Particularitatile de structura a peretelui celular al bacteriilor
gram positive .Coloratia gram.Tehnica si mecanismul de colorare.Imortanta practica.Exemple de bacterii gram positive. Peretele cellular reprezinta un invelis ce inconjoara protoplasplstul bacterian.Lipseste la micoplasme.Se disting 2 grupe de bacterii in functie de structura PC:bacterii gram positive si gram negative.Elementul comun al ambelor grupe-peptidoglicanul.PG-structura particulara a celulei bacteriene. Structura PG:Heteropolimer macromolecular reticulat,constituit dintr-un component glicanic si unul peptidic.Partea glicanica(polizaharidica)este constituita din catene liniare paralele in care alterneaza N- acetil-glicozamina cu N-acetil-muramic.Partea petidica este reprezentata de unitati tetrapeptidice(izomeri D si L de AA),fixate de acidul muramic,care pot fi legate intre ele direct (structura bidimensionala,G-) sau prin punti interpeptidice(structura tridimensionala,G+). Acidul diaminoplemic,izomerii D ai AA,acidul muramic se intilnesc doar la cellule procariote.PG este tinta de atac a unor substante: 1.lizoziml ce taie legaturile dintre N-AGA si acidul N-AM(catena glicanica) 2.antibioticele(beta-lactamice,glicopeptide,fosfomicina) perturba sinteza puntilor interpeptidice Functiile PC: -confera forma bacteriilor -bariera osmotica si mecanica -bariera de permiabilitate selectiva -functie antigenica -participa la procesele de crestere si diviziune celulara -functie de receptor -determina toxicitatea bacteriilor -reprezinta tinta de atac al unor enzyme si AB Peretele bacteriilor gram-pozitive: -Uniform cu pori mici -Grosimea 20-80nm -Conponentul major 40-80% reprezinta PG(structura reticulata tridimensionala) -Componentele minore: 1.Acizii teichoici(polimeri de glycerol sau ribitol fosfat) fixate de N-AGA.Traverseaza PG si creaza sarcina electrica negative la suprafata bacteriei,asigura transferul de ioni si fixarea unor proteine,functie antigenica. 2.Acizi lipoteicoici:se fixeaza de MCP si depasesc stratul de PG.Functii: identice cu AT,intervin in adeziunea la cellule si au un efect toic slab. 3.Proteine asociate peretelui celular: proteina A, coagulaza legat (clumping factor) i proteina fixatoare de fibronectin la Staphylococcus aureus, proteina M la Streptococcus pyogenes (rol n adeziune la substrate, protecie de fagocitoz) 4. La unele bacterii G+ (de exemplu: Mycobacterium, Nocardia) peretele conine o cantitate important de lipide sau ceruri, la altele (ex.: streptococi) peretele conine multe glucide. COLORATIA GRAM 1.Pe frotiul fixat se aplica solutie apoasa a violetului de metal(1-2min.),apoi solutia se varsa. 2.Frotiul se prelucreaza cu sol.Lugol(1min.) si se varsa fara a-l spala cu apa. 3.Frotiu se acopera cu alcool 95%(0,5-1min.),spalind dupa aceasta resurile de alcool cu apa 4.Froitu se acopera cu fucsina si peste 1-2min.coloranrul se varsa ,preparatul se spala cu apa,se usuca cu hirtie de filtru si se examineaza la microscop. Prin aceasta metoda de coloratie mi/o G+ se coloreaza in violet,iar cele G- in rosu-roz La cooratia cu alcool bacteriile G+ retin colorantii si isi pastreaza culoarea violeta,iar bactreiile G- se decoloreaza si se recoloreaza cu fucsina in rosu roz. Coloratia Gram perite determinarea specie agentilor cauzali ai bolilor infectioase . Exemple:gongo- si meningococii,toti bacilii si clostridiile patogene