g produs vegetal pulverizat se extrag prin refluxare
repetata cu apa sau alcool.Dupa racire, solutiile se filtreaza ,apoi se
reunesc.1mL solutie extractiva se trateaza cu 1 mL acid clorhidric 0,5 N, 1 mL
reactiv Arnow si 1 mL hidroxid de sodiu 0,5N.Apare o coloratie rosie sau rosu
violeta ca urmare a formarii oximei acidului cafeic.

7.Flavone
Formarea fenoxizilor
Principiul reactiei: flavonozidele si agliconii formeaza in mediu alcalin
fenoxizi colorati in galben
Reactiv necesar: hidroxid de sodiu 100g/L.
Tehnica de lucru: la 1 mL solutie extractiva apoasa se adauga 0,5 mL
solutie de hidroxid de sodiu 100 g/L.Se observa intensificarea coloratiei
galbene.

Reactia Shibata (reactia cianidolului sau reactia de reducere a gruparii

ceto de la C4)
Principiul reactiei: se bazeaza pe proprietatea flavonozidelor sau a
agliconilor acestora sa isi reduca gruparea ceto in prezenta hidrogenului nativ.
Reactivi necesari: magneziu metalic,acid clorhidric concentrat.
Tehnica de lucru:la 1 mL solutie extractiva apoasa se adauga cateva
fragmente de magneziu metalic si 0,5 mL solutie de acid clorhidric concentrat.
Reactia este insotita de efervescenta.Modificarea culorii are loc in decurs de
cateva minute.
Reactia de obtinere a chelatilor
Principiul reactiei : se bazeaza pe proprietatea flavonozidelor sau a
agliconilor acestora de a forma in prezenta metalelor bi- sau trivalente chelati
colorati in galben intens si care prezinta o fluorescenta galben-verzuie sau
albastra in lumina UV.De asemenea formeaza combinatii oxalo-borice sau
citroborice cu fluorescenta galben-verzuie in lumina UV.
Reactivi necesari: acetat de sodiu 100 g/L,clorura de aluminiu 25 g /L
Tehnica de lucru : la 1 mLsolutie extractiva apoasa se adauga 0,5 mL
solutie acetat de sodiu 100 g/L si 1 mL solutie clorura de aluminiu 25 g/L.
Se observa intensificarea coloratiei galbene.

8.Saponozide

Proba de spumefiere
Principiul reactiei : o solutie apoasa continand saponozide,prin agitare
energica timp de 15 secunde ,formeaza o coloana de spuma persistenta cel putin
15 minute.
Tehnica de lucru:5,00 mL solutie extractiva apoasa continand saponozide
se agita timp de 15 secunde,apoi se lasa in repaus.Existenta unei spume
persistente si dupa 15 minute denota prezenta saponozidelor.

Reactii de precipitare cu hidroxid de bariu,acetat bazic si neutru de

plumb
Principiul reactiei:saponozidele formeaza cu hidroxidul de bariu ,acetat
bazic si neutru de plumb precipitate albe,insolubile in exces de reactiv.
Reactivi necesari: hidroxid de bariu 100 g/L,acetat de plumb (II) 50g/L,
acetat bazic de plumb (II).
Tehnica de lucru: peste 1 mL solutie extractiva apoasa se adauga 0,5 mL
reactiv.Aparitia unor precipitate alb-galbui indica prezenta saponozidelor.

9.Taninuri
Reactia cu clorura ferica
Principiul reactiei: in prezenta cationului Fe (III) taninurile catehice
formeaza precipitate si/sau coloratie verde-negricioasa, iar cele galice
precipitate si/sau coloratie albastra-negricioasa.
Reactiv necesar : clorura de fer (III) 10 g/L
Tehnica de lucru: la 1 mL solutie extractiva se adauga 0,5 mL solutie de
clorura de fer .Se obtine un precipitat si/sau coloratie diferita in functie de tipul
de tanin.