3. Efectul extractelor apoase de mentă (Mentha × piperita L.

) asupra germination și
creșterea semințelor selectate de legume și cereale -
https://www.notulaebotanicae.ro/index.php/nbha/article/view/11359
Abstract Mentmint (Mentha × piperita L.) este cultivat în grădini pentru aspectul său atractiv și
utilizarea multilaterală în bucătărie și medicină. Planta cultivată se răspândește foarte ușor
producând stoloni și ar putea concura în mod eficient cu alte specii de plante. În scopul acestui
studiu, efectul de extracte apoase din frunze de mentă uscată a fost examinat pe germinare,
creștere, greutate proaspătă și uscată, și scurgeri electroliți de 10 specii frecvent cultivate în
diferite regiuni ale lumii: Beta vulgaris L., Cucumis sativus L., Lactuca sativa L., Lupinus luteus
L., Phaseolus vulgaris L., Raphanus sativus L. var. radicula Pers., Sinapis alba L., Lycopersicon
esculentum Mill., Triticum aestivum L., și Zea mays L. Au fost preparate mai multe concentrații
de extracte apoase din frunze de mentă: 1, 3, 5, 10 și 15%. Germinarea semințelor a scăzut odată
cu creșterea concentrației de extracte apoase din frunzele de mentă. Germinarea semințelor a fost
complet inhibată pe vasepetri cu extracte de 10 și 15%. Semințele de roșii erau cele mai
sensibile, au germinat pe apa distilată și doar 1%. Cele mai rezistente au fost semințele de fasole
care au avut cea mai mare capacitate de germinare. În general, creșterea răsadurilor speciilor
analizate a fost inhibată de extractele apoase din frunzele de mentă. Cu toate acestea, sa observat
efectul stimulativ asupra creșterii răsadde de fasole și porumb pe extract de 1%. Extractele
apoase din frunzele de mentă au cauzat scurgerea electrolitilor la toate speciile examinate și au
crescut cu creșterea concentrației extractului la concentrația mai mare de 3%.
Cuvinte cheie: allelopatie; extracte apoase; cereale; capacitatea de germinare; mentă; Legume
Introducere
Unul dintre obstacolele în calea dezvoltării agriculturii ecologice este concurența dintre plante
fiind consecința interacțiunii cunoscute sub numele de alopatie (Kieć și Wieczorek, 2009;
Sekutowski, 2010). Partea semnificativă a studiilor asupra acestui fenomen se referă la relația
buruienilor - cultură, care ilustrează interacțiunisinergice sau antagoniste (de Albuquerque et al.,
2011). Aceste interacțiuni sunt asociate cu producerea de compuși chimici specifici în plante
numite alopatine (Jezierska-Domaradzka, 2007; Jezierska-Domaradzka și Kuźniewski, 2007).
Acești compuși aparțin grupului
metabolițisecundari ai plantelor. Ele sunt eliberate din plante în mediu în mai multe moduri, de
exemplu, ca substanțe volatile din părțile supraterane, levigare din frunze, excreție din rădăcini
sau în timpul descompunerii. În general, frunzele sunt considerate a produce și să conțină cel mai
înalt nivel de alopatine. Cel mai scăzut nivel al metaboliților secundari a fost găsit în semințe și
fructe (Rice, 1984). Substanțele alelochimice acționează prin interferența directă cu funcțiile
fiziologice ale receptorului, ar fi germinarea semințelor, creșterea rădăcinii, creșterea rădăcinii,
creșterea tulpinii, eficacitatea simbiotică sau acționează indirect prin impact aditiv sau sinergic,
împreună cu infecții patologice, leziuni ale insectelor și/sau stres de mediu (Dahiya et al., 2017).
Numeroase experimente au demonstrat efectul inhibitor al extractelor realizate din specii native
de buruieni asupra germinării și creșterii timpurii a cerealelor (Ciesielska și Borkowska, 2010;
Kraska și Kwiecinska-Poppe, 2007; Marczewska-Kolasa et al., 2017), germinarea
leguminoaselor, de exemplu fasole (Phaseolus vulgaris L.) și alte legume, ca dovleac (Cucurbita
pepo L.) sau roșii (Lycopersicon esculentum Mill.) (Kadioglu et al., 2005). Efectele alelopate ale
extractelor au fost, de asemenea, documentate asupra plantelor cultivate, de exemplu, Sorghum
vulgaris L., hrișcă (Fagopyrum esculentum Moench), floarea-soarelui comună (Helianthus annus
L.) (Macias et al., 2002; Tsuzuki și Dong, 2003), balsam de lămâie (Melissa officinalis L.), dud
alb (Morus alba L.) (Mozdzen și Repka, 2014), lavandă (Moara Lavandula angustifolia.) (Teaca
et al., 2008) sau mentă (Mentha × piperita L.) (Skrzypek et al., 2015a, b, 2016). Cu toate acestea,
potențialul alelopatic al multora dintre aceste plante vegetale nu este încă suficient de cunoscut,
un astfel de exemplu este menta. Menta (Mentha × piperita L., Lamiaceae) este un hibrid spontan
de M. aquatica L. și M. spicata L. em. L. Probabil a apărut în Anglia și a fost cultivată din
secolul al XVIII-lea (Szweykowska și Szweykowski, 2003). În prezent, menta este plantată peste
tot în lume și utilizată ca aromă în bucătărie, industria alimentară, precum și o sursă de uleiuri
esențiale utilizate pe scară largă în farmacie (în special aromoterapie) și cosmetologie (Rita și
Animesh, 2011; 2015). Cele mai frecvent, frunzele (Folium Menthae piperitae) și plantele
mentolate de mentă (Herba Menthae piperitae) sunt utilizate datorită celui mai mare conținut de
substanțe biologic active din aceste organe. Principalii săi compuși chimici sunt uleiurile
esențiale (în principal uleiul de mentă care conține, printre altele, mentol), flavonoide, glicozide,
acizi (de exemplu, acid ascorbic) și compuși minerali (Czikow și Laptiew, 1983; Mystkowska et
al., 2016). Scopul prezentului studiu a fost de a examina influența alelopatică a extractelor
mentha × piperita asupra germinării semințelor (i), creșterii (ii), biomasei (iii) și scurgerilor
electrolitice (iv) de 10 legume și cereale cultivate în mod obișnuit în diferite regiuni ale lumii:
comună sfeclă roșie Beta vulgaris L., castravete Cucumis sativus L., salata verde Lactuca sativa
L., lupine galben lupinus luteus L., bean common bean Phaseolus vulgaris L., ridiche Raphanus
sativus L. var. radicula Pers., us muștar Sinapis alba L., comune de mustar si rosii de rosii
Lycopersicon esculentum Mill., grâu comun Triticum aestivum L., și porumb comun Zea mays
L.

Materiale și metode
Material vegetal Semințele legumelor studiate (Beta vulgaris, Cucumis sativus, Lactuca sativa,
Lupinus luteus, Phaseolus vulgaris, Raphanus sativus var. radicula, Sinapis alba, Lycopersicon
esculentum) și speciile de cereale (Triticum aestivum, Zea mays) obținute de la magazinul de
grădinărit Polan sp. z.o.o (Polonia) și frunzele uscate de mentă (Folium Menthae piperitae) de la
compania Flos (Morsko, Polonia).
Extractul preparat Extracte apoase de frunze de mentă au fost realizate la concentrații de 1, 3, 5,
10 și 15%, cântărind cantitatea corespunzătoare de frunze uscate la 100 ml de apă distillată.
După 24 h extracție, extractele au fost tensionate folosind o pompă de vid pe o pâlnie Büchner cu
hârtie de filtru Whatman. Extractele preparate în acest mod au fost păstrate la o temperatură de 8
°C (în frigider) pe durata întregului experiment.
Germinarea semințelor Semințele de legume și cereale, spălate în apă de funcționare și distilată,
au fost plasate pe vase Petri sterile căptușite cu un strat triplu de hârtie filtrantă (105 °C /2 h). A
fost folosit 100 de semințe morfologic identice din fiecare specie pe un vas Petri pentru fiecare
extract și control (saturate cu apă distilată). Materialul vegetal a fost plasat în întuneric la o
temperatură constantă (25 °C) și starea de umiditate (90%). Numărul de semințe germinate a fost
numărat la fiecare 24 de ore pe parcursul a 7 zile. Deoarece semințele germinate au fost
considerate cele cu germinativă de lungime egală cu 2 mm. Germinarea totală a fost verificată în
conformitate cu formula GT = (Nt × 100) / N, au fost GT – germinare totală, Nt – proporția de
semințe germinate la fiecare tratament pentru ultima dată, N – numărul de semințe utilizate în
biotest.
Lungimea răsadurilor, greutatea proaspătă și uscată, scurgerea electroliților După 7 zile, folosind
etrierul (Topex 31C615, Polonia), s-a măsurat lungimea răsadurilor și, ulterior, s-a determinat
greutatea proaspătă (Medicat 1600 C, Polonia) și greutatea uscată (uscătorul Termaks 8430,
Polonia). Gradul de destabilizare a membranelor celulare a fost determinat prin măsurarea
scurgerilor de electroliți utilizând metoda descrisă în Skrzypek et al. (2015a).
Analiză statistică Experimentul a fost repetat de cinci ori. Diferențele dintre probele de testare și
cele de control au fost determinate de testul parametric al lui Duncan, cu p ≤ 0,05. Calculele au
fost efectuate utilizând Statistica pentru software-ul Windows 13.0.
Rezultatele
Germinarea semințelor Capacitatea de germinare a semințelor testate a scăzut odată cu creșterea
concentrației de extracte apoase de mentha × piperita frunze. La majoritatea speciilor, inhibarea
totală a germinării semințelor a fost observată pe vasele Petri saturate cu extract de 15%. Model
similar germinare a fost observat pentru Beta vulgaris, Raphanus sativus var. radicula, Sinapis
alba: numărul de semințe germinate a scăzut rapid deja la 1% din extract. Cele mai sensibile au
fost semințele de Lycopersicon esculentum, care au germinat doar pe proba de control și pe
vasepetri saturate cu 1% extracte de frunze de mentă. Inhibarea totală a germinării semințelor a
fost găsită pentru Lactuca sativa pe plăci cu extracte de 10% și 15%. Semințele phaseolus
vulgaris au fost cele mai rezistente și au arătat cea mai mare capacitate de germinare (cu extracte
de la 1 la 10% mai mult de 90% din semințegerminate, germinarea a fost complet inhibată la
15% doar concentrație). Zea mays și Cucumis sativus au fost, de asemenea, rezistente la extracte.
Ei au răspuns la extracte prin reducerea germinării, dar chiar și la cea mai mare concentrație de
15% de frunze de mentă, mai mult de 30% din semințele lor germinate (Fig. 1)
Fig. 1. Capacitatea de germinare a semințelor din speciile de plante cultivate selectate pe
substraturi cu extracte apoase de frunze de mentă (Mentha × piperita L.), la concentrații de 1, 3,
5, 10 și 15%
Lungimea răsadurilor P. vulgaris și Z. mays au fost singurele specii care au arătat efectul
stimulativ al extractului de mentă asupra creșterii răsadurilor: a fost observat cu 1% extracte
apoase de frunze de mentă. L. răsaduri esculentum au fost cele mai sensibile: deja la 3% din
extract, creșterea alungirii a fost complet inhibată. În cazul Beta vulgaris, Raphanus sativus var.
radicula, și Sinapis alba extracte de frunze de menta întârziat alungirea, indiferent de
concentrația de extract. Cel mai mic efect de inhibare a fost documentat pentru răsadurile P.
vulgaris; doar extractul de 15% le-a inhibat creșterea (Tabelul 1).

Greutate proaspătă și uscată Analizând valorile greutății proaspete și uscate a răsadurilor, s-a
constatat că extractele de mentă la concentrații de 1%, 3%, și 5% doar ușor inhibat creșterea
masei. Efectul cel mai inhibare a fost legat de cele mai mari extracte concentrate – 10 și 15%,
care a limitat în mod clar creșterea masei răsadurilor, în raport cu controlul (Tabelul 2).
Scurgeri electrolitice Cu concentrații tot mai mari de extracte de mentă, s-a observat o creștere a
fluxului electrolitic prin membranele celulare ale răsadurilor, comparativ cu eșantionul de
control. Extracte cu concentrații de 1 și 3% nu a cauzat modificări semnificative statistic în
destabilizarea membranelor celulare. L. răsadurile esculentum au fost singura excepție, în care
extractul cu o concentrație de 3% a cauzat o creștere de 4 ori a scurgerilor electrolitice din celule,
comparativ cu controlul. Extracte de 5% și mai mare afectate răsaduri din toate speciile studiate,
o creștere a scurgerilor de electroliți a fost demonstrată. Cea mai mare destabilizare de peste 90%
a economiei ionice în celulele tuturor răsadurilor testate a fost găsită la concentrația de 15% a
extractului (Tabelul 3).
Discuţie
În mediul solului, efectul alelopatic depinde de concentrația compușilor activi din rizosfera
solului și de interacțiunea lor cu conținutul solului, materia organică și factorii care modifică
proprietățile fizico-chimice și biotice ale solurilor (Blum și Shafer, 1988). Creșterea
evapotranspirației și a umidității solului mai mici pot duce la reducerea fitotoxicității compușilor
alelopati în substratul solului. Nivelul toxinelor din sol depinde, de asemenea, de tipul solului, de
aerarea, temperatura și activitatea microbiană. De exemplu, solurile loamy sunt slab permeabile
și toxinele nu difuza cu ușurință în ele. În schimb, solurile nisipoase sunt bine permeabile și au
tendința de levigare maximă și de difuzare ușoară, inclusiv aluzii. Plantele sensibile la toxine pot
fi mai vulnerabile atunci când sunt plantate în soluri grele (Dahiya et al., 2017). Luând în
considerare relația dintre fitotoxine și proprietățile solului, ar putea fi important să se controleze
prezența speciilor de plante care coexistă și concurează cu plantele vegetale. Germinarea
semințelor este influențată de mulți factori externi, inclusiv disponibilitatea apei, pH-ul solului,
temperatura sau lumina. Factorii interni joacă, de asemenea, un rol cheie, cum ar fi starea
embrionului, nivelul hormonilor și enzimelor activate în spermă (Koger et al., 2004). Germinarea
adecvată a semințelor duce la apariția hipocotilului și a rădăcinii. Rădăcina este prima parte a
răsadului, care, în anumite condiții, este responsabilă pentru modificările chimice care au un
efect ulterior asupra creșterii hipocotiliului, ca urmare a absorbției apei și mineralelor. În cazul în
care rădăcina răsadului este în condițiile adecvate pentru creștere, primește substanțele necesare
pentru dezvoltare. În caz contrar, mediul înconjurător provoacă perturbări ale capacității de
absorbție a apei și minerale, ceea ce duce la creșterea anormală a întregului răsad (Pula et al.,
2016). În timpul acestui experiment, s-a constatat că extractele apoase de mentha × piperita
frunze, indiferent de concentrare, germinare în mod clar limitată de semințe. În ceea ce privește
controlul, semințele Phaseolus vulgaris au arătat cea mai mare capacitate de germinare, acestea
fiind cele mai rezistente la alaopatinele mentei. Pe de altă parte, cele mai sensibile au fost
semințele de Lycopersicon esculentum, care au germinat numai pe substrat cu 1% extracte de
mentă și în control (Fig. 1). Interacțiunile chimice dintre buruieni și culturi au arătat că
substanțele eliberate din resturile de buruieni afectează germinarea culturilor vecine (Ridenour și
Callaway, 2001). În același timp, eficiența germination de semințe depinde de dimensiunea și
greutatea lor. Semințele la scară largă conțin mai mulți nutrienți decât semințele mici. Prin
urmare, semințele mari sunt capabile de germinare și creștere mai rapidă (Nik et al., 2011;
Sadeghi et al., 2011; Amin și Brinis, 2013). În cazul alungirii răsadurilor, 1 % din m. × piperita
au stimulat creșterea răsadurilor de P. vulgaris și Z. mays, în raport cu controlul. Skrzypek et al.
(2015b) a observat o tendință similară de creștere în studiul influenței extractelor apoase de
frunze de mentă asupra germinării semințelor comune de floarea soarelui. În acest studiu, în
legumele și cerealele rămase, fiecare extract de mentă a inhibat alungirea răsadurilor (Tabelul 1).

Tabelul 1. Lungimea răsadurilor speciilor cultivate studiate, care germinate pe substraturi cu

extracte apoase de frunze de mentă (Mentha × piperita L.), la concentrații de 1, 3, 5, 10 și 15%

Fitotoxicitatea plantelor poate rezulta din reacția sinergică a substanțelor chimice produse de
acestea (Saharkhiz et al., 2010). Adesea, este rezultatul acțiunii simultane a mai multor compuși
și afectează, de obicei, acei compuși ale căror proprietăți chimice sunt divergente (Kaur et al.,
2010). În experimentul realizat aici, valorile greutății proaspete și uscate a răsadurilor au scăzut
semnificativ odată cu creșterea concentrațiilor de extracte de mentă, în comparație cu controlul.
Cea mai mică creștere a biomasei a fost găsită în răsadurile cultivate pe vase Petri saturate cu
extracte cu cele mai mari concentrații de alopatine (Tabelul 2).
Tabelul 2. Greutatea proaspătă (A) și uscată (B) (g) a răsadurilor cultivate studiate, care
germinate pe substraturi cu extracte apoase de frunze de mentă (Mentha × piperita L.), la
concentrații de 1, 3, 5, 10 și 15%

Compoziția chimică a metaboliților secundari, ar fi alelopatinele, depinde în mare măsură de

taxonul plantelor, de vârsta, de origine și de factorii de mediu (Lawrence, 2007; Newerli-Guz,
2016). Substanțele biologic active produse de plante demonstrează diferite proprietăți. Unele
dintre ele sunt selective pentru alte specii, altele nu. Unele au capacitatea de a inhiba complet și
altele pentru a încetini creșterea ușor (Dudai et al., 1999; Campiglia et al., 2007; Ayoub et al.,
2018). Un rol important este, de asemenea, jucat de hormoni de crestere a plantelor acid
indoleacetic (IAA) și gibberellins (GA) care reglementează extinderea celulelor în plante. IAA
este prezentă atât în forme active, cât și inactive și este inactivată de IAA- oxidază. IAA-oxidază
este inhibată de diverse alochimice (Rice, 1984), alți inhibitori bloc GA și induce creșterea
extensiilor.
S-a demonstrat că membranele celulare ale speciilor examinate au fost destabilizate cu o
concentrație tot mai mare de extracte de mentă, în raport cu starea de control (Tabelul 3).

Tabelul 3. Procentul de scurgeri de electroliți din membranele celulare ale răsadurilor speciilor
cultivate studiate, care germinate pe substraturi cu extracte apoase de frunze de mentă (Mentha ×
piperita L.), la concentrații de 1, 3, 5, 10 și 15%
Astfel de reacții de răsad pot fi explicate prin prezența compușilor biologic activi în plantele
"donatoare" – mentă, care acționează asupra componentelor membranelor celulare beneficiare –
specii cultivate analizate (Harper și Balke, 1981). Aceste substanțe provoacă, printre altele,
disfuncții enzimatice și tulburări ale absorbției minerale și a apei, ceea ce duce la schimbări în
creșterea și dezvoltarea plantelor (Siyar et al., 2017). Capacitatea de a lega multe produse
vegetale naturale cu membrane duce nu numai la modificări conformationale în canalele ionice și
proteine, dar, de asemenea, crește sau scade fluxul ionic. S-a documentat că monoterpenoidele au
un efect toxic asupra germinării semințelor (Rice, 1984) și interacționează la nivel celular cu
Ca2+, probabil printr-o eliberare intracelulară a magazinului Ca2+ și blocarea canalului Ca2+
(Takeuchi et al., 1994; Sanders și Bethke, 2000). Potrivit lui Griffin et al. (2000),
hidrofobicitatea relativă a majorității monoterpenoidelor se poate acumula în membranele
biologice. În plus, unele alopatine pot contribui indirect la moartea celulară prin producerea de
oxigen reactiv care provoacă peroxidarea lipidelor și dezintegrează membranele (Golisz et al.,
2008; Mutlu et al., 2011). În agroecosisteme, buruienile concurează cu culturile arabile pentru
resursele de mediu, reducând randamentele și reducând calitatea culturilor. Prin urmare, acestea
contribuie la pierderi financiare (Lipinska, 2006). Agricultura în curs de dezvoltare dinamică este
încă în căutarea de noi modalități de a crește eficiența producției vegetale. Cu toate acestea,
datorită creșterii poluării mediului, agricultura ecologică devine din ce în ce mai populară.
Cunoașterea interacțiunilor reciproce dintre speciile de plante este unul dintre factorii importanți
care ar putea fi propice dezvoltării agriculturii ecologice. Acesta permite evitarea sau reducerea
utilizării diferitelor tipuri de pesticide și obținerea unor culturi mai bune, mai fertile, sănătoase și
gustoase. Speciile de plante bine alese nu se vor proteja doar reciproc împotriva dăunătorilor, ci
și o mai bună înflorire și o mai bună utilizare a nutrienților conținute în sol. Potențialul de
utilizare a alopatinelor ca erbicide naturale sau componente care permit reducerea utilizării
substanțelor chimice artificiale crește de la an la an (Bhadoria, 2011; Khalaj et al., 2013). Deși
multe probleme legate de aloopatie nu au fost încă rezolvate, utilizarea de compuși alelopate
pentru suprimarea buruienilor rămâne un "cale deschisă " pentru a reduce utilizarea erbicidelor.
Indiferent dacă prin dezvoltarea erbicidelor naturale din alolipatine izolate sau prin utilizarea
plantelor cu potențial alopatic, aleuropaopatie va fi cel mai probabil o modalitate de a asigura
sisteme agricole durabile în viitor.
Concluziile
Germinare redusă [i], inhibarea alungirii răsadurilor [ii], reducerea în greutate [iii], și creșterea
scurgerilor de electroliți [iv] ca răspuns la extractele apoase de mentă confirmă faptul că frunzele
acestei specii conțin alalopate biologic active Compuşi. Cel mai probabil, activitatea fitotoxică
ridicată a extractelor de mentă rezultă din prezența unei concentrații ridicate de substanțe
chimice bine solubile în apă, care, în condiții adecvate de sol, sunt ușor accesibile plantelor care
cresc în imediata vecinătate