Sunteți pe pagina 1din 37

2.2.

TRANSPORTUL ACTIV PRIN


MEMBRANA CELULAR
-

CARACTERISTICI:
contra gradient
consum energetic: ATP ADP + Pi +E
dependent de energetica celular
caracter limitativ Tmax determinat de disponibilitatea
transportorului
ROLURI:
transportul moleculelor organice (glucoza, aa) i ionilor
(Na+, K+, Ca2+, Fe2+, I-)
asigur diferena de concentraie a subst. ntre mediul intra
i extracelular

n funcie de sursa de energie care


asigur desfurarea procesului:
a) TRANSPORT ACTIV PRIMAR
b) TRANSPORT ACTIV SECUNDAR

a) TRANSPORTUL ACTIV PRIMAR


- proteina transportoare este i ATP-az
ATP ADP + Pi + E
- E modif. conformaionale ale prot. care asig. transportul
- specific ionilor proteina transportoare = pompa ionic

Pompa Na+/K+ (Na+/K+-ATP-aza)


Pompa H+/K+ (H+/K+-ATP-aza
Pompa de Ca2+ (Ca2+-ATP-aza)
Pompele protonice (H+-ATP-azele)

POMPA Na+-K+
cea mai imp. ATP-az de transport
transport 3 Na+ spre ext. i 2 K+ spre int. pentru 1 ATP
mare consumatoare de energie (50% - neuron i nefrocit,
10% - fibra muscular i hepatocit)
STRUCTURA:
- dou subuniti cu rol catalitic
- la interior situsuri de fixare Na+, ATP, Mg2+
situs de fosforilare Pi
- la exterior situsuri de fixare K+
- dou subuniti cu rol reglator ce asigur:
- translocarea pompei din citoplasm n membr.
- distribuia polarizat a pompelor pe supraf. cel.
(la polul bazal al celulelor)

Pompa Na +/K +

MECANISMUL DE OPERARE:

1. ocuparea situsurilor interne cu 3 Na+, 1 ATP i 1 Mg2+; hidroliza ATP-ului cu


eliberarea E i a gruprii Pi;
2. fixarea gruprii Pi (sub aciunea unei kinaze) la situsul de fosforilare
creterea afinitii pompei pentru Na+; utilizarea E pentru modificarea
conformaional a proteinei expunerea situsurilor de Na+ pe faa ext. a
membr. i eliberarea Na+ n mediul extracel.;

3. ocuparea situsurilor externe cu 2 K+ ; ndeprtarea gruprii Pi (sub aciunea unei


fosfataze), urmat de creterea afinitii pentru K + ;
4. revenirea proteinei la conformaia iniial,
5. expunerea situsurilor de K+ pe faa intern a membranei
6. trecerea K+ n mediul intracelular.

POMPA Na+-K+ :
-

FUNCII:
mecanismul principal ce asigur homeostazia celular
pomp electrogenic ncrcare electronegativ la int.
- menine PR
- particip la refacerea echil. ionic dup
depolarizare.
- activat n exces hiperpolarizare
- inhibat depolarizare uoar
asigur gradientul de Na+ necesar TA secundar
REGLAREA ACTIVITII:
activat de insulin, h. tiroidieni, catecolamine
inhibat de ouabain, tonicardiace (digoxin)

ALTE POMPE
Pompa de Ca2+
-

caracteristic fibrei musculare


- la niv. sarcolemei expulzeaz Ca2+ n mediul extracelular
- la nivelul membranei RS asig. recaptarea Ca2+
rol conc. Ca2+ citosolic (10-5M10-7M) relaxarea muscular

Pompele de H+
m. mitocondriale transp. electronilor n timpul fosforilrii oxidative
polul apical al nefrocitului din TCD eliminarea renal a H+
meninerea echilibrului AB

Pompa H+/K+
scoate din celul 1H+ i introduce 1K+
prezent n celula parietal gastric formarea HCl

b) TRANSPORTUL ACTIV
SECUNDAR
- folosete gradientul de concentraie creat de TA primar

pentru a asigura transportul unei alte subst., cuplat cu


transportul de Na+
Transportul de Na+ intracelular, n sensul gradientului
de concentraie meninut de pompa Na+/K+
Transportul subst. cuplate contra gradient
- cotransport - Na+-glucoz, Na+-aminoacizi
- epiteliul de absorbie
- antiport - Na+-Ca2+ miocite
- Na+-H+ nefrocite

COTRANSPORTORUL Na+-glucoz

COTRANSPORTORI
- asigur TA secundar n aceeai direcie cu Na+
- electroneutri - Na+/K+/2Cl- (nefrocite - ansa Henle)
- electrogenici - Na+-glucoz, Na+-aminoacizi
ANTIPORTERI (SCHIMBTORI IONICI)
- asigur TA sec. n direcie opus fa de Na+
- Na+/Ca2+ - electrogen, scoate din celul 1Ca2+ i introduce 3Na+
- celula miocardic de lucru, n repaus
- particip la conc. de Ca2 n citoplasm
- Na+/H+ - electroneutru
- scoate din celul 1H+ i introduce 1Na+
- contribuie la meninerea constant a pH-ului intracel.

Transportul activ
MODELE I MECANISME:

ATP

antiport

ATP

simport

Transportul prin membrana


celulara - rezumat
simple
diffusion
facilitated
diffusion

active
transport

ATP

3. FUNCIA MEMBRANEI CELULARE


N TRANSFERUL DE INFORMAIE
MESAGERII PRIMARI:
-

ansamblu de substane biologic active


interacioneaz cu receptori specifici
clasificare:
n fc. de origine: endogeni, exogeni
n fc. de struct. chimic:

a) mesageri primari liposolubili


- strbat bistratul lipidic
- ptrund n celule
- se leag de receptori - citoplasmatici (h. steroizi)
- nucleari (h. tiroidieni)

b) mesageri primari hidrosolubili


- nu pot strbate membrana
- se fixeaz pe receptori membranari (h. polipeptidici)

RECEPTORII MEMBRANARI
DEFINIIE:
-

structuri complexe macromoleculare, proteice sau glicoproteice


capteaz, amplific, moduleaz informaia primit de la mesagerii
primari rspuns celular

CARACTERISTICI:
-

situs de recunoatere i de ancorare a ligandului


regiune hidrofob fixeaz R n stratul lipidic
situs de activitate interac. cu alte prot. de semnalizare
sinteza n ribozomi, asamblare membranar i degradare lizozomal
mare mobilitate n planul membranei
densitatea 104 105 receptori/celul int, dependent de:
- raportul sintez/degradare
- starea celulei
- conc. de lung durat a ligandului
densitate (internalizare, down-regulation ) ligand n conc.
densitate (externalizare, up-regulation ) ligand n conc.

RECEPTORUL:
- Localizat pe m. celular sau intracelular (nuclear, mitocondrial)
- Specializat n recunoaterea unui pattern molecular, molecul

semnal (ligand)
- Proprieti: capacitatea de a lega liganzi i a induce un rspuns
biologic
- Componente: de recunoatere, efectoare, reglatoare
(amplificatoare, transductoare)
- Receptori mui, acceptori fixeaz compui fr s induc un
rspuns biologic, i menin sau i elibereaz extracelular, n
funcie de echilibrul existent pt. compusul respectiv

LIGANZII:
Polipeptide: micro- macromolecule, pot atinge mrimea
receptorului
Endogeni: hormoni, mediatori chimici
Exogeni: ageni farmacologici
Interaciunea ligand receptor: agonism i antagonism:
L . agoniti: induc un rspuns fiziologic
L. antagoniti: mpiedic aciunea agonitilor.
- competitivi cu agonitii,
- necompetitivi
- antagoniti funcionali, cu efecte supracelulare contrarii
(R adrenergici alfa i beta)
L. parial agoniti sau dualiti, cu efect dependent de
concentraia agonitilor propriu-zii
L. parial antagoniti, antagoniti numai n doze mici

RECEPTORII: CLASIFICARE, ROLURI


n raport cu modalitatea de semnalizare intracelular:

a.
-

R. protein-canal ionic

b.
-

R. cuplai cu o enzim

ligandul ataat de R deschide un c.ionic flux ionic depolarizant sau


hiperpolarizant.
ex: Ach deschide c. de Na+ ale R nicotinic influx de Na+ cu efect
depolarizant
GABA sau glicina deschid un c. de Cl- influx de Clhiperpolarizant
ligandul ataat de R activarea unei E de pe faa int. a membranei i
sintetiza unui mesager sec. intracelular.
ex: - Ach se fixeaz de R muscarinic activarea guanilatciclazei cu
formare de GMPc;

c. R. cuplai cu protein G
-

ligandul determin activarea PG se cupleaz fie cu:


- alt enzim (AC, GC, fosfolipaza A, fosfolipaza C)
- cu un canal ionic (c. de Ca2+ , K+);

d. R. catalitici
ligandul se fixeaz de un R cu activit. enzimatic intrinsec
moduleaz activitatea unor proteine semnalizatoare intracel.:
- R tirozin-kinazici - fosforileaz resturile specifice de
tirozin ale proteinelor semnalizatoare intracelulare;
- R tirozin-fosfatazici - ndeprteaz gruprile fosfat de pe
resturile tirozinice ale proteinelor semnalizatoare
intracelulare;
- R serin/treonin-kinazici - fosforileaz resturile serinice sau
treoninice specifice ale unor proteine intracelulare.
-

INTERACIUNEA LIGANDRECEPTOR
COMPLEX LIGAND-RECEPTOR ACTIVAT (L-R)
- situs de fixare - specificitate n recunoaterea ligandului
- afinitate n fixarea ligandului (10-9 sec.)
- cinetica interaciunii complex = reacie bimolecular,
reversibil formarea de legturi fizice slabe
- modificri n structura receptorului i a ligandului
complex ligand-receptor activat
2.
ACTIVAREA MECANISMULUI DE SEMNALIZARE
INTRACELULAR
- amplificarea informaiei transmise de mesagerii primari:
10X mesageri de ordin II (sec): AMPc, Ca++, IP3, DAG
1.

100X mesageri de ordin III: proteinkinaze intracel.

INTERACIUNEA LIGANDRECEPTOR

Mesageri primari (liganzi)


complex ligand-receptor activat

Mesageri secundari (AMPc, Ca++, IP3, DAG)


Proteinkinaze specifice
Fosforilare proteine intracelulare
RSPUNS CELULAR

MODUL DE INTERACIUNE LIGANDRECEPTOR


AGONISM
- complex ligand-receptor activat rspuns fiziologic
specific 80-100%
AGONISM PARIAL
- complex ligand-receptor activat rspuns fiziologic
specific 10 - 40%
ANTAGONISM - fr rspuns fiziologic
competitiv - acelai situs de fixare a ligandului =
blocant de receptor
alosteric - modificarea configuraiei receptorului

SISTEME DE SEMNALIZARE
INTRACELULAR
- mesageri secundari reacii imediate (ms) Ca++
- mesageri teriari reacii lente (s, min) rspuns

SISTEMUL ADENILATCICLAZ AMPc


SISTEMUL GUANILATCICLAZ GMPc
SISTEMUL DERIVAILOR DE FOSFATIDIL INOZITOL
SISTEMUL Ca++ - CALMODULIN

SISTEMUL ADENILATCICLAZ
AMPc

SISTEMUL DERIVAILOR DE
FOSFATIDIL INOZITOL DIFOSFAT

SISTEMUL Ca ++ - CALMODULIN
Creterea Ca++ citosolic prin 2 mecanisme:
- influx prin c. ionice de Ca++ membranare: voltajdependente, operate mecanic, operate de liganzi extracel.
(catecol.), liganzi intracel. (AMPc) sau prin proteine G
- eliberarea din RS prin c. de Ca++ operate de mesageri
intracel. (IP3)
4 Ca++ - calmodulin
proteinkinaze Ca++ - calmodulin dependente
RSPUNSUL CELULAR

PROTEINELE G
- proteine-transductoare intramembranare cupleaz receptorii a
peste 100 de mesageri primari cu efectorul (unitate catalitic,
canal ionic)
- asigur transferul de informaie de la mesagerii primari ctre
mesagerii secundari
STRUCTUR heterotrimeri formai din 3 subuniti:
- subunitatea - GTP-az asigur funcia i specificitatea proteinei
- inactiv cnd fixeaz o molecul de GDP
- activ cnd fixeaz o molecul de GTP
- activeaz enzime i c.ionice membr.EFECTORUL
- subunitile i - activeaz canalele de K+ membranare

TIPURI DE PROTEINE G
Gs

Receptori

Efectorul

Mesagerul de
ordinul II

- adrenergici

adenilatciclaza
canale de Ca++

AMPc
AMPc

muscarinici

adenilatciclaza
canale de K+

1 - adrenergici

fosfolipaza C

IP3, DAG,

muscarinici
Gi
Gq

2 adrenergici

Ca++-calmodulina
K+

Gt

fotoni

GMPc
fosfodiesteraza

Ca++-calmodulina
GMPc
(vedere)

Golf

receptori olfactivi

adenilatciclaza

AMPc (olfacie)

muscarinici

SISTEMUL DERIVAILOR DE
FOSFATIDIL INOZITOL DIFOSFAT

MECANISME DE REGLARE A
CONTRACIEI
CLASIFICARE
mecanisme membranare depolarizante sau
hiperpolarizante:
includ poteniale de membr. specifice tipului
de fibr musc. neted
mecanisme umoral-hormonale
implic aciunea direct a unor factori
metabolici locali (CO2, O2, acid lactic, K+) i
hormoni circulani sau locali (NOR, ADR, HIS,
ocitocin, etc) asupra R membranari specifici

Contracia fibrei musculare netede


Indus de creterea Ca2+ citosolic prin:
- activarea c. de Ca2+ voltaj-dependente
- activarea c. operate de ligand
- deschiderea c. activate prin intermediul PGq
activarea PLC generarea de IP3 i DAG
IP3 => eliberarea Ca2+ din RS formarea complexului
Ca2+ / calmodulin contracia DAG activeaz
proteinkinaza C (PKC) membranar susine
contracia
Relaxarea fibrei musculare netede
prin creterea - AMPc (ci respiratorii)
- GMPc (vase)
scad nivelul Ca2+ (stimularea recaptrii n RS)