1

3. CELULELE AUXILIARE Celulele auxiliare ndeplinesc roluri complementare limfocitelor, n cadrul sistemului imun adaptativ. n acelai timp, unele celule auxiliare sunt celule efectorii ale sistemului imun nnscut. Celulele auxiliare sunt heterogene structural i funcional i au roluri n ambele ramuri ale rspunsului imun adaptativ: aferent i eferent. Ramura aferent este format din mecanismele de transmitere a informaiei ca din momentul apariiei antigenului n organism i recunoaterea lui ca non-self, pn la activarea complet a limfocitelor efectoare: LB i LTC. Pe calea aferent, celulele auxiliare ndeplinesc funcii importante n: Recunoaterea i preluarea antigenelor Prelucrarea antigenelor Prezentarea antigenelor, n complex cu moleculele moleculele complexului major de histocompatibilitate de tip II (MHC II) Sinteza de citokine. Ramura eferent reprezint ansamblul proceselor prin care sunt degradate i eliminate antigenele solubile i corpusculate: Captarea i fagocitarea complexelor imune Distrugerea celulelor int acoperite de anticorpi Degradarea resturilor celulelor distruse Secreia de citokine i ali mediatori proflogistici. Celulele auxiliare sunt: Celule prezentatoare de antigen (APC) Celule fr rol de APC: polimorfonucleare circulante (neutrofile, eozinofile, bazofile) i mastocite. Celulele APC se mpart n: profesioniste - a cror funcie principal este procesarea i prezentarea antigenelor ctre limfocitele T helper: macrofage, celule dendritice i limfocite B. ocazionale - care, n anumite condiii, sub influena unor citokine exprim pe suprafa MHC II: fibroblaste, celule gliale, celule pancreatice, celule epiteliale timice i tiroidiene, celule endoteliale. APC sunt celule cu rol esenial n generarea RIU i RIC fa de antigenele timodependente, care sunt cele mai frecvente n natur. APC sunt singurele celule care pot recunoate antigenele timodependente n form nativ. APC prelucreaz aceste antigene, selecteaz cele mai imunogene fragmente i le prezint limfocitelor. MACROFAGELE Sistemul fagocitar mononuclear este format din monocite circulante i macrofage rezidente n esuturi. Macrofagele (MF) provin din monocite, care se gsesc n snge, n esuturi i n cavitile naturale ale organismului. Monocitele au originea n mduva hematogen, dintr-un

2 precursor comun cu PMN, sub influena M-CSF i GM-CSF. Trecerea monocitelor n esuturi se face numai la nivelul anumitor zone ale endoteliului, situate n vecintatea unui focar imun. n esuturi monocitele stimulate se deplaseaz sub aciunea unor factori chemotactici. Sub aciunea unor citokine cu rol inductor produse de limfocite, monocitele se difereniaz, transformndu-se morfologic i funcional n MF rezidente i apoi n MF activate. MF activate sunt capabile s ndeplineasc funcia de APC. MF tisulare au o durat de via de cteva luni, pn la civa ani. Transformarea monocitelor n MF presupune schimbri importante: Dimensiunea celulelor crete de 5-10 ori (MF au diametre de 25-50 microni). Crete numrul i dimensiunea mitocondriilor i lizozomilor, se dezvolt aparatul Golgi. Crete cantitatea de enzime hidrolitice (fosfataz acid, beta-glucuronidaz, catepsin, arilsulfataz, lizozim, peroxidaz, colagenaz, elastaz, proteaze, lipaze, fosfolipaze, muramidaz, etc). Devin multinucleate prin fuzionare sau prin endomitoz. Citoplasma emite numeroase pseudopode, care dau la microscopul electronic un aspect de meduz cu prelungiri fine i dantelate. Macrofagele se gsesc n aproape toate esuturile organismului, n special n esutul conjunctiv i n apropierea membranei bazale a vaselor sanguine mici. Se afl n numr mare la nivelul unor organe n care exista un aflux ridicat de antigene: splin, ganglioni limfatici, plmni, ficat. Exist macrofage specifice anumitor esuturi (tabelul I). Acestea au capacitate de sintez de ADN i de diviziune. Proliferarea acestor MF este indus de anumii factori locali. Pe lng MF fixate n esuturi exist i MF libere n cavitile seroase: MF peritoneale, pleurale i sinoviale. Monocitele i MF se pot deplasa prin chemotactism, adic migreaz direcionat sub influena unor stimuli chemotactici. Tabelul I. Forme particulare de macrofage esutul esutul osos articulaiile alveolele pulmonare lobulii hepatici SNC Rinichii Forma particular a MF osteoclastele sinoviocitele MF alveolare celulele Kuppfer microglia celulele mezangiale

Funciile principale ale macrofagelor sunt: fagocitoza mecanism important de aprare nespecific. procesarea i prezentarea antigenului rol de APC n aprarea nespecific. secreia de citokine si de mediatori ai inflamaiei influeneaz att imunitatea nnscut, ct i pe cea adaptativ. Rolul MF n cadrul aprrii nespecifice - Fagocitoza Fagocitoza este un important mecanism de aparare nespecific, care const n nglobarea

3 i digerarea antigenului de ctre celule specializate. Macrofagul poate fagocita: antigene exogene complexe - virusuri, bacterii, parazii. particule insolubile. celulele lezate sau moarte, resturi celulare. factori ai coagulrii activai. Capacitatea de fagocitoz a macrofagului este mult crescut dac antigenul respectiv este opsonizat. Opsonizarea reprezint procesul prin care un antigen este recunoscut de anticorpi specifici sau de componenta C3b a complementului, care se ataeaz n numr mare pe suprafaa acestuia. Moleculele de C3b se gsesc permanent n lichidele interstiiale, pentru c se produc continuu, n cantiti mici, pe calea altern a complementului. Moleculele C3b se depoziteaz pe toate suprafeele non-self, indiferent de specificitatea antigenic a acestora. Dup opsonizarea antigenelor corpusculate cu C3b, acestea sunt captate de MF care au pe suprafa receptori pentru C3b, numii CR (CR1 i CR3). IgG se gsesc n cantiti mari n lichidele interstiiale i n snge. Moleculele de IgG recunosc determinanii antigenici de pe suprafaa bacteriilor, de care se leag prin fragmentul Fab. MF capteaz bacteriile opsonizate pentru c au pe suprafa receptori pentru fragmentul Fc al IgG, numii Fc gama R. Dup fagocitare, antigenele sunt distruse prin mecanisme dependente de oxigen i prin aciunea enzimelor lizozomale. Rolul MF n cadrul rspunsului imun adaptativ MF particip la rspunsul imun datorit funciei lor de APC profesioniste. n funcia de APC, MF parcurg o serie de etape: Captarea antigenelor Endocitarea antigenelor Procesarea i prezentarea antigenelor Conservarea epitopilor. Captarea i endocitarea antigenelor se desfoar n cursul procesului de fagocitoz. Procesarea si prezentarea antigenului Macrofagele au capacitatea de a seleciona anumite peptide relevante din punct de vedere antigenic, pe care le asociaz cu molecule ale complexului major de histocompatibilitate de tip II (MHC II). Acestea vor fi expuse ulterior pe membrana MF. Antigenele sunt prezentate limfocitelor T helper (LTH), celule cu rol esenial n imunitatea adaptativ, att umoral ct i celular. LTH pot recunoate antigenul doar n condiiile n care acesta este prezentat mpreun cu MHC II. Astfel, MF are funcia de celul prezentatoare de antigen. Dintre fragmentele rezultate este ales fragmentul cel mai imunogen, care se numete epitop. Epitopul este un antigen complet, adic este format din hapten i carrier. MF transport antigenele spre ariile timo-dependente, adic populate cu LT, ale organelor limfoide periferice: paracorticala ganglionilor limfatici i PALS intern a splinei. Conservarea epitopului n MF se conserv o cantitate mic din epitopi, care sunt eliberai progresiv n urmtoarele zile. Conservarea are rol n ntreinerea rspunsului imun mai mult timp i n generarea unui rspuns imun mai intens printr-o stimulare prelungit a limfocitelor.

Sinteza de citokine i de factori ai inflama iei Macrofagele activate secret molecule care influeneaza att mecanismele de aprare nespecific ct i raspunsul imun adaptativ. Macrofagele pot elibera substane cu rol proinflamator i enzime hidrolitice coninute n lizozomi, care uneori pot agrava leziunile tisulare. Celulele normale din vecintate au mecanisme protectoare, n special contra radicalilor de oxigen (catalaz, glutation-peroxidaz). Distrugerea excesiv a celulelor normale din vecintate caracterizeaz hipersensibilitatea de tip IV ntrziat. Stimularea intens i de durat a MF din focarele de inflamaie cronic duce la modificarea lor. MF se transform n celule epitelioide, cu mult citoplasm i cu o capacitate de fagocitoz sczut. Prin fuziunea MF apar celule gigante multinucleate de dou tipuri : Celulele Langhans au nucleii aezai la periferie, n coroan . Celulele de tip corp strin au nucleii dispersai n toat citoplasma. CELULELE DENDRITICE Celulele dendritice sunt specializate n prezentarea antigenelor. Se caracterizeaz printro structur arborescent, cu un corp celular cu puin citoplasm perinuclear i numeroase prelungiri ramificate care ptrund printre celulele din jur. Aceste pseudopode au un aspect caracteristic care a fcut s fie comparate cu dendritele neuronilor: Sunt foarte multe, de ordinul sutelor pe o celul. Sunt foarte subiri i lungi, depind de 4-5 ori diametrul celulei. Datorit lungimii lor, pseudopodele celulelor dendritice permit supravegherea unor spaii ntinse de esut cu ajutorul unui numr relativ mic de celule. Celulele dendritice au rol de APC pentru c pot s capteze i s prezinte antigenele. Ele au pe suprafa principalii receptori implicai n funcia de APC: CR, Fc R i pot s sintetizeze moleculele MHC II. Celulele dendritice ndeplinesc n cadrul rspunsului imun urmtoarele funcii: Capteaz antigenele de la porile de intrare. Transport antigenele spre organele limfoide secundare - ganglionii limfatici i splin. Prezint n organele limfoide secundare antigenele spre LB i LT. Pe parcursul desfurrii funciei lor imunologice, clasele de celule dendritice se transform una n alta. Se consider n prezent c o celul dendritic i schimb morfologia n funcie de teritoriul unde se gsete. Exista 4 tipuri principale de celule dendritice: celulele Langerhans celule dendritice interstiiale celulele dendritice foliculare celulele dendritice limfoide. Celulele Langerhans Celulele dendritice din tegumente i submucoase se numesc celule Langerhans. Sunt aezate la porile de intrare ale antigenelor n organism: n special subcutanat, n strat aproape continuu n stratul spinos al epidermului. La nivelul submucoaselor bucal, faringian, bronic, digestiv, a colului uterin.

5 Rolul celulelor Langerhans este de captare a antigenelor, de aceea au receptorii de suprafa pentru antigen: CR i Fc gama R. Celulele Langerhans nu prezint antigene, de aceea nu sintetizeaz moleculele MHC II. Dup ce celulele Langerhans capteaz antigenele din esutul subcutanat i submucos, ele trec n limf i se transform n celule cu vluri. Celulele cu vluri au doar rol de transport al antigenelor, aa c nu prezint pe suprafa nici receptori pentru antigene, nici molecule MHC II. Celulele cu vluri ajung n ganglionii limfatici, n zonele populate cu LTH. Acolo se transform n celule dendritice interdigitate. Acestea prezint antigenele spre LTH, de aceea au pe suprafa molecule MHC II. Celulele dendritice interdigitate prezint antigenele spre sute de LT care intr ntre prelungirile lor. Celulele dendritice interstiiale Aceste celule se gsesc n interstiiul organelor nelimfoide: ficat, rinichi, plmn, cord. Rolul lor este de captare a antigenelor, de aceea au receptori de suprafa pentru antigenele opsonizate: CR i Fc gama R. Celulele dendritice interstiiale nu prezint antigene, de aceea nu sintetizeaz moleculele MHC II. Dup ce celulele dendritice interstiiale capteaz antigenele, ele trec n snge i se transform n celule dendritice sanguine. Ele ajung n pulpa alb a splinei, unde se transform n celule dendritice interdigitate i prezint antigenele spre LTH. Celulele dendritice foliculare Celulele dendritice foliculare reprezint un subtip care are origine i funcii diferite. Nu se formeaz n mduva hematogen i nu exprim pe suprafaa membranei molecule MHC II, deci nu au funcie de APC. Se gsesc exclusiv n foliculii limfatici din ganglionii limfatici, foliculi care conin limfocite B. Prezint pe suprafa receptori pentru anticorpi i pot lega complexe imune. Antigenul care intr n structura acestor complexe imune este recunoscut de limfocitele B. Acest mecanism de recunoatere a antigenului de ctre limfocitele B are un rol complementar n cadrul raspunsului imun umoral. LIMFOCITELE B LB stimulate antigenic pot s aib funcie de APC deoarece ndeplinesc cele dou condiii fundamentale: Au pe suprafa receptorii de captare a antigenelor: CR, Fc gama R, BCR. Produc cantiti mari de MHC II. Captarea antigenelor de ctre LB are urmtoarele caractere: LB capteaz numai antigenele solubile, adic proteine simple. Captarea se face prin receptori i poate fi specific i nespecific. Captarea antigenelor este n principal imunologic specific. Ea se face cu receptorii BCR care recunosc determinanii antigenici conformaionali din antigenele solubile. ntr-o msur mai mic la captarea antigenelor particip i receptorii CR i Fc gamaR, astfel c LB fac i captare imunologic nespecific. NEUTROFILELE

6 Neutrofilele provin din mduva hematogen, din celula su comun pentru monocite i granulocite GM-CFU. Din seria granulocitar se difereniaz neutrofilele (peste 90%), eozinofilele i bazofilele. Neutrofilele triesc n snge sub 24 h, chiar dac nu extravazeaz spre un focar inflamator. Aproximativ jumtate din ele se deplaseaz lent, rostogolindu-se pe endoteliul vascular. Neutrofilele sunt celule polinucleare, cu un diametru de aproximativ 12 microni, cu o form variabil (datorit permanentei emiteri de pseudopode). Nucleul este multilobat i prezint granulaii citoplasmatice care se coloreaz att cu colorani acizi ct i bazici. Neutrofilele se mai numesc polimorfonucleare neutrofile (PMN) datorit nucleului multilobat. Reprezint 60 - 70% din totalul leucocitelor din sangele periferic. Neutrofilele sunt primele celule care ajung intr-un focar inflamator. Sunt celule cu rol foarte important n imunitatea innscut (nespecific). Neutrofilele strabat endoteliul capilar (diapedez) i se deplaseaz n esuturi (chemotactism) pentru a ajunge la nivelul focarului imun. Neutrofilele au rol important mai ales mpotriva bacteriilor cu habitat extracelular, pe care le fagociteaz cu ajutorul echipamentul enzimatic coninut n granulele primare i secundare: Granulele primare au dimensiuni mai mari i sunt mai dense dect cele secundare i conin: peroxidaz, lizozim i diverse enzime hidrolitice. Granulele secundare conin colagenaz, lizozim i lactoferin. Att granulele primare ct i cele secundare fuzioneaz cu fagozomul n timpul fagocitozei, mecanism similar cu cel ntalnit n fagocitoza realizat de macrofage. Distrugerea microorganismelor de ctre neutrofile se realizeaz prin mecanisme dependente i independente de oxigen. Neutrofilele sintetizeaz cantiti mai mari de radicali de oxigen, intermediari reactivi de azot i defensine dect macrofagele. n schimb, neutrofilele au o durat de via mai scurt i sunt distruse dup ce i epuizeaz echipamentul enzimatic n timpul fagocitozei. Macrofagele au capacitate de regenerare a lizozomilor i supravieuiesc chiar dup fagocitoza unui numr crescut de bacterii. COMPLEXUL MAJOR DE HISTOCOMPATIBILITATE Complexul major de histocompatibilitate (major histocompatibility complex - MHC) este format din molecule solubile sau aflate pe diferite suprafee celulare, cu roluri importante n funcionarea normal a sistemului imun. Complexul major de histocompatibilitate este implicat n imunitatea adaptativ (specific) avnd un rol esenial n discriminarea ntre self i nonself. De asemenea, intervine i n imunitatea nespecific. Complexul major de histocompatibilitate mai este cunoscut sub numele de sistemul HLA (human leukocyte antigen). Exist 2 clase principale: moleculele MHC I sunt glicoproteine aflate pe suprafaa aproape tuturor celulelor nucleate. Au rolul de a prezenta antigenele peptidice interne limfocitelor T citotoxice. Neuronii i spermatozoizii nu prezint molecule MHC I pe membrane. Limfocitele au pe suprafa numeroase molecule ale complexului major de histocompatibilitate de tip I - pn la 105 receptori / celul. moleculele MHC II se gsesc pe suprafaa celulelor prezentatoare de antigen (n special macrofage, monocite, celule dendritice i limfocite B). Au rolul de a prezenta antigenele procesate de ctre aceste celule limfocitelor T helper. Numrul moleculelor MHC II aflate pe suprafaa monocitelor i macrofagelor neactivate este redus. Stimularea antigenic determin creterea semnificativ a expresiei acestor receptori pe membran.

Structura moleculelor MHC de tip I Moleculele MHC I sunt formate prin asocierea necovalent ntre un lan i o molecula de 2 - microglobulin. Lanul are o greutate de 45 kilodaltoni i este codat de gene aflate n regiunile A, B, C din cadrul complexului HLA. Lanul prezint o mare variabilitate n funcie de individ. 2-microglobulina este o proteina codat de o gen aflat pe cromozomul 15. Lanul este format din: un domeniu extramembranar - care conine trei regiuni: 1, 2 i 3. Fiecare regiune este format din aproximativ 90 de aminoacizi. un domeniul transmembranar - alcatuit din aproximativ 25 de aminoacizi. un domeniu intracitoplasmatic - care ancoreaz lanul alfa, format din 30 de aminoacizi. 2-microglobulina nu prezint domeniu transmembranar sau intracitoplasmatic i se leag necovalent mai ales de regiunea 3. Regiunea 3 i 2-microglobulina nu prezint variabilitate structural i sunt similare regiunilor constante ale moleculelor de imunoglobulin. Prin interaciunea regiunilor 1 i 2 se formeaz un situs de legare pentru antigene peptidice. Acesta poate lega peptide formate din aproximativ 10 aminoacizi. Structura moleculelor MHC de tip II Moleculele MHC II sunt alcatuite din doua lanuri polipeptidice: lanul (mai greu) i lanul . Cele doua lanuri sunt asociate prin legaturi necovalente. Ambele lanuri prezint cte un segment extracelular, transmembranar i intracitoplasmatic. Segmentele externe prezint cte doua regiuni: 1 i 2, respectiv 1 i 2. Regiunile 2 i 2 sunt aezate lng membran. Situsul de legare pentru peptidele antigenice este format prin asocierea domeniilor 1 i 1. Func iile MHC I i MHC II Moleculele MHC I i MHC II au un rol esenial n recunoaterea antigenului de ctre limfocitele T. Aceste limfocite sunt implicate n generarea att a raspunsului imun umoral ct i a celui celular. Spre deosebire de limfocitele B, limfocitele T nu pot recunoate decat acele antigene prezentate n combinaii cu moleculele MHC (mecanism de restricie MHC). Limfocitele T helper recunosc doar antigene exogene prezentate mpreuna cu MHC II, iar limfocitele T citotoxice recunosc antigene endogene prezentate mpreun cu MHC I. Moleculele MHC se asociaz cu fragmente peptidice care au fost procesate anterior n diferite compartimente ale celulei: MHC I se leag de peptide derivate din antigene endogene, care au fost procesate n citoplasma celulei: proteine normale celulare, tumorale, virale, proteine care provin din bacterii cu habitat intracelular. MHC II formeaz complexe cu peptidele rezultate n urma procesarii antigenelor exogene, care au fost internalizate prin fagocitoz de ctre celule specializate (mai ales macrofage i celule dendritice). Toate celulele care prezint pe suprafa receptori MHC I pot prezenta antigene endogene limfocitelor T citotoxice. Aceast prezentare determin activarea limfocitelor T citotoxice, cu declanarea raspunsului imun celular, care are drept finalitate eliminarea acestor celule neoplazice sau infectate cu germeni intracelulari. Astfel, celulele care prezint antigene prin intermediul MHC I catre LT citotoxice sunt de fapt celule int pentru acestea din urm. Antigenele exogene pot fi procesate i prezentate limfocitelor T helper doar de ctre

8 celule specializate care au pe suprafa molecule MHC II (celule prezentatoare de antigen).