Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Lucrari practice
Prepar. Univ Dr. Aura Temereanca
Asist. Univ dr. Cornel Popescu
Sef Lucrari Univ. dr. Camelia Sultana
ALGORITMUL
DIAGNOSTICULUI
IN VIROZE
Etapele diagnosticului
virusologic
Orientarea diagnosticului (suspiciunea
de viroz)
Recoltarea produsului patologic
Transportul produselor patologice
Direciile diagnosticului virusologic
Etapele diagnosticului
virusologic
Orientarea
diagnosticului
Medicul caruia i se va
comunica rezultatul (tel, fax, email)
Sex, Varsta
Data debutului
simptomatolgiei
Analiza solicitata
Semnatura, parafa medicului
V. Varicela - Zoster
Etapele diagnosticului
virusologic
Suspiciunea de viroz
Recoltarea
patologic
produsului
S T E R I L !!!
Recoltarea probelor
- locul & timpul potrivit
POLIO (enterovirusuri)
PRODUSE PATOLOGICE
PRODUSE PATOLOGICE
Saliva. Se recolteaza saliva de langa ductul Stenon cu tampon steril.
Frecvent este limitata la diagnosticul infectiei rabice.
Lichid vezicular - Colectarea lichidului din vezicule, bule, pustule se face
dupa dezinfectia prealabila a regiunii cutanate sau mucoase. Se perforeaza
vezicula cu un ac atasat la o seringa de tuberculina sau cu ajutorul unei
pipete.
Virusuri frecvent izolate: HSV I, HSV II si VZV.
Urina -100 ml - orice specimen urinar obtinut prin abstinenta de la mictiune
timp de 2 ore este adecvat pentru diagnosticul virusologic.
Virusuri frecvent izolate. V. citomegalic, v. rujeolos.
Tampoane vaginale, lavaj cervico-vaginal, tampon uretral de la nivelul
colului uterin si uretrei (atat la femeie cat si la barbat); cu tampoane sterile,
respectiv periuta citologica (pentru uretra masculina), fara toaleta prealabila
a regiunii.
Virusuri frecvent izolate: virusuri herpetice si papilomavirusuri; diagnostic
BTS, uretritelor, leziunilor veziculare si hiperplazice genitale.
Biopsia tisulara. Fragmente de organ recoltate n ctiva ml de solutie
salina + ser de vitel 10% + antibiotice n concentratiile folosite n culturile de
celule.
Etapele diagnosticului
virusologic
Suspiciunea de viroz
Recoltarea produsului patologic
Transportul
produselor
patologice
rece
Sigur
ambalare riguros corecta
etichetarea cu semn biorisc
documentatie in legatura cu
agentul biologic transportat
Etapele diagnosticului
virusologic
Suspiciunea de viroz
Recoltarea produsului patologic
Transportul produselor patologice
Direciile
diagnosticului
virusologic
DIRECIILE DIAGNOSTICULUI
VIRUSOLOGIC
1.
Izolarea viral
Demonstrarea prezenei
virusului / componentelor sale
2.
3. Diagnosticul serologic
Izolarea
virusurilor
Izolarea virusurilor
3 sisteme de izolare folosite n virusologie
Culturi de celule
Ou de gin embrionat
Animalul de laborator
Izolarea virusurilor
in culturi de celule
= EFECTE CITOPATICE
Infectate cu v. variolic
HEK 293
HeLa
BSC-40
RABIE
Sus- neuron fara
incluzii Negri
Jos neuron cu incluzii
Negri (col HE)
Izolarea virala
prin
inoculare la
animalul de
laborator
RABIE modificari
patognomonice in SNC
Infiltrat mononuclear perivascularsus
Focare de infiltratie limfocitare in
celulele gliale -jos
pe OGE
DIRECIILE DIAGNOSTICULUI
VIRUSOLOGIC
1.
Izolarea viral
Demonstrarea prezenei
virusului / componentelor sale
2.
3. Diagnosticul serologic
Detectia directa
a particulei
virale
Microscopia electronica
Coloratia negativa
acetat de uranil
acid fosfotungstic
Metode care cresc sensibilitatea
(106-108 particule/ml)
Metode de concentrare:
ultracentrifugare
difuzia in agar
Microscopie electronica
Coloratie negativa
vaccinia
Microscopie electronica
Coloratie negativa
variola
Detectia directa a
componentelor
virale
Acid nucleic
Antigene virale
Thermocycler
sandwich ELISA. (1) Plate is coated with a capture antibody; (2) sample is added,
and any antigen present binds to capture antibody; (3) detecting antibody is added,
and binds to antigen; (4) enzyme-linked secondary antibody is added, and binds to
detecting antibody; (5) substrate is added, and is converted by enzyme to
detectable form.
RSN
Reactia de Seroneutralizare
- Identificarea Enterovirusurilor
RHAI
NA - neuraminidaza
Nucleocapsida helicoidala
ARNss
anvelopa
transcriptaza
Matrice
Reactia de Hemaglutinoinhibare
-Identificarea virusurilor gripale
DIRECIILE DIAGNOSTICULUI
VIRUSOLOGIC
1.
Izolarea viral
Demonstrarea prezenei
virusului / componentelor sale
2.
3.
Diagnosticul serologic
Raspuns
imun
primar
Raspuns
imun
secundar
Diagnosticul serologic
proba I - la debut
proba II - la 2-3 sptmni
creterea
Diagnosticul
serologic
Direciile diagnosticului virusologic
Transportul produselor patologice
Recoltarea produsului patologic
Suspiciunea de viroz