ANTICORPII

MONOCLONALI

SISTEMUL IMUNITAR

Immunis = scutit
Sistemul imunitar = totalitatea proceselor
biologice, a organelor, a celulelor, a
produsilor celulari care asigura protectia
impotriva infectiilor
Imunitatea
Nespecifica
Specifica

ANATOMIA SISTEMULUI
IMUNITAR
Amigdale si adenoide
Ganglioni limfatici
Vase limfatice
Timus
Ganglioni limfatici
Splina
Placi Peyer
Apendice
Maduva hematogena

CELULELE SISTEMULUI
IMUNITAR
Macrofag

Mastocit
PMN eozinofil

Maduva

Eritrocite

PMN bazofil

Monocit

Os

Megacariocit

Celula stem
hematopoetica
Celula stem
multipotenta

Celula
progenitoare PMN neutrofil
mieloida
Plachete

Celula progenitoare limfoida

Celula dendritica

Limfocit T

Celula NK

Limfocit B

ACTIVAREA LB SI
PRODUCEREA DE ANTICORPI
Anticorp circulant
Antigen

Rec. de Ag
specific LB
Antigen

HLA clasa II

LB
Celula
prezentatoare
de Ag

Procesarea
Ag

HLA clasa II Celula prezentatoare de Ag

si Ag
procesat sunt
expuse

Limfokine
Th activat

Anticorpi
Plasmocit

ANTICORPII
Lanturi grele
Lanturi usoare

Paratop

Regiune constanta

ANTICORPII
IgA, IgD, IgE, IgG

IgA

IgM

PRODUCEREA ANTICORPILOR
MONOCLONALI
Antigen
Fuzionarea
celulelor
HIBRIDOM

Mielom

Plasmocite
producatoare de Ac

Testarea clonelor

Cultivarea
hibridoamelor

Hibridoamele se separa
si se cultiva
Mentinerea
hibridoamelor in
soareci

Clonele
dorite se
cultiva sau
se
congeleaza
Anticorpii monoclonali
sunt purificati

PRODUCEREA ANTICORPILOR
MONOCLONALI
1. Antigenul (celule, componente ale
membranei celulare, microorganisme, etc.)
se injecteaza soarecelui
2. Cand titrul de anticorpi serici a crescut
corespunzator, se realizeaza splenectomia si
se colecteaza LB
3. Se obtine hibridomul prin fuzionarea LB
murine cu celule provenite din mielom
4. Se cultiva hibridoamele si se colecteaza
anticorpii

PROBLEME

HAMA = human anti-mouse antibodies

Dupa 10-14 zile

Eruptie cutanata (urticarie)
Bronhospasm
Hipotensiune
Soc anafilactic

TEHNICI DE INGINERIE
GENETICA

Soareci transgenici (gene pentru Ig umane)

Mab himerici =

Mab umanizati =

Regiuni variabile murine

Regiuni constante umane
Regiuni hipervariabile murine
95% umani

Bacteriofagi/plasmide

APLICATIILE ANTICORPILOR
MONOCLONALI

Diagnostic

Terapie

Cercetare

APLICATIILE ANTICORPILOR
MONOCLONALI

Diagnostic

Imunohistochimie
Imunofluorescenta
Radioimunodetectie (RIA)

Medicamente
Hormoni
Proteine
Toxine
Droguri

Imunodetectie enzimatica (ELISA)

IMUNOHISTOCHIMIE DIRECTA

IMUNOHISTOCHIMIE
INDIRECTA

IMUNOHISTOCHIMIE

IMUNOHISTOCHIMIE

IMUNOFLUORESCENTA

IMUNOFLUORESCENTA

APLICATIILE ANTICORPILOR
MONOCLONALI

Terapie

Infliximab TNF
Abciximab GpIIb/IIIa
Omalizumab IgE
Rituximab CD20
Alemtuzumab CD52
Trastuzumab HER2
Bevacizumab VEGF

IMUNOTERAPIE
Radioizotop

Herceptin
Factor de
crestere

Anticorp

Herceptin
blocheaza
receptorul

Antigen

Celula
tumorala
mamara
Distrugerea celulei
tumorale

Cresterea se opreste

APLICATIILE ANTICORPILOR
MONOCLONALI

Cercetare

Imunohistochimie
Identificarea unor molecule
Purificarea unor structuri