VETERINARA
FACULTATEA DE BIOTEHNOLOGII
PROF. COORDONATOR :
FLORENTINA MATEI
STUDENT: RIGIBOIU
GEORGIANA
GRUPA: 6303 B
Mycobacterium tuberculosis
Page 1 of 18
Colonii de Mycobacterium tuberculosis
GENUL MYCOBACTERIUM
Scurt istoric:
Mycobacterium tuberculosis este bacteria care cauzează cele mai multe cazuri de tuberculoză. A fost
descrisă pentru prima dată de Robert Koch, în martie 1882.Este o bacterie obligatoriu aerobă (nu Gram
pozitivă/negativă), care se divide la 16-20 ore (o rată mică de multiplicare, comparativ cu alte bacterii,
cum ar fi E. coli, care se divide la 20 de minute). Spre deosebire de alţi germeni, datorită continutului
mare de mureină din peretele celular, se colorează foarte greu şi, ulterior, rezistă la decolorarea cu alcool
si acizi minerali diluaţi. Sunt aşadar, bacili acid-alcoolorezistenti. Se pun în evidenţă prin coloraţia Ziehl-
Neelsen. Pe frotiurile colorate după această metodă, bacilul tuberculos apare colorat în roşu aprins,
datorită fucsinei, în timp ce restul de germeni, celule sau alte elemente, sunt decolorate de acizi sau
alcool, fiind ulterior recolorate cu albastru de metilen. Se mai poate identifica prin microscopie
fluorescentă, sau prin colorare cu rodamină-auramină. De asemenea se dezvoltă lent şi numai pe medii
speciale, cum ar fi mediul Lowenstein-Jensen, însă mai nou s-au obţinut rezulate excelente de cultură
folosind mediul de cultură Middlebrook.
Rezistenţa specifică faţă de infecţia tuberculoasă poate fi obţinută cu germenii vii atenuaţi. Prin
vaccinare, în special a copiilor, cu B.C.G.(bacilul Calmette-guerin), se obţine o scădere importantă a
cazurilor noi de tuberculoză. Acest vaccin conţine bacili tuberculoşi bovini care, prin treceri repetate pe
mediul de cultură cu cartof biliat şi glicerinat, şi-au pierdut virulenţa şi capacitatea de a produce
tuberculoza, dar şi-au păstrat proprietăţile antigenice.
DEFINIłIE, ÎNCADRARE
Page 2 of 18
Mycobacterium. Genul Mycobacterium cuprinde următoarele specii:
- grupul „tuberculosis”
• Mycobacterium tuberculosis
• Mycobacterium africanum
• Mycobacterium bovis
• Mycobacterium kansasii
• Mycobacterium marinum
• Mycobacterium xenopi
• Mycobacterium scrofulaceum
• Mycobacterium fortuitum
• Mycobacterium gordonae
• Mycobacterium malmoense
• Mycobacterium ulcerans
• Mycobacterium avium-intracellulare
• Mycobacterium chelonae
• Mycobacterium abscessus
- Mycobacterium leprae
nici sub acţiunea combinată a acidului diluat si a alcoolului. Din acest motiv se
MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
CARACTERE GENERALE
Page 3 of 18
Este agentul cauzal al tuberculozei, descoperit de Robert Koch în 1882.
Habitat
Structura genomului
Genomul M. tuberculoza a fost studiată în general folosind tulpina M. tuberculoza H37Rv. Genomul
conține aproximativ 4000 de gene. Gene care cod pentru metabolismul lipidic sunt o parte foarte
importantă a genomului bacteriene, și 8% din genomul este implicat în această activitate.
Diferitele specii ale complexului Mycobacterium tuberculosis prezintă o înrudire ADN 95-100% și o
bazat pe studii de omologie ADN și secvența genei ARNr 16S sunt exact aceleași pentru toate
speciile. Deci, unii oameni de stiinta sugereaza ca acestea ar trebui să fie grupate în o singură specie în
timp ce alții susțin că acestea ar trebui să fie grupate ca soiuri sau subspecii de M. tuberculoza.
Page 4 of 18
pentru o perioadă îndelungată în gazdă, M.tuberculoza au învățat să se adapteze la mediul permițând sau
inhibarea de transcriere în funcție de împrejurimile sale.
Bacilii tuberculosi cresc foarte greu; ritmul Bacilii tuberculosi cresc foarte greu; ritmul de diviziune este
de 10-12 ore, de aceea de diviziune este de 10-12 ore, de aceea coloniile apar tardiv.coloniile apar tardiv.
- cel mai repede apar coloniile de mycobacterii atipice, dupa 3-7 zile de la mycobacterii atipice, dupa 3-7
zile de la insăminţare
- coloniile de M. hominis apar dupa 4-6 - coloniile de M. hominis apar dupa 4-6 saptamini de la
insăminţare
- Cel mai folosit mediu de cultura este mediul ce contine gălbenus de ou şi glicerina,
numit ce conţine galbenuş de ou şi glicerina, numit mediul Lmediul
Löwenstein.öwenstein.
- Bacilii tuberculoşi dau culturi de tip R Bacilii tuberculoşi dau culturi de tip R
- - pe mediile lichide bacilii de tip hominis şi - pe mediile lichide bacilii de tip hominis si
bovis cresc sub formă de pelicula, lăsind mediul limpede.
- Bacilii tuberculosi sânt puternic aerobi ( cresc Bacilii tuberculosi puternic aerobi ( cresc
doar la suprafaţă) şi au nevoie de un ph uşor doar la suprafaţă) şi au nevoie de un ph uşor
acid.
- Bacilii de la purtătorii sănătoşi sunt puţin Bacilii de la purtătorii sănătoşi sunt puţin
importanţi deoarece aceştia eliberează importante cantităţi reduse de germeni, care în
plus, au cantităţi reduse de germeni, care în plus, au patogenitate scazută patogenitate
scăzută.
Page 5 of 18
- Adevarata sursa de infectie o reprezintă bolnavii care elimină bacilii pe cale respiratorie
(excretori pulmonari), , pe cale renala ( excretori renali) sau prin abcedare renală
( excretori renali) sau prin abcedare ganglionară ( excretori ganglionari)..
- Există şi excretori cutanaţi, cazul bolnavilor, tuberculoza osoasa. Cele mai importante
surse de infecţie sunt oamenii şi apoi animalele.
Patogenitate
Rezistenţă
- sunt sensibili la acţiunea radiaţiilor solare şi la acţiunea UV, care îi omoară în 1-2 ore.
- sunt rezistenţi la acţiunea antisepticelor şi dezinfectantelor uzuale.
- sunt sensibile la acţiunea antibioticelor folosite în tratament :
- streptomicina
- hidrazida acidului izonicotinic (HIN)- hidrazida acidului izonicotinic (HIN)
- acid para-aminosalicilic
- cicloserina
- etambutol
- rifampicina
- Pot castiga usor rezistenta
24Specii:
Genul Mycobacterium
Cla
Regn Bacteria
Page 6 of 18
Încrengătură Actinobacteria
Ordin Actinomycetales
Subordin Corynebacterineae
Familie Mycobacteriaceae
Gen Mycobacterium
Caractere de cultură
Mycobacterium tuberculosis
Page 7 of 18
Un mediu de cultură poate fi definit ca un suport nutritiv steril, care permite dezvoltarea şi studiul unui
microorganism în afara nişei ecologice naturale.
-să aibă o anumită reacţie (pH) în limitele căreia se poate dezvolta bacteria;
-să corespundă particularităţiilor fiziologice ale bacteriilor, ţinând cont de tipul lor respirator;
aerob, se dezvoltă la 36°C, necesită medii de cultură speciale. Cel mai utilizat este
Page 8 of 18
Astfel de crestere pe medii de cultură o numim creştere eugonică
(abundentă, optimă).
Pentru necesităţi de ordin practic, pe baza efectului pe care oxigenul îl exercită asupra creşterii şi
metabolismului, microorganismele pot fi grupate în 4 categorii:
1) Strict aerobe (Bacillus anthracis, Bacillus subtilis, Mycobacterium tuberculosis) - care au nevoie
absolut de prezenţa oxigenului molecular, fiind incapabile să trăiasca în absenţa acestuia.
2) Strict anaerobe (Clostridium tetani, Clostridium botulinum, Clostridium perfringens) - care pot fi
cultivate numai în medii sarace în oxigen, deoarece chiar la presiuni joase (10-5 atm) acesta poate avea
efect inhibitor.
În practica, anaerobioza se realizează fie prin înglobarea în mediu a unui compus sulfhidrilic
(ex.tioglicolatul de sodiu, care reduce O2), fie prin cultivarea în anaerobiostate, în care O2 a fost
îndepartat sau înlocuit cu un amestec controlat de alte gaze.
3) Microaerofile (spirochaetales, thiobacterii) - care cresc foarte bine la presiuni de oxigen mai mici decât
aerul atmosferic (0,2 atm). Aceasta particularitate reflectă prezenţa unor enzime care sunt inactivate în
condiţii de oxidare puternic şi pot fi menţinute în stare funcţională numai la presiuni joase de O2.
(1) Proteine excretate: sunt produse în cantităţi mici, în primele zile după
semnificative, în bacilii întacţi aceste proteine se găsesc în cantităţi foarte mici (urme).
cultivare.
concentraţia creşte brusc spre finalul fazei logaritmice de creştere (ziua a 5-a), odată
Page 9 of 18
25Caractere biochimice si de metabolism
27Structură antigenică
Constituenţii peretelui celular induc apariţia unui răspuns imun de tip celular
Răspuns imun
Page 10 of 18
constituie o stare de „premuniţie” adică o stare de rezistenţă faţă de o nouă
28Caractere de patogenitate
granulomului.
- tuberculoză pulmonară
• primoinfecţie latentă
• primoinfecţie manifestă
• pleurezie
• forme mediastinale
• forme miliare
Page 11 of 18
- tuberculoză extrapulmonară, care este rară şi are localizări meningiene,
tuberculină;
sunt inhalaţi, ajung în alveole unde bacilul este fagocitat de macrofage. O parte
din bacili rămân pe loc altă parte este vehiculată pe cale limfatică spre ganglionii
imun care stă la baza formării leziunii caracteristice numită „tubercul”. Tuberculul
Tuberculoză
Boala
Tuberculoza este o boală cauzată de infecția de bacterii M. tuberculoza. Dacă nu este tratată în mod corespunzător, TB
poate fi fatal . În prezent, Organizatia Mondiala a Sanatatii estimeaza ca peste 13 de milioane de oameni au TBC și
aproximativ 1,5 milioane mor in fiecare an din cauza bolii. Tuberculoza afecteaza cel mai frecvent in plamani (TBC
pulmonar). Pacienții cu TB pulmonară activă au de obicei o tuse, un piept X-ray anormale, și sunt infectioase. TB poate
apărea, de asemenea, în afara plămânilor (extrapulmonare), cel mai frecvent în nervos, limfatic centrală, sau sistemele
genito-urinare, sau în oaselor si articulatiilor (1). Tuberculoza care apare împrăștiate pe tot corpul este menționat TB ca
Page 12 of 18
miliară. Extrapulmonară TB este mai frecventa la persoanele cu imunosupresie și la copiii mici .
Atunci când o persoană cu tuse activi TBC pulmonar, strănută, sau discuții, bacteriile care cauzeaza TB poate răspândi în
întreaga aer. Dacă o altă persoană respiră în aceste bacterii, exista o sansa ca vor infecta cu tuberculoză. Contactul repetat
este de obicei necesară pentru infecție . Cu toate acestea, nu toata lumea infectate cu bacterii TB devine
bolnav. Aproximativ 5% dintre persoanele infectate cu M. tuberculozeidezvolta de fapt TB. Oamenii care sunt infectate,
dar nu bolnav au infectie latenta TB. Cei care au o infectie latenta sunt asimptomatice, nu se simt rău, și nu sunt
contagioase.
2Simptomele
Primele simptome ale TB pulmonară activă pot include pierderea în greutate, febră, transpirații nocturne, și pierderea
poftei de mâncare .Datorită vagi simptome inițiale de TBC, o persoana infectata nu pot simți că este ceva în
neregulă. Infecția poate fie intra in remisie sau devin mai grave cu debutul dureri în piept și tuse cu spută cu
sânge . Simptomele exacte ale TB extrapulmonară variază în funcție de site-ul de infectie in organism.
3Transmisie
TB este raspandit prin aer de la o persoană la alta. Picaturi microscopice care contin bacterii poate fi expulzat atunci când
o persoană care are TB infectioase tușește sau strănută. Ele pot rămâne suspendate în aer timp de câteva ore, în funcție de
mediul. Atunci când o persoană respiră în M. tuberculoza, bacteriile se pot rezolva in plamani si sa inceapa sa creasca. De
acolo, ele se pot deplasa prin sânge în alte părți ale corpului.TB in plamani poate fi infectioasa, deoarece bacteriile sunt
ușor extins la alte persoane. TB în alte părți ale corpului, cum ar fi rinichi sau coloanei vertebrale, nu este de obicei
infecțioase . Dacă o persoană are TB confirmată sau este suspectat de a avea TBC, cel mai bun mod de a opri de transport
este prin izolare imediat. Tratamentul trebuie început imediat. Contagiozitate scade repede dupa un regim standard de
tratament a inceput, cu condiția ca pacientul aderă la cursul terapiei.
3DIAGNOSTIC DE LABORATOR
eliminată după un puseu de tuse sau la copii recoltată prin spălătură gastrică. Se
Page 13 of 18
În tuberculoza extrapulmonară produsele recoltate depind de localizarea
inocularea cobaiului.
depistarea acestora.
bacteriană în 15 zile.
Page 14 of 18
- Metode de hibridare a ADN-ului şi ARN-ului bacterian cu sonde marcate
Mycobacterium tuberculosis.
sensibilitate.
4TRATAMENT
diagnosticat cu tuberculoză.
Page 15 of 18
Tratamentul se face cu medicamente antituberculostatice (rifampicina, izoniazida sau pirazinamida)
pentru o perioadă lungă de timp (>6 luni). Pentru evitarea selecţiei de mutante rezistente este necesară
asocierea a cel puţin 3 chimioterapice antituberculoase. Eficacitatea tratamentului este indicată de
negativarea culturilor şi a examenului microscopic. În ultimii ani au fost izolate unele tulpini
multirezistente la chimioterapicele antituberculoase, ca urmare a unui tratament incorect. Pentru
prevenirea infecţiei cu M. tuberculosis se impune: imunizarea cu vaccinul viu atenuat (Bacil Calmette-
Guerin (BCG)), izolarea şi tratamentul prompt al bolnavului, combinat cu chemoprofilaxia contacţilor.
Sursa de infecţie este exclusiv umană: omul bolnav cu leziuni deschise iar
transmiterea este exclusiv interumană pe cale aerogenă, mai rar prin contact
direct cu leziuni deschise. Receptivitatea este generală risc mare având extremele
după primo-infecţie un procent de 3-5% din pacienţi dezvoltă în cursul vieţii boala
Page 16 of 18
infectaţi HIV.
Profilaxia specifică este realizată prin vaccinarea BCG care este obligatorie
fost subcultivată de 230 de ori de Calmette şi Guerin pe mediul cu bilă şi cartof, şi-a
Page 17 of 18
BIBLIOGRAFIE
5.http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1731077/pdf/v053p
00727.pdf
6.https://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Mycobacterium_tuberc
ulosis
Page 18 of 18