Sunteți pe pagina 1din 95

Caiet de lucrri practice

FIZIOLOGIE
pentru studentii Facultii de Farmacie
Sub redacia: Bogdan GURZU

Autori:
Elena COJOCARU
Irina Luciana DUMITRIU
Bogdan GURZU
Minela Aida MRNDUC

Editura UMF Gr. T. Popa Iai


2009

Descrierea CIP a Bibliotecii Naionale a Romniei


Caiet de lucrri practice Fiziologie pentru studenii Facultii de Farmacie /
sub redacia: Bogdan Gurzu - Iai: Editura Gr. T. Popa, 2009.
ISBN 978-973-7682-84-0

Refereni tiinifici
Prof. Dr. Gheorghe PETRESCU - UMF Gr T Popa Iai
Prof. Dr. Simona Mihaela SLTINEANU - UMF Gr T Popa Iai
Prof. Dr. Mihai Dinu SCUTARIU - UMF Gr T Popa Iai
Tehnoredactare computerizat: Irina Luciana DUMITRIU
Elena COJOCARU
Minela Aida MRNDUC
Coperta: autorii

Editura Gr. T. Popa


Universitatea de Medicin i Farmacie Iai
Str. Universitii nr. 16
Toate drepturile asupra acestei lucrri aparin autorului i Editurii Gr.T. Popa" Iai. Nici o parte
din acest volum nu poate fi copiat sau transmis prin nici un mijloc, electronic sau mecanic, inclusiv
fotocopiere, fr permisiunea scris din partea autorului sau a editurii.
Tiparul executat la Tipografia Universitii de Medicin i Farmacie "Gr. T. Popa" Iai
str. Universitii nr. 16, cod. 700115, Tel. 0232 267798 int. 231, Fax 0232 211820

Lista de autori:
Elena COJOCARU
Asistent UMF Gr T Popa Iai
Irina Luciana DUMITRIU
ef de lucrri Gr T Popa Iai
Bogdan GURZU
ef de lucrri Gr T Popa Iai
Minela Aida MRNDUC
Asistent UMF Gr T Popa Iai
Gheorghe PETRESCU
Profesor UMF Gr T Popa Iai

Student()....................
Anul ........
Seria ........
Grupa .....

Cuprins

Lucrarea practic nr.1............................................................................................... 7


Lucrarea practic nr.2............................................................................................. 10
Lucrarea practic nr.3............................................................................................. 16
Lucrarea practic nr.4............................................................................................. 22
Lucrarea practic nr.5............................................................................................. 27
Lucrarea practic nr.6............................................................................................. 34
Lucrarea practic nr.7............................................................................................. 46
Lucrarea practic nr. 8............................................................................................ 50
Lucrarea practic nr.9............................................................................................. 56
Lucrarea practic nr.10........................................................................................... 62
Lucrarea practic nr.11........................................................................................... 67
Lucrarea practic nr.12........................................................................................... 73
Lucrarea practic nr.13........................................................................................... 81
Lucrarea practic nr.14........................................................................................... 84
Lucrarea practic nr.15........................................................................................... 89

Lucrarea practic nr.1


Metoda experimental
Experimentul: procedeu de cercetare care const n provocarea intenionat a unor fenomene
n condiiile propice pentru studierea lor i a legilor care le guverneaz.
Clasificarea experimentelor:
1) dup momentul evalurii rezultatului:
a) experiment acut: evalueaz rezultatul imediat (secunde, minute, ore). Exemplu:
demonstrarea legilor reflexelor medulare pe broasc spinal.
b) experiment cronic: rezultatul se evalueaz dup un timp ndelungat (zile,
sptmani, ani) din momentul nceperii experimentului respectiv. Exemple:
reflexele condiionate, aciunea stresului asupra organelor prin apariia leziunilor
la nivelul mucoasei gastrice.
2) dup mediul unde se efectueaz experimentul:
a) n vivo: biosistemul studiat este un organ sau esut sau organismul viu,
modificrile

induse

fiind

reversibile.

Exemple:

determinarea

volumelor

respiratorii, studiile clinice.


b) n situ: subsistemul biologic studiat nu este ndeprtat din organism, dar
integritatea lui este mult diminuat, iar modificarile induse sunt ireversibile.
Conditiile permit nutriia i celelalte funcii ale organismului sau esutului de
cercetat. Exemple: realizarea preparatului de cord de broasc n situ, ligaturile lui
Stanius, legea inimii.
c) n vitro: subsistemul biologic studiat este separat de organism i studiat ntr-un
mediu controlat unde se creaz condiii cat mai apropiate de cele din organismulsurs. Exemplu: fertilizarea n vitro, baia de organ. Multe experimente din
biologia celular sunt efectuate n afara organismelor sau celulelor. Deoarece
condiiile de testare nu coincid cu cele din interiorul organismului, rezultatele nu
sunt ntotdeauna concludente. Prin urmare, astfel de rezultate experimentale sunt
de multe ori adnotate cu n vitro.
d) n silico: experimentul este simulat pe computer.
3) dup momentul evalurii parametrului de cercetat:
a) experiment direct: n care parametrul de cercetare este msurat direct.
Exemplu: determinarea capacitii vitale cu ajutorul spirometrului.
7

b) experiment indirect: parametrul de cercetat este calculat prin intermediul altor


parametri, mai uor de msurat. Exemplu: determinarea capacitii pulmonare
totale (CPT= CV+ VIR+ VER).
4) dup modalitatea de contact cu mediul intern al organismului:
a) experimente sngernde: traductorii i aparatura de investigare se afl n contact
direct cu mediul intern al organismului. Exemplu: determinarea presiunii arteriale la obolan.
b) experimente nesngernde: traductorii i aparatura nu intr n contact cu mediul
intern al organismului de cercetat. Exemplu: determinarea presiunii arteriale prin metoda
indirect (ascultatorie).
Experimentul trebuie s se caracterizeze printr-o bun reproductibilitate, sensibilitate i
precizie.
Animalele cele mai folosite n laborator sunt: broasca, obolanul, cobaiul.
Pentru nlturarea rezistenei produs de animal, se efectueaz anestezie. Metodele de
anestezie sunt la broasc- spinalizarea (distrugerea centrilor nervoi medulari) iar la celelalte
animale- administrarea a diferite substane analgezice (eter, cloroform, ketamin, etc). Prin
anestezie se obtine relaxare muscular, se previne ocul operator i apariia reflexelor neurosomatice-vegetative nocive. In experimentele cronice, anestezia este necesar pentru ca animalul
s revin la starea vigil dup experiment.
Protocolul unui experiment trebuie s prevad i un lot de control (martor) care ofer
experimentatorului posibilitatea de a elimina efectele nerelevante.

Rezultate:

Observaii i discuii::

Lucrarea practic nr.2.


Transportul transmembranar
Membrana celular reprezint o difereniere morfo-funcional prin care se realizeaz
legtura dintre celul i mediul su de via. Permeabilitatea membranei celulare este selectiv.
Transportul transmembranar presupune introducerea n interiorul celulei de substane
necesare activitii acesteia precum i eliminarea produilor nefolositori. Schimburile
transmembranare sunt permanente i bidirecionale.
Clasificarea transportului transmembranar:
I. din punct de vedere al consumului de energie
a. transport activ
b. transport pasiv
II. din punct de vedere al mrimii particulei transportate
a. sisteme de microtransfer
b. sisteme de macrotransfer
III. din punct de vedere al numrului speciilor transportate
a. sisteme de unitransport
b. sisteme de cotransport - simport
- antiport
Transport pasiv:
1. difuziunea simpl (osmoza)
2. difuziunea facilitat
3. difuziunea facilitat de - proteine canal
- transportori
- ionofori
Transport activ:
1. pompe ionice (ATP-aze)
2. sisteme de macrotransfer - endocitoza - fagocitoza
- pinocitoza
- exocitoza
- transcitoza

10

Osmoza reprezint difuziunea apei prin membrane.


In mod normal, volumul celulei ramne constant deoarece trecerile moleculelor de ap ntre
interiorul i exteriorul celulei sunt echivalente flux net hidric nul. In anumite condiii apare o
diferen de concentraie transmembranar, n sensul c de o parte i de cealalt a membranei
exist o diferen de concentraie a unor solviti nedifuzibili. In acest caz, apa va fi atras din
mediul mai puin concentrat n mediul mai concentrat flux hidric net. Fenomenul poarta
numele de osmoz (figura II.1.).
Presiunea osmotic reprezint fora ce ar trebui aplicat de partea cu concentraie crescut
a membranei care s fie capabil s opreasc micarea moleculelor de ap. Valoarea presiunii
osmotice a sngelui este determinat de concentraia substanelor difuzibile din plasm (Na, K,
Ca, glucoz).
Membrana permeabila
numai pentru apa
Presiune
osmotica

Figura II.1. Osmoza


Presiunea coloidosmotic este presiunea osmotic conferit sngelui de ctre proteinele
din plasm.
Osmolaritatea mediului intern reprezint o constant homeostatic. Are o valoare de
~ 300 mOsm/L.
In funcie de osmolaritatea mediului intern, soluiile se clasific n:
1. izoosmotice (izotone)
2. hiperosmotice (hipertone)
3. hipoosmotice (hipotone)
11

Hematiile i plasma n care acestea se gsesc se afl n echilibru osmotic. Soluia de clorur
de sodiu 9 este izoton hematiilor.
Plasarea hematiilor ntr-o soluie hiperton cloruro-sodic are ca efect ratatinarea
hematiilor, iar ntr-o soluie hipoton cloruro-sodic duce iniial la creterea volumului acestora,
urmat de liza (hemoliza) (figura II.2).
In mediu hipoton, hematiile prezint o anumit rezisten cunoscut sub numele de
rezisten globular.
Pentru investigarea rezistenei globulare se face testul rezistenei osmotice globulare: se
determina concentratia mediului hipoton la care ncepe hemoliza unei suspensii de hematii
(rezistena globular minim) i concentraia la care hemoliza este total (rezistena globular
maxim).

Mediu izoton

Mediu hiperton
Figura II.2.

Mediu hipoton

Gradul de hemoliz se apreciaz prin intensitatea colorrii soluiilor produs de ctre


hemoglobina pus n libertate. Rezistenei globulare minime a hematiilor i corespunde nceputul
colorrii n rou a mediului hipoton, iar rezistenei globulare maxime i corespunde colorarea
analoag cu cea produs de apa distilat.
12

10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22

Nr. pic.
Apa 1

10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22

Nr. ep

Nr. pic.
NaCl 34 33 32 31
7%0
Conc.
0% 0,68 0,66 0,64 0,62
NaCl

30 29

28 27 26 25 24 23 22 21 20 19 18 17 16 15 14 13

0,60 0,58 0,560,540,520,500,480,460,440,420,380,360,34 0,32 0,30 0,28 0,260,24

Tabel 1. Tehnica diluiilor cu pictura


Determinarea rezistenei globulare
Se poate realiza prin dou metode: diluia cu pictura i diluia cu pipeta gradat.
Materiale necesare
-22 de eprubete serologice, soluie NaCl 7, pipete Pasteur (tehnica diluiei cu pictura)
-21 de eprubete serologice, soluie NaCl 10, pipete gradate (tehnica cu pipeta gradat)
-apa distilat
-snge venos
Metoda de lucru
Se realizeaz diluii succesive de NaCl n eprubete serologice aezate n stativ (Tabel II.1,2)
cu pipeta Pasteur sau cu pipeta gradat.

Nr.
ep

Apa
(ml)

0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,46 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,60 0,62 0,64 0,66 0,68 0,70

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

NaCl
10%0 0,70 0,68 0,66 0,64 0,62 0,60 0,58 0,56 0,54 0,52 0,50 0,48 0,46 0,44 0,44 0,40 0,38 0,36 0,36 0,32 0,30
(ml)
Conc.
NaCl 0,70 0,68 0,66 0,64 0,62 0,60 0,58 0,56 0,54 0,52 0,50 0,48 0,46 0,44 0,42 0,40 0,38 0,36 0,34 0,32 0,54
%

Tabel 2. Tehnica diluiei cu pipeta gradat


In felul acesta n cazul metodei diluiilor cu pictura n fiecare eprubet vor exista 35 de
picturi, iar n cea cu pipeta gradat cte 1ml soluie cloruro-sodic de concentraie cunoscut.
Pentru omogenizare se agit eprubetele n stativ, fr s se schimbe ordinea lor.
Prin puncie venoas se recolteaz snge i se pune cte o pictur (cu o pipet Pasteur
uscat) n fiecare eprubet. Se agit uor pentru dispersarea hematiilor n soluia cloruro-sodic.

13

Citirea se face:
- dup 3 ore la temperatura camerei;
- dup 2 ore la 37grade C;
- dup 24 de ore la 4 grade C;
- imediat dup centrifugare.
Coloraia minim n rou corespunde nceputului hemolizei (rezistena minim a
hematiilor); n urmatoarele eprubete coloraia lichidului supernatant se amplific; colorarea
maxim a lichidului supernatant corespunde hemolizei totale (rezistena maxim a hematiilor).
Concentraiile soluiilor cloruro-sodice corespunztoare nceputului hemolizei (rezistena
minim) i a primei eprubete n care hemoliza a fost total (rezistena maxim) reprezint
rezistena globular.
Valori normale: rezistena minim: 0.46-0.42
rezistena maxim: 0.38-0.34

14

Rezultate:

Observaii i discuii:

15

Lucrarea practic nr.3.


Excitabilitatea i contractilitatea muscular
Excitabilitatea- definiie: reprezint proprietatea fundamental a materiei vii de a reaciona
specific la un excitant adecvat, de natur endogen sau exogen.
Excitabilitatea muscular: reprezint proprietatea muchiului striat de a rspunde la un
stimul prin generarea unui potenial de aciune.
Parametrii excitabilitii
1. intensitatea stimulului
Din punct de vedere al intensitii, stimulii se clasific n:
- subliminali
- liminali (prag)
- supraliminali
- maximali
2. reobaza reprezint intensitatea minim a curentului electric capabil s produc un
rspuns
3. timpul util reprezint timpul necesar unui curent cu intensitatea reobazei s produc un
rspuns (timp de pasaj infinit)
4. cronaxia este timpul minim necesar unui curent cu valoare dubl reobazei capabil s
declaneze excitaia; reprezint un parametru de baz al excitabilitii neuromusculare
5. climaliza este bruscheea cu care se aplic stimulul.
Preparatul neuromuscular de broasc este alctuit din nervul sciatic (regiunea coapsei) i
muschiul gastrocnemian (regiunea gambei). Experimental, se folosete drept excitant curentul
electric deoarece: produce modificri reversibile, poate fi precis msurat din punct de vedere al
intensitii, duratei i modului de aciune, poate fi aplicat direct pe structura a crei excitabilitate
dorim s o evaluam sau indirect cnd se excit nervul efector al organului explorat.
Stabilirea pragului de excitatie.
Pragul de excitaie- definiie: reprezint cea mai mica intensitate a stimulului capabil s
determine un rspuns manifest din partea muchiului.
Materiale necesare: broasc, miograf, surs de curent de inducie pentru stimulare (bobina
de inducie), semnal electric, dispozitiv de nscriere grafic (kimograf), trus de vivisecie,
accesorii pentru fixarea animalului de experien.

16

Metoda de lucru:
- Se spinalizeaz broasca;
- Se fixeaz pe planeta de plut n decubit ventral;
- Se descoper muchiul gastrocnemian;
- Se secioneaz tendonul distal i se fixeaz cu ajutorul unui crlig la o peni nscriitoare;
- Se monteaz circuitul de stimulare. Se monteaz n paralel semnalul electric care are rolul de a
marca momentul de aplicare al stimulului. Cele dou penie trebuie s fie la acelai nivel pe
cilindrul kimografului. Se stimuleaz muchiul gastrocnemian cu intensiti diferite (progresiv
cresctoare) prin nchideri i deschideri ale circuitului electric care furnizeaz curent de inducie

contractie

stimul
Figura III.1. Stabilirea pragului de excitaie
Rezultate:
Se constat c:
- s-au aplicat stimuli care nu au produs nici un rspuns contractil (subliminali) (figura III.1);
- prin creterea progresiv a intensitii stimulului se obine la un moment dat o contracie foarte
mic (stimuli liminali sau prag);
- creterea n continuare a intensitii de stimulare determin proporional contracii musculare
mai ample (stimuli supraliminali).
Fenomenul de sumaie
Aplicarea de stimuli unici cu intesitate subliminar nu produce nici un rspuns. Aplicarea
de stimuli multipli cu intensitate subliminar, cu frecven crescut este urmat de apariia unui
rspuns contractil prin modificri fizico-chimice care ajung la intensitatea excitantului liminar
(sumaie temporal).
Materiale necesare: aceleai ca pentru stabilirea pragului de excitaie.
Tehnica de lucru:
- Se pregatete preparatul neuromuscular de broasc;
17

- Se stabilete intensitatea prag de stimulare;


- Se reduce intensitatea sub valoarea prag i se aplic stimuli subliminali cu frecven mare.
Se obine un rspuns contractil minim.
Contractilitatea muchiului neted i striat
Inregistrarea grafic a contraciei musculare se numete miogram, iar dispozitivul folosit
miograf.
Materiale necesare: aceleai ca pentru excitabilitatea muscular. Ca muchi neted se va
folosi un fragment de stomac de broasc care va fi adaptat la sistemul de nregistrare sau se poate
utiliza baia de organ
Tehnica de lucru: Se realizeaz aceeai instalaie ca pentru stabilirea pragului de excitaie.
Contracia determinat experimental de aciunea unic a unui excitant se numete secus i
are urmtoarele componente (figua III.2):
-perioada de laten
-perioada de contracie
-perioada de relaxare.
In cazul muchiului neted, toate cele trei perioade ale secusei vor fi mai lungi.

Figura III.2. Secusa muchiului striat


Contracia tetanic
In funcie de durata secusei musculare i de frecvena de stimulare se pot obine contracii
unice (secuse) sau fuzionate (contracii tetanice).
Stimularea muchiului cu o frecven care s nu permit relaxarea muchiului (intervalul
dintre stimulii succesivi s fie mai mic dect durata primelor dou perioade: de laten i de
relaxare) determin un tetanos complet. Dac excitantul se aplic la intervale mai mici dect
durata secusei, dar mai mari dect suma primelor dou perioade (de laten i de relaxare) se
produc secuse separate de relaxri incomplete tetanus incomplete (figura III.3).

18

Figura III.3. Tetanus complet i incomplet


Evaluarea cronaxiei i reobazei la om
Aparatul folosit se numete cronaximetru. Determinarea se face prin metoda unipolar i se
folosesc doi electrozi:
- electrodul indiferent (se fixeaz n regiunea cefei sau a trunchiului);
- electrodul activ (negativ) se aplic la nivelul punctelor motorii.
Punct motor = traiectul cel mai superficial al nervului n raport cu tegumentul.
Tehnica de lucru
Se aplic electrodul activ pe un punct motor. Se stabilete reobaza (pragul de excitaie) nervului
sau al muchiului respectiv. Se dubleaz reobaza. Se stabilete din nou pragul de excitaie n
funcie de durata de excitare (figura III.4.).
Legile fundamentale ale cronaxiei
-cronaxia muchilor agoniti are n poriunea distal valoare dubl fa de segmentul proximal;
-cronaxia muchilor posteriori are valoare dubl fa de cea a muchilor anteriori;
-cronaxiile sunt aceleai pentru regiunile omoloage.
Semnificaie clinic:
-apreciaz starea sistemului neuro-muscular;
-are valoare n aprecierea conduitei terapeutice (tratamentul va fi continuat att timp ct
cronaxiile sunt modificate).

19

Figura III.4. Reprezentarea schematic a cronaxiei i reobazei

20

Rezultate:

Observaii i discuii::

21

Lucrarea practic nr.4.


Viteza de conducere nervoas (motorie i senzitiv)
Trunchiurile nervoase sunt formate din fibre motorii (axoni) i/sau sensitive (dendrite).
Viteza de conducere a potenialelor de aciune este proprie fiecrui nerv dar i fiecrui tip de fibr
care intr n constituia sa.
Viteza de propagare a influxului nervos la nivelul membranei neuronale depinde de:
-grosimea fibrei nervoase
-prezena sau absena tecii de mielin
-grosimea tecii de mielin
-distana la care se gsesc nodurile Ranvier
-temperatura
-vrsta.
Semnificaie clinic: Determinarea vitezei de conducere la nivelul nervilor periferici este
esentiala n diagnosticarea afeciunilor neurologice.
A. Viteza de conducere motorie
Fibrele motorii sunt cele mai accesibile stimulrii iar rspunsul motor care apare se observ
foarte uor. Stimularea nervului se realizeaz transcutanat, iar intensitatea curentului utilizat este
supramaximal (antreneaz n contracie toate fibrele musculare).
Tehnica de lucru: Se alege un muchi distal astfel nct trunchiul nervos s fie accesibil
stimulrii n dou puncte ntre care s existe o distan suficient de mare. Se determin latena
rspunsului motor prin msurarea:
- intervalului de timp (ms) din momentul stimulrii i cel al apariiei rspunsului muscular
- distanelor (mm) dintre cele dou puncte ntre care se plaseaz electrozii (de stimulare distal i proximal i de culegere).
- v=d/t, n care d- reprezint distana dintre cele dou puncte de stimulare, iar t-reprezint
diferena dintre valoarea latenei proximale i distale
B. Determinarea vitezei de conducere senzitive
Tehnicile utilizate elimin contribuia fibrelor motorii. Se folosete stimularea distal cu
ajutorul unor electrozi inelari plasai la nivelul degetelor, iar electrozii de culegere sunt plasai fie
pe suprafaa pielii la nivelul emergentei proximale fie electrozi tip ac monopolar, fixai pe nerv.

22

Potential compus, electronervograma


Electronervograma reprezint graficul obinut n urma nregistrrii activitii bioelectrice
de la nivelul unui trunchi nervos.
Materiale necesare: broasc, material de vivisecie, ace cu gamalie, planet de plut,
dispozitiv de excitare i de culegere, neurostimulator.
Tehnica de lucru: Se spinalizeaz broasca. Se fixeaz pe planeta de plut n decubit
ventral. Se descoper nervul sciatic. Se stimuleaz nervul. Se nregistreaz potenialul de actiune
compus al nervului.
Pe traseul obinut se pot distinge rspunsurile diferitelor categorii de fibre prezente n
nervul stimulat; rpunsul fibrelor A cu subgrupele , , , cu amplitudine mare, B i C cu
amplitudine mic (figura IV.1.).

Figura IV.1. Electronervograma


Electromiografia global i de unitate motorie (EMG)
Electromiografia reprezint metoda de nregistrare a curenilor de aciune musculari.
Investigheaz starea funcional a ansamblului neuromuscular.
Instalaia de nregistrare are urmtoarele componente:
1. electrozi de culegere
2. sistem de amplificare
3. sistem de afiaj.

23

Figura IV.1. Uniti motorii

\
Figura IV.2. Traseu EMG
24

1. Electrozii de culegere pot fi:


- de suprafa (cutanai): sunt plai, se aplic direct pe tegument, distana dintre ei trebuie sa fie
de ~ 4 cm, se plaseaz unul pe muchi iar celalalt pe tendon, culeg activitatea de la nivelul tuturor
fibrelor musculare (EMG global).
- intramusculari (tip ac): se introduc n muchi, pot culege activitatea unei singure uniti motorii
(EMG de unitate motorie).
2.Sistemul de amplificare amplific numai curentul venit de la electrod i elimin curenii
venii de la elementele situate la distan.
3. Sistemul de afiaj poate fi- inscriptor termic, inscriptor cu cerneal, inscriptor fotografic.
Traseul electromiografic (figura IV.2) se caracterizeaz prin 4 parametri: form,
amplitudine, durat, frecven.

25

Rezultate:

Observaii i discuii:

26

Lucrarea practic nr.5.


Compartimentele mediului intern. Sngele: plasma i elementele figurate
Sngele este un esut circulant, format din elemente figurate i plasm.
Elemente figurate:
1.eritrocite (hematii)
2.leucocite
3.trombocite

Figura V.1. Plasm

Figura V.2.Ser

Plasma reprezint componenta lichid obinut n urma sedimentrii elementelor figurate,


atunci cnd sngele este recoltat pe anticoagulant (figura V.1.). Conine proteine (albumine,
globuline, fibrinogen), substane organice (aminoacizi, uree, creatinin), substane anorganice
(Na, K, Ca, Mg, Fe, I, Cu).
Serul se obine prin recoltarea sngelui fr substane anticoagulante (figura V.2.). Spre
deosebire de plasm nu conine fibrinogen.
Apa din organism este distribuit astfel:
- ap intracelular;
- ap extracelular - intravascular;
- interstiial;
- apa transcelular (seroase, umori).
Determinarea hematocritului
Hematocritul reprezint raportul dintre volumul hematiilor i cel al sngelui n care se
gsesc.
Principiul metodei: n sngele venos recoltat pe anticoagulant, prin centrifugare, se separ
hematiile din plasm i se determin raportul dintre volumul hematiilor i volumul total al
sngelul din tubul de sticl (figura V.3.).
Materiale necesare: vat, alcool, ac steril de unica folosint, substan anticoagulant (citrat
de sodiu 3,8%), tuburi de hematocrit (tuburi de sticl mai groas, rezistente la centrifugare,
gradate), pipete Pasteur, centrifug.
27

Metoda de lucru: Se recolteaz 3-5ml de snge prin


puncie

venoas

pe

substan

anticoagulant

se

omogenizeaz coninutul. Se repartizeaz acest amestec cu o


pipeta Pasteur ntr-un tub de hematocrit pn la diviziunea
100. Se centrifugheaz tubul (20 min la 4000 turaii/min, n
poziie orizontal pentru sedimentare maxim). Se obine
separarea sngelui ntr-un strat superior (plasm), un strat mic
Figura V.3.Hematocritul

mijlociu format din leucocite i trombocite i un strat inferior,


format din globule roii, care constituie hematocritul.

Rezultate: dup centrifugare se masoar nalimea h a coloanei de eritrocite i nlimea H a


coloanei totale de snge. Rezultatele se exprim procentual.
Calcul: Ht%= 100 x h / H
Valori normale:
- brbai: 46,5% 5%
- femei: 42% 5%
- copii: 35-45%

Viteza de sedimentare a hematiilor (VSH)


Ofer informaii despre structura proteic a plasmei.
VSH reprezint nlimea coloanei de supernatant la 1h, 2h i 24h din amestecul (4:1) de
snge (venos, proaspt recoltat prin puncie venoas) i lichid anticoagulant (citrat de sodiu
3,8%).
Principiu: Eritrocitele sedimenteaz ntr-un timp variabil dac sngele recoltat pe o
substan anticoagulant este lsat n repaus.
Materiale necesare: ac de puncie, vacutainer de VSH care conine citrat de sodiu 3,8%,
alcool, vat, stativ Westergreen cu diviziuni milimetrice de la 0 la 200 (gradaia ncepnd de sus
n jos), cronometru.
Tehnica de lucru: Prin puncie venoas se recolteaz 5 ml de snge venos ntr-un vacutainer
de VSH (care conine 0,4 ml citrat de sodiu 3,8%). Se omogenizeaz. Se fixeaz n stativul
Westerngreen, poziia pipetei fiind perfect vertical (figura V.4). Se pornete cronometrul. In
mod obinuit se citete nltimea coloanei de supernatant la 1 i la 2 ore i rar la 24 de ore.
Rezultatele se exprim n milimetri pe unitatea de timp.

Valori normale
-brbai: 2-7 mm/h i 7-15 mm/2h
-femei: 4-9mm/h i 12-17 mm/2h
-sarcin: 35 mm/h
-copii:9-12mm/h

Figura V.4. Stativ pentru VSH


Interpretarea rezultatelor: exist dou tipuri de factori care influeneaz VSH-ul:
- factori eritrocitari (numrul, mrimea, forma eritrocitelor)
- factori plasmatici (proteine plasmatice - albumine, globuline, fibrinogen).
Variaii fiziologice: VSH-ul crete n sarcin, la menstruaie.
Variaii patologice: VSH-ul crete n boli inflamatorii i infecioase i scade n stri
alergice.
! VSH-ul este invers proporional cu hematocritul !

Dozarea hemoglobinei prin metoda Sahli


Hemoglobina este o protein specific celulelor eritrocitare i are rol n transportul gazelor
respiratorii.
Principiu: se urmrete capacitatea de oxigenare a sngelui. Este o metod cantitativ i
colorimetric.
Materiale necesare:
- hemoglobinometrul Sahli format din:
1. tub de cercetat care prezinta dou scale gradate, ce servesc la aprecierea cantitii de
hemoglobin - una n procente n raport cu sangele considerat normal i cealalta n g la 100ml
2. comparator: 2 tuburi etalon care au culoarea unei soluii de clorhidrat de hematin, echivalant
unui snge a crui coninut n hemoglobin este 16g la 100ml
3. pipeta Sahli, baghet de sticl, ap distilat, soluie HCl 0,2N, snge

29

Tehnica de lucru: Se pune soluie de HCl diluat (0,2N) n tubul de cercetat, pn la


diviziunea 10. Cu o pipet Sahli se pun apoi 0,02 ml snge capilar i se omogenizeaz coninutul
tubului de cercetat. Se las tubul n repaus 7 minute la temperatura camerei. Se pune tubul de
cercetat n comparator. Se dilueaz ncet cu ap sau HCl 0,2N pn cnd cele dou culori devin
identice. n acest moment, se citete valoarea hemoglobinei care este dat de cifra scalei de pe
tubul de cercetat n dreptul creia se citete nivelul amestecului.
Valori normale:
- brbai: 14- 18g/ 100ml
- femei: 12-16g/ 100ml
- copii: 12-17g/ 100ml
Numrarea hematiilor
Hematiile (eritrocitele, globulele roii) sunt elemente figurate ale sngelui specializate n
transportul gazelor respiratorii (oxigen, dioxid de carbon).
Principiu: numrarea hematiilor cu ajutorul microscopului ntr-un volum cunoscut de
lichid, diluat ntr-o proporie cunoscut. Diluia sngelui se realizeaz folosind o soluie izoton
cu hematiile i litic pentru celelalte elemente figurate ale sngelui (leucocite i trombocite).
Materiale necesare: lichid de diluie (soluie Hayem), pipeta Potain pentru eritrocite, camer
de numrare Brker-Trk, microscop, lamele de sticl, ac steril, vat, alcool, hrtie de filtru.
Camera de numrat Brker-Trk (figura V.5.) are suprafaa de 9 mm2 i prezint o reea
gravat special. Suprafaa de 9 mm2 este delimitata de linii triple i se mparte n 9 ptraele de 1
mm2 tot prin linii triple.
Ptratul din mijloc de 1 mm2 reprezinta reteaua Thoma, care prezinta 400 de ptrele
mici, fiecare cu suprafaa de 1/400 mm2.. Se folosete la numrarea hematiilor. Ptratele
inferioare i superioare, laterale drepte i stngi se mpart n 16 ptrele, separate prin linii
duble, fiecare ptrel avnd suprafaa de 1/25 mm2. Aceste suprafee se folosesc pentru
numrarea leucocitelor (figura V.7).

Figura V.5.Camera de numrat Brker-Trk

Figura V.6. Pipete Potain


30

Figura V.7. Reeaua camerei de numrat Brker-Trk


Tehnica de lucru:
1. Diluia sngelui: Pipeta Potain (figura V.6) pentru eritrocite este compus dintr-un tub
capilar gradat (cu notaiile 0.5 i 1, spaiul dintre aceste diviziuni este divizat n 10
segmente egale) i o bul de diluie (prevzut cu o perla roie) la al crui capt distal se
observ notaia 101. Se dezinfecteaz pulpa degetului cu alcool, se neap tegumentul cu
un ac steril i se terge cu hrtie de filtru prima pictur de snge care apare. Se aspir
snge pn la diviziunea 0.5 (sau 1), apoi lichid de diluie pn la diviziunea 101. Se
realizeaz astfel diluia 1/200 (sau 1/100).
2. Umplerea camerei de numrat: Se omogenizeaz amestecul. Se inlatura pe o hrtie de
filtru primele 2 3 picturi. Se umple cu grij camera de numrat prin capilaritate (se evit
prelingerea lichidului n anurile laterale ale camerei de numrat i ptrunderea bulelor
de aer). Se ateapt 1-2 minute, timp n care hematiile sedimenteaz.
31

Tehnica de numrare: Se fixeaz camera la microscop, astfel nct n cmpul microscopului


s apar camera Thoma. Numrarea hematiilor se realizeaz pe 5 ptrate mari (cu latura de
1/25 mm) care nsumeaz 80 de ptraele mici (cu suprafaa de 1/400 mm2).
Regul de numrare: Numrarea se ncepe cu ptratul din stnga-sus i continu cu
urmtoarele trei din dreapta. Se numr apoi rndul urmtor de la dreapta la stnga, apoi al
treilea rnd de la stnga la dreapta, etc. Pentru a numra o singura data fiecare eritrocit,
hematiile aflate pe laturi se numr numai pe latura de sus i pe latura stng (figura V.8).

Figura V.8. Regul de numrare a hematiilor


Calcul: se face corecia se suprafa, nlime i diluie:
Nr. eritrocite/mm3= N / 80 x S x h x D
n care: N - numrul de eritrocite numrate n cele 80 de ptrate mici
S - suprafaa unui ptrat mic- 1/400 mm2
H - nlimea camerei de numrat 1/10 mm
D - diluia lichidului- 1/200 sau 1/100
Pentru D = 1/200, nr. leucocite/mm3= 10 000 x N
D = 1/100, nr. leucocite/mm3= 5 000 x N
Valori normale: brbat: 4 500 000 5 000 000 / mm3
femeie: 4 200 000 4 500 000 / mm3
nou-nscut: 5 000 000 6 000 000 / mm3
Semnificaia clinic: Numrul de globule roii variaz n funcie de vrst, sex, conditiile
de altitudine. Creterea numarului de hematii se numeste poliglobulie, iar scaderea numarului lor
se numeste anemie.

32

Rezultate:

Observaii i discuii::

33

Lucrarea practic nr.6.


Numrarea leucocitelor
Leucocitele (globulele albe) sunt elemente figurate ale sngelui adaptate pentru funcia de
aprare contra unor ageni patogeni prin fagocitoz sau alte activiti legate de procesul
inflamator.
Principiu: numrarea leucocitelor cu ajutorul microscopului ntr-un volum cunoscut de
lichid, diluat ntr-o proporie cunoscut. Diluia sngelui se realizeaz folosind o soluie izoton
cu leucocitele i litic pentru celelalte elemente figurate ale sngelui (hematii i trombocite).
Materiale necesare: lichid de diluie (soluie Trk), pipeta Potain pentru leucocite, camer
de numrare, microscop, lamele de sticl, ac steril, vat, alcool, hrtie de filtru.
Tehnica de lucru:
1. Diluia sngelui: Pipeta Potain pentru leucocite (figura V.6) este compus dintr-un tub
capilar gradat (cu notaiile 0.5 i 1, spaiul dintre aceste diviziuni este impartit n 10
segmente egale) i o bul de diluie (prevzut cu o perla alb) la al crui capt distal se
observ notaia 11. Se dezinfecteaz pulpa degetului cu alcool, se neap tegumentul cu
un ac steril i se terge cu hrtie de filtru prima pictur de snge care apare. Se aspir
snge pn la diviziunea 0.5 (sau 1), apoi lichid de diluie pn la diviziunea 11. Se
realizeaz astfel diluia 1/20 (sau 1/10).
2. Umplerea camerei de numrat: Se omogenizeaz uor sngele diluat prin agitarea pipetei.
Se elimin cu o hrtie de filtru primele 2 3 picturi. Se umple cu grij camera de numrat
prin capilaritate (figura V.7). Se ateapt 1-2 minute, timp n care leucocitele
sedimenteaz.
3. Tehnica de numrare: Numrarea leucocitelor se realizeaz pe minim 25 ptrate mari (cu
latura de 1/5 mm) care nsumeaz o suprafa total de 1 mm2.
Regul de numrare: Se numr nti leucocitele de pe latura din stnga i cea de sus i apoi
cele din interiorul ptratului (figura VI.1.).
Calcul: se face corecia de suprafa, nlime i diluie:
Nr. leucocite/mm3= N / 25 x S x h x D
n care: N - numrul de leucocite numrate n cele 25 ptrate mari
S - suprafaa unui ptrat mare- 1/25 mm2
H - nlimea camerei de numrat 1/10 mm
D - diluia lichidului - 1/20 sau 1/10
34

Pentru D = 1/20, nr. leucocite/mm3 = 200 x N


D = 1/10, nr. leucocite/mm3 = 100 x N

Figura VI.1. Regul de numrare a leucocitelor


Valori normale: 4 000- 8 000/ mm3 (vezi tabelul VI.1.)
Semnificaia clinic: Numrul de globule albe variaz n funcie de vrst, fiind mai mare
la copil. n infecii, n special cele bacteriene, numrul de leucocite crete (leucocitoz), dar poate
s i scad (leucopenie) n infecii virale sau la persoane cu imunodeficiene.
Numrarea trombocitelor
Trombocitele (plachetele sangvine) sunt elemente figurate ale sngelui cu rol n
hemostaz.
Principiu: numrarea trombocitelor cu ajutorul microscopului ntr-un volum cunoscut de
lichid, diluat ntr-o proporie cunoscut. Diluia sngelui se realizeaz folosind o soluie izoton
cu trombocitele i litic pentru celelalte elemente figurate ale sngelui (hematii i leucocite) care
are i rol antiagregant plachetar.
Materiale necesare: lichid de diluie (soluie care conine EDTA), pipeta Potain pentru eritrocite
(figura V.6), camer de numrat, microscop, lamele de sticl, ac steril, vat, alcool, hrtie de
filtru.
Tehnica de lucru (metoda direct cu EDTA):
1. Diluia sngelui: Se dezinfecteaz pulpa degetului cu alcool, se neap tegumentul cu un
ac steril i se terge cu hrtie de filtru prima pictur de snge care apare. Se aspir snge
pn la diviziunea 0.5 (sau 1), apoi lichid de diluie pn la diviziunea 101. Se realizeaz
astfel diluia 1/200 (sau 1/100).

35

2. Umplerea camerei de numrat: Se omogenizeaz uor sngele diluat prin agitarea pipetei.
Se elimin cu o hrtie de filtru primele 2-3 picturi. Se umple cu grij camera de numrat prin
capilaritate (figura V.7). Se ateapt 1-2 minute, timp n care trombocitele sedimenteaz.
Tehnica de numrare: Numrarea trombocitelor se realizeaz pe 10 ptrate mari de pe camera
Thoma.
Calcul: se face corecia se suprafa, nlime i diluie:
Nr. trombocite/mm3 = N / 10 x S x h x D
n care: N - numrul de trombocite numrate n cele 10 ptrate mari
S - suprafaa unui ptrat mare - 1/25 mm2
H - nlimea camerei de numrat 1/10 mm
D - diluia lichidului- 1/200 sau 1/100
Pentru D = 1/200, nr. trombocite/mm3 = 5000 x N
D = 1/100, nr. trombocite/mm3 = 2500 x N
Valori normale: 150 000- 400 000/ mm3
Semnificaia clinic: metoda este folosita in diagnosticul bolilor hematologice.
Formula leucocitar
Principiu: Determinarea formulei leucocitare permite stabilirea proporiilor dintre
diferitele serii leucocitare din sngele periferic dup numrarea a 200 de elemente leucocitare.
Materiale necesare: vat, alcool, ac steril, lam de sticl, colorant May-Grmwald i
colorant Giemsa.
Tehnica de lucru: se realizeaz un frotiu de snge i se coloreaz May-Grmwald-Giemsa.
Se pune o pictur de ulei de cedru peste frotiu i se parcurge frotiul cu obiectivul cu imersie.
Obiectivul se deplaseaz n zig-zag pentru a surprinde att limfocitele care au tendina de a se
grupa spre centru ct i polimorfonuclearele i monocitele care se disperseaz ctre margine i
franjuri. Pe msur ce se ntlnete un element leucocitar, se noteaz i se obine astfel
exprimarea n procente a valorilor gsite pentru fiecare clas de celule. Deoarece informaiile
cantitative oferite de formula leucocitar sunt valabile ca atare numai n cazul unui numr normal
de leucocite, ceea ce intereseaz de fapt sunt valorile absolute (nr. pe mm3) ale fiecarei clase
celulare. Valoarea absolut rezult din nmulirea cifrei de leucocite pe mm3 cu cifra procentual
a celulelor respective mprit la 100 (tabelul VI.1).

36

Element
leucocitar
Leucocite
Neutrofil
nesegmentat
Neutrofil
segmentat
Eozinofil
Bazofil
Limfocit
Monocit

Neutrofil(a)

Nou-nscut

Sugar
9 00015 000/mm3
1 - 5%

Copil
(6 ani)
4 00010 000/mm3
5%

15 00030 000/mm3
1 - 5%
30 70%

Adult
4 0008 000/mm3
1 - 4%

50 - 200

25 30%

30 60%

60 70%

3000 - 4800

2 5%
7%
4%
1-4%
0 1%
1%
1%
0 1%
20 40%
50 70%
30 60%
25 30%
2 8%
6 8%
4 8%
4 8%
Tabelul VI.1. Formula leucocitar (valori procentuale i absolute)

Eozinofil (b)

Bazofil (c)

Monocit (d)

Valori
absolute

300 - 400
20 - 80
1500-2400
240-600

Limfocit (e)

Figura VI.2.
Leucocitele se clasific n granulocite i agranulocite (figura VI.2.). Granulocitele sunt leucocite
cu nucleu granular, clasificate dup culoarea protoplasmei n trei categorii: eozinofile (figura
VI.2.b), bazofile (figura VI.2.c) i neutrofile (figura VI.2.a). Au rol imunologic n imunitatea
nespecific.
Agranulocitele sunt leucocite cu nucleu de form mai simpl, negranular, i se clasific n
monocite (figura VI.2.d) i limfocite (figura VI.2.e). Au rol n imunitatea specific.
Grupele sangvine
In prezent exist 29 de sisteme de sisteme de grupe sangvine, dar cele mai cunoscute i
cele mai importante n cazul transfuziilor sunt sistemele ABO i Rhesus (Rh).
Grupele sangvine n sistemul ABO
In cadrul sistemului ABO exist patru grupe sangvine: O (I), A (II), B (III) i AB (IV).
Aceste grupe sunt determinate de prezena sau absena pe suprafaa hematiilor a unor molecule
antigenice, denumite aglutinogene. Cele mai importante aglutinogene sunt A i B. Anticorpii
corespunztori acestor antigene se numesc aglutinine i sunt denumite anticorpi (Anti-A) i
(anti-B). Aglutininele (anticorpii) corespunztoare aglutinogenelor A i B nu pot traversa bariera
placentar. Aglutininele i anticorpii corespunztori (de exemplu A i ) nu se gsesc n sngele
37

aceleiai persoane. Daca ar intra n contact anticorpii i antigenii corespunztori, ar avea loc o
reacie antigen-anticorp (reacie foarte specific), hematiile ar aglutina i n final ar fi distruse.
In funcie de distribuia antigenelor de pe hematii i a anticorpilor din plasm se disting 4
grupe sangvine, a crei denumire este dat de tipul de antigen (tabelul VI.2).
Grup sangvin

Aglutinogene
(antigene)

Aglutinine
(anticorpi)

Distribuia grupelor
sangvine n
Romnia
36%

O (I)

Lipsesc

sau anti-A i
sau anti-B

A (II)

sau anti-B

41%

B (III)

sau anti-A

16%

AB (IV)

A i B

Lipsesc

7%

Tabelul VI.2. Grupele sangvine din sistemul ABO


Stabilirea compatibilitii transfuzionale
In cazul necesitii efecturii unei transfuzii, exist urmtoarea regul de donare: n
sngele donatorului nu trebuie sa existe antigene (aglutinogene) care s interacioneze cu
anticorpii (aglutininele) primitorului. Prin urmare este indicat a se administra snge izogrup.
Atunci cnd nu exist snge izogrup, se folosete snge din grupe compatibile, cu condiia ca
volumul de snge transfuzat s nu depeasc 10% (maxim 500 ml) din volumul total de snge al
primitorului. n tabelul VI.3. este prezentat compatibilitatea grupelor sangvine.
Grup sangvin

Primete

Doneaz

O (I)

O (I)

A (II)

A (II), O (I)*

O (I), A (II)*, B (III)*, AB (IV)*


Donator universal
A (II), AB (IV)*

B (III)

B (III), O (I)*

B (III), AB (IV)*

AB (IV)

O (I)*, A (II)*, B (III)*, AB (IV)


Primitor universal

AB (IV)

Tabelul VI.3. Compatibilitatea grupelor sangvine (*- maxim 10%-500 ml- din volumul total de
snge al primitorului).
Persoanele cu grupul sangvin O(I) sunt donatori universali (pot dona la toate celelalte
grupe) iar persoanele cu grupul sangvin AB(IV) sunt primitori universali, deoarece plasma lor
este lipsit de aglutinine. Aceast regul este valabil n cazul transfuziei unor volume mici de
38

snge (pn la 500 ml). In acest caz, anticorpii din sngele donatorului nu pot crea complicaii
transfuzionale deoarece volumul de snge transfuzat este mic i anticorpii se vor dilua foarte mult
n sngele primitorului.
Determinarea grupei sangvine n sistemul ABO
Principiu: Are loc o reacie antigen-anticorp la care particip antigenele de grup sangvin i
anticorpii lor specifici. Este o recie de aglutinare (se soldeaz cu aglutinarea hematiilor).
Exist dou metode:
-

proba Beth-Vincent (determinarea aglutinogenului)- cea mai utilizat;

proba Simonin (determinarea aglutininelor).

Proba Beth-Vincent (determinarea aglutinogenului)


Materiale necesare: seruri hemotest: O (anti-A, anti-B), A (anti-B) i B (anti-A); lame de
sticla; snge integral; ac steril, vat, alcool.
Metoda de lucru: Pe o lam de sticl se pun, de la stnga la dreapta, cte o pictur din
serurile hemotest n urmtoarea ordine: O (anti-A, anti-B), A (anti-B) i B (anti-A). Cu coltul
unei lame se adauga o cantitate mica de sange (circa 1-10 din cantitatea de ser hemotest),
schimband coltul lamei la fiecare picatura de ser

hemotest si amestecandu-se pentru

omogenizare.
Interpretarea rezultatelor: Dup 2-3 minute se observ sau nu aglutinarea hematiilor i se
stabilete grupa sangvin dup figura VI.3.
Proba Simonin (determinarea aglutininelor)
Materiale necesare: seruri cu eritrocite test de grupe: O, A i B; lame de sticla; snge
integral; ac steril, vat, alcool.
Metoda de lucru: Pe o lam de sticl se pun trei picturi din sngele de cercetat. Peste
fiecare pictur de snge se adaug, cu ajutorul unei micropipete o cantitate mic de suspensie de
hematii test (n ordine de la stnga la dreapta O, A, B). Se citete rezultatul ca mai sus.

39

Ser hemotest

O (I)

Figura VI.3. Determinarea aglutinogenelor


(metoda Beth-Vincent).

A (II)

Legend:
- amestec ser hemotest - snge care
B (III)

prezint aglutinarea hematiilor


- amestec ser hemotest - snge fr
aglutinarea hematiilor

AB (IV)

Rezultate:

40

Determinarea grupei sangvine n sistemul Rhesus (Rh)


Sistemul Rh clasific sngele uman dup prezena sau absena unor proteine specifice pe
suprafaa hematiilor dintre care cea mai frecvent este factorul D (antigenul D). Persoanele ale
cror hematii prezint antigen D pe membran sunt considerai Rh+ (pozitiv) (circa 85%din
populaie), iar cei care nu prezint acest factor sunt Rh- (negativ) (circa 15%din populaie).
Spre deosebire de sistemul ABO, n sistemul Rh absena antigenului nu presupune
existena anticorpilor specifici; indivizii Rh- nu au n mod normal n ser anticorpi anti- D.
Sistemul Rh se asociaz obligatoriu grupei din sistemul ABO, astfel c "grupa sanguin" este
exprimat prin adugarea semnului + sau - la grupa ABO (de exemplu: A+, B+, 0+, 0-). Aceste
informaii reprezint minimul necesar n practica medical pentru realizarea unei transfuzii.
Sngele Rh+ poate fi primit doar de indivizi Rh+, pe cnd cel Rh- se poate administra la Rh- i
Rh+ fr nici o problem, deoarece n sistemul Rh nu exist anticorpi n absena factorului
antigenic. Teoretic, persoanele Rh- ar putea primi o dat n via snge Rh+, dezvoltnd ulterior
anticorpi anti-Rh.
Principiu: Aglutinarea hematiilor la tratare cu un ser ce conine anticorpi anti-Rh.
Materiale necesare: ser anti-Rh, lame de sticl; snge integral; ac steril, vat, alcool.
Metoda de lucru: pe o lam de sticl se pune o pictur de ser anti-Rh peste care se
adaug o cantitate mic din sngele pacientului (circa 1/10 din cantitatea de ser anti-Rh) i se
omogenizeaz cu un col al lamei de sticl.
Interpretarea rezultatelor: Dup 2-3 minute se observ sau nu aglutinarea hematiilor i se
stabilete grupa sangvin n sistemul Rh dup figura VI.4.:
Rh negativ

Rh pozitiv

Figura VI.4. Determinarea grupei sangvine n sistemul Rh.


Legend:
- amestec ser anti-Rh- snge care prezint aglutinarea hematiilor.
- amestec ser anti-Rh- snge fr aglutinarea hematiilor

41

Hemostaza fiziologic
Hemostaza (oprirea sngerrii) poate fi:
-

fiziologic (spontan - la nivelul vaselor mici i capilare);

medicamentoas (folosirea unor medicamente capabile s completeze lanul factorilor


implicai n coagulare (de exemplu - vitamina K);

chirurgical (oprirea unei hemoragii prin procedee chirurgicale, mai ales n timpul unei
intervenii chirurgicale).

Hemostaza fiziologic:
- ansamblul mecanismelor prin care organismul se apr mpotriva hemoragiilor produse prin
lezarea vaselor mici i mijlocii;
- se desfoar n patru timpi:
1.

Timpul parietal: ansamblul fenomenelor care determin vasoconstricie care reduce sau

oprete momentan hemoragia;


2.

Timpul trombocitar: are loc formarea trombusului alb trombocitar prin aderarea

trombocitelor de peretele vasului lezat i agregarea lor ulterioar;


3.

Timpul plasmatic: ansamblul fenomenelor de coagulare cu formarea trombusului de

fibrin care se retract ulterior;


4.

Hemostaza definitiv: prin procese de fibrinoliz asociate cu aciunea macrofagelor

tisulare trombusul de fibrin este distrus (la circa 7 zile).


Explorarea hemostazei
Cele mai utilizate metode de evaluare a hemostazei sunt:
-

numrarea trombocitelor;

timpul de sngerare i de coagulare;

timpul de protrombin Quick i INR;

timpul de tromboplastin parial (APTT).

Timpul de sngerare (TS)


Definiie: reprezint durata de timp dintre momentul extravazrii sngelui dup neparea cu
un ac i momentul producerii hemostazei. Testul este un indicator al eficienei timpului parietal
i trombocitar al hemostazei.
Materiale necesare: ac Franke sau ac steril, vat, alcool, hrtie de filtru, cronometru.

42

Tehnica de lucru (metoda Duke): se dezinfecteaz cu alcool pulpa degetului sau lobul urechii
iar dup uscare se neap zona respectiv cu un ac Franke sau un ac steril cu o profunzime de
maxim 3 mm. n momentul cnd apare prima pictur de snge, se pornete cronometrul.
Din 30 n 30 de secunde se terg picturile de snge aprute cu o hrtie de filtru, fr ns a
apsa. Cronometrul se oprete cnd hrtia de filtru nu se mai pteaz cu snge.
Valori normale: 2 - 4 minute.
Semnificaia clinic: Testul se efectueaz obligatoriu inaintea unei intervenii chirurgicale sau
stomatologice.
Timpul de coagulare (TC)
Definiie: reprezint timpul scurs din momentul recoltrii sngelui i cel n care are loc
coagularea complet (dispariia fluiditii sngelui). Testul se efectueaz n vederea efecturii
unei intervenii chirurgicale sau stomatologice.
Materiale necesare: lam de sticl, camer umed, ser fiziologic, ac steril, vat, alcool,
cronometru.
Tehnica de lucru (metoda Bazarov): se pune o pictur de ser fiziologic pe o lam de sticl
care se aeaz ntr-o camer umed (cutie Petri prevzut cu hrtie de filtru umezit). Se
dezinfecteaz cu alcool pulpa degetului iar dup uscare se neap cu un ac steril. Se ndeprteaz
prima pictur de snge iar a doua pictur se las s cad liber peste pictura de ser fiziologic.
Se pornete cronometrul. Se nclin uor camera umed (din 30 n 30 de secunde) i se urmrete
dispariia fluiditii amestecului ser fiziologic - snge (cnd pictura nu se mai deformeaz a avut
loc coagularea). Se oprete cronometrul i se noteaz timpul.
Valori normale: 8 - 10 minute.
Semnificaia clinic: prelungirea TC arat ntrzierea producerii coagulrii sngelui,
predispoziia la sngerari i la hemoragii. Un TC sczut indic un risc crescut de formare a
trombilor la nivelul vaselor sanguine.
Timpul de protrombin Quick (TP sau TQ)
Definiie: Timpul Quick reprezint timpul necesar pentru apariia cheagului de fibrina ntr-un
amestec de plasma citratata si tromboplastina calcica (ntr-o proporie cunoscut).
TP exploreaz global complexul protrombinic (factorii V, VII, X, protrombina i
fibrinogenul). Protrombina este o substan proteic (factorul II) ce trebuie convertit la trombin
pentru a putea fi eficace n formarea cheagului de fibrin.
Valori normale: 11-15 secunde sau 80-100%.
43

Semnificaia clinic: se folosete n supravegherea tratamentului anticoagulant.


INR (International Normalized Ratio)
Datorit variabilitii valorii timpului de protrombin care exist de la un laborator la altul i
a diferenelor dintre agenii anticoagulanti folosii, rezultatele se exprim n mod frecvent sub
forma unui raport numit INR (valori normale: 0.8-1.2). Aceast masur a fost luat de
Organizaia Mondial a Sntii astfel nct medicii s poat compara mult mai uor i rapid
rezultatele provenite de la laboratoare diferite. INR reprezint raportul dintre timpul de
protrombin al pacientului i valoarea de control a laboratorului.

Parametrii coagulrii (PT, APTT,


fibrinogenul) pot fi msurai cu ajutorul
analizoarelor de coagulare denumite
coagulometre. Aparatul combin avantajele
principiilor mecanice i fotooptice de
detecie a cheagului, utiliznd un dispozitiv
unic turbodensitometric. Coagulometrele au
sensibilitatea necesar pentru a detecta chiar
i cea mai slab formare a cheagului n
cazurile patologice.

44

Rezultate:

Observaii i discuii:

Lucrarea practic nr.7.


Proprietile muchiului cardiac
Miocardul are proprieti comune muchilor striai (excitabilitate, contractilitate,
conductibilitate, tonicitate), dar i proprieti specifice (automatismul, ritmicitatea).
Automatismul

reprezint proprietatea miocardului de a genera spontan poteniale de

aciune n absena oricror influene extrinseci (proprietatea de a se autoexcita). Este o proprietate


care se manifesta in mod normal la nivelul sistemului excitoconductor, iar in restul miocardului
este o proprietate latenta.
Sistemul excitoconductor uman este format din (figura VII.1.):
- nodul sinoatrial
- nodul atrioventricular
- fasciculul Hiss
- reeaua Purkinje

Figura VII.1. Sistemul excitoconductor uman (A) i inima de broasca (B)


Inima scoas din organism, degrevat de orice influene nervoase i umorale i continu
activitatea contractil o perioad de timp care poate s ajung la cteva zile dac i se asigur
condiii adecvate de perfuzie i temperatur.
Materiale necesare: broasc, trus vivisecie, cutie Petri, ser Ringer.

46

Tehnica de lucru: Se spinalizeaz broasca. Se plaseaz pe o planet de plut n decubit


dorsal. Se nltur plastronul costal. Se inlatura sacul pericardic. Se scoate cordul i se plaseaz
ntr-o cutie Petri care conine ser Ringer. Se observ activitatea contractil a inimii.
Cardiograma reprezint graficul obinut n urma nregistrrii activitii mecanice a inimii
(figura VII.2.).
Material necesar: broasc, planet de plut, ace cu gmalie, trus de vivisecie, dispozitiv
de nregistrare, pens cardiografic Marey, kimograf.
Pensa cardiografic Marey este format din urmtoarele componente:
1. un suport cu care se fixeaz pe planeta de plut;
2. doua valve concave, opozante, care fixeaz cordul; una din valve este fix iar cealalt este
mobil n plan orizontal.
Tehnica de lucru: Se spinalizeaz broasca. Se fixeaz broasca pe planeta de plut. Se
descoper cordul i se izoleaz din sacul pericardic. Se plaseaz cordul ntre valvele pensei
cardiografice. Se observ micarea valvei mobile care antreneaz penia nscriitoare. Se aduce
penia nscriitoare lng dispozitivul de nregistrare al kimografului.
Se nscrie un traseu format dintr-o serie de deflexiuni, separate de segmente orizontale (diastola
general).
Inscrierea grafic a extrasistolei la broasc
Activitatea mecanic a miocardului (sistola i diastola) poart numele de revoluie cardiac.
Principiu: dac miocardului i se aplic un stimul n perioada de relaxare (diastola), acesta va
rspunde prin contracie, care va fi din ce n ce mai ampl cu ct momentul de aplicare al
stimulului se afl spre sfritul diastolei.
Stimulul care determin o contracie suplimentar poate proveni dintr-o anumit zon a
miocardului care poarta numele de focar ectopic. Contracia suplimentar se numete
extrasistol. Extrasistola este urmat de perioada postextrasistolic.
Materiale necesare: materialele necesare nscrierii cardiogramei, bobina de inducie,
electrozi, semnal electric, ntreruptor.
Tehnica de lucru: Se pregtete broasca la fel ca pentru cardiograma. Se realizeaz circuitul
electric (secundarul bobinei de inductie se cupleaz cu bornele de excitare ale pensei
cardiografice Marey). Se nregistreaz cardiograma (2-3 deflexiuni martor) dup care se aplic

47

socuri martor. Momentul de aplicare al stimulului este marcat de o peni semnal. In funcie de
momentul de aplicare (sistol i diastol) se pot obine sau nu contracii.
Stimulul aplicat n timpul sistolei nu este urmat de nici un rspuns; dac stimulul este
aplicat n timpul diastolei, acesta este urmat de o contracie suplimentar. Urmtoarea contracie
apare dup o perioad mai mare de timp (perioad postextrasistolic). Amplitudinea extrasistolei
depinde de momentul aplicrii excitantului fa de durata diastolei.

1 Stimul normal
2, 3 Stimul n perioada refractar absolut
4, 5, 6 Stimul n perioada refractar relativ

Figura VII.2.Extrasistola

48

Rezultate:

Observaii i discuii:

49

Lucrarea practic nr. 8


Metoda electrocardiografic: principii, detalii tehnice (aparatur, condiii tehnice, derivaii)
Cordul prezint trei tipuri de activiti:
- mecanic- cardiogram;
- electric- electrocardiogram;
- acustic- fonocardiograma.
Electrocardiograma (ECG)- reprezint nregistrarea grafic pe axele de derivaie a
proieciei vectorilor activitii electrice a inimii.
Fibra cardiac are activitate electric (depolarizare i repolarizare). Fenomenele electrice
sunt determinate de stimuli care pleac de la nivelul sistemului excito-conductor al cordului.
Acestea preced i determin fenomenele mecanice. Activitatea electric a miocardului produce
un cmp electric care poate fi captat cu ajutorul unor electrozi. Intensitatea cmpului electric
poate fi msurat i poate fi reprezentat grafic n timp. Graficul obinut poart numele de
electrocardiogram, iar aparatul utilizat se numete electrocardiograf.
Condiii tehnice de nregistrare a electrocardiogramei
- se plaseaz pacientul n decubit dorsal, relaxat fizic i psihic;
- temperatura mediului ambiant trebuie s fie 20C;
- se degreseaz tegumentul cu alcool la locul unde urmeaz s fie plasai electrozii;
- pe electrozi se plaseaz gel adeziv pentru a se realiza o mai bun conductivitate;
- se plaseaz electrozii pe zone musculare, evitndu-se regiunile osoase i cele cu pr;
- se fixeaz electrozii cu benzi elastice;
- se calibreaz i se etaloneaz aparatul (1 mV corespunde la 10 mm);
- se fixeaz viteza de derulare a hrtiei (25 mm/s sau 50 mm/s);
- se nscrie traseul electrocardiografic.
Derivaia reprezint raportul spaial dintre cei doi electrozi plasai n contact cu subiectul
ntre care se culege diferena de potenial. O electrocardiogram standard este constituit din 12
derivaii obinute prin plasarea a doi electrozi pe antebrae, doi electrozi pe gambe i sase n
puncte bine stabilite n regiunea precordial: 6 derivaii ale membrelor (3 standard i 3 unipolare
ale membrelor) i ase derivaii precordiale. Derivaiile pot fi bipolare atunci cnd cei doi
electrozi sunt activi unul pozitiv i cellalt negativ (cele 3 derivaii standard ale membrelor)
i unipolare atunci cnd un electrod este activ (ntotdeauna pozitiv) i al doilea este indiferent
50

(plasat la un potenial constant). Sistemul celor 12 derivaii formeaz dou planuri perpendiculare
unul pe cellalt. Primul, denumit planul frontal, este constituit din cele ase deviaii ale
membrelor iar cel de-al doilea, planul transversal, este format din deviaiile precordiale. Fiecare
deviaie reprezint o ax ntr-unul din cele dou planuri pe care inima proiecteaz vectorul
activitii sale electrice. Fiecare derivaie descrie activitatea electric a inimii dintr-un punct de
vedere unic.
Triunghiul lui Einthoven. Din punct de vedere electric, trunchiul i membrele pot fi
reprezentate sub forma unui triunghi echilateral avnd unul dintre vrfuri orientat n dreptul
abdomenului i celelalte dou la nivelul umerilor. Deoarece corpul uman este un volum
conductor, un electrod ataat la nivelul unui bra este echivalent electric cu o conexiune la nivelul
umrului, iar un electrod ataat la nivelul piciorului este echivalent cu o conexiune la nivelul
abdomenului.
Pornind de la acest principiu se obin cele trei derivaii standard (figura VIII.1) bipolare
ale membrelor:
DI : antebra drept (-), antebra stng (+)
DII: antebra drept (-), gamba stng (+)
DIII: antebra stang (-), gamba stng (+)

Fig.VIII.1. Amplasarea electrozilor n derivaiile standard


Derivaiile unipolare ale membrelor (figura VIII.2) (a V-a reprezint voltaj amplificat)
- aVR antebra drept
51

- aVL antebra stang


- aVF gamba stng
Pentru fiecare din cele ase derivaii potenialul electric 0 (de referin) se obine prin
cuplarea celor 2 electrozi din triunghiul lui Einthoven, prin rezistene de 5 k (borna central
Wilson).

Figura VIII.2. Amplasarea electrozilor n derivatiile unipolare ale membrelor


Derivaiile precordiale
V1: parasternal dreapta, spaiul intercostal IV
V2: parasternal stnga, spaiul intercostal IV
V3: la mijlocul distanei dintre V2 i V4
V4: linia medio-clavicular, spaiul intercostal V
V5: linia axilar anterioar, spaiul intercostal V
V6: linia medioaxilar, spaiul intercostal V
Pentru fiecare din cele ase derivaii (figura VIII.3) potenialul electric 0 (de referin) se
obine prin cuplarea celor 3 electrozi din triunghiul lui Einthoven, prin rezistene de 5 k (borna
central Wilson).

52

Figura VIII.3.Amplasarea electrozilor n derivaiile precordiale

Undele ECG

Figura VIII.4.Traseul electrocardiografic

Electrocardiograma reprezint de fapt o nregistrare a vectorului electric al inimii la un


anumit moment dat. ECG se nregistreaz pe hrtie special pentru aprecierea corect a
amplitudinii i duratei undelor. Astfel, pe vertical, un mm reprezint o amplitudine a undei de
0.1 mV iar pe abscis, un mm reprezinta un interval de timp de 0.04 sec. (5 mm = 0.2 sec). Un
traseu electrocardiografic normal este alcatuit din urmtoarele unde i segmente caracteristice
(figura VIII.4):
53

Unda P - pozitiv, monofazic, amplitudine 0.1-0.2 mV, durat 0.1 sec. Corespunde
depolarizrii atriale.
Intervalul PQ - cuprinde unda P i segmentul PQ. Durata: 0.12-0.2 sec. Corespunde
depolarizrii atriale i conducerii atrio-ventriculare.
Complexul QRS - trifazic, este alctuit din dou unde negative de polaritate mic (Q i S)
i o component pozitiv (R) de amplitudine mare. Amplitudine: 1-2 mV, durat: pn la 0.1 sec.
Corespunde depolarizrii ventriculare.
Segmentul S T- corespunde repolarizarii ventriculare lente (0.35- 0.4 sec).Este
izoelectric.
Unda T- pozitiv, monofazic, asimetric, de amplitudine i durat dubla fa de unda P.
Corespunde repolarizarii ventriculare rapide.
Unda U apare foarte rar si reprezinta repolarizarea fibrelor Purkinje.

54

Rezultate:

Observaii i discuii:

55

Lucrarea practic nr.9.


Ascultaia zgomotelor cardiace
Zgomotele cardiace sunt vibraii generate n cursul unui ciclu cardiac, de fluxul de snge
care interacioneaz cu pereii cardiaci, aparatul valvular i vasele mari (aorta i artera
pulmonar).
Ascultaia zgomotelor cardiace reprezint cea mai important etap a examenului obiectiv
al aparatului cardio-vascular. Ascultaia se poate realiza direct sau indirect cu stetoscopul. Pentru
a obine maximum de informaii prin ascultaia cordului trebuie respectate cteva reguli:
- se evit zgomotele puternice n ncperea unde se realizeaz manevra;
- atenia examinatorului trebuie concentrat asupra acelei pri a ciclului cardiac n care
evenimentul sonor poate aprea;
- sa se efectueaze concomitent cu palparea pulsului arterial pentru a plasa corect n sistol sau
diastol zgomotele sau suflurile identificate.
Pentru fiecare zgomot cardiac se urmarete: intensitatea, tonalitatea i timbrul. Exist
patru focare de ascultaie maxima: mitral, tricuspidian, aortic i pulmonar (figura IX.1).

Figura IX.1. Aria cardiac i focarele de ascultaie maxim pentru valvele cardiace
(A aort, P pulmonar, T - tricuspida, M- mitrala).

56

Zgomotul I cardiac (sistolic)


Este generat de asocierea dintre componenta muscular - contracia ventricular (mai ales
a ventriculului stng care are o mas muscular superioar celui drept);
- nchiderea valvelor mitrala i tricuspid;
- distensia marelor vase.
Ascultaia: Zgomotul I se ascult pe toat aria cardiac, cu focare de intensitate maxim:
- pentru mitral: n spaiul V intercostal stng, pe linia medio-clavicular;
- pentru tricuspid: la baza apendicelui xifoid.
Caracteristici: este un zgomot intens, de tonalitate joas, prelungit.
Durata: 0.08-0.15 sec, frecventa: 35-100 Hz.
Zgomotul II cardiac (diastolic)
Este generat de nchiderea sigmoidelor aortice i pulmonare.
Ascultaia: Zgomotul II se ascult pe toat aria cardiac, cu focare de intensitate maxim:
- pentru valva sigmoid pulmonar n spaiul II intercostal stng, la 2 cm de
marginea sternului;
- pentru valva sigmoid aortic n spaiul II intercostal drept, la 2 cm de marginea sternului.
Caracteristici: este un zgomot scurt i nalt.
Durata 0.07-0.1 sec, amplitudinea: 100-150 Hz, timbrul: clar, lovit.
Intre zgomotul I i zgomotul II este mica tcere iar ntre zgomotul II i zgomotul I este
marea tcere.
FCG

EKG
Figura IX.2.Fonocardiograma (FCG) n raport electrocardiograma (ECG)
Zgomotul III cardiac (protodiastolic)
Este generat de vibraia pereilor ventriculari n timpul umplerii ventriculare rapide.
Ascultaie, caracteristici: este un zgomot slab, perceput doar la copiii care au un perete toracic
subire i la sportivii de performan care au un perete ventricular bine reprezentat.
57

Zgomotul IV cardiac (presistolic)


Este generat de vibraia pereilor ventriculari n timpul sistolei atriale.
Ascultaie, caracteristici: este un zgomot foarte slab, inaudibil cu stetoscopul.
Fonocardiograma (figura IX.2) reprezint graficul nregistrrii zgomotelor cardiace.
Pulsul arterial
Definiie: pulsul arterial reprezint expansiunea ritmic a pereilor arteriali, ca urmare a
evacurii sngelui n artera aort n timpul fazei de ejecie a sistolei ventriculului stng. Pulsul
arterial este un fenomen parietal. Viteza de propagare a undei pulsului la nivelul aortei este de
aproximativ 6 m/s, iar la nivelul arterei radiale este de 10 m/s.
Pulsul este perceput ca o senzaie de lovitur uoar dac se comprim adecvat artera de
un plan osos.
Pulsul poate fi apreciat palpatoriu sau poate fi nregistrat cu ajutorul sfigmografului.
Sfigmogram reprezinta graficul obtinut in urma inregistrarii pulsului arterial.
Pulsul arterial aortic central se exprim printr-o und cu ascensiune rapid spre un vrf
rotunjit (figura IX.3.). Unda anacrot reprezint poriunea ascendent a sfigmogramei i apare
chiar naintea atingerii presiunii maxime a fluxului aortic.

Figura IX.3. Sfigmogram


Panta descendent (unda dicrot), mai putin abrupt, prezint o deflexiune ascuit,
sincron cu nchiderea valvelor aortice, denumita incizur. Pe msur ce unda pulsatil se
transmite spre periferie, panta ascendent iniial devine mai abrupt iar unda anacrot devine
mai tears. Pulsul arterial poate fi palpat n toate zonele unde arterele pot avea un traiect
superficial: artera carotid, artera temporal, artera brahial, artera radial, aorta abdominal (la
persoanele cu perete abdominal subire), artera femural, artera poplitee, artera pedioas.
Determinarea presiunii (tensiunii) arteriale
Definiie: Presiunea arterial (PA) reprezint fora pe care sngele o exercit asupra
pereilor arteriali. PA este determinat de fora de contracie a ventriculului stng, calitile
58

pereilor arteriali i ale sngelui, rezistena arterial periferic. Tensiunea arterial (TA) este fora
egal i de sens opus cu PA i reflect fora exercitat de pereii arteriali destini de jetul de snge
asupra coloanei de snge. In cursul unui ciclu cardiac, PA oscileaz ntre o valoare maxim presiune sistolic (din timpul sistolei ventriculare) i o valoare minim- presiune diastolic (din
timpul diastolei generale).
PA (TA) se poate determina prin metoda direct sau metode indirecte.
1. Metoda direct const n puncionarea arterei (carotid) i racordarea acului la
un manometru. In practica medical se efectueaz cateterismul vascular.
2. Metodele indirecte sunt cele mai utilizate n practica medical.
Valorile PA determinate n stare de repaus sunt un indicator al dinamicii circulaiei.
Principiu: PA se echilibreaz cu o presiune exterioar (TA) de valoare cunoscut.
Materiale necesare: tensiometru, stetoscop.

Figura IX.4.Tipuri de tensiometre: electronic (a), cu capsul aneroid (b),


cu manometru cu mercur (c).
Un tensiometrul (figura IX.4) este alctuit:
- dintr-o manet peneumatic (n care se poate introduce aer, extensibil nspre bra i
inextensibil spre exterior);
- o par din cauciuc prevzut cu o supap, cu ajutorul crora se introduce aer n manet;
- manometru (electronic, aneroid sau cu mercur).
Tehnica de lucru: exist dou metode de determinare a PA:
a. Metoda palpatorie (Riva-Rocci): permite sesizarea doar a presiunii arteriale maxime
(sistolice). Drept reper se foloseste pulsului arterial. Se utilizeaz manometrul cu mercur (figura
IX.4.c) sau tensiometrul cu capsul aneroid (figura IX.4.b). Se fixeaz maneta pneumatic a
tensiometrului pe bra, deasupra plicii cotului. Se palpeaza pulsul arterial la nivelul arterei
radiale. Se nchide supapa i se introduce aer n manet pn nu se mai percepe pulsul (se
59

consider c s-a ajuns la o valoare superioar valorii sistolice a PA). Se decomprim uor
maneta (3 - 5 mm/sec) pn cnd se percepe prima und pulsatil. Acest moment indic pe scala
manometrului valoarea presiunii sistolice (maxima). In schimb, metoda nu are acuratee n
msurare la valori mici ale TA.
Valori normale: PA sistolic: 115 mmHg pn la 139 mmHg.
b.Metoda ascultatorie:
Principiu: curgerea laminar nu produce vibraii ale peretelui arterial sesizabile prin
intermediul stetoscopului. Comprimarea arterei brahialetransforma curgerea laminar in curgere
turbulent care genereaz vrtejuri, producndu-se astfel zgomotele Korotkov.
Se utilizeaz tensiometrul cu mercur sau tensiometrul cu capsul aneroid i stetoscopul.
Se fixeaz maneta pneumatic a tensiometrului pe bra, deasupra plicii cotului. Se
repereaz pulsul arterial n anul pulsului. Se nchide supapa i se introduce aer n manet pn
nu se mai percepe pulsul la artera radial (se consider c s-a ajuns la o valoare superioar valorii
sistolice a PA). Se aplic stetoscopul la nivelul plicii cotului sub marginea inferioar a manetei
pneumatice (figura IX.5). Se decomprim uor maneta (3- 5 mm/sec) pn cnd se percepe
primul zgomot Korotkov care ne indic pe scala manometrului valoarea presiunii arteriale
sistolice.

Figura IX.5.
Se continu evacuarea aerului din maneta pneumatic, timp n care zgomotele Korotkov i
modific intensitatea, pn cnd nu se mai percepe nici un zgomot. Ultimul zgomot care se
percepe corespunde presiunii arteriale diastolice (minima).
Valori normale: 115/75 mmHg pn la 139/89 mmHg(la adult).

60

Rezultate:

Observaii i discuii:

61

Lucrarea practic nr.10.


Fiziologia respiraiei
Respiraia reprezint ansamblul fenomenelor fizice, chimice i biologice prin care se
asigur schimburi de gaze ntre organism i mediu, necesare proceselor de respiratie tisular.
Etapele respiraiei pulmonare:
1. ventilaia pulmonar asigur vehicularea gazelor respiratorii de la i spre membrana
alveolo-capilar
2. hematoza pulmonar presupune traversarea de ctre O2 i CO2 a membranei alveolocapilare
3. transportul sanguin al gazelor respiratorii de la nivel alveolar pna la esuturi si invers
4. respiratia tisular reprezint utilizarea O2 i eliminarea CO2 rezultat din metabolism la
nivel celular
Ventilaia pulmonar este un proces dinamic, ciclic de introducere i expulzie a aerului din
cile respiratorii.
Aparatul respirator este evaluat printr-un examen obiectiv care cuprinde urmtoarele etape:
1. inspecia se realizeaz pe toracele dezgolit al pacientului i poate oferi elemente
importante pentru diagnostic.
2. palparea ofer informaii despre transmiterea vibraiilor vocale la nivelul toracelui
generate n laringe la pronunarea cu voce tare a unui sunet cu multe consoane (de
exemplu: 33).
3. percuia apreciaz sonoritatea pulmonar.
4. ascultaia - se realizeaz cu ajutorul stetoscopului.
Ascultaia zgomotelor respiratorii
Reprezint metoda cea mai important de examinare a aparatului respirator. Se poate
realiza direct (prin aplicarea urechii pe toracele pacientului) i indirect (mediat instrumental, cu
ajutorul stetoscopului).
Ascultaia se efectueaz comparativ, ncepnd cu regiunile apicale, apoi descendent pe
faa posterioar a toracelui, anterioar i n regiunile axilare.
Normal, la ascultaia toracelui se percep dou zgomote:
- zgomotul laringo-traheal (sau suflul tubar fiziologic);
- murmurul vezicular.
62

1. Zgomotul laringo-traheal
Este produs de trecerea aerului n cursul inspirului i expirului prin orificiul ingustat al glotei.
Aria de ascultaie: laringe, trahee, manubriul sternal, primele patru vertebre toracice i zona
interscapulo-vertebral.
Caracteristici: zgomot cu caracter suflant, intens, de tonalitate joas i timbru aspru, ce se
ascult n ambii timpi ai respiraiei. Intensitatea zgomotului este maxim la nivelul laringelui i
scade pe msura progresiei ctre bronhiile cu calibru mic.
Semnificaie clinic: ascultaia zgomotului n alte arii toracice.
2. Murmurul vezicular
Este produs de trecerea aerului prin sfincterul bronhiolelor supralobulare.
Aria de ascultaie: toat aria toracic, dar mai intens n axil i subclavicular i mai aspru
interscapular. Se percepe mai bine la persoanele slabe (cu perete toracic subire) i atenuat la
obezi. Este mai intens i mai aspru la copii i are o intensitate mai redus la femei i btrni.
Caracteristici: zgomot de intensitate redus, cu timbrul dulce, aspirativ, continuu.
Semnificaie clinic: modificrile patologice ale murmurului vezicular sunt reprezentate de
respiraia nsprit, diminuarea murmurului vezicular, expiraia prelungit i respiraie sacadat.
Patologic, la ascultaia toracelui se disting zgomote respiratorii supraadugate care aparin
dup origine la dou categorii:
- zgomote produse la nivelul conductelor respiratorii, alveole sau cavitii pulmonare,
denumite raluri;
- zgomote produse n cavitatea pleural - frecturi i zgomote pleurale.
Volume i debite pulmonare
Volumele i debitele pulmonare msoar dimensiunea pompei pulmonare.
Capacitatea vital (CV) reprezint capacitatea maxim de aer care poate fi mobilizat ntr-o
singur micare ventilatorie, de la poziia expiratorie maxim la poziia inspiratorie maxim. CV
are 3 subdiviziuni:
1. Volumul current (VC )- este volumul de aer inspirat i expirat n cursul unui ciclu
ventilator de repaus (de la poziia expiratorie de baz la poziia inspiratorie de baz) (500 ml).
2. Volumul inspirator de rezerv (VIR )- este volumul maxim de aer care mai poate fi
introdus in plamani dupa un inspir de repaus (de la poziia inspiratorie de repaus la poziia
inspiratorie maxim) (pn la 3000 ml).

63

3. Volumul expirator de rezerv (VER) ) - este volumul maxim de aer care mai poate fi
expirat de la sfritul unui expir de repaus (de la poziia expiratorie de repaus la poziia
expiratorie maxim) (pn la 1200 ml).
CV = VC + VIR + VER
Capacitatea rezidual funcional (CRF) sau volumul gazos intratoracic reprezint
volumul de aer care se gsete n plmni la sfritul unei respiraii normale.
Volumul rezidual (VR) este volumul de gaz care rmne n plmni la sfritul unui expir
complet (pn la 1200 ml).
Capacitatea rezidual funcional (CRF) reprezint suma dintre volumul rezidual i
volumul expirator de rezerv.
CRF= VR + VER
Capacitatea inspiratorie (CI) reprezint volumul maxim de aer care poate fi inspirit
plecnd de la sfritul unui expir de repaus. CI reprezint suma dintre volumul current i volumul
inspirator de rezerv.
CI = VC + VIR
Capacitatea pulmonar total (CPT) reprezint volumul de gaz coninut n plmn la
sfritul unui inspir complet.
CPT= VR + CV; CPT = CRF + CI
Volumul expirat maxim pe secund (VEMS) reprezint volumul de aer expulzat n prima
secund al unui expir forat care succede un inspir forat. Valoarea normal a VEMS este 75-80%
din valoarea CV.
VEMS/CV x 100 = 75%
Metode de determinare a volumelor pulmonare
Spirografia este metoda cea mai uzual pentru msurarea capacitiii vitale i a
subdiviziunilor acesteia (figura X.2). n urma metodei spirografice se obine o spirogram.

64

Figura X.1. Spirogram

65

Rezultate:

Observaii i discuii:

66

Lucrarea practic nr.11


Proprietile fizice ale urinei
Primul produs biologic care a fost analizat n vederea stabilirii unui diagnostic a fost
urina. Inc din antichitate, medicii tiau s examineze urina i pe baza caracterelor sale fizice
stabileau diagnosticul i chiar prognosticul bolilor. In condiii normale, la nivelul rinichiului se
elaboreaz o urin care reflect starea funcional a organismului.
Urina se formeaz la nivelul nefronului. Urina primar apare la nivelul glomerulului n
urma procesului de filtrare a plasmei (are aceeai compoziie cu plasma sangvin, dar nu conine
proteine i lipide). Pe parcursul sistemului tubular, urina primar sufer procese de secreie,
reabsorbie, acidifiere, diluie i concentraie, n urma crora se formeaz urina definitiv, un
lichid biologic de excreie, cu o compoziie complex.
1. Culoarea urinei normale este galben-pai sau galben rocat. Culoarea este mai inchis
atunci cnd este foarte concentrat sau dup consumul unor medicamente (piramidon,
antinevralgice, tetraciclina, albastru de metilen, etc.). i o serie de alimente ca: sfecla, varza roie,
bomboanele colorate, etc. pot s modifice culoarea normal a urinei.
2. Mirosul urinei este specific: fad, de migdale amare, datorit acizilor volatili. In
infeciile urinare care duc la fermentarea urinei, mirosul este caracteristic de amoniac. Unele
alimente (hrean, usturoi) sau medicamente aromate care se elimin prin urin pot sa-i imprime
acesteia variate mirosuri. Urina bolnavilor de diabet poate mirosi a acetona, iar a alcoolicilor a
alcool.
3. Aspectul (transparena) este caracteristic urinei proaspete; dup cteva ore de la
miciune poate cpta un aspect tulbure, mai ales daca este pstrat la temperaturi sczute.
4. Cantitatea (volumul) de urin din 24 de ore (diureza) la un adult variaza de la 1-1,5
litri.
Variaii ale diurezei:
-diurez redus: n sezonul cald, dup un puseu febril, dup vrsturi, diaree, transpiraii intense
(deshidratare), dup fumat sau consum redus de lichide, n ocul produs de hemoragii mari, arsuri
sau traumatisme, n bolile care rein apa n organism (insuficien cardiac, ciroz hepatic); o
diurez sczut sub 500 ml este denumit oligurie. O diurez sub 150 ml/24h este denumit
anurie.

67

-Diurez crescut: n condiii de frig, emoii, tratamente cu diuretice, consum mare de lichide, de
alimente srate, de alcool, glomerulonefrit, scleroz renal, consumul exagerat de lichide,
diabetul zaharat netratat; o cantitate de urin de peste 2 litri este denumit poliurie.
Exist un ritm biologic de eliminare a urinei, eliminarea fiind mai mare n timpul zilei i mai
mica n timpul noptii (nicturie). Inversarea acestui ritm indic o patologie renal.
5. Densitatea (greutatea specific) urinei este mai mare dacat a apei (care este de 1000).
Valori normale ale densitii: 1015-1030. Se determin cu ajutorul urodensimetrului sau al
analizorului de urini (figura XI.1).

Figura IX.1. Urodensimetru (a) i analizor automat de urini (b)


In condiii de hiperhidratare, densitatea poate ajunge la valoarea de 1001. O densitate
urinar se consider anormal atunci cnd examenele repetate arat valoarea sub 1012.
In condiii de deshidratare, densitatea urinar poate crete peste valoarea de 1030.
Modificri ale densitii urinei:
- hipostenurie: concentraia urinei < osmolaritatea plasmei;
- izostenurie: concentraia urinei = osmolaritatea plasmei;
- hiperstenurie: concentraia urinei > 1035.
Densitatea urinar se determin fie prin intermediul stripurilor (bandelete) urinare (figura
XI.2.) fie al analizoarelor de urini.

Figura XI.2. Stripuri urinare


6. pH-ul urinar sau reacia urinei arat dac urina este acid sau alcalin.
Determinarea pH-ului se face cu ajutorul stripurilor urinare sau al analizorului de urini.
68

Valori normale: pH= 5.0-7.0


- urina este acid avnd pH-ul cuprins ntre 5,5 i 6,5: dup o alimentaie bogat n carne i
medicamente acide (sare de lmie, vitamina C)
- urina devine alcalin (>7.0) dup un regim alimentar vegetarian, dup medicamente alcaline
(bicarbonat, ap mineral) sau dup infecii ale aparatului urinar.
Examenul sumar de urin
Principiu: const ntr-un grup de analize care se lucreaz din prima urin de diminea. n
cadrul acestui examen se determin densitatea, pH-ul i civa parametri biochimici ca: glucoza,
proteinele, urobilinogenul (figura XI.3).
Materiale necesare: un eantion de 10 ml de urin recoltat din prima miciune de
diminea, din jetul mijlociu.
Valori normale: n mod normal glucoza i proteinele sunt absente iar urobilinogenul este
prezent doar ca urme.
Semnificaia clinic: Examenul sumar de urin aduce informaii n diferite boli ale
rinichiului i ale cilor urinare (prezena de proteine), n diabet (prezena de glucoz, uneori i de
aceton), n diverse forme de icter (urobilinogen crescut n hepatita acut, pigmeni biliari
prezeni n icterul mecanic).

Figura IX.3. Un rezultat de sumar de urin de la analizorul de urini.


Clearance-ul renal
Definiii: Clearance-ul reprezint numrul de ml de plasm epurai de o anumit
substan n unitatea de timp.
Clearance-ul unei substane (x) se calculeaz prin produsul dintre volumul urinar pe
minut i concentraia urinar a substanei (x), mprit la concentraia plasmatic a aceleiai
substane, conform formulei:
Cx = Ux V/Px
69

Unde C- clearance/ul (ml/min)


V- volumul urinar (ml/min)
U- concentraia urinar a substanei x (mg/ml)
P- concentraia plasmatic a substanei x (mg/ml)
Clearance-ul ureei este un test care evideniaz precoce o disfuncie renal. Ureea
sangvin ajunge prin procesul de filtrare glomerular n urina primar. Ulterior este reabsorbit
parial la nivelul tubilor uriniferi, iar restul se elimin prin urin. O eventual leziune la nivel
glomerular sau tubular scade capacitatea de epurare a plasmei de uree.
Principiu: se determin concentraia ureei n plasm i n urin concomitent cu volumul
urinar eliminat pe o anumit perioad de timp.
Valori normale: la o diurez de cel puin 2 ml/min clearance-ul ureei este de aproximativ
75 ml/min.
Proba Addis
Principiu: este un test care apreciaz cantitativ elementele celulare din urin prin
numrarea acestora la microscop.
Materiale necesare: urin, microscop, centrifug, camer de numrat (Burker), pipete
Pasteur.
Tehnica de lucru: Se determin n urina din 24 de ore recoltat n dou etape (8-20 i 208). Se msoar i se noteaz valoarea diurezei. Urina recoltat n cele dou etape se
omogenizeaz. Se pipeteaz n dou eprubete cte 10 ml de urin i se centrifugheaz 5 minute la
1500-1800 turaii/minut. Se obine un sediment de 0.2 ml. Se arunc supernatantul i se las n
eprubete cte 1 ml. Se omogenizeaz coninutul rmas. Se aspir o pictur cu o pipet Pasteur
i se ncarc camera de numrat. Se las n repaus 5-10 minute. Se numr hematiile, leucocitele
i cilindrii.
Valori normale
Elementul numrat
Eritrocite
Leucocite
Cilindri

Adult
< 500 000/24 h
1-1.8 milioane/24 h
<5 000/24 h

Copil
< 450 000/24 h
9 000- 720 000/24 h
< 6 500/24 h

Proba de diluie i concentrare a urinei


Metodele utilizate n acest scop au la baz faptul c un rinichi sntos are capacitatea de a
produce o urin mai diluat sau mai concentrat, n funcie de gradul de hidratare al
organismului.
70

Principiu: se urmrete volumul i densitatea urinii n dou situaii: de ncrcare hidric i


n regim de deshidratare.
Tehnica de lucru:
1. Proba de diluie. Bolnavul i golete vezica urinar, dup care bea n decurs de 30 de
minute aproximativ 1500 ml de ap sau ceai slab nendulcit. Din 30 n 30 de minute, timp
de 4 ore, se recolteaz probe de urin n vase separate; fiecrei probe de urin i se
determin volumul i densitatea.
2. Proba de concentraie. Poate fi efectuat n continuarea probei de diluie sau
independent. Se ncepe prin administrarea unui prnz consistent constnd n alimente
solide i fr ingestie de lichide. La intervale de 2 ore, timp de 8 ore, se evacueaz vezica.
Se msoar la fiecare prob volumul i densitatea. Tot ce pacientul urineaz n
urmtoarele 12 ore se colecteaz ca prob unic. Se msoar volumul i densitatea.
Interpretarea rezultatelor
1. Proba de diluie: un rinichi sntos este capabil s elimine ntreaga cantitate de lichide ingerat
(sau chiar mai mult), iar densitatea urinei ajunge la valori de 1002-1001.
2. Proba de concetrare: capacitatea funcional normal a rinichiului poate fi afirmat n cazul
unui volum urinar sub 800 (300-750 ml) i o densitate de minim 1025 la cel puin una din
probe.
Este de preferat ca aceast prob s fie corelat cu alte teste ale evalurii funciei renale.

71

Rezultate:

Observaii i discuii:

72

Lucrarea practic nr.12.


Recoltarea sucurilor digestive
Digestia reprezint totalitatea proceselor mecanice, fizice i chimice pe care le sufer
alimentele de la introducerea lor n cavitatea bucal i pn la transformarea lor n produi simpli,
absorbabili.
Transformrile chimice se produc sub aciunea enzimelor elaborate de ctre diferitele
segmente ale tubului digestiv i glandele anexe ale acestuia, iar cele mecanice au loc datorit
contraciei musculaturii masticatorii i a pereilor tubului digestiv.
In funcie de principiile alimentare asupra crora acioneaz, enzimele se clasific n:
1. glicolitice (transform glucidele complexe n monozaharide)
2. proteolitice (transform proteinele n aminoacizi)
3. lipolitice (transform lipidele n acizi grai i glicerin).
Dup sediul transformrilor, digestia se mparte n:
-digestia bucal
-digestia gastric
-digestia intestinal
Digestia bucal
Prin masticaie se produc transformrile mecanice ale alimentelor (tiere, sfrmare,
triturare, mpregnare cu saliva) iar prin aciunea enzimelor alimentele sunt procesate chimic.
Saliva este produsul de secreie a celor 3 perechi de glande salivare mari (parotid,
sublinguale i submaxilare) i a glandelor accesorii prezente n mucoasa cavitii bucale.
Amestecul secreiilor acestor glande formeaz saliva mixt.
Saliva este un lichid filant, incolor , cu un pH uor bazic.
Compoziia chimic a salivei:
- 98,5-99% ap
- 1-1,5% reziduu uscat (substane organice i anorganice)
a. substane organice: mucina, celule epiteliale descuamate de la nivelul mucoasei
bucale, leucocite, lactoferin, enzime (ptialina i lipaza lingual).
b. substane anorganice: sulfai, bicarbonai, cloruri, fosfai de Na, K, Ca, Mg
- gaze: CO2, O2, N2

73

Rolurile salivei:
- digestiv datorit enzimelor pe care le conine (amilaza salivar i lipaza lingual)
- dizolvarea substanelor sapide
- protector (prin lizozim, IgA)
- meninerea umed a mucoasei bucale
- excretor (uree, acid uric, virusuri, substane toxice )
- n vorbire
-reparator prin factori care stimuleaz creterea epidermal.
Exist mai multe metode de recoltare a salivei la om:
- metoda Holmes se penseaz nasul cu o pens nazal astfel nct subiectul este obligat s aib
o respiraie oral; uscaciunea mucoasei faringiene reprezint un stimul fiziologic pentru secreia
salivar;
- stimularea secreiei salivare se poate realiza prin introducerea n cavitatea bucal a unei buci
de parafin;
-stimularea secreiei salivare parotidiene se poate realiza prin aplicarea de 2-3 picturi de lmie
pe fa dorsal a limbii.
Aciunea digestiv a amilazei salivare
Amilaza salivar (ptialina) este o enzim amilolitic care acioneaza asupra amidonului
preparat (copt sau fiert). Are aciune maxim la 37- 40C i la pH neutru. Ii nceteaz activitatea
la pH=6. Este distrus prin fierbere i inactivat prin congelare. Amidonul, sub aciunea ptialinei
trece prin mai multe stadii intermediare de degradare: amilodextrine, eritrodextrine i
acrodextrine i maltoz.
Produii intermediari de degradare ai amidonului se pun n eviden prin urmrirea
reaciilor de culoare pe care acesia le dau cu solutia Lugol: amidon (albastru), amilodextrine
(albastru violet), eritrodextrine (rou), acrodextrine i maltoz (incolor).
Termolabilitatea ptialinei
Principiu: punerea n eviden a denaturrii ptialinei prin fierbere
Materiale necesare: saliv, soluie amiloz 1%, soluie Lugol, eprubete, baie de ap, stativ
Tehnica de lucru: Se iau 2 eprubete (E1 i E2); n prima eprubet se adaug saliv fiart,
soluie amiloz 1% i 2 picturi solutie Lugol; se constat apariia culorii albastre. In cea de-a
doua eprubet se adaug saliva nefiart, soluie amiloz 1% i 2 picturi de soluie Lugol; se
observ coninutul acromat al acesteia.

74

Concluzie: prin fierbere a fost distrus amilaza salivara, iar soluia de amiloz nu a suferit
nicio modificare.
Digestia gastric
Digestia gastric este rezultatul aciunii produilor de secreie ai mucoasei gastrice
precum i ai motilitii pereilor gastrici.
Sucul gastric este un lichid incolor, cu pH puternic acid (1,2-1,5).
Compoziia sucului gastric:
- 99% ap
- 1% substane solide
- 0,6% substane anorganice (cationi de Na, K, Mg, anioni de Cl, HPO4, SO4, HCl)
- 0,4% substane organice (mucina, leucocite, factor intrinsec Castle, enzime).
Cea mai important substan anorganic este acidul clorhidric.
Rolurile HCl:
- transform pepsinogenul inactiv n pepsin activ;
- solv colagenul;
- scindeaz zaharoza n glucoz;
- precipit cazeinogenul din lapte;
- dilacereaz proteinele, pregtindu-le pentru aciunea enzimelor proteolitice;
- stimuleaz secreia de secretin la nivelul mucoasei duodenului
- rol antibacterian;
- mpiedic procesele de fermentaie i putrefacie de la nivelul stomacului;
- transform Fe3+ n Fe2+ absorbabil.
Enzimele sucului gastric
1.pepsina este o enzim proteolitic; se secret sub form inactiv de pepsinogen; este activat
de aciditatea sucului gastric, dar i de pepsina format (rol autocatalitic); hidrolizeaz proteinele
mai nti sub form de acid-albumine i apoi sub form de albumoze i peptone.
2. catepsina particip la digestia proteinelor doar la sugar (pH mai puin acid).
3. labfermentul produce coagularea laptelui prin precipitarea cazeinogenului solubil n cazein
i paracazein n prezeta calciului.
4. lipaza lingual se ntlnete n stomacul copilului
5. gelatinaza scindeaz gelatina
Factorul intrinsec Castle are rol n absorbia vitaminei B12, esenial n procesele de
eritropoiez.
75

Pentru explorarea i investigarea funciei gastrice se folosete tubajul gastric.


Tubajul gastric se poate realiza pe stomacul gol sau prin provocarea secreiei gastrice prin
excitani (alimentari: prnzuri de prob, cine de prob sau medicamentoi: histamina, insulina).
Pentru tubajul gastric se utilizeaz 2 tipuri de sonde: Faucher i Einhorn.

Figura XII.1. Tipuri de sonde pentru tubaj gastric i duodenal


Sonda Faucher este groas, are un diametru de 1 cm i o lungime de 75 de cm. Se introduce fie
pe cale oral, fie pe cale nazal (figura XII.1.).
Sonda Einhorn este subire, are un diametru de 0,5 cm i o lungime de 150 cm. Se introduce doar
pe cale nazal. La captul distal prezint o oliv metalic cu ajutorul creia se poate verifica
radiologic poziia sa n tubul digestiv (figura XII.1.).
Tehnica de lucru: Se aaz pacientul pe scaun, se scoate proteza dentar dac este cazul.
Pacientul prinde cu minile o tavi renal i o va ine sub brbie. Se va apleca puin nainte i va
deschide gura. Asistenta, aezat n dreapta va lua sonda umezit i o va introduce pn n
faringe. Pentru a impiedica reflexul de vom, pacientul va respira profund i va face gargar cu
xilin. Bolnavul va fi invitat s nghit, n timp ce sonda este mpins cu blndee. Coninutul
gastric va fi aspirat cu seringa ataat la captul proximal al sondei.
Dozarea aciditii gastrice
Acidul clorhidric din sucul gastric se gsete sub dou forme: liber i combinat (legat de
substane minerale sau proteine). Suma celor dou formeaz aciditatea total.
Principiu: Se neutralizeaz acidul clorhidric cu soluie de NaOH 0,1N, n prezen de
reactiv Topfer-Linossier (conine fenolftalein). Este o reacie colorimetric i cantitativ.
Material necesar: suc gastric filtrat, soluie NaOH 0,1N, biuret, pahar Berzelius, pipete
gradate
76

Tehnica de lucru: Intr-un pahar Berzelius se pun 10ml suc gastric filtrat. Se adaug 3-4
picturi de reactiv Topfer-Linossier. Dac sucul conine HCl liber soluia va capta culoare roie.
Se titreaz cu NaOH 0,1N din biuret pn cnd soluia capt culoarea galben-portocaliu. Se
noteaz volumul de NaOH 0,1N consumat (n1). Se continu titrarea pn la culoarea roz. Se
noteaza volumul de NaOH 0,1N consumat (n2).
n1 reprezint numrul de ml de NaOH 0,1N necesari neutralizrii HCl liber.
n2 reprezint numrul de ml de NaOH 0,1N necesari neutralizrii HCl combinat.
n1 + n2 reprezint numrul de ml de NaOH 0,1N necesari neutralizrii HCl total
Exprimarea aciditii se face n uniti clinice Iaworski.
1 unitate clinic (UCl) reprezint numrul de ml de NaOH 0,1N ce au neutralizat acidul liber sau
total din 100 ml suc gastric.
Calcul
HCl liber = n1 x 10 UCl
HCl combinat = n2 x 10 UCl
HCl total = (n1+n2) x 10 UCl
Valori normale

UCl

g/l

Liber

15

0,9-1

Combinat

25

1-2,5

Total

40

2,5-3,5

Digestia intestinal
Digestia intestinal, ultima etap a digestiei, are loc sub aciunea sucului pancreatic, bilei
i sucului intestinal.
Recoltarea sucului pancreatic se realizeaz prin tubaj duodenal, dimineaa pe nemncate.
Se introduce n tubul digestiv, pe cale oral sau nazal sonda Einhorn (0,5cm diametru i 150 cm
lungime). Evacuarea veziculei biliare se realizeaz prin injectarea pe sonda a unei substane
colagoge (sulfat de magneziu 33%). Pentru creterea debitului secreiei pancreatice se injecteaz
i.v secretin (se urmrete secreia pancreatic 30-40 min i se recolteaz sucul din 10 n 10 min)
sau pancreozimin (1-2 uniti/Kgc i recoltarea se face timp de 60 de min).
Compoziia chimic a sucului pancreatic:
-98,5% ap
-1,5% reziduu uscat
-Substane anorganice (cationi de Na, K, Ca, Mg, anioni bicarbonat)
- Substane organice (enzime)
77

Enzimele sucului pancreatic:


1- proteaze - tripsina (secretat sub form inactiv de tripsinogen; se activeaz n intestin sub
influena enterokinazei);
- chimotripsina (se secret sub form inactiv de chimotripsinogen i se activeaz n
prezena tripsinei);
-elastaza
-carboxipeptidaza (devine activ sub influena tripsinei)
-ribonucleaza i dezoxiribonucleaza.
2. lipaze lipaza pancreatic acioneaz doar asupra lipidelor emulsionate
-colipaza
-fosfolipazele
3. amilolitice amilaza pancreatic care acioneaz asupra amidonului crud.
Dozarea amilazei pancreatice (metoda Wolgemuth)
In mod normal amilaza pancreatic nu se elimin prin urin. In cazul unor afectiuni
pancreatice, concentraia plasmatic a amilazei pancreatice crete foarte mult i este urmat de
apartiia n urin a acesteia (diastazurie).
Importana practic: eliminarea n cantiti mari evideniaz tulburri funcionale
pancreatice.
Materiale necesare: stativ, eprubete, ap distilat, NaCl 7%o, soluie amiloz 1%o, soluie
iod N/50, termostat la 37 C
Tehnica de lucru: In 10 eprubete se realizeaz diluii succesive, conform tabelului.
Nr.
1
eprubetei
urina,ml 1

10

solNaCl
7 , ml
dilutia

1/8

1/16

1/32

1/64

1/128

1/256

1/512

amiloza

Se adauga n toate cele 10 eprubete solutie de amiloza i se termostateaza 30 min. Se


racesc n jet de apa, dupa care se adauga n fiecare cate 2 picaturi de solutie iod N/10.
Prima eprubeta n care se produce colorarea n albastru indica dilutia de urina care nu a
fost capabila sa hidrolizeze amidonul adaugat.
78

Rezultatele se exprima n unitati diastazice sau Wolgemuth (UW).


1UW reprezinta cantitatea de diastaza continuta intr-un ml de urina capabila sa
hidrolizeze 1 ml solutie de amidon.
Numarul UW reprezinta numitorul dilutiei n care a aparut colorarea.
Valori normale: 16-64 UW
Valori crescute apar n pancreatite (acuta, hemoragica).
Compoziia bilei: ap, mucin, sruri biliare, pigmeni biliari, lecitin, colesterol
Recoltarea secreiei biliare se poate face prin tubaj duodenal.
Tehnica: sonda Einhorn se introduce pe cale oral sau nazal pn la diviziunea 40, cu
subiectul n poziie seznd, prin nghiire. Ulterior subiectul este culcat n decubit lateral drept, i
se continu introducerea sondei pn la diviziunea 80, n decurs de 20-30 de minute. Prezena
sondei n duoden se face prin control radiologic. Cu seringa ataat la captul proximal al sondei
se aspir coninutul duodenal. Tubajul clasic se efectueaz n 3 timpi i se urmrete:
-Bila A coledocian: galben nchis, vscos; reprezint un amestec de bil, secreie pancreatic i
intestinal.
-Bila B vezicular: apare la 15-30 min dup administrarea pe sond a 20 ml sulfat de magneziu
33%, care are efect colecistokinetic (determin contracia veziculei biliare, cu eliminarea bilei n
duoden); galben verzui
-Bila C hepatic; galben auriu; reprezint secreia biliar n forma sa iniial (figura XII.2.).

Figura XII.2. Cile biliare.

79

Rezultate:

Observaii i discuii:

80

Lucrarea practic nr.13.


Explorri hormonale n sarcin
Hormonul gonadotrop (HCG)

substituie rolul LH-ului hipofizar asigurnd funcia

corpului galben n cursul gestaiei. Creterea mare iniial st la baza testelor biologice de sarcin
pozitive din primele luni de gestaie.
Proba Galli-Mainini
Principiul metodei: se bazeaz

pe faptul c HCG are efect asemntor cu LH-ul

hipofizar. In urina broatei mascul nu se gsesc spermatozoizi dect n perioada rutului. Apariia
lor poate fi provocat prin injectarea de hormoni gonadotropi.
Material necesar: broasc mascul, seringa cu ac, pipet, microscop, lame, urin de femeie
presupusa nsrcinata.
Tehnica de lucru: Din prima urin de diminea recoltat prin emisie spontan de la
femeia presupus gravid se injecteaz 3-4 ml n sacii limfatici dorsali ai broscoiului, ptrunznd
cu acul subcutanat, paravertebral. Dup 1-2 ore de repaus la ntuneric i la umezeal, se
recolteaz urina cu ajutorul unei pipete din cloaca animalului. Se pun l-2 picturi de urin pe o
lam de sticl i se examineaz la microscopul optic. Daca proba este pozitiv, adic urina
injectat broscoiului provine de la o femeie nsrcinat, n urina animalului, recoltat din cloaca
acestuia, apar spermatozoizi. Reacia este pozitiv n 98% din sarcinile ce depesc 4 sptmni.
Proba este fals negati n sarcinile mai mici de 3 sptmni.
Reacii imunologice
Principiul metodei se bazeaz pe evidenierea HCG n urina femeii gravide, printr-o
reacie imunologic ntre acesta i anticorpii anti-HCG. Urina de cercetat se pune n contact cu
particule de latex ce au fixate pe suprafaa lor anticorpi anti-HCG; dac urina conine HCG
apare reacia de aglutinare.
Materiale necesare: stick-uri, urina de analizat.
Tehnica de lucru: Se folosete urina de diminea, recoltat prin emisie spontan. Bagheta
se introduce n urin pn la jumtatea distanei dintre cei doi markeri, timp de 5 secunde apoi se
aeaz pe o suprafa plan. Rezultatul se citete dup 5 minute (Figura XIII.1). Testul este
negativ dac ntre cei doi markeri apare o singur band colorat. Testul este pozitiv, deci urina
este recoltat de la o femeie gravid, dac pe lng banda de control mai apare nc o band clar
vizibil. Pozitivarea ncepe din sptmna a 4-a.
81

Figura XIII.1. Rezultatul testului de sarcin prin metoda ELIZA.


.

82

Rezultate:

Observaii i discuii:

83

Lucrarea practic nr.14.


Legile reflexelor medulare
La baza activitii sistemulul nervos st funcia reflex prin care se realizeaz legtura
dintre diferitele segmente ale organismului precum i dintre organism i mediul su de via.
Actul reflex reprezint reacia de rspuns a organismului la aciunea unui stimul de
natur endogen sau exogen. Actul reflex are ca substrat anatomic arcul reflex. Aceasta este
constituit din receptor (exteroceptori, interoceptori, proprioceptori), cale aferent

(nervul

senzitiv), centrul reflex (situat la diferite segmente ale sistemului nervos central), cale eferent
(de obicei nervul motor) i organul efector (muchi, gland). Producerea unul reflex necesit
integritatea arcului reflex.
n funcie de mecanismul de producere, reflexele pot fi conditionate i necondionate.
Reflexele necondiionate sunt nnscute (prezente la toi indivizii unei specii) i pot fi:
simple (clipit, tuse, strnut) sau complexe (alimentare, de aprare).
Reflexele condiionate se elaboreaz n cursul vieii. In funcie de numrul sinapselor
prezente pe traiectul arcului reflex, reflexele pot fi monosinaptice i polisinaptice.
Reflexele monosinaptice (miotatice, osteotendinoase): axonul fibrei aferente fac sinaps
direct cu motoneuronul medular, fr nterpunere de neuroni intercalari. Calea de transmitere are
viteza mare de conducere i timp de laten scurt (sub 1-2 msec).
Reflexele polisinaptice se caracterizeaz prin prezena pe traiectul arcului reflex a unuia
sau mai multor interneuroni (neuroni de asociaie). Timpul lor de rspuns este mai lung (8-12
msec) iar amplitudinea rspunsului reflex este proporional cu intensitatea stimulului
declansator.
Legile reflexelor medulare (Pflger)
Principiul metodei: la aplicarea unor excitani cu intensitate gradat crescnd, rspunsul
motor antreneaz din ce n ce mai multe grupe musculare, fenomen datorat existenei neuronilor
de asociaie.
Tehnica de lucru: Se realizeaz o broasc spinal i se suspend de un stativ cu ajutorul
unui crlig introdus n mandibul. Se stimuleaz tegumentul de la nivelul labei posterioare
(soluii acide cu concentraii crescnde).
Se constata c: un excitant slab determina contracia doar a unui muchi (legea
localizrii), unul mai puternic determin contracia muchilor membrului respectiv (legea
84

unilateralitii), creterea intensitii determin iradierea excitaiei i la membrul de partea opus


(legea simetriei), apoi determin participarea unui numr mai mare de grupe musculare (legea
iradierii) iar la excitani extrem de putenici sunt antrenai toi

muchii corpului (legea

generalizrii). Iradierea este caracteristic reflexelor polisinaptice.


Reflexele osteotendinoase
Reflexele reprezint rspunsuri motorii rapide aprute ca urmare a aciunii unor stimuli.
Acestea pot fi normale, accentuate, diminuate sau abolite. Exist o serie de reflexe iniiate de
alungirea muchilor. Prin alungirea unui muchi este stimulat fusul neuromuscular i se va
conduce un impuls pn la mduva spinrii. La acest nivel neuronul senzitiv va face sinaps cu
un interneuron. In cazul reflexelor osteotendinoase se vor stimula direct motoneuroni care vor
iniia drept rspuns o contracie muscular. Reflexele se exploreaz bilateral, comparativ i
simetric.

Figura XIV.1. Ciocnel de reflexe


Reflexul bicipital (C5-C6)
Percuia

tendonului

distal

al

bicepsului

brahial

(prin

intermediul

degetului

examinatorului) determin contracia bicepsului, cu flexia antebratului pe bra (Fig.XIV.2 A).


Pentru explorare subiectul are antebraul uor flectat pe bra.
Reflexul tricipital (C7-C1)
Percuia tendonului tricepsului brahial la nivelul olecranului determin contracia
tricepsului, cu extensia antebraului pe bra. Pentru explorare examinatorul susine braul
subiectului la nivelul plicii cotului i l aduce uor nainte i n afar (Fig.XIV.2.B).
Reflexul rotulian (L2-L4)
Percuia tendonului rotulian determin contracia cvadricepsului femural, cu extensia
gambei pe coaps. Se poate examina la subiectul n poziie eznd (picior peste picior) sau la

85

subiectul n decubit dorsal (cruia examinatorul i susine membrul inferior la nivelul spaiului
popliteu) (Figura XIV.2.C).
Reflexul achilean (L5-S2)
Percuia tendonului achilean determin contracia tricepsului sural urmat de flexia
plantar a piciorului. Pentru explorare, subiectul se aaz cu genunchiul sprijinit (pe scaun sau
marginea patului) (Figura XIV.2.D).

Figura XIV.2. Modalitile de examinare ale reflexelor osteotendinoase

Reflexele cutanate
Reflexele cutanate sunt reflexe polisinaptice i apar datorit contraciei muchiului
subiacent prin stimulare cutanat superficial.
Reflexul cutanat abdominal se obine prin excitarea cu un ac fin, bont a tegumentelor din
regiunea abdominal. Pacientul se aaz n decubit dorsal cu membrele inferioare n semiflexie.
Se execut n regiunea superioar (T7-8 paralel cu rebordul costal), mijlocie (T9-10 n dreptul
ombilicului) i inferioar (T11-12 paralel cu arcada inghinal). Lezarea integritii arcului reflex
medular conduce la abolirea acestor reflexe. Se exploreaz mult mai greu la pacientul cu
musculatur abdominal foarte dezvoltat.
86

Reflexul cutanat plantar (L4-S2): excitarea tegumentelor de pe faa extern a plantei de


la clci spre degete cu un vrf ascuit determin flexia degetelor pe plant (Figura XIV.3.A).
Inversarea reflexului (extensia halucelui i abducia celorlalte degete) poart numele de reflex
Babinski. Apare n mod fiziologic la copii sub 3 ani i la adult n somnul profund.
(FiguraXIV.3.B). Patologic, apare n leziuni ale cilor piramidale.

Figura XIV.3. Examinarea reflexelor cutanat plantare


Reflexe vegetative
Metode de stimulare vagala
Comprimarea sinusului carotidian, unilateral, timp de 20 de secunde are ca efect scderea
frecvenei cardiace i a presiunii arteriale. La persoanele vagotonice (predomin tonusul vagal)
apare un efect invers.
Proba Valsalva se realizeaz prin inspir profund urmat de apnee postinspiratorie.
Rezultatul este apariia tranzitorie a bradicardiei (scderea frecvenei cardiace).
Proba de postur const n trecerea din clinostatism n ortostatism, urmat de creterea
frecvenei cardiace i a presiunii arteriale prin mecenism simpatic. Fenomenul este urmat de o
reacie parasimpatic compensatorie cu efect invers.

87

Rezultate:

Observaii i discuii:

88

Lucrarea practic nr.15.


Determinarea pragului de discriminare tactil
Discriminarea tactil este exprimat prin distana minim la care este posibil
recunoaterea a dou excitaii diferite. Este variabil n funcie de diferite regiuni ale corpului.
Regiunile cu discriminare tactil mic sunt buzele, obrazul, suprafaa intern a varfului degetelor
iar mijlocul spatelui, braul, coapsa i ceafa sunt zonele cu discriminare tactil mare.
Principiu: daca se aplic pe tegument simultan dou excitaii, subiectul trebuie s
perceap dou senzaii distincte.
Tehnica de lucru: Se folosete un compas special (esteziometrul Weber) sau un compas
obinuit cu varfuri tocite. Se aplic simultan ambele brae ale esteziometrului pe zona de cercetat
astfel ncat aciunea excitatoare s se exercite numai prin greutatea compasului. Subiectul percepe
iniial o singur senzaie, dar pe msur ce mrim distana dintre cele dou varfuri ale
compasului, ar trebui s perceap dou senzaii. Cu cat distana dintre cele dou puncte aplicate
este mai mic, cu atat zona are un parg de discriminare tactil mai mic. Se stabilete distanta
minim la care sunt percepute dou senzaii distincte, prin msurarea pe tegument a distanei
dintre punctele de excitare sau prin citire direct cu rigla gradat a esteziometrului Weber.
regiunea cutanat

distana minim (mm)

suprafaa intern a varfului degetului

2.3

suprafaa dorsal a falangei a IIIa

6.8

regiunea palmar

11.3

regiunea plantar

16

suprafaa dorsal a mainii

31.6

ceafa

54

mijlocul spatelui, braul, coapsa

67.1

Topognozia reprezint capacitatea unui subiect de a localiza o excitaie perceput la


suprafaa tegumentelor.
Sensibilitatea gustativ
Funcie: definirea fizico-chimic a soluiei sau substanei introduse n cavitatea bucal.
Rol: selectarea alimentelor n funcie de necesitile organismului.

89

Receptori: n special mugurii gustativi, dar i receptorii olfactivi, tactili, termici, dureroi,
proprioceptivi (masticatori, linguali).
Principiu: pentru determinarea sensibilitii gustative se prepar soluii din substane
amare (chinina), dulci (zaharoz), srate (NaCl) i acre (acid acetic), deci stimuli pentru senzaii
de gust simple (primare sau fundamentale).
Tehnica de lucru: Se prepar soluii n concentraii variate. Diluiile pentru fiecare tip de
substan se realizeaz n eprubete care se ordoneaz n funcie de concentraie, pe stative
separate. Se determin pragul sensibilitii gustative pentru fiecare substan n parte. Se
badijoneaz cu un penson mic nmuiat n soluia respectiv diferite zone ale limbii, ncepandu-se
cu concentraiile cele mai mici. Dup fiecare determinare (zonal sau de concentraie) se nltur
substana prin cltirea gurii cu ap distilat. La fiecare determinare, subiectul este ntrebat despre
senzaia perceput.
Semnificaie clinic: se constat c exist o sensibilitate zonal a limbii:
-

gustul dulce- este perceput la varful limbii;

gustul acru- pe marginea limbii;

gustul srat- la nivelul varfului i marginii limbii;

gustul amar- la baza limbii.

Pragul de sensibiltate (concentraia minim de substan care poate fi perceput) este variabil n
funcie de substan.
Modificri ale sensibilitii gustative:
- ageuzia- absena senzaiei gustative pentru o anumit substan;
- hipogeuzia- diminuarea sensibilitii gustative;
- disgeuzia- senzaie gustativ neplcut;
- parageuzie- senzaie gustativ modificat;
- hipergeuzie- sensibilitate gustativ crescut.
Determinarea acuittii vizuale
Definiie: Acuitatea vizual evalueaz capacitatea perceptiei vizuale: gradul n care o
persoan poate distinge detalii fine.
Materiale necesare: optotip
Tehnica de lucru: se utilizeaz optotipuri diferite pentru aduli i copii (vezi figura XV.1.).
Subiectul se plaseaz la 5 metri de optotip i este invitat s citeasc testul cu fiecare ochi
pe rand, fr lentile corectoare, ncepand cu cel cu vederea mai slab, ncepand cu literele de
90

dimensiuni mari. Primul rand, cu litere mari, corespunde acuitii vizuale normale de la o distan
de 50 m.
Dac semnele grafice nu sunt distincte de la distana de 5 m, subiectul se va apropia de optotip
progresiv cu 1 metru, pan va reui s citeasc primul rand de pe optotip. Dac este necesar o
apropiere de 10 cm distan, se va meniona capacitatea subiectului de a percepe lumina sau
micarile mainii.
La copii, msurarea acuittii vizuale este identic cu cea a adultului, dar se utilizeaz
cifre, desene sau litera E orientat n diferite sensuri i a cror orientare subiectul trebuie s-o
indice.

b
Figura XV.1. Tipuri de optotip: pentru adult (a) i pentru copii i analfabei (b).

Valori normale:
Acuitatea vizual se poate exprima prin raportul dintre distana de
citire a optotipului (d) i distana la care poate fi citit litera randului
respectiv de catre un ochi emetrop (D):
AV= d/ D
Acuitatea vizual la un ochi emetrop are valoarea 1. (AV=1).
Acuitatea vizual se poate determina i electronic cu ajutorul unor
aparate speciale (de exemplu- Bioptron, vezi figura XV.2).

91

Fig. XV.2.

Electroencefalografia
Definiie: Electoencefalograma (EEG) reprezint nregistrarea semalelor electrice ce
rezult din activitatea creierului. Transmiterea informaiei la nivel cerebral se realizeaz prin
semnale electrice iar EEG permite nregistrarea acestor semale. Amplitudinea undelor nregistrate
reflect numrul neuronilor care funcioneaz sincron la un moment dat. Inregistrarea EEG se
realizeaz cu ajutorul electroencefalografului.
Tipuri de unde
O electroencefalogram normal se caracterizeaz prin existena unui ritm dominant de
aproximativ 10 Hz i o amplitudine medie de 20-100 mV (figura XV.3.). Amplitudinea reflect
numrul de neuroni care funcioneaz sincron i nu gradul de activitate al fiecrui neuron. Cand
creierul este activ (starea de veghe) predomin undele de mic amplitudine; cand creierul este
inactiv (n timpul somnului profund) predomin undele de amplitudine mare i frecven mic
deoarece neuronii tind s funcioneze sincron.

Figura XV.3.Exemplu de inregistrare EEG normal, ritm dominant.


Au fost identificate mai multe tipuri de unde (ritmuri) cerebrale:
1. Undele alfa
Sunt oscilaii de amplitudine mic (figura XV.4), aproximativ 50 mV i frecven medie,
8-13 Hz (cicli pe secund). In mod normal, amplitudinea lor crete i descrete regulat formand
fusuri caracteristice. De cele mai multe ori undele alfa indic o stare de veghe relaxat. Sub
influena activitii senzoriale i n special a excitaiilor luminoase are loc o reacie de oprire a
undelor alfa i de cretere a ponderii undelor beta. Acelai fenomen se produce i n cazul unei
activiti corticale, a unei stri emotive, etc.

Figura XV.4. Unde alfa.


92

2. Undele beta
Se caracterizeaz printr-o frecven de 13-30 Hz i o amplitudine de 5-30 mV (figura
XV.5.). Spre deosebire de ritmul alfa, undele beta sunt foarte nergulate i semnific o
desincronizare a activitii neuronilor corticali.

Figura XV.5. Unde beta


3. Undele teta
Sunt unde cu o frecven de 4-8 Hz (figura XV.6) i o amplitudine maxim de 20 mV
(figura ). Dei sunt normale la copii, prezena lor la adulii n stare de veghe este considerat
anormal.

Figura XV.6. Unde teta


4. Undele delta
Aceste unde au cea mai mare amplitudine i o frecven mic de maximum 4 Hz (figura
XV.7.). Sunt caracteristice fazelor de somn profund sau strilor de anestezie n care sistemul
reticulat activator ascendent este inhibat. Prezena undelor delta la aduli, n stare de veghe
semnific existena unor lezuni cerebrale.

Figura XV.7 . Undele delta

93

5. Undele gama
Au o frecven mare (n jur de 30-100 Hz) (figura XV.8). Acestea se nregistreaz pe
electroencefalogram n condiii de activitate cortical superioar, ca de exemplu: perceptia,
rezolvarea unor probleme complicate, teama, contiinta, etc.

Figura XV.8.Unde gama.


Semnificaia clinic a EEG
Undele nregistrate n timpul electroencefalogramei reflect modificri cerebrale normale
(induse de varst, diferii stimuli) sau patologice. EEG este folosit n mod curent pentru
diagnosticarea i localizarea unor leziuni cerebrale. Deasemenea, este un test util pentru a
diagnostica hemoragii craniene (hematoame), crize de epilepsie, tumori, infecii, boli
degenerative sau metabolice, dereglri ale somnului.

94

Rezultate:

Observaii i discuii:

95

S-ar putea să vă placă și