Determinarea acidului benzoic din sucuri,

prin spectrofotometrie in domeniul UV

Abstract

Benzoatul de sodiu si sarurile sale sunt folositi ca si aditivi alimentari, sub

denumirea de E211, E210, E212, E213. Acidul benzoic, inhiba cresterea
mucegaiurilor si a drojdilor. Este foarte ineficient in inhibarea bacteriilor.
Un conservat este o substanta care prelungeste perioada de pastrare a
alimentelor, prin protejarea lor impotriva alterarii produselor de
microorganisme. Benzoatul de sodiu este unul din cei mai utilizati conservati
alimentari.
Se gasesc in alimente acide cum ar fi: bauturi carbo-gazoase, dulceturi, sucuri
de tomate care contin acid citric. Acidul benzoic se gaseste, in mod natural in
unele fructe cum ar fi, coacaze, prune, corcoduse si cirese.
Este putin solubil in apa, este solubil in alcool etilic si uleiuri.
Ca si conservant alimentar, concentratia benzoatului de sodiu este limitata la
0.1%.
Determinarea acidului benzoic si benzoatilor din Pepsi light se face prin
spectroscopia de absorbtie UV-VIS, se foloseste spectrofotometru cu
monofascicol Spekol T70 + UV/VIS, cu dublu fascicol T80+ UV/VIS.
Pentru trasarea curbei de etalonare s-au folosit 5 solitii etalon de concentratie
cunoscuta, iar din ecuatia dreptei s-a calculat concentratia de acid benzoic din
proba. S-a efectuat 5 determinari pentru proba necunoscuta, se observa ca;
continutul de acid benzoic astfel determinat se afla sub limita maxim admisa.
Absorbanta s-a citit la lungimea de unda 272 nm.

Scopul lucrarii Determinarea acidului benzoic din sucuri.

Aparatura Spectrofotometru cu monofascicol Spekol T70+UV/VIS, cu dublu

fascicol T80+ UV/VIS.

Metoda folosita Spectrofotometria de absorbtie molecurara in domeniu UV.

Principalele rezultate
 Se bazeaza pe absorbtia luminoasa de catre proba de analizat. Gradul de
absorbtie a radiatiilor poate fi exprimat prin transmintanta sau absorbanta.
Sursele de radiaie utilizate au fost becuri cu filament de deuteriu pentru
domeniul ultraviolet. Lungimea de und la care s-a lucrat a fost de 272 nm.
Metoda sensibila de determinare in chimia analitica calitativa si cantitativa.
O alta metoda de determinare este cromatografia pe strat subtire.

Cuvinte cheie
- metode de analiza
- transmitanta
- etaloane
- spectrofotometru
- absorbtie moleculara

1. Introducere

Conservanti chimici din produsele alimentare sunt utilizate in principal pentru a

controla deteriorarea biologica . O larga varietate de compusi care pot realiza
acest lucru sunt disponibile n comert , ci numai o parte din ele este aprobat de
ctre agentiile de reglementare pentru utilizare n produsele alimentare . Acesti
conservanti pot fi clasificate pe baza spectrului de inhibtie , originea i structura
lor chimica. Deoarece conservanti sunt adugate n mod intentionat la produsele
alimentare , este necesara respectarea cu atentie a limitei maxime stabilite, si
este de asemenea necesar sa se cunoasca metodele de analiza pentru
determinarea prezentei si cantitatii lor n produsele alimentare. [1]
Mecanismul de conservare ncepe cu absorbtia de acid benzoic in celula. Daca
in pH-ul intercelular apar modificri la 5 sau mai jos, de fermentare
anaeroba a glucozei prin fosfo-fructo-cinesa sau microbiana este scazut cu 95%.
[2]
Conform cercetarilor publicate de Agentia de Standarde Alimentare din UK, n
anul 2007, datorita multiplelor efecte negative pe care sarurile acidului benzoic
le poate avea asupra oamenilor, cum ar fi; hiperactivitate, reducerea
coeficientului de inteligenta, dar si datorita faptului ca este contraindicat
persoanelor suferinde de afectiuni cum ar fi astm sau urticarie cronica, consumul
produselor care contin acest aditiv alimentar ar trebui atent monitorizat, n
special datorita faptului ca acidul benzoic mpreun cu acidul ascorbic (vitamina
C), gasit n aproape toate sucurile, poate sa formeaze benzen, care este o
substanta cancerigena. [3] Prof. Peter Piper, de la Universitatea din Sheffield
sustine ca benzoatul de sodiu poate deteriora ADN-ului, ntr-o celul
de mitocondria. Mitocondria consuma oxigen pentru a genera ATP, schimbul de
energie al trupului. In cazul n care acestea sunt deteriorate din cauza bolii,
disfunctiilor celulelor, poate intra apoptoza. Exista multe boli legate de daunarea
ADN-ului, inclusiv boala Parkinson (care poate determina cancerul la creier) i
alte boli neuro-degenerative, dar, mai presus de toate grabeste procesul de
imbatranire. [4][5][6][7][8]

Spre exemplu, acid benzoic au fost izolate de la patru bauturi racoritoare

selectate - Coca Cola, Pepsi Cola, Mirinda i Fanta, utilizand clorura de metil. In
urma interpretarii rezultatelor obtinute prin spectrofotometrie UV , cu ajutorul
curbei de calibrare a standardelor lor, numai Coca-Cola si Pepsi Cola au
confirmat prezenta cafeinei n timp ce n toate cele patru bauturi racoritoare
selectate a fost gsit acid benzoic. [9]

Programul International de Securitate chimica, nu a gasit efecte adverse la om

la doze de 647825 mg / kg de greutate corporala pe zi. [10][11]. Insa s-a
constatat ca pisicile au o toleranta semnificativ mai scazuta fata de acid
benzoic i sarurile sale decat sobolanii i soareci. [12]. Cu toate acestea
benzoatul de sodiu este permis ca aditiv alimentar pana la concentratia de 0,1%,
in conformitate cu AFCO [13].
De asemenea, acidul benzoic din bauturi a fost determinat cu succes prin
cromatografie de lichide de inalta performanta. [14].

Scopul lucrarii Determinarea acidului benzoic din sucul Pepsi Cola prin
spectrofotometria moleculara in domeniul UV, in vederea respectarii normelor
de respectare a concentratiei admise.

2. Partea experimentala

2.1 Reactivii utilizati pentru determinarea concentratiei acidului benzoic din

proba sunt: acid benzoic, acid tartic, acid sulfuric si eter de etil, calitatea
reactiviilor ultrapura, firma Merk.
Solutii standard utilizate, acid benzoic.
Probe
2.2 Pentru etalonare au fost preparate solutii de, acid benzoic de concentratie
8,16, 24, 32, 40, 48mg/L, care au fost aduse la cota in balon de 25 mL cu eter
etilic, au fost analizate probe de 16, 32, 48,64, 80, 96 mg/L.
2.3 Preparare probei, se ia 100 de mL de suc Pepsi Cola peste care se adauga a
mL de acid sulfuric concentrat. Se vor lua 10 mL din proba acidulata si se va
adauga un varf de spatula de acid tartric si se vor pune intr-o palnie de separare.
In palnie se va adauga 20 mL eter etilic, se agita timp de 15 min si se lasa inca
30 de minute pentru a se separa fazele. Dupa aceea se vor lua 10 mL proba din
panie si se va aduce la cota cu eter etilic in balon de 25 mL.
Solutia martor, cativa mL de eter etilic.
 Solutia stoc, se va cantari 0,2 g acid benzoic care se va aduce la cota cu eter
etilic in balon de 50 mL, din care se vor lua 2.5 mL si se vor aduce la cota intr-
un balon de 50 mL cu eter etilic.
Solutiile etalon, preparam 6 solutii de concentratii cunoscute de 8, 16 ,24 , 32,
40, 48 mg/L de acid benzoic care se vor aduce la cota cu eter etilic in balon de
25mL.

2. Instrumentatia

Schema bloc

Denumire instrument
Spectrofotometru cu monofascicol Spekol T70+UV/VIS, cu dublu fascicol
T80+ UV/VIS.

Mod de operare
Radiatia provenita de la o sursa cu spectru continuu este trecuta printr-un
dispozitiv de izolare si selectare a lungimii de unda, obtinandu-se la iesirea
acestuia un fascicul monocromatic. Radiatia monocromatica este trecuta prin
cuva fiind apoi masurata de un fotodetector care genereaza un fotocurent
proportional cu intensitatea radiatiei. Fotocurentul este transformat in tensiune si
amplificat de catre un amplificator a carui iesire este apoi legata la un instrument
de masura si afisaj.
Sursele de radiatie sunt becuri cu filament de wolfram, pentru domeniul vizibil
al spectrului (cu lungime de und ntre 430nm 790nm) si lampi de deuteriu
pentru domeniul ultraviolet (cu lungime de und ntre 10nm - 430nm).
Spectrometrul prezentat face parte din categoria aparatelor cu monofascicol,
destinat in primul rand determinarilor cu caracter cantitativ.

4. Rezultate si discutii

Pe baza rezultatelor obtinute prin calibrarea aparatului, s-a trasat dreapta de

calibrare, reprezentata in figura 1:

Figura 1. Dreapta de calibrare

Nr. Proba C (mg/l) Cmed. s RSD(%) U CmedU(mg/l

(mg/l) )
1 15.8
2 16.1
3 16.1 16.3 0.4 2.5 0.5 16.30.5
4 16.6
5 16.7

C- concentratia probei in mg/l

Cmed- concentratia medie in mg/l
s- deviatia standard estimata
RSD- deviatia relativa standard procentuala
U- incertitudinea extinsa.

5. Concluzii generale
S-au efectuat diferite teste asupra rezultatelor :
Testul Q- QcalculatQtabelat pentru P=95%, a aratat ca nu
exista erori sistematice .
Testul F- Fcalc Ftab pentru P=95%, nu exista erori
sistematice .
S-a comparat valoarea calculata Q cu cea tabelata pentru un coeficient de
incredere de 95% si pentru un numar de masuratori egal cu 5, si s-a constatat ca
valoarea lui Q calculat (0.333) este mai mica decat valoarea celui tabelat
(0.717), ceea ce inseamna ca diferentele sunt intamplatoare si nu se elimina
valori, se vor folosi toate datele.
S-a demonstrat ca metoda a fost testata si poate fi utilizata cu succes la
determinarea acidului benzoic din sucuri. Pentru a obtine rezultate satisfacatoare
trebuie sa se prepare cu atentie probele, si sa se realizeze corect masuratorile.

6. Bibliografie

1. Clague, J.A. & Fellers, C.R. (1934). Relation of benzoic acid content and other
constituents of cranberries to keeping quality.Plant Physiology (9): 631-636.

2. Concise International Chemical Assessment Document 26: Benzoic acid and sodium
benzoate

3. Cosmetic Ingredient Review Expert Panel Bindu Nair (2001). Final Report on the
Safety Assessment of Benzyl Alcohol, Benzoic Acid, and Sodium Benzoate. Int J
Tox (20 (Suppl. 3)): 2350.

4. Krebs HA (1983). Studies on the mechanism of the antifungal action of

benzoate. Biochem J (214): 657663. PMID6226283.

5. Martin Hickman Caution: Some soft drinks may seriously harm your health The
Independent on Sunday (27 Mai 2007)

6. Martin Hickman E211 Revealed: Evidence highlights new fear over drinks
additive The Independent on Sunday( 27 Mai 2007)

7. Leading article: Children deserve our doubts The Independent on Sunday (27 Mai
2007)
8. Chris Mercer Fresh health fears hit benzoate in soft drinks BeverageDaily (29 Mai
2007)

9. Piper PW Yeast superoxide dismutase mutants reveal a pro-oxidant action of weak

organic acid food preservatives Free Radic Biol Med (1999 Dec)

10.Graham Tibbetts. "Artificial colourings as harmful as leaded petrol for

children", Telegraph, (7 Aprillie 2008)

11.Food Standards Agency issues revised advice on certain artificial colours (6

septembrie 2007)

12.Food Colorings and Hyperactivity "Myomancy" (7 September 2007)

13.Agency revises advice on certain artificial colours Food Standards Agency (11
septembrie 2007)

14.BBC Europe-wide food colour ban call (10 Aprilie 2008)