Curs 1 - GENETIC

Genetica este tiina ereditii i a variabilitii;

an de natere 1875, relativ nou ca tiin;

Ereditatea este totalitatea mecanismeor i legilor prin care materialul genetic se transmite de la o
generaie la alta;
Variabilitatea reprezint modificrile materialului genetic i consecinele acestor modificri;
Genotipul este structura genetic a unui organism;
Fenotipul reprezint totalitatea caracterelor biochimice, morfologice, fiziologice i
comportamentale ale unui organism ca rezultat al interaciunii dintre structura genetic i mediu;

EREDITATEA

Probleme de genetic uman

1. Bazele moleculare ale ereditii
Prima problem cine conine materialul genetic: citoplasma sau nucleul?
Hammerling experimenteaz pe o alga monocelular numit Acetabularia, care are 2 forme
Acetabularia mediteranea si Acetabularia crenulata;
Hammerling extrage nucleul din alg i observ ce se intmpl dup cteva zile alga
moare fr nucleu;
Hammerling extrage nucleul din alg i ateapt 2 zile dup care reintroduce nucleul n alg
i constat c alga ii reia activitatea.
Hammerling secioneaz capetele celor 2 alge i face schimb de nuclei ntre acestea. Observ
c Acetabularia mediteranea cu nucleu de la Acetabularia crenulata i-a regenerat capul cu
tipul de la Acetabularia crenulata i c Acetabularia crenulata cu nucleu de la Acetabularia
mediteranea i-a regenerat capul cu tipul de la Acetabularia mediteranea;
Concluzia este ca nucleul are rol n ereditate;
Nucleul este necesar pentru dezvoltarea normal a celulei, iar informaia genetic este
stocat n nucleu;
Cea de a doua problem ce trebuia rezolvat: cine este materialul genetic acizii nucleici sau
proteinele?
Ce era cunoscut la vremea respectiv: materialul genetic trebuie sa aib urmatoarele
caracteristici;
1. s stocheze informaia genetic;
2. s replice informaia genetic (de a copia);
3. de a exprima informaia genetic;
4. de a avea capacitate de variaie (de a se modifica);

2. Griffith n 1928 era preocupat de a gsi un vaccin pentru pneumonia produs de diplococus
pneumoniae, bacterie sferic gram negativ;
diplococus pneumoniae are 2 forme tipul S (smouth) ce produce colonii netede, bacterii
virulente, capsulate, i forma tip R (rough) ce produce colonii rugoase, nevirulente i necapsulate,
ce pot fi uor atacate de sistemul imun al gazdei;
Primul set de expeminte:
Griffith ia bacterii de tip R, le inclaveaz la oareci i constat c nu se intampl nimic;
Griffith ia bacterii de tip S, le inoculeaz la oareci, iar acetia fac forme severe i mor;
Griffith ia bacterii de tip S omorte prin cldur, le inoculeaz la oareci i constat c
acetia nu au nimic;
Experiment n vivo ia bacterii de tip S si tip R omorte prin cldur pe care le inoculeaz
la oareci, care dup un timp mor. Din animalele moarte, extrage bacterii de tip S vii;

1
 Concluzia este ca exist o interaciune intre cele 2 tipuri de bacterii, prin care tipul S
transform tipul R in celule vii, virulente, de tip S. El numete acest fenomen fenomen de
transformare, dar nu l nelege i nu l explic;
Transformarea este capacitatea de transformare a caracteristicilor fenotipice de la o celul
bacterian la alta, astfel nct apar modificri, specifice definitive i ereditare ala structurii
genetice ale unui organism cu ajutorul unui ADN de origine diferit;
Transformarea proces natural (n vivo) sau proces n condiii experimentale
(experimentale);

3. n 1944 Avery i colaboratorii

reiau experimental lui Griffith n vitro i clarific pricipiul transformrii;
iau bacterii de tipul S i extrag ADN-ul (l izoleaz);
trateaz ADN-ul cu nucleaze i proteaze;
nucleazele sunt enzime ce degradeaz ADN-ul;
protezele sunt enzime de degradeaz proteine;
l introduc (ADN-ul tratat) n vase de cultur n care exist bacterii de tip R, ateapt
aproximativ 24 ore i analizeaz vasele de cultur;
n primul vas de cultur (ADN i nucleaze) apare o cultur rugoas cu bacterii de tip R;
n al doilea vas de cultur (ADN i proteaze), printre formele de bacterii R
sunt si bacterii de tip S
Rezulta ca ADN-ul are capacitate de transformare, deci ADN-ul e material genetic;

4. Hershey i Chase, n 1953 fac un experiment pe bacteriofag;

ADN-ul are fosfor in strucura
proteina are sulf in structura
marcheaz cu fosfor radioactiv P32;
marcheaz inveliul proteic al virusului (capsida) cu S35;
injecie molecular prin care bacteriofagul se ataaz i introduce ADN-ul n bacterie;
are loc multiplicarea ADN in celul;
liza celular i din celul se elibereaz bacteriofagi noi ce conin ADN-ul marcat;
n primul set bacteriofagii au ADN-ul marcat;
n al doilea set bacteriofagii au capsida marcat;
Concluzia experimentului: ADN-ul este material genetic pentru c acidul nucleic viral a fost
capabil sa realizeze infecia celulei bacteriene i s transforme celula bacterian gazd n
aa fel nct s produc proteinele virale; a avut loc o transformare genetic transfecie
introduceea experimental de ADN n celule din cultur astfel nct ADN-ul transferat se
integreaz n ADN-ul gazdei i se exprim;

5. Expermente de transformare genetic, la organism care au ca material genetic ARN-ul

(ribovirusurile);
Frenkel Conrat Singer 1957
VMT (virusul mozaicului tutunului) i HR (Holmes Ribgrass) produc boli ale plantelor de
tutun cu consecine economice grave;
Experimentul lor: separ proteina viral de ARN viral, dup care recombin proteina virala
de la un virus cu ARN-ul viral de la cellalt virus i obine un virus hibrid;
infecteaz plantele de tutun cu acest virus hibrid, dup care izoleaz din frunzele de tutun
un anumit virus;
Cu virusul hibrid se fac infecii ale plantelor de tutun i constat c leziunile sunt tipice
pentru VMT;
Concluzie: ARN-ul este material genetic al ribovirusurilor;

Experimentele de transformare genetic s-au extins i la eucariote;

2
 Transferul de material genetic ntre specii s-a realizat n vitro i pentru obinerea lui sunt
folosite enzime de restricie, ce fragmenteaz molecula de ADN i ligaze ce unesc aceste
fragmente ntre ele. ADN-ul recombinat este un ADN artificial, format din secvene ADN de la
specii diferite;
acest ADN recombinat i introdus n celule din culturi celulare n zigoi sau embrioni cu
scopul de a transfera caractere noi peste barierele naturale celulelor i organismelor;
toate descendenele unei celule ce a primit ADN recombinat sau toi descendenii unui
organism ce a primit ADN, vor primi ADN recombinat;
tehnica ADN recombinat este utilizat n ingineria genetic avnd aplicaii importante
pentru medicin;
astfel se realizeaz medicamente prin sintez bacterian, obinerea de noi vaccinuri i de
produse farmaceutice, obinerea de animale transgenice i knock out, folosite ca model pentru
simularea bolilor ereditare umane;
segmente de ADN eucariot ce corespund unei anumite gene sunt izolate i introduse n ADN-
ul celulei bacteriene;
Animalele transgenice apar sau sunt realizate prin tehnologie transgenic se introduc
caractere noi unor animale de laborator (obolani, capre, cai, iepuri);
o gen este microinjectat ntr-un zigot cruia i lipsete gena respectiv; zigotul este
implantat unei femele gestante pentru a obine descendeni transgenici i organisme ce au n
toate celule corpului lor gena transferat sau transgena;
animalul care primete noi informaii genetice artificiale prin introducerea unui ADN strin
este animal transgenic ce exprim fenotipic i genele strine i le transmite urmailor si
pentru c gena transferat este deja integrat n ADN- ul celular;
vita Nancy n laptele alfa1 antitripsina ce se administreaz persoanelor cu emfizem
ereditar;
animalele transgenice sunt folosite pentru studiul bolilor ereditare umane;
animalele knock-out (oareci) li se introduc o gen care este inactiv i n felul acesta se
studiaz rolul acelei gene n procesele de dezvoltare