Transformari metabolice ale acidului piruvic (piruvat)

1 Acid Lactic

2 Etanol

3
Acid Piruvic Acetil-Coenzima A

4
Acid Oxalil-Acetic

5
Alanina
 1. Conversia anaeroba a Piruvatului in Lactat
(Fermentatia Anaeroba)

Acidul piruvic (Piruvatul ) Acid Lactic (Lactat)

Reactia nr. 11 din glicoliza anaeroba asigura

reducerea/hidrogenarea acidului piruvic in acid lactic
 2. Conversia anaeroba a Piruvatului in Etanol
(Fermentatia alcoolica)

Anumite microorganisme fermenteaza Glucoza in Etanol (prin

intermediul Piruvatului) in 10 +2 reactii :

• Reactii nr. 1-10 din glicoliza anaeroba

• Reactia nr. 11: Decarboxilarea Piruvatului, cu obtinerea
Acetaldehidei

• Reactia nr. 12 :Reducerea Acetaldehidei, cu obtinerea

Etanolului.
3. Conversia aeroba a Piruvatului in Acetil-Coenzima A
(reactia de legatura intre glicoliza anaeroba si aeroba_reactie notata 1a la curs onsite)

Acid Piruvic Acetil-Coenzima A

 CICLUL CITRATULUI

CICLUL KREBS

CICLUL ACIZILOR TRICARBOXILICI

5
 Introducere

Hans Krebs (1900 – 1981) – a descoperit ciclul citratului în anul 1937

The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1953 was divided equally between Hans Adolf
Krebs "for his discovery of the citric acid cycle" and Fritz Albert Lipmann "for his discovery
of co- enzyme A and its importance for intermediary metabolism".

• Etapele acestui ciclu au fost mai întâi postulate, şi apoi demonstrate de H. Krebs, care în anul 1937, utilizând metoda
Warburg a observat că o suspensie de celule consumă mai mult oxigen, dacă se adaugă acizi organici dicarboxilici şi
tricarboxilici, respectiv acid succinic, fumaric şi citric.

• Cercetări făcute de E. P. Kennedy şi A. L. Lehninger încă din anul 1948 au demonstrat că mitocondriile izolate prin
ultracentrifugarea omogenatelor de ţesut hepatic asigură transformarea tuturor intermediarilor ciclului citratului,
deci conţin toate enzimele ciclului citratului. Ciclul citratului se desfăşoară în compartimentul intern al mitocondriei şi
anume, unele enzime sunt repartizate în matricea solubilă, în timp ce altele sunt legate de membrana mitocondrială
internă.
6
 Proteine Polizaharide Lipide

Stadiul I

Aminoacizi Hexoze Acizi grasi

Pentoze Glicerol

• Ciclul Krebs reprezintă

o cale finală comună Acetil~SCoA
pentru catabolismul
tuturor constituenţilor
bochimici
Ciclul
Stadiul II
• Reacţiile ciclului Krebs citratului
au loc în matricea
mitocondriala şi sunt
cuplate cu lanţul
respirator. 2H 2H 2H 2H

Stadiul III O2 Oxidarea biologicã ATP

H2 O CO2
 Caracterul Universal al Ciclului Krebs :

• Este prezent la toate viețuitoarele, de la cele mai simple la cele complexe, inclusiv la plante;

• Este prezent în toate celulele organismului, cu excepția hematiilor;

• Prin cuplarea cu lanțul respirator, reprezinta o cale finală de degradare, comună și
obligatorie, de transformare a componentilor biochimici (glucide, lipide, proteine).
 CICLUL CITRATULUI (CICLUL KREBS) CICLUL ATC

Transformarea globală din ciclul Krebs :

CH3-COOH + 2 H2O → 2 CO2 + 8H

Observatii:

• Ciclul Krebs asigura preluarea unei unitati C2 (CH3-COOH activat/ acetil-CoA) si generarea corespunzatoare a 8H
si 2 moli de CO2 prin intermediul unei serii de 8 reacţii enzimatice care constituie un ciclu prin care se asigura
reînnoirea acidului oxalilacetic.

• CO2 se formează prin decarboxilarea oxidativă a cetoacizilor si Nu prin combinarea directa a carbonului și a
oxigenului molecular.

• Localizarea enzimelor ciclului citratului: matricea mitocondriala

9
 O

H3C C ~ SCoA Reacţiile ciclului Krebs

Acetil~SCoA
HSCoA
NADH+H+ O C COOH + H2 O

NAD+ CH2 COOH 1

Acid oxalilacetic
8 3
HO C COOH
HO CH COOH 4 5
CH2 COOH
CH2 COOH Acid citric
- H2 O
Acid L-malic 2
7
+ H2 O H2C COOH

 C COOH
HC COOH Acid cis-aconitic
Acid fumaric
CH COOH C COOH
H

FADH2 6 2 + H2 O
+ H2 O
FAD
H2C COOH
H2C COOH
Acid succinic Acid izo-citric HC COOH
CH2 COOH
Succinil~SCoA HO CH COOH
5 Acid -cetoglutaric
COOH
GTP COOH
+ H2 O
CH2 NAD+
CH2
3
CH2
GDP+Pi 4 CH2
HSCoA
O C ~ SCoA C=O NADH+H+
COOH
NADH+H+ NAD+ CO2
CO2
HSCoA
 Acetil~SCoA

O C ~ SCoA O C ~ SCoA 1 COOH

CH3 CH2
2 CH
2 - H2 O
citrat + H2 O aconitaza
+ HO C COOH HO 3 C COOH
sintaza
O C COOH 1 CH2
4
CH 2 2
5
HSCoA COOH
CH2 COOH

COOH
Citril~SCoA Acid citric
Acid oxalilacetic

COOH NADH+H+ COOH

COOH

+ H2O CH2 NAD+ CH2

CH2
aconitaza izocitrat-DH
 C COOH HC COOH CH2
3
 CH HO CH C=O
COOH CO2 COOH
COOH

Acid cis-aconitic
Acid izo-citric Acid a-cetoglutaric
 (GTP + ADP ATP + GDP)
NADH+H+
GTP
COOH COOH
HSCoA COOH GDP+Pi
CH2 NAD+ CH2
CH2 succinil tiokinaza
alfa-cetoglutarat-DH
CH2 CH2
4
TPP
CH2 + H2O 5
Acid lipoic
C=O FAD
COOH
NAD+ O C ~ SCoA
COOH CoASH
CO2 HSCoA
Succinil~SCoA Acid succinic
Acid α-cetoglutaric

FADH2 COOH NADH+H+

COOH
NAD+ COOH
FAD + H2 O
CH HO CH
succinat-DH Fumaraza malat-DH O C
HC CH2
6 7 8 CH2
COOH COOH COOH

Acid fumaric Acid L-malic Acid oxalilacetic

Obs:
12
DH=dehidrogenaza
Intermediarii ciclului Krebs

Reacţiile ciclului Krebs:

a) 1 reacţie de condensare (C2 + C4).

b) 4 dehidrogenări dintre care trei catalizate de

NAD+ (izocitrat, α-cetoglutarat şi malat) şi una
de FAD (succinat).
c) 2 decarboxilări (izocitrat şi α -cetoglutarat).
d) 2 hidratări efective (hidratarea fumaratului şi
formarea acidului succinic din succinil-CoA).
e)1 reacţie de hidratare reversibilă (reacţia
aconitazică).
Ecuaţia globală a ciclului Krebs :

CH3-CO~SCoA + 3H2O + 3NAD+ + FAD + GDP + Pi → 2CO2 + HS-CoA + 3NADH+H+ + FADH2 + GTP

BILANŢUL ENERGETIC AL CICLULUI KREBS

• prin oxidarea unei molecule de acetil-CoA se formează 2 molecule de CO2 şi 4 perechi de

echivalenţi reducători (3 NADH+H+ + FADH2)

6 → 3(NADH+H+ )x 3ATP = 9ATP

8H 11ATP+ 1(GTP≡ ATP)
2 → 1 (FADH2 )x 2ATP = 2ATP

12ATP
12ATP

Ciclul Krebs (prin cuplarea cu lanțul respirator ) este un proces generator de energie. Oxidarea unei
singure molecule de CH3-COOH asigura stocarea energiei în 12 molecule de ATP.
 RANDAMENTUL CICLULUI KREBS
CH3-COOH + 2 H2O + 2O2 → 2 CO2 + 4 H2O + Energie stocată (≈ 12 ATP )
• Ciclul Krebs asigura energie echivalenta cu 228 kcal, corespunzătoare celor patru molecule de apă formate (4 x 57 kcal)
• Pe seama energiei eliberate în acest proces, se formează 12 molecule de ATP, cărora le corespund 84 kcal (7 x 12).
• Din totalul de 228 kcal eliberate, 84 kcal au fost stocate sub formă de ATP, ceea ce corespunde unui randament (η) de

cca 37%.

228 kcal ……………84 kcal stocaţi în energie biologic utilă (ATP)

100 kcal ……………X
X = 37% (η)

• Restul de energie, nestocată în ATP este consumată sub diferite forme: căldură, energie mecanică, osmotică, etc.
• Apa rezultată în urma oxidării hidrogenului intră în fondul metabolic de apă al celulei.
Autoreglarea ciclului citratului

• Ciclul citralului este reglat pe căi multiple.

• Mecanismul reglării este frecvent de tip
feedback
• ATP, NADH și Intermediarii care acţionează ca
activatori (+) sau ca inhibitori (-) asupra unor
enzime din ciclul Krebs
• Piruvat DH este prima etapă la care se realizează
reglarea
enzimei (ENZIMĂ alosterică)
• Oxaloacetatul inhibă activitatea succinat-DH
• Succinil-SCoA inhibă activitatea citrat sintazei

16
Caracterul amfibolic al ciclului citratului

Ciclul Krebs este un proces amfibolic:

-proces catabolic, deoarece CH3-CO~SCoA se degradează la CO2
-proces anabolic, deoarece asigura formarea unor intermediar importanți în
biosinteza altor compuși: hem, purine, pirimidine, aminoacizi, acizi grași, steroli.
 Glu

COO - COO -
GPT +
C O H3N CH

CH3 CH3
COO - -cetoglutarat COO
+ Piruv at L-Alanina
H3N CH GOT C O -cetoglutarat
Acetil-CoA
CH2 CH2

COO - COO
L-Aspartat Oxalilacetat
Glu

Malat Citrat

Izocitrat
Fumarat

Succinat -Cetoglutarat
Formarea aminoacizilor din COO -
intermediari ai ciclului acizilor Succinil-CoA
C O
tricarboxilici CH2
Aspartat CH
2
COO -
+ GOT COO -
H3N CH
Oxalilacetat
CH2
CH2

COO -
L-Glutamat
ATP- principalul rezervor, furnizor şi transportor
intermediar de energie în organismele vii

• ATP este intermediarul chimic comun, care leagă procesele

generatoare de energie (catabolismul) şi cele consumatoare
de energie (anabolismul).
• NAD(P)H şi FADH2 sunt cofactori transportori de electroni care
“colectează” electronii din reacţiile oxidative şi apoi le
donează într-o varietate de reacţii de biosinteză.
• Aceşti cofactori sunt în permanenţă regeneraţi în cursul
reacţiilor catabolice.
 Glucide

Cuplarea ciclului Krebs Mobilizarea Aminoacizi Piruvat Acizi grasi

acetil~SCoA
cu lanţul respirator 2H CO2

Acetil~SCoA

Oxalilacetat Citrat

Malat
cis-Aconitat
Ciclul acizilor
tricarboxilici CO2
Izocitrat
Fumarat
CO2

Succinat a-Cetoglutarat

2H
2H 2H
2H

NAD+
ADP + Pi ATP

Flavoproteinã
Transportul de
electroni
si fosforilarea Citocrom b
oxidativã
ADP + Pi ATP

Citocrom c

Citocrom a/a3
ADP + Pi ATP

2H+ + 1/2O2 H2 O
Lanţul respirator şi fosforilarea oxidativă sunt procese
complexe care asigură conservarea energiei în sistemele
biologice.

Mitocondriile sunt sediul respiraţiei celulare, în cursul căreia

ATP este format prin fosforilare oxidativă.
Acetil-CoA care provine din metaboliţii citoplasmatici
(glucide, acizi graşi, aminoacizi) este integrată în ciclul de
reacţii ale acizilor tricarboxilici (Krebs), în cursul căruia este
decarboxilată (CO2↑) şi oxidată, cu transferul de protoni
(H+) şi electroni (e-) pe NADH și FADH2.

Echivalenţii reducători intră într-o succesiune de reacţii de

oxidoreducere - lanţ respirator, alcătuit din transportori
specifici. Energia eliberată în cursul oxidoreducerilor şi a
transferului de protoni permite fosforilarea ADP –
fosforilarea oxidativă.
65
 Bilant energetic (ATP) total / mol glucoza= 38 moli ATP/mol glucoza

Sinteză Sinteză Consum Sinteză

glicoliză
FADH2 NADH ATP ATP
glu → glu-6-P - 1 mol
fru-6-P → fru-1,6-P2 - 1 mol
1,3-P2-glicerat → 3-P-glicerat + 2 moli
P-enolpiruvat → piruvat + 2 moli
gliceraldehid-3-P → 1,3-P2-glicerat + 2 moli ........ → + 6 moli
Ciclul KREBS
piruvat → acetil CoA + 2 moli ........ → + 6 moli
iso-citrat → α-ceto-glutarat + 2 moli ........ → + 6 moli
38 moli ATP/mol glucoza
α-ceto-glutarat → succinil CoA + 2 moli ........ → + 6 moli
succinil CoA → succinat + 2 moli
succinat → fumarat + 2 moli .............. ........ → + 4 moli
L-malat → oxal-acetat + 2 moli ........ → + 6 moli
TOTAL - 2 moli + 40 moli