• Nitratii si nitritii sunt saruri obtinute in mod
natural in sol prin mineralizarea substantelor
organice azotoase din surse animale si vegetale sub actiunea microorganismelor existente in pamant. • Aceste substante chimice, regasite si in apa, sunt folosite pe scara larga in agricultura si in industria alimentara. • Nitritii si nitratii patrund in organismul omului fie pe calea apei, fie prin consumarea legumelor si fructelor pentru cultivarea carora s-au folosit ingrasaminte pe baza de nitrogen, fie prin consumarea de produse obtinute prin sacrificarea animalelor contaminate, implicit a preparatelor din carne si a lactatelor pentru care s-au folosit nitriti si nitrati drept aditivi alimentari. • In industria alimentara, nitritii sunt utilizati pentru a oferi culoarea roz a produselor din carne si savoarea carnii conservate, dar si pentru protejarea preparatelor de toxina bacilului botulinic si de alte bacterii. Efectele nocive asupra sanatatii omului
• Expunerea excesiva a omului la aceste doua
substante provoaca afectiuni grave, cea mai severa fiind methemoglobinemia(creste cantitatea de methemoglobina din sange). • Methemoglobinia provoaca cianoza sau invinetirea buzelor si a pielii, precum si dureri de cap, ameteala, oboseala, greata. • In cazuri grave, provoaca pierderea cunostintei, convulsii, coma si chiar moartea persoanei afectate prin asfixiere, prin producerea atacurilor de cord. • Desi nu exista vreo dovada clinica sau epidemiologica clara, specialistii care au studiat domeniul considera ca aceste substante chimice pot cauza si diverse tipuri de cancer. • Copii mici risca mai mult decat adultii sa dezvolte methemoglobinie, fiindca sistemul gastrointestinal imatur favorizeaza proliferarea bacteriilor nitrat-reducatoare in stomac(in special dupa ingerarea apei contaminate)si transformarea nitratilor si nitriti(in cantitati exagerate), fapt care conduce la conversia hemoglobinei din sange in methemoglobina. Efecte benefice asupra sanatatii omului • Nitritii au potentialul sa se transforme in oxid nitric. Aceasta molecula are rolul de a transmite semnale de relaxare celulelor care invelesc arterele prin care circula sangele nostru. Astfel, oxidul nitric determina peretii arterelor sa se relaxeze, sa se dilate si in acest fel sa scada tensiunea arteriala. In exact acelasi mod functioneaza nitroglicerina (o sursa de nitrati), recomandata in cazul crizelor de angina pectorala. • Nitratii administrati la timp previn astfel instalarea unui infarct miocardic, deoarece dilata vasele de sange ale inimii, care altfel ar fi putut bloca alimentarea cu oxigen a miocardului. Studiile au aratat ca suplimentele cu nitrati, cum este sucul de sfecla rosie, pot reduce tensiunea arteriala cu 4 pana la 10 mm/Hg in doar cateva ore. Acelasi suc de sfecla rosie, bogat in nitrati, imbunatateste performantele atletilor. Alimentele cel mai usor de contaminat
• O mare parte din cantitatea de nitrati si de
nitriti regasita in organismul omului provine din alimentatie. • Printre alimentele cu cele mai mari concetratii de compusi chimici se numara unele fructe, legume si frunze verzi. Metode de determinare
• Azotatul şi azotitul din proba de analizat sunt determinaţi
ca azot total. Conţinutul de azotat se calculează prin diferenţa dintre azotul total şi azotitul determinat prin metoda GRIESS şi exprimat în echivalent azotat. Metoda se bazează pe nitrarea în mediu acid a produsului 2,4-xilen-1-01(m-xilenol), în 6-nitro-2,4 xilen-1- 01 (o-nitroxilenol). Agentul de nitrare este HNO3 care se formează prin tratarea NO3– cu H2SO4. Orto-xilenolul format este distilat şi captat într-o soluţie apoasă de NaOH, formând o sare de sodiu de culoare galbenă. Soluţia astfel obţinută este supusă colorimetrării. Metoda fiind puternic influenţată de prezenţa azotiţilor, clorurilor şi proteinelor, acestea trebuiesc îndepărtate înainte de nitrarea m- xilenolului. • În acest scop, azotiţii se transformă în azotaţi prin oxidare cu KMnO4. Clorurile se îndepărtează prin precipitare cu sare de argint (hidroxid de argint amoniacal, soluţie preparată astfel: 5 g sulfat de argint – fără azotiţi şi azotaţi- se dizolvă în 60 ml amoniac, se încălzeşte la fierbere, se concentrează la cca. 30 ml, se răceşte şi se diluează la 100 ml cu apă distilată); Proteinele se îndepărtează prin precipitare cu acid fosfo-tungstic sol. 20%. • Într-un vas cotat de 100 ml se introduc 10 g carne (sau produse din carne) peste care se adaugă 80 ml de apă distilată, se omogenizează şi se ţine pe baia de apă la 60-70o C timp de o oră. După răcire se completează la semn cu apă distilată şi se filtrează printr-un filtru cutat. Din extractul apos se pipetează 50 ml într-un balon cotat de 50 ml, se adaugă 3 picături indicator (soluţie de verde de bromcrezol 0,1%, preparată astfel: 0,1 g de verde de bromcrezol se dizolvă în 1,5 ml de soluţie de NaOH 0,1 n şi se diluează la 100 ml cu apă distilată) şi se acidulează slab, picătură cu picătură cu ajutorul unei soluţii diluate de H2SO4 1:10, până la virarea culorii în galben. Pentru oxidarea azotiţilor (transformarea în azotaţi) se adaugă picătură cu picătură KMnO4 sol. 0,2n, sub agitare continuă până la culoare roz-persistent. • Se adaugă apoi 1 ml ac. sulfuric diluat 1:10 şi 1 ml de soluţie acid fosfotungstic 20% . Se completează la semn cu apă distilată, se omogenizează bine şi se filtrează prin filtru cutat. Se pipetează 10 ml de filtrat într-un balon de distilare cu fund plat de 500 ml şi se adaugă picătură cu picătură soluţie de hidroxid de argint amoniacal până când precipită întreaga cantitate de cloruri (5 ml). • Se adaugă 45 ml din soluţia concentrată de H2SO4 3:1, se acoperă balonul cu dopul, se omogenizează şi se răceşte până în apropierea temperaturii de 35 grade. Se adaugă 3 picături de m-xilenol, se astupă din nou cu dopul, se omogenizează şi se ţine 30 minute pe baia de apă la 30-40oC. Apare o culoare galben-brună care se datoreşte nitro-derivatului format. • Se adaugă apoi 150 ml apă distilată (cu care se spală şi dopul), apoi se montează balonul la instalaţia de distilare. Se distilează 40-50 ml; distilatul se captează într-un pahar Berzelius în care s-a introdus în prealabil 5 ml de sol NaOH 1 % şi suficientă apă distilată, astfel încât extremitatea inferioară a tubului refrigerentului să fie scufundată în lichid. Se aduce distilatul în balonul cotat de 100 ml şi se completează cu apă distilată la semn. Se citeşte extincţia la lungimea de undă de 445 nm (filtru albastru), iar concentraţia de azotat a soluţiei ce se analizează se obţine din curba etalon. Metoda de determinare selectivă a nitraţilor şi nitriţilor din apă folosind cromatografia lichidă de înaltă performanţă cu reacţii fotochimce în coloană şi cu detecţia prin chemiluminescenţă
• Determinarea nitraţilor şi nitriţilor din apă se poate realiza folosind cromatografia
de înaltă performanţă cu reacţii fotochimice în coloană şi cu detecţia prin chemiluminescenţă a luminolului. Reducerea nitriţilor ai nitraţilor la NO şi generarea peroxinitritului ar putea fi completă doar prin iradierea cu UV, care ar simplifica considerabil metoda de identificare. • Pentru această determinare s-au preparat soluţii stoc standard de azotat şi azotit de sodiu. Soluţia stoc de luminol s-a preparat prin dizolvarea a 70,9 mg de luminol în 20 ml soluţie tampon de carbonat. Soluţiile stoc au fost ţinute la temperaturi de 4 °C. Apa utilizată pentru toate soluţiile a fost purificată cu sistemul Milli-Q Gradient A10 şi Yamato Auto Still WA-200. Soluţiile de lucru sunt: apa din rău, apa din lac, apa de ploaie şi apa de la robinet. Determinările HPLC au fost efectuate prin iradiere cu raze UV, urmate de detecţia prin chemiluminiscenţă., după cum se arată în fig. 3 de mai jos. • Pentru a obţine condiţii adecvate pentru determinările efectuate şi pentru a optimiza parametrii pentru reacţia fotochimică şi reacţia de chemiluminescenţă, s- au efectuat câteva experimente preliminarii folosind sistemul de injecţie în flux. • În fig. sunt arătate cromatogramele obţinute pentru fiecare tip de apă luat pentru analiză. Cu excepţia probei ce conţine apă de la robinet, nu s-a înregistrat existenţa altor specii chimice în afară de nitraţi şi nitriţi. • Cromatogramele tipice a (A) unei soluţii standard de nitriţi şi nitraţi, (B) apă din lac, (C) apă de râu, (D) apă de ploaie si (E) apa de robinet. • Picul (1) nitriţi, picul (2) nitraţi • Din fig. se observă că cea mai mare cantitate de nitraţi se găseşte în apa de la robinet, apoi în apă din lac şi apa de rău. Spre deosebire de nitraţi, nitriţii se află într-o cantitate mult mai mică în toate probele de apă luate pentru analiză. În analiza apei de la robinet s-au înregistrat şi alte specii chimice în afară celor studiate. • Rezultatele acestei metode sunt comparabile cu rezultatele metodelor de referinţă şi astfel această metodă este validată. In concluzie • Nitriții și nitrații nu sunt neapărat răi, ci este vorba mai degrabă despre sursa lor. • Consumul de alimente procesate este în mod clar o alegere greșită, iar alimentația organică este alternativa cea mai potrivită, mai ales atunci când include fructe și legume. • De aceea, se recomandă porții mici de carne organică, iar un truc interesant spune să folosești carnea ca pe un „condiment”, în timp ce pe farfuria ta se află mai multe fructe și legume