Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Distanţele sunt măsurate în minute necesare transferului prin conjugare. Sunt menţionate câteva locusuri din cele câteva
sute cunoscute: locusuri ale genelor de sinteză a treoninei (thr),leucinei (leu), etc.,de utilizare a unor zaharuri
ca lactoza (lac), galactoza (gal), de rezistenţă cromozomală la streptomicină (str), acid nalidixic (nal). în interior
sunt marcate câteva din punctele de integrare a factorului F, dând naştere la diverse tulpini Hfr; orientarea
săgeţii arată ordinea în care sunt transferate genele cromozomale în conjugare (după Ivanof A.şi col., 1982 citat
de Guguianu E., 2002).
– plasmide neconjugative sau criptice, incapabile de a se transfera prin conjugare,
şi
– plasmide conjugative (conjugoni) care au capacitatea de a trece de la o celulă
bacteriană la alta prin conjugare.
Plasmidele, ca şi cromozomul bacterian, sunt ataşate de membrana
citoplasmatică prin intermediul mezozomilor şi sunt dotate cu proprietăţi autoreplicante. In
stare autonomă replicarea lor este independentă şi necorelată cu replicarea genomului, iar în
stare integrată se replică simultan cu acesta.
Prezenţa plasmidelor nu este esenţială pentru definirea genotipului şi nici pentru
supravieţuirea bacteriilor în condiţii normale de mediu, deoarece ele nu codifică desfăşurarea
activităţilor vitale ale celulei. Plasmidele poartă o informaţie genetică accesorie, ,,de confort”,
care permite bacteriilor o mai bună adaptare la condiţiile de mediu noi sau modificate, motiv
pentru care mai sunt numite minicromozomi, material genetic auxiliar sau suplimentar.
Prin urmare, plasmidele pot lipsi, sunt transmise de la o celulă bacteriană la alta, sau
pot fi pierdute, fără ca celula de origine să sufere.
Principalele tipuri de plasmide sunt: plasmidele F (de fertilitate), plasmidele R (de
rezistenţă faţă de antibiotice), plasmidele ,,col”(de colicinogeneză sau bacteriocinogeneză),
plasmidele ,,ent”(de enterotoxicitate) şi genomul fagic integrat.
Plasmidele F.
Identificarea plasmidelor F, numite şi factori de fertilitate sau de sex, este strâns
corelată cu descoperirea de către Lederberg şi Tatum (1946) a fenomenului de conjugare.
Prezenţa plasmidelor F într-o celulă bacteriană îi conferă capacitatea de donor de
material genetic, deoarece ele codifică sinteza pilului sexual sau conjugativ, prin lumenul
căruia are loc transferul.
Plasmidele F sunt plasmide mari (20 x 106 daltoni), trec cu uşurinţă din faza
plasmidică în faza epizomală şi invers şi sunt conjugative. În afară de transferul lor propriu,
plasmidele F sunt capabile să ,,mobilizeze” în vederea transferului şi alte categorii de material
genetic, cum ar fi unele plasmide care în starea lor obişnuită sunt neconjungative şi
fragmente de cromozom.
În funcţie de prezenţa sau absenţa plasmidelor F în celulă, de faza plasmidică sau
epizomală în care acestea se află, celulele bacteriene se împart în:
- F- - lipsite de plasmide F, echivalente unor celule femele, care sunt receptoare de
material genetic;
- F+ - cu factorul F în faza plasmidică, echivalente unor celule mascule donatoare de
material genetic prin transmiterea factorului F ;
- Hfr (High frequency of recombination = cu mare frecvenţă de recombinare) – cu
plasmide F în faza epizomală, considerate supermascule având în vedere
posibilitatea lor de a transfera un număr variabil de gene cromozomale, uneori o
replică a cromozomului în întregime ;
- F’ – celulă masculă purtătoare de factor F în faza plasmidică, în urma reversiei lui
din faza epizomală. în acest caz, factorul F conţine secvenţe din materialul genetic
cromozomal pe care le va transfera celulelor receptoare.
Harta genetică a plasmidelor F este constituită din aproximativ 12 gene, posibilitatea
de transfer prin conjugare fiind controlată de genele ,,tra”, care codifică sinteza pilul sexual
prezent la bacteriile F+.
Plasmidele F îşi exprimă cu o frecvenţă relativ redusă capacitatea de transfer, datorită
controlului de tip represiv căruia le sunt supuse genele ,,tra”. Derepresarea acestora şi iniţierea
conjugării este de regulă rezultatul unei mutaţii plasmidice.
Bacteriile F+ sunt, de cele mai multe ori, incapabile de a primi material genetic de la alţi
donori - proprietate numită “excluzia intrării”.
Plasmidele R (de rezistenţă) sunt implicate în determinismul genetic al rezistenţei
extracromozomale la antibiotice. Unele sunt conjungative, iar altele neconjungative.
Plasmidele R conjungative se transmit cu uşurinţă de la o celulă bacteriană la alta,
fenomen cunoscut sub denumirea de rezistență infecțioasă ,,R- infecţie”. Ele sunt mai mari
decât cele neconjugative, având o masă moleculară de aproximativ 20 – 80 x 106 daltoni, iar
genele care le compun sunt grupate în 3 ansambluri funcţionale:
♦ Genele care condifică capacitatea autoreplicantă (replicatorul);
♦ genele care determină rezistenţa faţă de antibiotice (determinanţii r ).
♦ genele care controlează posibilitatea de transfer, constituind factorul RTF
(,,rezistance transfer factor”), absent la plasmidele R neconjugative. Această
secvenţă de gene se poate desprinde de plasmida R, devenind independentă şi
comportându-se asemănător cu o plasmidă F.
Numărul determinanţilor r poate varia de la 1 până la un număr care asigură rezistenţa
la toate antibioticele utilizate în terapie la un moment dat.
Prin urmare, antibiorezistenţa indusă bacteriilor de prezenţa factorului R este de tip
,,multi steep“, deosebindu-se de rezistenţa cromozomală la antibiotice (consecutivă unei
mutaţii), care este de tip ,,one- steep”(faţă de un singur antibiotic). In mod obişnuit,
plasmidele de rezistenţă conţin până la 6 determinanţi r , pentru notarea cărora se utilizează
prescurtările uzuale pentru antibiotice, urmate de litera ,,r”.
Prima hartă genetică a unei plasmide R (fig. 43) a fost întocmită în anul 1963 de către
cercetătorul de origine japoneză Watanabe, cel care a demonstrat că rezistenţa multiplă faţă de
antibiotice este infecţioasă, în sensul că ea se poate transmite de la o celulă bacteriană la alta.
Transferul factorului R se realizează prin conjugare (fig. 44) sau, în cazul plasmidelor
neconjugative, prin transducţie mediată de fagii cu dimensiuni mari. Transferul prin
conjugare se realizează însă în egală măsură de la donatori F+ şi F– , necesitând sinteza unei
substanţe cu rol în formarea punţilor de conjugare. Structura morfologică a acestor punţi este
asemănătoare cu cea a sexpililor de conjugare.
Fig. 46 Configuraţia moleculei de ARN solubil (după Răducănescu H., şi col.,1986, citat de
Guguianu E., 2002).
La extremitatea a două din cele 4 ramuri ale moleculei se găsesc sedii de cuplare cu un
înalt grad de specificitate şi anume:
♦ anticodonul (nodocul), reprezentat de bazele azotate complementare celor din
codonii care se succed de-a lungul lanţului de ARNm (de exemplu, unui codon
ACG– adenină-citozină-guanină îi va corespunde un anticodon UGC- uracil –
guanină-citozină );
♦ zona de acceptare pentru aminoacid, reprezentată de o grupare chimică
complementară acestuia, astfel încât fiecărui aminoacid îi corespunde un ARNs
specific.
Acizii ribonucleici ribozomali (ARNr), intră în structura ribozomilor.
Ribozomii (granulele lui Palade) sunt formaţiuni corpusculare diseminate în
citoplasmă, la nivelul cărora are loc traducerea informaţiei genetice, concretizată în sinteza
proteinelor prin ansamblarea aminoacizilor în lanţuri polipeptidice.
În celula bacteriană se găsesc în medie 20000 – 30000 de ribozomi de tip 70 S. Din
punct de vedere al structurii chimice, ribozomii sunt ribonucleoproteine, grupate în două
subunităţi diferite ca formă şi mărime (fig. 47): o subunitate mică, asemănătoare cu o pereche
de haltere asimetrice şi o subunitate mare, având forma aproximativă a unui fotoliu.