/

2. ANTIGENUL Sistemul imun are capacitatea fundamental de a deosebi structurile proprii ale organismului (self) de cele strine (non-self). Structurile non-self sunt eliminate prin mecanismele aprrii imune. Termenul de non-self nu implic obligatoriu originea exogen a substanei respective. Exist molecule sau celule proprii ale organismului, care au facut parte din self, dar au suferit modificri i au devenit non-self. Antigenul este o substan recunoscut ca non-self de ctre sistemul imun al organismului. n definiia clasic, termenul de antigen desemna orice substan de origine exogen capabil s induc formarea de anticorpi i s reacione!e "n mod specific cu acetia. Aceast definiie a fost considerat prea restrictiv, pe msura ce s-a observat ca exist antigene de origine endogen sau antigene care nu induc sinte!a de anticorpi, dei sunt recunoscute de sistemul imun. #ntr-o definitie folosit "n pre!ent, termenul de antigen denumete o substan de origine endogen sau exogen capabil s determine un rspuns imun i s reacione!e specific cu moleculele re!ultate "n urma declanrii acestuia (anticorpi sau receptori celulari). Aceast definiie sublinia! cele dou proprieti fundamentale ale antigenului$ imunogenitatea (capacitatea de a induce un rspuns imun) i specificitatea (capacitatea de a reaciona specific cu produsele sistemului imun activat). munogenele sunt antigene complete, av%nd at%t capacitatea de a elicita rspuns imun umoral sau celular, c%t i de a se lega de produsele re!ultate. Antigenele incomplete (numite i &aptene) sunt capabile s reacione!e cu anticorpii sau receptorii de membran, dar nu pot declana un rspuns imun, dec%t daca sunt cuplate cu o alta molecul (numit carrier). Au fost descoperite antigene care, dei "ndeplinesc caracteristicile fundamentale de imunogenitate, nu produc raspuns imun umoral sau celular. Acestea au fost denumite tolerogene, iar semnificaia lor imunologic este diferit. Spre desebire de &aptene, pe care le putem aprecia ca fiind 'indiferente( sistemului imun, tolerogenele activea! anumite mecanisme de in&ibiie activ a sistemului imun. )spunsul imun adaptativ poate fi repre!entat sc&ematic astfel$ Raspuns imun umoral (RIU) Antigen * +imfocit , - .lasmocit * +imfocit , cu memorie. Rspuns imun celular (RIC) Antigen * +imfocit T - +imfocit T efector * +imfocit T cu memorie. Este important de subliniat c sistemul imun are un repertoriu ex&austiv de limfocite care exist "nainte de ptrunderea unui antigen "n organism. Aceste limfocite, inactive metabolic, exprim pe membrana celular receptori care sunt specifici unui singur antigen inductor. Se estimea! c numrul receptorilor identici structural de pe suprafaa unui limfocit , este de aproximativ /01. Antigenul care ia contact cu sistemul imun va selecta limfocitele capabile s-l recunoasc (proces numit selecie clonal). #n urma semnalelor intracelulare transmise, limfocitele sunt activate metabolic i se vor multiplica rapid (expansiune clonal). Etapa final o repre!ina sinte!a unor molecule care se combin specific cu antigenul declan2ator.

: 3oleculele de recunoa2tere a antigenului sunt anticorpii (imunoglobulinele) 2i anumite tipuri de receptori de pe membranele limfocitelor, numii ,4) (,-4ell )eceptor) 2i T4) (T-4ell )eceptor). Antigenele cu care organismul vine "n contact pot fi solubile sau corpusculate$ Antigenele solubile sunt molecule recunoscute ca non-self. 5e obicei antigenele solubile sunt proteine cu greutate molecular mare, peste /0 65a. 7neori antigenele solubile sunt poli!a&aride, aci!i nucleici sau glicolipide. Antigenele corpusculate sunt structuri non-self mai complexe$ virusuri, bacterii, proto!oare, celule strine, celule infectate, celule neopla!ice. 5e fapt, antigenele corpusculate sunt formate dintr-un numr foarte mare de molecule antigenice. 5intre ele, cele mai importante pentru recunoa2terea 2i distrugerea antigenului corpusculat sunt antigenele de suprafa. )spunsul imun nu apare obligatoriu dup contactul cu un antigen$ Antigenele care induc un rspuns imun se numesc imunogene. Antigenele care induc "n mod activ supresia rspunsului imun se numesc tolerogene. 4apacitatea unei substane de a induce un rspuns imun depinde at%t de proprietaile intrinseci ale acesteia, c%t i de anumite caracteristici ale sistemului biologic cu care aceasta vine "n contact. 4&iar dac o anumit molecul indeplinete toate condiiile pentru a fi imunogen, abilitatea ei de a declana un rspuns imun va depinde in egal masur de caracteristicile genetice ale organismului. 4ele mai importante proprieti ce influenea! capacitile imunogenice ale unei molecule sunt$ &eterogenitatea structural, solubilitatea, mrimea, complexitatea c&imic, concentraia, capacitatea de a fi procesat de ctre A.4, administrarea concomitent a unor ad8uvani. 4ele mai importante trsturi individuale sunt genotipul i calea de administrare. Clasificarea antigenelor n func!ie "e origine 3a8oritatea antigenelor sunt exogene$ bacteriile, para!iii, unele substane c&imice industriale, alergenele ca polenul, praful de cas, alergenele alimentare. 9 alt categorie important este repre!entat de antigenele endogene$ autoantigenele, antigenele virale 2i antigenele tumorale. Autoantigenele sunt antigene proprii care "n mod normal sunt sec&estrate prin bariere anatomice. Aceste antigene sunt situate "n a2a-numitele 'situsuri imunologice privilegiate(, prote8ate prin bariere &emato-tisulare cu permeabilitate sc!ut pentru substanele &idrosolubile. #n mod normal autoantigenele nu vin niciodat "n contact cu celulele sistemului imun 2i nu induc un rspuns imun. Exemple de astfel de autoantigene sunt$ sperma, cristalinul, esutul cerebral 2i unele structuri din celulele miocardice. .entru c autoantigenele nu sunt cunoscute de ctre sistemul limforeticular, pentru ele nu exist toleran imun "nnscut, ca pentru celelalte structuri self cu care limfocitele vin "n contact "n cursul traficului lor prin organism. #n condiii patologice se produce desec&estrarea acestor autoantigene. Autoantigenele vin "n contact cu sistemul imun 2i se produce un rspuns imun fa de ele, deci fa de ni2te structuri self. Aceste rspunsuri imune autoreactive dau o patologie autoimun. Antigenele virale fac parte din categoria antigenelor endogene pentru c virusurile "2i includ genomul "n genomul ga!dei. 4elula ga!d sinteti!ea! proteinele virale antigenice pe acelea2i ci metabolice ca proteinele proprii.

; Antigenele tumorale se gsesc pe membranele 2i "n citoplasma celulelor canceroase. Ele nu se gsesc pe membranele sau "n citoplasma celulelor normale din care a derivat tumora. 9rice organism normal produce un numr mic de celule canceroase, care sunt distruse rapid de sistemul imun. .revenirea apariiei tumorilor se face prin distrugerea celulelor tumorale i!olate, "n cadrul unui proces de imunosupraveg&ere. 5ac o celul neopla!ic i!olat reu2e2te s se divid 2i apare o tumor constituit, rspunsul imun "mpotriva tumorii seamn cu cel din respingerea grefelor. #n ambele situaii acionea! "n special mecanismele rspunsului imun celular.

#ropriet!ile "e $a% ale antigenelor .roprietile fundamentale ale antigenelor sunt imunogenitatea i antigenitatea. munogenitatea este proprietatea unei substane de a declan2a "ntr-un organism un rspuns imun specific de tip ) 7 sau ) 4. Specificitatea sau antigenitatea este proprietatea unei substane de a se combina specific cu moleculele de recunoa2tere a antigenelor, adic cu anticorpii 2i cu receptorii de membran. Imunogenitatea munogenitatea este proprietatea unui antigen de a declan2a un rspuns imun. 5eclan2area rspunsului imun este un proces complex care cuprinde obligatoriu trei etape succesive$ selecia clonal, activarea metabolic 2i proliferarea limfocitelor din clona selectat. &igura ' (elec!ia clonal

+imfocit /

A.4 Ag +imfocit :

activare 2i proliferare

+imfocit ;

Selecia clonal repre!int selecia dintr-o mare varietate de limfocite, de8a existente 2i pre!ente "n organele limfoide, numai a limfocitelor antigen-specifice. 5up ce intr "n organism,

= antigenul este transportat prin s%nge sau limf "n organele limfoide periferic$ ganglioni limfatici 2i splin. Acolo antigenul este pre!entat de unele celule speciali!ate (A.4 < antigen presenting cell) spre un numr foarte mare de +T 2i +,. Antigenul este recunoscut doar de limfocitele antigen-specifice, adic de acele limfocite care au pe suprafa receptori care se potrivesc cu antigenul, pe principiul c&eie-broasc. Antigenul este recunoscut de receptorii T4) de pe suprafaa +T sau de receptorii ,4) de pe suprafaa +,. #n exemplul pre!entat cele trei limfocite difer prin receptorii de suprafa pentru antigen. )eceptorii au situsurile de recunoa2tere a antigenului cu structur diferit, ceea ce "nseamn c cele trei limfocite aparin unor clone diferite, care recunosc antigene diferite. +imfocitele care aparin aceleia2i clone au pe suprafa acela2i tip de receptor pentru antigen. 5intre cele trei limfocite, numai limfocitul : este antigen-specific, adic are pe membran receptori care recunosc antigenul pre!entat de A.4 2i se combin cu el. Activarea clonal este procesul prin care limfocitele din clona selectat (numai limfocitul : din figura de mai sus) se activea! metabolic. .roliferarea sau expansiunea clonei activate este procesul prin care limfocitele din clona activat se divid prin mito!e 2i astfel cre2te foarte mult numrul de limfocite identice. #n figur, cele patru limfocite re!ultate prin proliferare sunt identice cu limfocitul :, au pe suprafa acela2i tip de receptor de recunoa2tere a antigenului (,4)), deci fac parte din aceea2i clon. Antigenitatea sau specificitatea Antigenitatea sau specificitatea este proprietatea antigenului de a reaciona specific numai cu receptorii antigenici sinteti!ai special pentru el. )eceptorii pot fi molecule solubile sau molecule legate de membranele limfocitelor$ )eceptorii solubili sunt anticorpii sau imunoglobulinele. )eceptorii membranari de recunoa2tere a antigenului care se afl pe membrana +, se numesc ,4) (,-cell )eceptor), iar cei care se afl pe membrana +T se numesc T4) (T-cell )eceptor). Clasificarea antigenelor n func!ie imunogenitate )i specificitate #n practic nu toate antigenele au ambele proprieti. #n funcie de imunogenitate 2i de specificitate, antigenele pot fi de dou categorii$ Antigenele complete sunt acele antigene care au specificitate 2i imunogenitate. Antigenele incomplete sunt unele antigene, de dimensiuni foarte mici, care au doar specificitate. Ele se numesc &aptene. Antigenele complete sau imunogene Antigenele complete au ambele proprieti$ imunogenitate 2i specificitate. Ele sunt capabile s declan2e!e un rspuns imun 2i apoi s reacione!e specific cu anticorpii produ2i. 3a8oritatea antigenelor din natur, "n special cele cu structur proteic, sunt antigene complete. Antigenele complete pot s declan2e!e rspunsul imun prin mecanisme diferite, cu sau fr participarea limfocitelor T (+T). 5in punct de vedere al necesitaii participrii limfocitelor T &elper "n cadrul ) 7, antigenele se "mpart "n$ timoindependente - antigene care pot declan2a ) 7 "n absena +T &elper (mai ales antigenele poli!a&aridice bacteriene). )spunsul este rapid, fapt important "n infeciile cu microorganisme agresive. 5e!avanta8ul este c ace2ti anticorpi nu sunt la fel de funcionali ca cei re!ultai prin participarea +T &elper 2i nu exist mecanismul de comutarea i!otipica, care permite sinte!a a diferite clase de imunoglobuline. n plus, nu se formea! limfocite , cu memorie.

1 timodependente - repre!int ma8oritatea antigenelor. )spunsul imun declan2at de aceste antigene este mai puin rapid, dar mai versatil 2i mai eficient. #n plus, apar limfocite , cu memorie, care permit un rspuns mult mai rapid i intens la un nou contact cu antigenul (rspunsul imun umoral secundar).

Antigenele incomplete sau haptenele >aptenele au numai specificitate. Ele reacionea! specific, adic se combin cu receptorii antigen-specifici, respectiv cu anticorpii anti-&apten, dac ace2tia exist. >aptenele nu au imunogenitate din cau! c au o greutate molecular foarte mic 2i nu pot declan2a singure un rspuns imun. >aptenele pot declan2a un rspuns imun doar dac se cuplea! cu macromolecule imunogene numite purttor sau carrier. Administrarea la animalul de experien a &aptenei nu determin apariia anticorpilor, pe c%nd administrarea complexului &apten-carrier induce formarea a trei tipuri de anticorpi$ anticorpi anti-&apten < se pot lega at%t de &aptene libere, c%t i de cele cuplate cu moleculele carrier anticorpi anti-carrier anticorpi care se leag doar de complexele &apten-carrier #n acest mod, o serie de substane c&imice industriale sau medicamente pot s aib rol de &apten, combin%ndu-se cu proteine normale ale organismului, care au rol de carrier. 4omplexele astfel formate sunt antigene complete 2i determin rspunsuri imune patologice numite reacii de &ipersensibili!are, cu formarea de anticorpi anti-&apten 2i anti-carrier. 3oleculele de &aptene ca atare nu sunt imunogene, adic nu pot s declan2e!e singure rspunsul imun. 3oleculele individuale de &apten sunt recunoscute de receptorii ,4), dar aceast recunoa2tere interesea! receptori a2e!ai la distan pe suprafaa +,, astfel c stimulii activatori au intensitate slab 2i nu declan2ea! activarea metabolic a +,. Activarea +, se declan2ea! numai c%nd &aptenele sunt pre!entate spre +, "ntr-o form multivalent, adic un numr mare de &aptene identice sunt pre!entate grupat 2i sunt recunoscute de mai muli receptori ,4) a2e!ai "n apropiere pe membran. Antigenele complete cuprind structuri cu rol de carrier 2i de &apten. 4omponenta &aptenic d specificitatea antigenului, "n timp ce ansamblul carrier-&apten d imunogenitatea. #n funcie de &apten se face selecia clonal. .re!entarea &aptenelor spre o !on mic din membrana +, se reali!ea! atunci c%nd &aptenele fac parte din structura unui antigen complet$ Antigenele timoindependente bacteriene (de ex. flagelina 2i lipopoli!a&aridul) au un carrier cu greutate molecular foarte mare. 5e carrier se leag multe grupri &aptenice identice, care sunt recunoscute de muli receptori ,4) grupai "n aceea2i regiune a membranei +,. 5e aceea antigenele timoindependente pot activa direct +,. Antigenele timodependente au un carrier cu greutate molecular mai mic, de care se leag &aptena. Aceste antigene au nevoie de +T>, care recunosc partea carrier 2i pre!int antigenul cu partea &aptenic spre receptorii +,. +T> pre!int &aptenele pe o !on mic de pe suprafaa +,, reu2ind s stimule!e un mare numr de ,4) din aceea2i regiune a membranei +,. *eterminan!ii antigenici sau epitopii 5eterminanii antigenici sunt segmentele imunologic active ale moleculei de antigen care se leag de anticorpii sau de receptorii limfocitari specifici. )aportat la noiunile precedente, determinanii antigenici ar cuprinde &aptena 2i o mic parte din molecula carrier. Antigenul este, de obicei, o macromolecul cu suprafaa neregulat. 9 molecul de anticorp are contact doar cu un anumit fragment din structura acestuia. Situsul combinativ al

? anticorpului 2i suprafaa de antigen pe care o recunoa2te sunt complementare din punct de vedere al conformaiei "n spaiu 2i al structurii c&imice. )egiunea din antigen care se combin cu anticorpul (sau cu receptorul de membran) se nume2te determinant antigenic sau epitop. (tructura )i func!iile "eterminan!ilor antigenici 5eterminanii antigenici au compo!iii c&imice variate 2i conin grupri &idrofile (polare) 2i &idrofobe. 5up structur determinanii antigenici 2i epitopii pot fi liniari sau conformaionali. 5eterminanii liniari sunt formai dintr-un lan de aminoaci!i sau de mono!a&aride "n cadrul structurii primare, "n timp ce determinanii conformaionali apar "n cadrul structurii secundare sau teriare a moleculei proteice sau glicoproteice. Determinanii antigenici liniari sau secveniali 5eterminanii antigenici liniari sau secveniali sunt caracteri!ai prin succesiunea aminoaci!ilor "n lanul proteic sau a mono!a&aridelor "n lanurile glicoproteice, "n cadrul structurii primare. Ace2tia sunt recunoscui doar de receptorii T4) ai +T. 5eterminanii liniari sunt interiori!ai, adic sunt a2e!ai "n interiorul moleculei de antigen. Ei sunt expu2i la exteriorul moleculei numai dup procesarea antigenului nativ, prin aciunea en!imelor proteolitice ale A.4. .entru recunoa2terea epitopilor liniari de ctre +T este obligatorie prelucrarea 2i pre!entarea lor de ctre A.4. Determinanii antigenici conformaionali 5eterminanii antigenici conformaionali, tridimensionali sau spaiali sunt formai din mai multe grupri de aminoaci!i sau mono!a&aride situate "n regiuni diferite ale lanului proteic sau glicoproteic, sau c&iar pe dou lanuri diferite. +anurile sunt aduse "n apropiere prin puni disulfurice sau legturi necovalente, intra sau intercatenare. Aceste puni fac bucle "n molecul. 7neori determinanii conformaionali iau na2tere la limita de contact dintre dou uniti repetitive "n cadrul structurii cuaternare a proteinelor. 5eterminanii conformaionali sunt recunoscui de receptorii pentru antigen ai +, (,4)) 2i de anticorpi. )ecunoa2terea determinanilor conformaionali se face prin complementaritate spaial, pe principiul c&eie < broasc. 5eterminanii conformaionali sunt a2e!ai la suprafaa moleculelor de antigen, de aceea nu este obligatorie procesarea 2i pre!entarea lor de ctre A.4. 5eterminanii antigenici sunt recunoscui strict de anumite seturi de limfocite, cu rol efector (+,, +T4) sau imunomodulator (+T>). #n funcie de tipul de limfocite responsive, 2i determinanii antigenici au rol efector sau imunomodulator.