Nevoile de protein n alimentaie.

Starea
dinamic a proteinelor. Valoarea biologic a
proteinelor. Bilanul azotat.
Digestia proteinelor n stomac i intestin.
Endo- i exopeptidazele, specificitatea de
aciune a proteinkinazelor.
Proenzimele proteinkinazelor i mecanismul
convertirii lor la enzime active.
Reglarea secreiei sucului gastric, pancreatic i
intestinal.
Absorbia aminoacizilor n intestin.
Putrefacia aminoacizilor n intestin.
Alimentaia proteic parenteral.
Compoziia sucului gastric i modificrile lui n
patologie
Proteinele substane macromoleculare de
natur polipeptidic.
Au un rol fundamental att prin funciile lor
structurale (matricea tuturor esuturilor) ct i
dinamice (rol de transport, control metabolic,
medierea unor reacii biochimice etc.)

Necesarul de protein n alimentaie
Aportul zilnic
exogen de proteine
este:
La un adult 100-
120 g
La un efort fizic
130-150 g
La copii 55-75 g

Starea funcional normal a
organismului depinde de aportul de
proteine (AA) din exterior.
De menionat, c ea este influenat
nu numai de cantitatea ei ci i de
calitatea proteinelor alimentare, ce
au valoarea biologic diferit.

Valoarea biologic a proteinelor
VB a proteinelor alimentare este
determinat de 2 factori:
1. AA ce ntr n componena lor
a. de cantitatea AA indispensabili
8 AA: Val, Leu, Ile; Liz, Met, Tre, Tri,
Fen i
b. AA semidispensabili - Arg, His).

Valoarea biologic a proteinelor
2. capacitatea organismului de a
asimila AA proteinei date.
Lipsa sau carena unui AA
indispensabil din alimente duce la
afectarea absorbiei celorlali AA.

Starea dinamic a proteinelor
Proteinele din organism se renoiesc
permanent.
Pentru meninerea constant a
proporiei lor n esuturi, vitezele de
sintez i de degradare a proteinelor
trebuie s fie egale, ceea ce
constituie o stare dinamic
staionar.

Vitezele de renoire a proteinelor se
exprim prin timpul de njumtire
(T1/2), ce difer n diferite organe.
De exemplu:
T1/2 Pr musculare = 30 zile;
T1/2 Pr hepatice = 5-6 zile;
T1/2 enzimelor = ore, minute.

Bilanul azotat- BA
BA al organismului - raportul dintre cantitatea de N
ngerat i cantitatea de N excretat din organism
(urin, fecale, saliv, gl.sudoripare)
exprimat n g/24 ore.
Deosebim 3 tipuri de BA:
echilibrat - Nng = Nexcr;
pozitiv cantitatea de N ngerat > N
eliminat (specific pentru organisme n
cretere, femeile n perioada de gestaie,
lactaie);
negativ cantitatea de N ingerat< N
eliminat.
la persoanele de vrsta a treia i n
patologii: cancerul, nsoit de caexie,
tuberculoz, nefrite, combustii, naniie.
Digestia proteinelor n TGI
Digestia proteinelor are loc n stomac i
intestinul subire sub aciunea E proteolitice
(hidrolaze) din sucul gastric, pancreatic i
intestinal.
Toate aceste E catalizeaz hidroliza legturii
peptidice - peptidaze

E proteolitice
Se disting: endo- i exopeptidaze.
Endopeptidazele care asigur scindarea
legturilor peptidice din interiorul lanurilor
polipeptidice.
Exopeptidazele E ce scindeaz legturile
peptidice formate de AA terminali.
Enzimele proteolitice
1. ntre ele exist diferene de
specificitate.
2. sunt secretate de celulele
productoare n forme inactive
numite proenzime (zimogeni).
Activarea are loc prin:
a. proteoliz parial (detaarea unor
oligopeptide de la capetele lor sau
din interior, n urma creia are loc
formarea conformaiei active a CA
al E.)
b. autocatalitic

E proteolitice ale sucului gastric
1. Pepsina
2. gastrixina
3. renina (sugari).
Pepsina

se sintetizeaz de celulele principale ale
mucoasei stomacului sub form de pepsinogen.
Pepsinogenul este activat la pepsina:
1. proteoliz parial (H+ (HCl))
2. autocatalitic
H+
Pepsinogen ------------- Pepsin
-42 AA
PH optim 1-1,5
este endopeptidaz,
Specificitatea - atac legturile peptidice la care
particip prin gruprile aminice AA
aromatici i ntr-o mic msur - Met, Leu i
AA dicarboxilici

E proteolitice ale sucului gastric
Gastrixina (pepsina C) un
analog structural al pepsinei.
1. pH-ul optim de aciune
~3(predomin la copii).
2. Specificitatea de aciune se
manifest asupra legturile peptidice
din interiorul lanurilor proteice,
formate de a/a dicarboxilici.

E proteolitice ale sucului gastric
Chimozina (renina) este prezent
n sucul gastric al sugarilor.
n prezena ionilor de Ca2+
chimozina transform cazeina
laptelui n paracazein (hidrolizat
apoi de pepsin).
Punctul izoelectric al reninei
4,5.

n stomac, ca urmare a aciunei
hidrolitice specifice a pepsinei i
gastrixinei, din proteine se obin
polipeptide i eventual
oligopeptide, nu ns AA liberi.


Rolul HCl
denaturarea parial a P alimentare i
hidroliza P conjugate;
activarea pepsinogenului;
meninerea pH optim;
aciune antimicrobian;
particip la absorbia Fe2+
stimuleaz secreia secretinei




DIGESTIA PROTEINELOR
N TRACTUL GASTRO-INTESTINAL.

Sinteza i secreia HCl
I etap n celulele secundare ale mucoasei stomacale
carboanhidraza
H
2
O + CO
2
H
2
CO
3
HCO
3
-
+ H
+
NaCl Na
+
+ Cl
-
II etap secreia separat a ionilor H
+
i Cl- n lumenul
stomacului
III etap formarea ac.clorhidric n lumenul stomacului
H
+
+ Cl
-
HCl

Stimulatori gastrina, histamina.
Inhibitori secretina, somatostatina

Reglarea secreiei HCl
n reglarea secreiei HCl n mucoasa
gastric un rol important i revine H- K-
ATP-azei
Localizarea: n membrana apical a
celulelor epiteliale din mucoas
Este alctuit din 2 subuniti:
(funcie catalitic)
subunitate (glicoproteid, ce determin
localizarea E n membran i regleaz
funcia ei de transport)
Rolul: catalizeaz hidroliza ATP la
ADP+P, cuplat cu sistemul de schimb al
H intracelular pe K extracelulart

Reglarea proteazelor
Reglarea secreiei enzimatice se
face cu participarea urmtoarelor
substane active:
gastrina - stimuleaz secreia
pepsinogenului i a HCl.
Histamina - stimuleaz secreie
HCl.

Secreia HCl din celule este activat de:
Gastrin, histamin,
acetilcholin
Histamina acioneaz nemijlocit, pe
cnd gastrinele prin mrirea
cantitii de histamin
Schema influenei gastrinei la
sinteza HCl


Secretina i somatostatina inhib
prin diminuarea formrii gastrinelor
(4 polipeptide sintetizate n partea
piloric a stomacului).



E proteolitice ale sucului pancreatic:

1. tripsina (endopeptidaza),
2. chimotripsina (endopeptidaza),
3. elastaza (endopeptidaza),
4. carboxipeptidaza (exopeptidaza).


Tripsina:

Endopeptidaz
Se sintetizeaz sub form de tripsinogen
este convertit n tripsin prin:
1.proteoliz limitat sub aciunea
enterochinazei (E secretat de mucoasa
intestinal)
2. autocatalitic.
Enterochinaza
Tripsinogenul-----------------
Tripsina
Ca2+
Specificitatea: hidrolizeaz legturile
peptidice cu participarea grupelor carboxil
ale lizinei i argininei.
Chimotripsina

se sintetizeaz din chimotripsinogen:
sub aciunea tripsinei (prin ndeprtarea a dou
dipeptide)
autocatalitic.
tripsinei
Chimotripsinogen-------chimotripsina
Ca2+
Deosebim cteva forme de chimotripsine ,
i p
Specificitatea: hidrolizeaz legturile peptidice
formate de grupa COOH a Phe, Tyr, Tri.
scindeaz amide, esteri, derivai acil.


Elastaza
Se obine din proelastaz (sub aciunea
tripsinei)
Specificitatea: catalizeaz hidroliza
legturile peptidice formate de AA
hidrofobi relativ mici: Gli, Ala, Ser.

Carboxipeptidaza
Este o exopeptidaz
Carboxipeptidaza A:
1. Este o metaloprotein (E ce conine Zn)
2. Specificitatea: scindeaz legturile
peptidice formate de AA aromatici
3. Atunci cnd ionul de Zn =>Ca se
declaneaz activitatea esterazic
Carboxipeptidaza B: - acioneaz asupra
legturile peptidice din captul C
terminal, formate de Arg i Lyz

sinteza i secreia sucului pancreatic e
reglat de: secretin i colecistokinin
Secretina stimuleaz eliminarea unui suc
pancreatic bogat n bicarbonai i srac n E,
ce are menirea de a:
1. neutraliza HCl, ce ptrunde cu bolul
alimentar din stomac
2. de a crea pH optim pentru acionarea E
pancreatice 7,5-8,5.
Sinteza secretinei n mucoasa duodenului
este stimulat de HCl.

Colecistokinina - stimuleaz eliminarea
unui suc pancreatic bogat n E (stimuleaz
contracia vezicii biliare) i srac n
bicarbonai.
E sucului intestinal
Aminopeptidazele:
exopeptidaze
Ala aminopeptidaza specific numai pentru
Ala
Leu aminopeptidaza
1. conine Zn, pe care o poate activa Mn
2. e specific pentru toi AA N terminali
Dipeptidazele: glicil-glicin; prolinaza (COOH),
prolidaza (NH).
Sub aciunea tuturor acestor
enzime are loc scindarea total
a proteinei pn la AA liberi.
Absorbia
are loc la nivelul intestinului subire
este un proces activ cu solicitare de
energie, cuplat cu transportul ionilor
de Na.
Absorbia AA prin difuzie e limitat.
Transportul n celulele epiteliale
intestinale se efectueaz cu ajutorul
unor proteine specializate, numite
translocaze.
Exist urmtoarele translocaze de
grup:
1. pentru AA neutri cu molecule mici
2. pentru AA neutri cu molecule mari (a/a
aromatici)
3. pentru AA bazici i cistein
4. pentru AA acizi
5. pentru Pro i hidroxiprolin
Dup alimentaie, concentraia max de AA
n snge se nregistreaz la o or.

Fondul metabolic comun (FMC) al
AA
Spre deosebire de G, ce se acumuleaz n
muchi i ficat (glicogen), sau lipide (n
esutul adipos Tg), P i AA nu
depoziteaz.
Unica rezerv a lor o prezint FMC al AA
FMC- este totalitatea AA liberi n
organism de origine att exogen
(alimentele) ct i endogen (degradarea
proteinelor) care sunt utilizai pentru
sinteza proteinelor de ctre celule.

FMC al AA
Ei prezint circa 30g din totalitatea
de 15kg de P.
Cantitatea major o constituie AA
sanguini (0,35-0,65g/l).
n condiii extremale (nu este aport
de AA din mediul ambiant) FMC este
completat prin degradarea
proteinelor plasmatice i ale ficatului.

Soarta aminoacizilor absorbii.
AA:
Particip la formarea fondului metabolic comun al
AA care vor fi utilizai pentru:
sinteza proteinelor
- sinteza glucidelor
- sinteza lipidelor
- sinteza hormonilor
- sinteza de baze azotate purinice, pirimidinice
- sinteza hemului
- Sinteza neurotranslatorilor
- Sinteza porfirinelor
- Sinteza anserinei, carnozinei
- Formarea aminelor biogene

Putrefacia AA n intestin
O parte din AA alimentelor este scindat
de E microflorei intestinale, ce
catalizeaz reacii deosebite de cele din
esuturi.
Acest proces se numete putrefacie.
1. La scindarea Cis, Met (conin sulf), n
intestin se formeaz H2S,
metilmercaptanul (CH3SH).
2. Ornitina i Lys se decarboxileaz cu
formarea aminelor - putrescina i
cadaverina.

+
H
3
N CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
NH
3
+
+
H
3
N CH
2
CH
2
CH
2
NH CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
NH
3
+
putrescine
spermidine
3. La o decarboxilare bacterian din
Phe, Tyr, Trp se formeaz aminele
biogene corespunztoare
feniletilamina, tiramina, triptamina.
4. Degradarea catenelor laterale ale
AA ciclici duc la formarea
produselor toxice:
a. din Tyr se formeaz crezol, fenol;
b. din Trn scatol, indol.

Neutralizarea
Aceste produse toxice se absorb din
intestin i snt neutralizate n ficat.
n ficat - n prealabil substanele
toxice snt oxidate:
scatol scatoxil,
indol indoxil).
Ficatul conine E specifice
1. arilsulfotransferaza
2. UDP glucoroniltransferaza
ce transfer resturile de acid (a
sulfuric sau glucuronic) la
substanele toxice, rezultnd
compui conjugai netoxici,
eliminai prin urin.

Menionm c resturile de acid sunt
n formele active:
1. A sulfuric PAPS - 3 fosfoadenozin
5fosfosulfat
2. A glucuronic - UDP-glucuronat
scatoxil + UDP-glucuronat---
scatoxilglucuronat + UDP
indoxil + PAPS --- indoxilsulfat
+ PAP


Sarea de potasiu a indoxilsulfatului se
numete indican.




Cantitatea de indican din urin indic
gradul de putrefacie n intestin i starea
funcional a ficatului.
Transportul aminoacizilor n celule.
Se realizeaz cu ajutorul:
Transportorilor membranari (reglai
de insulin)
ciclului Glutamil Transferazic (activ
n intestin, creier, rinichi, glande
salivare)
E- glutamiltransferaza
Co - glutationul

Glutamatul
Aminoacid n afara celulei
Gama Glutamil Cisteinil Glicina
Eliberarea AA
Cisteinil Glicina
Glicina
Gama Glutamil Cisteina
AA n celul
5 oxoprolin
Gama Glutamil AA
Purttor
-GlutamilcicloTrasferaza
5-Oxoprolina
-Glutmil Cisteinil Sintetaza
Glutation sintetaza
Transferaza
Dipeptidaza
Cisteina
Gama- Glutamil
Translocaza
Membrana
citoplasmatic


Cile generale de
catabolizare a AA
Obiectivele:
1. Soarta aminoacizilor absorbii. Transportul aminoacizilor
n celule.
2. Metabolizarea NH
2
-grupelor:
3. Dezaminarea aminoacizilor. Tipurile.
Glutamatdehidrogenaza.
4. Transaminarea aminoacizilor. Aminotransferazele i
importana clinic a determinrii activitii
transanminazelor.
5. Dezaminarea indirect a aminoacizilor.
6. Decarboxilarea aminoacizilor. Influena aminelor biogene
asupra funciilor fiziologice ale organismului. Detoxifierea
aminelor biogene.
7. Metabolizarea o-cetoacizilor rezultai din aminoacizi.
8. Detoxifierea amoniacului: sinteza glutaminei,
carbamoilfosfatului, aminarea reductiv a o-
cetoglutaratului.
9. Biosinteza ureei. Importana clinic a determinrii ureei
n snge i n urin.
10. Biosinteza aminoacizilor neeseniali n organismul animal.

Ci generale i particulare de
catabolizare a AA

cile de degradare, legate de
transformarea gruprilor NH2;
decarboxilarea gr. COOH ale AA
cu formarea aminelor biogene.
cile de degradare a scheletelor de
atomi de carbon ale AA;


Cile generale
de catabolizare pot fi divizate n
urmtoarele grupe:
1. Dezaminarea
2. Transaminarea
3. Decarboxilarea

Transaminarea

este transferul aminogrupei de la orice
AA la -cetoacid, cu formarea unui nou
AA i nou cetoacid fr formarea de NH3.


H
R
1
C COO
-
+ R
2
C COO
-
NH
3
+
O
Transaminase
H
R
1
C COO
-
+ R
2
C COO
-
O NH
3
+
Transaminarea
sunt reacii reversibile;
E aminotransferaze (transaminaze);
coenzime piridoxalfosfat (PALP) i
piridoxaminfosfatul (PAMP);
E manifest specificitate de grup (utiliznd
n calitate de S civa AA)
excepie => Lyz i treonina i Pro(pierd
NH2 prin dezaminare).
Localizarea: n toate esuturile (intens:ficat,
rinichi, inim, plmni, creier)


Transaminarea
n calitate de acceptor de gr.NH2
servesc 3 cetoacizi:
1. -cetoglutaratul => Glu
2. piruvat Ala;
3. OA Asp



Rolul transaminrii
1. etapa final a sintezei AA
neeseniali
2. etapa iniial a catabolismului AA (
prima etap n DO indirect)
Alaninaminotransferaza (ALAT sau GPT-
glutamic piruvic transaminaz)
Aspartataminotransferaza (ASAT sau GOT
glutamic-OA transaminaz)
Creterea nivelului seric al lor este cauza
leziunilor celulare la nivelul esutului
afectat (sd de citoliz a esuturilor n care
se afl aceste E)

ALAT localizat n citoplasma mai
multor organe ( n C % mult mai
mari n hepatocite i miocard)
ASAT localizat att n citoplasma
ct i mitocondrii (miocard, ficat)

ALAT:
hepatita infecioas;
hepatite antiicterice - perioada de incubare;
hepatopatie toxic;
hepatita cronic.
n ciroza ficatului i icterul mecanic cresc
puin.
ASAT:
infarct miocardic n 95% (de 8-10 ori);
raportului DE RITTIS (GOT/GPT, norm 1,33)
activ. sale apare peste 4-6 ore,
manifestndu-se celor 24-36 ore; dup 3-7 zile
=> activitate atinge valori normale.

Mecanismul transaminrii
1. Legarea PALP de
un rest de Lys al E
(compus de tip
baz Schiff)


N
H
C
O
P
O
O
O
O

CH
3
HC

+
H
2
N
(CH
2
)
4
Enz
H
+
R
H
C COO

NH
2
Enzyme (Lys)-PLP Schiff base
Amino acid
2. PALP reacioneaz
cu AA, formnd o baz
Schiff, care se
detaeaz de molecula
E
3. deplasarea dublei
legturi (aldemina
cetimin), eliberarea
alfa-cetoacidului i
formarea intermediar
a PAMP



N
H
C
O
P
O
O
O
O

CH
3
HC

+
H
2
N
H
C
H
+
R COO

EnzLysNH
2
Amino acid-PLP Shiff base (aldimine)
Mecanismul transaminrii
Prima etap
Mecanismul transaminrii
A doua
etap

Dezaminarea scindarea
grupelor NH2 din poziia o ale AA
sub form de NH3

DEZAMINAREA
Oxidativ (direct i indirect)
Neoxidativ
Intramolecular

Dezaminarea oxidativ - DO

1. direct
2. indirect - transdezaminare
a. transaminare
b. Dezaminarea acidului glutamic
DO direct
E oxidazele
Co -L-AA FMN i FAD;D-AA FAD





FADH2+O2--------FAD+H2O2
H2O2-----------H2O+1/2O2

DO a AA
n esuturi la pH fiziologic e activ numai
oxidaza D-AA, pe cnd toi AA alimentari
(esuturile org.) => L AA.
pH optim pentru L oxidaze => pH=10,0
=> n condiii fiziologice e activ numai L-
enzima, ce catalizeaz dezaminarea
oxidativ a a. glutamic =>
glutamatdehidrogenaza (enzima
anaerob).
Co - NADP+ , NAD+
GluDH =>compus din 6 subuniti
Activatori: ADP, GDP
inhibitori: ATP, GTP


DO indirect (transdezaminare)
2 etape:
Transaminarea - toi AA ntr
ntr-o reacie cu o-cetoglutaratul,
rezultnd Glu (localizat n
citoplasm).
DO a Glu (E- GluDH) -
mitocondrii
Sensul biologic al reaciilor de
transaminare

const n adunareasau colectarea
gr.NH2 ale tuturor AA n structura
moleculei de acid glutamic.
Glu => ptrunde n mitocondrii =>
dezaminarea propriu zis a acidului
glutamic
E glutamatdehidrogenaza (GluDH)
Co - NADP+ , NAD+

Amino acid o-ketoglutarate NADH + NH
4
+
o-keto acid glutamate NAD
+
+ H
2
O
Transaminase Glutamate
Dehydrogenase

OOC
H
2
C
H
2
C C COO

O
+ NH
4
+
NAD(P)
+
NAD(P)H

OOC
H
2
C
H
2
C C COO

NH
3
+
H
glutamate
o-ketoglutarate
Glutamate Dehydrogenase
Dezaminarea neoxidativ
Neoxidativ direct n organism sunt
dezaminai 3 AA: Ser, Tre (E-
dehidrataze; Co- B6), Cis (E-
desulfhidrataz)

DN a Cys

Dezaminarea intramolecular
Reacia are loc doar n ficat i piele.
Soarta cetoacizilor
rezultai din AA
Biosinteza AA dispensabili-
transreaminare (sinteza AA din
cetoacizii corespunztori)
Biosinteza Gl i glicogenului
Biosinteza corpilor cetonici
Oxidai pn la CO2 i H2O
Transreaminarea
sau biosinteza aminoacizilor dispensabili
I Etap - Fixarea amoniacului la -cetoglutarat
cu formarea Glu (reaminarea)
)








II Etap Trasferul grupei -amino de la
Glu la -cetoacidul respectiv cu formarea
aminoacidului scontat (transaminarea)
H
R
1
C COO
-
+ R
2
C COO
-
NH
3
+
O
Transaminase
H
R
1
C COO
-
+ R
2
C COO
-
O NH
3
+
Sinteza AA neeseniali
din intermediarii de degradare a glucidelor:
1. glutamat + piruvat------- o-cetoglutarat +
alanina
2. 3-fosfoglicerat ----------- serina ---- glicin
3. ribozo-5-fosfat fosforibozilpirofosfat--His

din metaboliii ciclului Krebs prin
transreaminare
1. o-cetoglutarat + NH3 ------ glutamat
2. Glu + OA----- o-cetoglutarat + Asp

din aminoacizi eseniali
O2+ NADPH2
Phe----- --------- Tyr+ NADP+ H2O
Met --------------- Cys


Ala din
muchi
Glu
din muchi
i alte esuturi
Ficat
AA
Proteinele
celulare
Ceto acizii
Decarboxilarea AA

scindarea CO2 de la gr. -carboxil a AA cu
formarea de amine biogene.
E- decarboxilaza (Co- PALP)

aminele biogene

Triptofan triptamin
5 oxotriptofan serotonin
3, 4 dioxifenilalanin dofamin
histidina histamin
glutamatul aminobutirat

GLU gamma-aminobutitar (GABA)
Rolul aminelor biogene

Serotonina mediator chimic, vasoconstrictor:
1. la reglarea TA
2. t corpului
3. Respiraiei
4. filtraiei renale
5. este mediator al SNC
6. particip n dezvoltarea alergiei, toxicozei n timpul
graviditii, diatezelor hemoragice.
Dofamina sinteza catecolaminelor
Histamina:
1. vazodilatator,
2. secreia HCl,
3. particip n reaciile de sensibilizare i
desensibilizare a organismului.
aminobutiratul efect inhibitor n substana
cenuie a creierului. Se utilizeaz pentru tratarea
afeciunilor sistemului nervos, provocate de
excitaii excesive.
Neutralizarea aminelor biogene
E mono- sau diaminooxidazele
Proces ireversibil
2 etape:
R-CH2-NH2 + E-FAD+ H2O R-COH+ NH3 +
E-FADH2
E-FADH2 + O2 E-FAD + H2O2
2H2O2 H2O +O2


Soarta amoniacului
NH3 se formeaz n urmtoarele
procese:
1. dezaminarea AA;
2. detoxifierea aminelor biogene;
3. degradarea BA purinice i
pirimidinice;
4. dezaminarea amidelor AA (Asn, Gln);
5. Putrefacia AA n intestinul gros sub
aciunea microflorei

NH3 o combinaie toxic, ndeosebi
pentru celulele nervoase (creterea
mai mult de 0,6 mmol n SNC
convulsii).
Efectul toxic se exprim prin:
NH3 trece n MC unde
dezechilibreaz reacia catalizat de
GluDH,
-cetoglutarat + NH3 + NADPH +H+
glutamat +NADP
Aceast cauzeaz epuizarea -
cetoglutaratului (produs intermediar
al ciclului Krebs) ce conduce la:
reducerea reaciilor de generare a
ATP - carena energetic conduce la
micorarea sintezei mediatorilor
nervoi i dereglarea transmiterii
impulsului blocarea funciei SNC.

Cile de neutralizare a NH3
1.n esuturi(muchi, creier, glande):
are loc sinteza glutaminei sub aciunea
glutaminsintetazei citoplasmatice
(ATP i Mg)
Glu + NH3 + ATP Gln + ADP + Pa
- proces ireversibil
2. Gln snge ficat i rinichi
c% Gln n snge - de 3-5 ori mai mare
fa de ali AA

3. n ficat i rinichi:Gln (sub aciunea
glutaminazei mitocondriale):
Gln +H2O => Glu + NH3 proces
ireversibil
Aceste 2 etape mpreun - ciclul
glutamin-glutamic

4. n ficat - 80-90% din coninutul
total de NH3 - sinteza ureei.
n tubii renali NH3 este neutralizat cu
formarea srurilor de amoniu.
NH3 + H+ + Cl- NH4Cl

Dezintoxicarea NH3 n muchi
Ciclul Ala-Gl
n muchi:
AA (prin dezaminare oxidativ)- NH3
NH3+alfa-cetoglutaratGlu (GDH)
Glu+Piruvat alfa-cetoglutarat
+Ala
n snge: Ala n ficat
n ficat: Ala + alfa-cetoglutarat
Piruvat+Glu (GDHNH3uree)
Piruvatul prin gluconeogenez --- Gl
Gl n snge muchi piruvat
Sinteza ureei (Krebs-Henseleit)
ciclul ornitinic sau ureogenetic
n mitocondrii:
1. Sinteza
carbomoil
fosfatului
E carbomoilfosfatsin-
tetaz (E
biotinic, modulat
pozitiv de N-
acetilglutamat)



H
2
N C OPO
3
2
O
HCO
3

+ NH
3
+ 2 ATP
+ 2 ADP + P
i
Carbamoyl Phosphate
Synthase
carbamoyl phosphate
2. Transferul carbomoilfosfatului pe
ornitin- citrulinei
E- ornitin-carbomoil-transferaz
n citozol:
Condensarea citrulinei cu Asp



E- Arginaza:
Activat- Co, Mn
Inhibat- ornitin i Lyz


ArgininoSuccinat
Sintetaza
Arginaza
Arginino
Succinat
Liaza
Ornitin Carbamoil
Transferaza
Arginina
ArgininoSuccinat
Citrulin
Ornitin
Aspartat
Ureea
ATP
Stoichiometria procesului
CO2+NH3+3ATP+Asp+2H2O
Urea+2ADP+2Pi+AMP+PPi+
fumarat
Pentru sinteza ureei sunt necesare 4
legturi macroergice fosfat
Ureea este netoxic se elimin
prin urin (15-30g/24 ore)- variaz
proporional cu cantitatea de
proteine ngerate
Relaia ciclul ornitinic- ciclul Krebs
Ciclul ornitinic e dependent energetic i
metabolic de ciclul Krebs:
1. Energetic sinteza ATP n ciclul Krebs i
consumul lui n ciclul ornitinic
2. Metabolic fumarat (se include n ciclul
Krebs) ----OA
OA---prin transaminare --- Asp
Asp---ureogenez

Dereglrile ereditare ale ciclului
ureogenetic
1. Tipul I al hiperamoniemiei carena
Carbamoilfosfat sintetazei
2. Tipul II al hiperamoniemiei carena
Ornitin- carbamoil transferazei (cel
mai frecvent)
3. Citrulinemia clasic carena
argininosuccinat sintetazei
4. Aciduria argininosuccinic carena
argininosuccinat liazei
5. Hiperargininemia carena arginazei
Manifestri:

1. Hiperamoniemie
2. Hiperglutaminemie
3. Encefalopatie cu letargie i evoluie
spre com
4. Dereglri mixte ale EAB
5. Hiperventilare
6. Hipotermie
7. Vom


H
2
N C OPO
3
2
O
CH
2
CH
2
CH
2
HC
COO

NH
3
+
NH
3
+
CH
2
CH
2
CH
2
HC
COO

NH
3
+
NH
C
O
NH
2
COO

CH
2
HC
COO

NH
2
CH
2
CH
2
CH
2
HC
COO

NH
3
+
NH
C
NH
2
+
COO

CH
2
HC
COO

H
N
AMP + PP
i
ATP
CH
2
CH
2
CH
2
HC
COO

NH
3
+
NH
C
NH
2
+
H
2
N
COO

HC
CH
COO

C NH
2
H
2
N
O
H
2
O
P
i

ornithine
urea
citrulline
aspartate
arginino-
succinate
fumarate
arginine
carbamoyl
phosphate
Urea Cycle
1
2
3
4
Urea
Cycle
Enzymes in
mitochond
ria:
1. Ornithine
Trans-

carbamylas
e
Enzymes in
cytosol:
2. Arginino-
Succinate
Synthase
3. Arginino-

succinase
4. Arginase.

METABOLISMUL
INTERMEDIAR AL
UNOR
AMINOACIZI
OBIECTIVELE
1. Metabolismul fenilalaninei, tirozinei i triptofanului. Rolul
acestor aminoacizi n sinteza altor compui.
2. Metionina. S-Adenozilmetionina. Rolul acestui aminoacid n
organism. Sinteza creatinei.
3. Acidul tetrahidrofolic. Rolul lui n sinteza serinei, metioninei,
glicinei, timinei.
4. Metabolismul glicinei, serinei i cisteinei.
5. Metabolismul aminoacizilor dicarboxilici.
6. Glutamina i rolul ei n organism; glutaminaza rinichilor.
7. Patologia metabolismului proteic. Tulburrile congenitale ale
metabolismului aminoacizilor.
Soarta scheletului de carbon
Utilizarea scheletului de carbon al
AA
Scheletul de carbon al celor 20AA
se modific n:
1. piruvat,
2. acetil CoA;
3. acetoacetil CoA;
4. OA,
5. alfa-cetoglutarat;
6. succinil CoA;
7. fumarat.
AA glucoformatori: servesc pentru
sinteza Gl
AA cetoformatori: servesc pentru
sinteza de lipide i corpi cetonici.
Leu exclusiv cetogen
AA gluco i cetoformatori: Phe,
Tyr, Trp, Ile, Lys

Soarta scheletului de carbon
Metabolismul Phe (Fen) i Tyr
A. Sinteza
1. Fen AA
esenial
2. Tyr AA
neesenial
- se
sintetizeaz
din Fen

Fenilcetonurie:
Cauza:
DEFICITUL FENILALANINHIDROXILAZEI
DEFICITUL DIHIDROPTERIDIN-REDUCTAZEI
(MALIGN)
acumularea Phe- fenilpiruvat- fenillactat sau
fenilacetat (eliminai prin urin).
n ficat fenilacetat + Gln---- fenilacetilGln
(urina)
Fenilpiruvatul - substan toxic n special pentru
SNC
Retard mintal
Demielinizri ireversibile
Diminuat sinteza DOPA- melaninei; serotoninei.
Diet strict (pn la 6 ani)

B. Catabolismul Fen i Tyr
Pn la
fumarat i acetoacetat


Alcaptonuria - lipsa
homogentizinatoxidazei:
acumularea a.homogentizinic n
esuturi i eliminarea lui cu urina
(urina se coloreaz n albastru sau
negru). Colorarea esuturilor
(conjunctiv:cartilagiile nasului,
urechile se ntunec).Artrita la
nivelul articulaiilor mari.
TIROZINEMIILE
Tirozinemia de tip I- lipsa de
fumarilacetoacetaza, maleilacetoacetaza: vom,
diaree, deficiena de cretere (acut- exitus 6-8
luni, cronic moartea la 10 ani)
Tirozinemia de tip II
lipsa Tyr transaminazei ficatului mrirea
c%Tyr, afeciuni a pielii i ochiului, retard mintal
moderat, dereglarea coordonrii micrilor
Tirozinemia neonatal- deficit de
hidroxifenilpiruvathidroxilaz-
mrirea c% de Fen i Tyr n snge; n urin:
Tyr, tiramina, hidroxifenilacetat.

C. Reaciile metabolice
Din Phe i Tyr se sintetizeaz:
1. dopamin
2. Adrenalina, noradrenalina (hormonii
medulosuprarenali);
3. Iodtironinele (triiodtironina,
tiroxina)- hormonii tiroidei;
4. Melanina (pigmentul organismului);
5. biosinteza proteinelor, enzimelor,
unor hormoni, peptidelor biologic
active etc.
Sinteza catecolaminelor



Sinteza melaninei

Albinismul
apare n rezultatul deficienei
echipamentului enzimatic
participant la biosinteza melaninei.
Bolnavul este lipsit de pigment:
alb absolut (pielea i prul se
decoloreaz)
dezvoltai mintal normal.
Sunt afectai de razele solare
directe (pielea se afecteaz, apare
hiperemie, ulceraii etc.)
Metabolismul Trh
A.Trh AA esenial, glucogen i
cetogen
B. Catabolismul Trh: acetoacetil
CoAAcetil CoA
n timpul catabolizrii produce:
a. Ala - piruvat
b. NAD i NADP (din hidroxiantranilat)



Maladia Hartnup
Insuficiena E implicate n
catabolismul Trh (tiptofan pirolaza)
Uriticrie a pielii
Retard mintal, ataxie cerebral
Mtirea c% de Trh i indolacetic n
urin
n colon: sub influiena microflorei
bacteriene Trh---- indolilacetic
C. Reaciile metabolice:

1. sinteza
serotoninei
2. sinteza
triptaminei
3. sinteza Ala
4. Sinteza NAD
5. Prin acetilarea i
metilarea
serotoninei se
formeaz
malatonina (h al gl.
pineale)


Metionina. S-Adenozilmetionina
A. Met AA esenial, glucogen
S-adenozil metionina - donor de
gruparea CH3


B. Catabolismul Met succinil CoA:
a. Met---S-adenozilMet---S-adenozil-
homocistein--homocistein+adenozin

b. Homocisteina+Ser---
cistationina
c. Cistationina---NH3,
Cis, alfa cetobutirat
d. Cetobutiratul---
propionil CoA----
metilmalonil CoA---
succinil CoA



Homocistinurie clasic
deficit de cistation sintaz
deficit de cistationaz
deficit de vit B6, acid folic sau B12
Deficitul homocistein-metil-transferaz
Manifestri:
niveluri plasmatice i urinare
crescute de homocistein, Met i reduse de
Cis
Retard mental sever
- Leziuni neurologice, osoase, cardiace.
Hiperhomocisteinemie
promoveaz stresul oxidativ,
inflamaia i disfuncia endotelial,
leziunile vasculare apar prematur
Tromboza
Accidente vasculare cerebrale
Osteoporoza
Retard mental sever
Dislocarea cristalinului
C. Reaciile metabolice
S-adenozil-Met particip la sinteza:
a. Fosfatidilcolinei
b. Adrenalinei
c. Creatinei
d. La metilarea BA purinice i
pirimidinice: N1-metiladenozin,
metilguanozin (N2,N7)

Creatinfosfatul singurul compus cu
legturi macroergice pe care
organismul l poate depozita n
muchi.
La un efort fizic se elibereaz ATP
mai rapid dect formarea lui pe
seama glicolizei sau a LR
Creatinina se elimin cu urina
Creatina
C% plasmatic a creatinei depinde
de dezvoltarea masei musculare i
de existena unor procese
inflamatorii sau degenerative
musculare.
Creterea CK - MB: miopatii,
traumatisme musculare, inflamaii ce
afecteaz esutul muscular
Creatinina
Raportul dintre creatinina
plasmatic/ creatinina urinar este
un indicator al ratei de filtrare
glomerular.
Acidul tetrahidrofolic - THF
Derivat al AF
AF+NADPH+H------dihidrofolat +NADP
DHF +NADPH+H-----THF +NADP
Rolul
de transportator al unor fragmente cu
un atom de carbon (grupri
monocarbonice):
-metil (-CH3),
-metilen (CH2-),
-metenil (-CH=),
-formil (- CH=O)
-oximetil (-CH2-OH)
-formimino (-CH=NH)
THF particip ca coenzim n
reaciile de biosintez a serinei,
glicinei, metioninei, timinei.
La sinteza Gli (Ser)

N5-metil FH4+homocistein FH4
+Met
dUMP +N5,N10 metilen FH4 dTMP+
dihidrofolat

ANEMIA MACROCITAR
Anemia megaloblastic insuficiena
AF i/sau vit B12
Micorarea cantitativ a eritrocitelor
Pierderea Hb eritrocitele devin mari
Modificarea sintezei AN (ADN i ARN)
Micorarea vitezei eritropoiezei
Metabolismul glicinei, serinei i
cisteinei
Gli, Ser, Cis AA neeseniali, glucogeni
A. Sinteza Gli:
a. Tre
b. Ser
c. CO2+NH3+N5-N10-metilenTHF
d. din etanolamina
B. Catabolismul Gli

1. Gli ---Ser----Piruvat
2. Gli---a glioxilic (+NH3)----CO2+acid formic
(captat de FH4)
3. Gli---CO2+NH3+N5-N10-metilenTHF
CH
2
-COOH + FH
4
CO
2
+ NH
3
+ N
5
,N
10
-CH
2
-FH
4

I
NH
2


c. Reaciile metabolice a Gli
Gli particip la sinteza:
1. Serinei
2. Creatinei
3. Hemului
4. Glutationului
5. AB conjugai
6. Acidului hipuric
7. purinelor
Gli intr n componena colagenului
Gli---glicinamida ( intr n componena
oxitocinei, vasopresinei)


Rolul glutationului
2 forme:
GS-SG glutationul oxidat
GSH- glutationul redus
n forma redus e meninut de GR
(NADPH+H)
Rolul:
n reaciile de neutralizare a RL,
glutationul redus este oxidat sub aciunea
GP.
Glutationul intervine n transportul AA
(ciclul -glutamil)
Dereglrile metabolismului Gly
Hiperglicinemie - c% Gly n snge, datorat
deficitului enzimatic n catabolizarea ei.
Clinic: dereglri ale SNC, hipotonie,
convulsii,dereglri ale respiraiei.
Glicinurie - c% Gly n urin, n snge fiind
normal.
Apariia calculilor de oxalai , dar n urin oxalaii
sunt n norm.
Cauza: dereglri n metabolismul glioxilatului (defect
a E glicinaminotransferaz)
micorarea reabsorbiei Gly n rinichi
Dereglrile metabolismului Gly
Hiperoxalurie excreia urinar a
unor cantiti mari de acid oxalic,
nefrolitiaz (calculi de oxalat de
calciu), insuficien renal.
Cauza: deviaia catabolizrii Gly spre
o cale minor- ce conduce la
formarea acidului oxalic.
A. Sinteza Ser:

a. din Gli
b. din 3-fosfoglicerat
c. din fosfatidilserina


Formation of Serine
OH H
CH
2
OPO
3
-2
C
CO
2
-
CH
2
OPO
3
-2
CO
2
-
C=O
NH
3
+
H
CH
2
OPO
3
-2
C
CO
2
-
NH
3
+
H
CH
2
OH
CO
2
-
C
Glucose
Glycolysis
3-Phospho-
glycerate
3-Phospho-
hydroxypyruvate
3-Phosphoserine
Serine (Ser)
Pyruvate
Dehydrogenase
NAD
+
NADH +
H
+

Glutamate
o-Ketoglutarate
Transaminase
Phosphatase
3 Steps
Inhibits
B. Catabolismul Ser
Ser:- piruvat:
a. Serindehidratazei
b. Prin transaminare cu piruvatul
hidroxipiruvat2fosfoglicerat---
fosfoenolpiruvat---piruvat
C. Reaciile metabolice a Ser
Ser particip la sinteza:
1. Cis
2. Gli
3. Sfingolipidelor (SM)
4. Etanolaminei (la sinteza cholinei)
5. Fosfatidilserinei
6. Fosfatidiletanolaminei
7. Sinteza proteoglicanilor (la grupa OH a
cor-proteinei se ataeaz trizaharidul de
legtur i ulterior glicozaminoglicanii)
8. Sinteza colagenului (la grupa OH se
fixeaz ionii fosfat ce iniiaz mineralizarea)
A. Sinteza Cis:

a. din Ser +homocistein
b. din cistin

B. Catabolismul Cis
C. Reaciile metabolice ale Cis
Formarea legturilor disulfidice din
proteine, E, Co
La sinteza:
1. glutationului
2. taurinei (AB)
3. fosfopanteteinei (grupare
prostetic a PPA i grup
funcional a HSCoA)
AA dicarboxilici
Asp i Glu AA neeseniali,
glucoformatori
Sinteza:
1. prin reacii de transaminare
2. din alfa cetoglutarat (Glu)

Catabolismul:

Asn + H2O----Asp --------- OA
Gln + H2O---- Glu------------- alfa
- cetoglutarat
Metabolismul aminoacizilor dicarboxilici
Ac. glutamic i ac. aspartic particip la:
sinteza proteinelor;
reaciile de transaminare ale aminoacizilor;
transportul amoniacului (n form de amide);
dezintoxicarea amoniacului (Asp sinteza
ureei, Glu formarea srurilor de amoniu);
sinteza nucleotidelor;
sinteza glucozei i a glicogenului (aminoacizi
glucoformatori).
Reaciile metabolice
Glu particip la sinteza:
1. Gln
2. Pro
3. Arg
4. aminobutiratului
5. carboxiglutamatului
6. Glutationului
7. Este implicat n reaciile de DO;
transaminare


Reaciile metabolice
Asp particip la sinteza:
1. Asn
2. Ureei
3. sinteza - i -alaninei;
4. sinteza carnozinei i anserinei;
5. sinteza N-acetilaspartatului n esutul
nervos;



METABOLISMUL
NUCLEOPROTEINELOR
OBIECTIVELE
Digestia i absorbia acizilor
nucleici.
Biosinteza nucleotidelor purinice,
reglarea.
Biosinteza nucleotidelor
pirimidinice, reglarea.
Degradarea nucleotidelor purinice i
pirimidinice n esuturi. Guta.
Digestia i absorbia NP
NP alimentare se supun n TGI
urmtoarelor modificri:
1. n stomac - denaturarea NP -
separarea componentei nucleinice de
protein. (P se diger dup
mecanismul clasic)
2. n intestin sub aciunea
endonucleazelor (dribonucleazelor
sau ribonucleazelor, E pancreatice)
se scindeaz polinucleotidele pn la
oligonucleotide
3. Sub aciunea fosfodiesterazelor
(pancreatice) se elibereaz 5 i
3 nucleotide, iar a nucleotidazelor
(intestinale) are loc scindarea pn la
nucleozide i P
4. Nucleozidele sub aciunea
nucleozidazelor sunt scindate pn la
BA (purinice sau pirimidinice) i pentoz
(R sau dR)

Absorbia
R sau dR i P se absorb prin difuzie
BA purinice n celulele mucoasei
intestinale sunt transformate n acid uric,
eliminat apoi din circulaie prin urin
BA pirimidinice se transport cu
ajutorul transportatorilor membranari
O parte din produii de digestie a NP se
absorb sub form de nucleozide


BA purinice i pirimidinice
alimentare nu sunt utilizate la
sinteza AN tisulari
Fondul nucleotidelor n organism
se realizeaz prin:
1. Sinteza de novo
2. Conversia parial a
ribonucleotidelor n
dribonucleotide
3. Interconversia nucleotidelor
4. Reutilizarea bazelor purinice
Biosinteza de novo a
nucleotidelor purinice
1. Sinteza IMP
Are loc n citozol
Succesiune de 10 reacii (Gli,
Asp, Gln, CO2, FH4)
Necesit Mg, K, ATP. Se consum
6 legturi ~P (proces exergonic)
ireversibil
Predomin n ficat

2. Formarea 5-fosforibozil-
aminei
Reglarea
La nivelul PRPP sintetazei:
A: Pi
I: AMP, GMP, ATP,GTP,NAD, FAD,
CoA
Gln amidotransferaza:
A: Gln, PRPP
I: AMP,GMP,IMP, azaserina, acivicina
(anologii structurali ai Gln)
Riboza-5-P
5-fosfo-|-ribozilamin
Glu
PRPP
amidotransferasa
Gln
inozin
monofosfat
(IMP)
AA:
Gli + Gln + Asp

Cofactori:
N
10
-formil THF

N5N10-metenil THF

Glucoza-6-P
Ciclul pentozofosfat
PRPP sintetaza
ATP AMP
5-fosforibozil 1 pirofosfat (PRPP)
Sinteza inozin monofosfatului (IMP)
Se consum 6 leg P,
Proces ireversibil
Precursorii nucleului purinic

Sursa de atomi pentru IMP


Biosinteza nucleotidelor cu legturi
fosfat macroergice

Reglarea la nivelul AMP i GMP
1. Inhibiie feed-back de produi finali:
AMP-inhib Adenilosuccinat sintetaza
GMP- inhib IMP DH
2. Utilizarea ncruciat ca substrate
ATP stimuleaz sinteza GMP
GTP - stimuleaz sinteza AMP

inhibiia alosteric
PRPP sintetaza
PRPP amido-
transferaza
IMP
GMP AMP
GDP
ADP
nhibiia alosteric a sintezei purinelor;
ATP stimuleaz sinteza GMP; GTP stimuleaz sinteza AMP.
Catabolismul purinelor
Catabolismul purinelor
Acidul uric
Acidul uric se formeaz din:
Nucleotide exogene (intestin)
Din AMP i GMP rezultate din degradarea
AN tisulari
Din GMP i AMP sintetizai de novo
Acidul uric compus greu solubil n H2O.
n plasm i lichidele intersteiale se
gsete ca sare monosodic- monourat de
sodiu, fiind ceva mai solubil.
Este un AO puternic
Excreia de acid uric n 24 ore este de
400-600 mg.
Guta
Se caracterizeaz prin hiperuricemie.
Deosebim:
Primar rezultat al erorilor nscute
a metabolismului
Secundar cauzat de alte maladii
(cancer, insuficien renal cronic,
traumatisme, chimioterapii, infecii
cronice, acidoza metabolic)
Guta
Dureri artritice episodice, cronice reacia
inflamatorie declanat de cristalele de
urat fagocitate de leucocite
Nefrolitiaz favorizat formarea
calculilor de urat (n urinele mai acide i
de acid uric)
Depozite de acid uric n esuturi moi (tofi
gutoi) creterea c% uratului n snge,
depirea pragului de solubilitate,
determin precipitarea uratului monosodic
n jurul articulaiilor de la extremiti

Guta
Guta. Etiopatogeneza.
Factorul decesiv al hiperuricemiei
este creterea c% de PRPP. Cauzele_
1.sinteza crescut
2. ncetinireai ritmului de utilizare.
Deficitele enzimatice ce mresc
nivelul de PRPP (acid uric) pot fi:
PRPP-sintetaza activitate
catalitic crescut
Deficiena de hipoxantin-guanin-
fosforibozil transferazei (HGPRT) -
reutilizarea guaninei i hipoxantinei
la sinteza de IMP i GMP
Deficit de Gl-6 fosfotaz (Gl 6 P
nu ia calea gluconeogenezei dar a
ciclului pentozofosfat crete c% de
R-5P crete C% i de PRPP.

Tratamentul gutei
Administrare de alopurinol (analog
structural al hipoxantinei) inhib
xantinoxidaza i mpedic
transformarea hipoxantinei n
xantin i n acid uric. Hipoxantina i
xantina (sunt mai solubile) nu se
depun n esuturi i sunt excretate ca
produi finali ai purinelor.
Biosinteza de novo a nucleotidelor
pirimidinice
Precursorii nucleului pirimidinic:
Biosinteza de novo a nucleotidelor
pirimidinice
1. Formarea carbomoil fosfatului
(citozolic)
Formarea de UTP i de CTP
1. UMP +ATP UDP+ADP
2. UDP +ATP UTP+ADP
CTP se formeaz din UTP sub aciunea
CTP- sintetazei:


Sinteza CTP
Biosinteza
dezoxiribonucleotidelor
Are loc din nucleozid difosfai (dADP,
dGDP, dCDP, dUDP)prin reducerea de
ribozil (n poziia 2) n 2-
dezoxiribozil cu ajutoril tioredoxinei



1.NADPH+H transfer
echivalenii reductori pe o
protein mic tioredoxina ,
2. sub aciunea tioredoxin
reductazei tioredoxina se
reduce.
3. sub aciunea ribonucleotid
reductazei se reduce restul
ribozil la dezoxiribozil

Sinteza de d-TMP
Se
formeaz
din dUMP
dUDPdUTP
dUMP
dTMP
dCDPdCMP
dUMP
dTMP


Inhibitorul timidilat sintazei 5
fluoruracilul
Inhibitorul dihidrofolatreductazei
metotrexatul
Astfel se inhib sinteza ADN (utilizate
pentru a diminua rata de cretere a
celulelor canceroase)
dUMP dTMP
NADPH + H
+

NADP
+

SERINE
GLYCINE
INHIBITORS OF N
5
,N
10
METHYLENETETRAHYDROFOLATE
REGENERATION
DHF
N
5
,N
10
METHYLENE-THF
THF
dihydrofolate reductase
serine hydroxymethyl
transferase
thymidylate synthase


METHOTREXATE
AMINOPTERIN
TRIMETHOPRIM
FdUMP
X
X
Reglarea metabolismului pirimidinic




dATP inhib reducerea sa i
stimuleaz reducerea dUDP i dCTP
TTP inhib reducerea pirimidinelor
i stimuleaz reducerea purinelor.
Catabolismul pirimidinelor
Catabolismul pirimidinelor
Catabolismul pirimidinelor
Interconversiunile i reutilizarea
purinelor
La hidroliza AN, nucleozidelor se
formeaz BA purinice libere

Aceste mpreun cu BA sintetizate de
novo alctuiesc fondul metabolic
comun accesibil tuturor celulelor

Reutilizarea bazelor purinice
Purinele libere se reutilizeaz n nucleotide i
sunt utilizate din nou la sinteza AN.
Se cunosc 2 ci de rencorporare a bazelor
purinice n nucleozide (sau nucleotide)
I. Condensarea BA cu PRPP
1. Adenina + PRPP ---AMP +PP
E adenilofosforiboziltransferaza
2. Guanina +PRPP GMP +PP
3. Hipoxantina +PRPP --- IMP +PP
E hipoxantin guanilatfosforiboziltransferaza
Sinteza din produse finite este mai econom
pentru celule dect sinteza de novo.
II cale: ncorporarea purinei n
nucleotid n dou etape (minor):
2a.ribozo-1-fosfat + purin <
nucleozid+H3PO4
E-nucleozidfosforilaza
2b. nucleozid + ATP
nucleotid +ADP
E- nucleozidkinaza
Reutilizarea nucleotidelor
pirimidinice





BA pirimidinice nu sunt reutilizate ci
degradate (beta-Ala, beta-
aminoizobutiric +CO2 +NH3)


METABOLISMUL
CROMOPROTEINELOR
Obiectivele
Structura chimic i rolul biologic al
cromoproteinelor.
Digestia i absorbia cromoproteinelor.
Biosinteza hemului. Reglarea procesului.
Catabolismul hemoglobinei n esuturi.
Legtura dintre pigmenii sanguini, biliari,
urinari i a maselor fecale. Importana
determinrii lor n diagnosticul i
diferenierea icterelor.
Metabolismul fierului n organism.

Structura chimic i rolul biologic al CP
proteine conjugate:
partea proteic+ partea neproteic:
pigment (substan colorat).
Reprezentanii:
1. clorofila,
2. hemoproteidele
3. Flavoproteidele
Rolul:

1. particip n fotosintez,
2. respiraia tisular, reaciile de
oxido-reducere
3. transportul oxigenului i CO2
4. senzaiile de lumin i culoare

Hemoproteidele
substane complexe alctuite din
proteine + hem (heterocicluri
tetrapirolice neproteice) i ioni
ai metalelor
Reprezentanii principali:
hemoglobina
mioglobina,
citocromii,
catalaza
peroxidaza
Structura hemului
4 inele
pirolice
+Fe +puni
metinice
(, , , )
4 radicali
metil
2 vinil
2 resturi de
a propionic
Digestia hemoproteinelor
n tractul digestiv sub influena E
- se scindeaz n componenta
proteic i hem.
Proteina simpl degradeaz pn
la AA dup mecanismul clasic
Hemul - nu se supune
transformrilor i este eliminat
cu masele fecale.

Succinil CoA + Glicina
MITOCONDRIA
CITOPLASMA
Aminolevulinat dehidrataza
Enzima conine zinc
C
C
4 molecule
combinate
Uroporfirinogen III Coproporfirinogen III
o-Aminolevulinat
sintaza
piridoxal fosfat
dependent
o-Aminolevulinat
C
Porfobilinogen
C
Coproporfirinogen III
Protoporfirina IX
C
Ferrohelataza
HEM
Fe
2+


o-Aminolevulinat
(dou molecule)
Biosinteza Hemului

Biosinteza hemului

Substanele iniiale n sinteza hemului sunt Gli
i succinil-CoA,
Localizare: n toate esuturile, dar cu intensitate
mai mare n celulele sistemului eritroformator
din mduv, ficat i splin.
Etapele:
1. sinteza acidului aminolevulinic
2. Formarea porfobilinogenului
3. Formarea protoporfirinei IX
4. Unirea protoporfirinei IX cu Fe2+

E- aminolevulinatsintaza
(mitocondrial)
A ALS este o enzim:

mitocondrial
piridoxal fosfat i Mg++ dependent
masa molecular de 400000 D.
Reglarea o-ALA sintazei (alosteric):
1. este inhibat de hem
2. se regleaz prin inducie-represie (sinteza
este indus prin scderea c% hemului; iar
represia invers)
Aciune inductoare o au: barbituricele,
insecticidele, sulfamidele, h. estrogeni
Aciune represoare: glucoza
Hipoxia mrete activitatea E n
esuturile eritropoietice, fr efect n ficat

Aminolevulinat dehidrataza


1. este o E citoplasmatic,
2. are ca cofactor ionul de Zn i PALP.
3. Este inhibat alosteric de hem i
hemoproteine.
4. Activitatea sa este diminuat n
saturnism (intoxicaie cu Plumb) i n
alcoolism (acut sau cronic).

Porphyrin from -aminolevulinate/heme (ferrochelatase)

Patru molecule de porfobilinogen se
condenseaz cu formare de uroporfirinogen III
este prezent n citoplasma hepatocitelor.
E-
porfobilinogendezaminaza+uroporfirinogencosint
aza
este termolabil (se denatureaz la 60C).


Decarboxilarea uroporfirinogenului
III
Uroporfirinogen decarboxilaza - este o
E citoplasmatic (4 radicali de acid
acetic metil).

Oxidarea Coproporfirinogenului III
Coproporfirinogen oxidaza: - E
mitocondrial (decarboxileaz i
dehidrogeneaz oxidativ)
ce transform doi radicali propionil n
vinil.
Oxidarea protoporfirinogenului
Protoporfirinogen oxidaza catalizeaz
formarea legturilor duble n inelul
porfirin
Adiionarea Fe
Ferochelataza fixeaz atomul de Fer cu
formare de hem.
Exist mai multe izoenzime a
ferochelatazei n mitocondrii sau n
citoplazm care conduc la sinteza de
hemoglobin, citochromi.

Porfiriile
boli metabolice produse de
defectele enzimatice n procesul
de biosintez a hemului
Se caracterizeaz prin
supraproducia, acumularea i
eliminarea precursorilor de hem
Clasificarea porfiriilor
1. primare cauzate de defecte
enzimatice ereditare
2. Secundare sunt consecutive
altor afeciuni ( diabet,
intoxicaie)
Porfiriile primare dup localizare
pot fi:
- eritropoietice
- hepatice
- mixte
Porfiriile eritropoietice

1. Porfiria eritropoietic
congenital (Gunther)
2. Protoporfiria

Porfiriile hepatice

1. Porfiria acut intermitent
2. Porfiria variegata
3. Coproporfiria ereditar
4. Porfiria cutanea tarda
Transmiterea autosomal dominant
Manifestare simpomelor trziu
(pubertare)
Provocat de factori medicamentoi
(sulfamide, estrogeni,
anticoncepionale)
PORFIRIILE
GLICINa + SuccinilCoA
o-aminolevulinat(ALA)
Porfobilinogen(PBG)
hidroximetilbilan
uroporfirinogen III
coproporfirinogen III
Protoporfirinogen IX
protoporfrin IX
Hem
ALA sintaza
ALA dehidrataza
PBG dezaminaza
Uroporfirinogen III
cosintaza
Uroporfirinogen
decarboxilaza
Coproporfirinogen
oxidaza
Protoporfirinogen
oxidaza
Ferrohelataza
Porfiria deficienei
ALA-dehidratazei

Porfiria Acut
intermitent

Porfiria eritropoietic
congenital
Porfiria
cutanea tarda
coproporfiria
erediatar

porfiria
Variegat
protoporfiria
eritropoietic
Mitochondria
9q34
11q23
10q26
1q34
9
1q14
18q21.3
3p21/Xp11.21
Agent Orange
Porfiria eritropoietic congenital
- afeciune rar
- autosomal recesiv
Cauza: sinteza defectuoas a uroporfirinogen III
cosintetazei
Supraproducerea de uroporfirinogen I i
coproporfirinogen I (elimin prin urin i masele
fecale) urina e de culoare roie
Eritrocitele se distrug prematur
Clinic:
1. Hepatomegalie
2. Fotosensibilitate mare cu producerea de eriteme i
vezicule ce las cicatrice
3. Dinii roii
4. Anemie hemolitic
5. Setea de snge

Protoporfiria
este determinat de deficiena
sintezei ferochelatazei
Eritrocitele, plasma i masele
fecale conin n cantiti mari
protoporfirina IX
Reticulocitele i pielea prezint
fluorescen roie
Ciroz
urticrie
Porfiria acut intermitent
Activitatea sczut a
uroporfirinogensintetazei
Cretereas c% de aminolevulinat i
porfobilinogen (se elimin cu urina, ei sunt
incolori, dar n contact cu aerul i lumina se
polimerizeaz nchid culoarea urinei)
Simptome:
Dureri abdominale
Paralizii periferice
Tulburri ale SNC (depresii, psihoze)
Porfiria cutanea tarda
Cea mai frecvent
E cauzat de deficitul uroporfirinogen
decarboxilaza
se mrete c% uroporfirinogen I i
III
Manifestrile clinice:
Fotosensibilitatea cutanat (eriteme,
vezicule, cicatrice
Tulburri abdominale
Tulburri neurologice
Fluorescena ficatului
Coproporfiria ereditar
Defect enzimatic n sinteza
coproporfirinogenoxidaza
(mitocondrial)
eliminarea renal i prin masele
fecale a unor cantiti excesive de
coproporfirinogen III (n contact cu
aerul se oxideaz la coproporfirin
III, care este colorat n rou)
Clinic: simptomele porfiriei acute
intermitente + fotosensibilitatea
cutanat
Porfiria variegata
Micorarea sintezei protoporfirinogen
oxidazei + ferochelatazei
Mrirea c% de protoporfirin,
coproporfirin, uroporfirin
La debutul bolii se mrete
aminolevulinatul i porfobilinogenul
n urin
Apare o porfirin atipic- X
hidrofil, ce are ataat un rest
peptidilic
Simptomele clinice ca la
coproporfiria eriditar
Catabolismul Hb
Zilnic se degradeaz 6 g Hb (300 mg de
hem)
Durata vieii eritrocitelor este de 120 zile
Ruperea membranelor celulelor mbtrnite
ale eritrocitelor eliberarea Hb
1. Hb + haptoglobina se formeaz
complexul Hb-Haptoglobin, fagocitat
de macrofagele sistemului RE
(reticulului endotelial) n special al
ficatului, splinei i ganglionilor
limfatici
n RE al ficatului, splinei i ganglionilor limfatici

2.a. oxidarea microsomial a
complexului sub aciunea
hemoxigenazei microsomiale - se
obine un intermediar
hidroxihemina (gr OH la C metinic
i fierul n stare oxidat (Fe3+).
2b. scindarea punii metinice sub
aciunea hemoxigenazei
(monooxigenaz solicitant de O2 i
NADPH, se elimin CO verdoglobina
3. Verdoglobina pierde Fe i
globina se transform n
biliverdin. Globina este
hidrolizat la AA, iar Fe se leag
de transferin (este reciclat sau
depozitat n ficat)
Biliverdina pigment biliar de
culoare verde.
4. reducerea
biliverdinei
(NADPH+H) la
nivelul punii
metinice
/biliverdinredu
ctazei/ -
bilirubina
(galben-
portocalie)

5. n snge: bilirubina se leag cu
albumina i este transportat la
ficat
Bilirubin liber indirect 75%
din toat cantitatea (2,5-10
mg/l; 8,7-17 mol/L)
Este toxic
Nu trece prin filtrul renal
Nu se elimin prin bil
Reacie indirect cu diazoreactivul
Prin difuziune facilitat bilirubina
trece n ficat unde se leag de 2
ligandine (Y i Z).
6. n ficat: sub aciunea bilirubin-
UDP-glucoronil-transferazei,
bilirubina se conjug cu a glucuronic
activat (UDP glucuronat) mono i
diglucuronid (hidrosolubili)
Bilirubina conjugat, direct
Valoarea medie: 2,6 mol/L
Sub form de glucuronid se excret
prin bil n intestinul subire (o
cantitate f mic reabsorbit ficat),
dar cea mai mare parte trece n
intestinul gros
7. n ileonul terminal i intestinul
gros glucuronidaza (produs de
bacteriile microflorei intestinale)
nltur resturile acidului glucuronic
i transform bilirubina n
mesobilirubin, care sufer o serie de
reduceri ------mesobilinogen
(urobilinogen), care prin reduceri
ulterioare se va transforma n
stercobilinogen.
Ultimul cu masele fecale se elimin n
mediul ambiant se oxideaz pn la
stercobilin
8. O parte din mesobilinogen
(urobilinogen), se reabsoarbe n
sistemul v portae se intorc n ficat se
scindeaz la dipiroli, care se elimin cu
bila n intestin ciclul entero-hepatic al
pigmenilor biliari
9. alta - se reabsoarbe la nivelul venelor
hemoroidale, care prin sistemul v cava
inferior nimerete n sistemul general. Se
elimin pe cale renal cu urina (0,5-2,4
mg timp de 24 ore)
Eritrocit
Ficat
Bilirubin diglucuronat
(solubil n ap)
2 UDP-glucuronat
Cu bila spre intestin
Stercobilin
excreted in feces
Urobilinogen
formed by bacteria



RINICH
I
Excreia cu
urina Urobilin
CO
Biliverdina IXo
Heme oxygenase
O
2

Bilirubina
(insolubil n
ap)
NADP
+

NADPH
Biliverdin
reductaza
Heme
Globin
Hemoglobina
Reabsorbia in
snge
Bilirubin
(insolubil n
ap)
Prin snge
spre ficat
INTESTIN
Catabolismul hemoglobinei
Dereglrile catabolismului Hb
Icterul ce se caracterizeaz
prin:
1. Hiperbilirubinemie - creterea
c% bilirubinei n snge
2. Coloraia specific a
tegumentelor (galbena) i
lichidelor biologice
Cauzele hiperbilirubinemiei
1. Creterea v de formare a bilirubinei
(creterea degradrii hemului);
2. Scderea capacitii ficatului de a capta
bilirubina
3. Scderea capacitii ficatului de a
conjuga bilirubina
4. Perturbarea mecanismului eliminrii prin
bil
5. Tulburri extrahepatice ale fluxului biliar
3 tipuri de icter
Prehepatic hemolitic
Hepatic (hepatocelular)
parenhimatos
Posthepatic obstructiv
A. hemolitic
Exces de
hemoliz
q bilirubina neconjugat
(n snge)
^ bilirubina conjugat
(se elimin cu bila)
B. Hepatic
q bilirubina neconjugat
(n snge)
q bilirubina conjugat
(n snge)
C. Obstructiv
^ bilirubina neconjugat
(n snge)
q bilirubina conjugat
(n snge)
Tipuri de ictere
Icterul hemolitic - prehepatic


Cauza hemoliza masiv (degradarea
exagerat a eritrocitelor)
nsoit de o cretere a bilirubinei
libere (indirecte), care depete
capacitatea de conjugare a ficatului.
Pe contul ei crete i bilirubina
total.

Icterul hepatic (hepatocelular)
Hepatic:
1. Premicrosomal
2. Microsomal
3. postmicrosomal
Hepato premicrosomal
Sindrom

Defect

Bilirubina

Clinic

Crigler-
Najjar I - AR

Incapacitatea
ficatului de a
produce UDP-
glucuronil-
transferazei
Bilirubinei
indirecte
lll
Bilirub
direct-abs
n bil
Icter profund
Dereglri SNC
Crigler-
Najjar II - AD

Defect
parial UDP-
glucuronil-
transferazei


Bilirubinei
indirecte l
Semnele
bolii sunt
mai puin
severe
3. Boala Gilbert
Cauzele:
a. Legarea atipic mai stabil a
bilirubinei la albuminele sanguine;
b. deficiena captrii bilirubinei libere
de ctre ficat
C% bilirubinei indirecte l, fr
modificri n urin i masele fecale
4. Icterul neonatal fiziologic-
hemoliza eritrocitelor +imaturitatea
ficatului de a prelua, conjuga i excreta
bilirubina (deficit de UDP- glucoronat): l
C% bilirubinei indirecte

Hepatic microsomal- hepatocelular
Apare n hepatite acute virale,
infecioase; cronice, alcoolice,
medicamentoase i ciroze hepatice.
Provocat de afectarea principalelor
funcii hepatice privind metabolismul
pigmenilor biliari (captarea,
conjugarea i excreia)
Crete bilirubina total, direct,
indirect; urobilinogenul n urin
Hepatic postmicrosomal
Provocat de perturbarea eliminrii
bilirubinei n bil i colestazei exclusiv
intrahepatice
A. Ereditar:
1. Sd Dubin-Johnson defect al secreiei
bilirubinei conjugate n canaliculele biliare
(biliubina conjugat mrit, culoarea
ficatului este nchis)
2. Sd Rotor asemntor cu Sd Dubin-
Johnson, dar nu se produce sinteza
pigmentului brun n ficat
B. Dobndit ciroza postnecrotic, biliar;
atrezie canalicul biliar

Hepatic postmicrosomal
Crete c% E, ce denot colestaza
(fosfotaza alcalin, gama
glutamiltransferaza, 5-
nucleotidaza)+ creterea
bilirubinei directe i indirecte,
urobilinogenul urinar micorat
sau lipsete, dar se detecteaz
pigmeni i sruri biliare
Icter posthepatic mecanic -
obstructiv
Tulburarea fluxului biliar perturbarea
eliminrii bilei (blocarea canalelor biliare)
Cauzele:
1. Litiaza biliar
2. Neoplasme (ci biliare)
1. Crete f mult bilirubina direct (conjugat)
n snge ct i n urin - mai mare ca n
icterul hepatic;
2. cresterea sarurilor biliare,
3. hipercolesterolemie,
4. Urobilina i urobilinogenul vor fi normale
sau scazute (n caz de obstrucie total
scaunul este decolorat).

Icterele cu patogenie mixta
n afar de faptul c un icter mecanic
poate duce la leziuni hepatocelulare, ca un
icter prin hepatita poate determina trombi
biliari sau ca un icter hemolitic poate avea
si cauze inflamatorii hepatice si elemente
obstructive, exista unele ictere care de la
bun inceput au o patogenie mixta. Asa
este cazul in toxiinfectiile grave
(septicemia cu B. perfringens,
spirochetoza icterohemoragica, pneumonia
grava etc), in care icterul este hepatic si
totodata hemolitic.