LP 7

DOZAREA UREEI, CREATININEI SI ACIDULUI URIC

UREEA

Introducere
Ureea reprezintă produsul de excreție al amoniacului din organism.
Ureea reprezinta principala forma de eliminare a gruparilor amino din aminoacizi si
reprezinta ~ 90% dintre componentele azotate ale urinei.
Valori normale:
1-3 ani: 11-36 mg/dL
4-13 ani: 15-26 mg/dL
14-19 ani: 18-45 mg/dL
Adulti- F < 50 ani: 15-40 mg/dL
>50 ani: 21-43 mg/dL
B< 50 ani: 19-44 mg/dL
> 50 ani: 18-55 mg/dL

Variatii fiziologice:
 Creste pana la 50mg/dL la subiectii peste 60 de ani
 Creste in alimentatia hiperproteica
 Scade in ultimul trimestru de sarcina

Variatii patologice
Valori scazute:
 tulburări hepatice
 bilanţ azotat negativ
 Acromegalie
  sindrom nefrotic
 hiperamoniemie ereditară

Valori crescute:
 Cauze renale
o GN acute sau cornice
o Nefroangioscleroze benigne sau maligne
o Nefropatii tubulare toxice
o Tumori renale
o Rinichi polichistic
o Calculoza renala
o IR acuta sau cronica
 Cauze extrarenale
o Stari de toxicoza si soc datorate hemoragiilor, arsurilor, traumatismelor

Metoda de dozare enzimatică cu urează

Principiul metodei

Ureea este hidrolizata sub actiunea ureazei si este transformata in ammoniac si dioxid de
carbon . In mediu alcalin, ionii de amoniu impreuna cu oxoglutaratul, sub actiunea
GLDH, formeaza glutamatul. Cresterea extinctiei este proportionala cu concentratia
ureii.

Ureaza
Uree +H2O 2NH3 + CO2

Oxoglutarat + NH4+ + NADH GLDH L-glutamat +NAD+ +H2O

Reactivi: R1: Tampon TRIS pH=7,8

Oxoglutarat
ADP
Ureaza
GLDH (glutamatdehidrogenaza)
R2: NADH
Reactiv Standard,μL Proba, μL
Standard 100 -
Proba - 100
R1 1200 1200
R2 300 300

Se citește variația absorbanței (ΔA) la lungimea de unda de 380 nm față de apă distilată,
in cuve de 1 cm, timp de 3 min.
Calcul
Se calculează activitatea enzimatică a ureei exprimata prin variatia absorbantei pe minut
ΔA/min

CREATININA

Creatinina este cel mai constant constituient azotat din sange, deoarece nu este
influențat de regimul alimentar, efort fizic, ritmul circadian, etc. Variază doar in funcție
de eliminarea sa renală si de masa musculara.
Cantitatea de creatină convertită in creatinină este direct proporțională cu masa de
țesut muscular din organism.
Creatinina, ca și ureea, este eliminată prin urină.

Valori normale:
F: 0,6-1,2 mg/dL
B: 0,8-1,3 mg/dL

Recomandari pentru determinarea creatininei:

-evaluarea functiei renale;
-monitorizarea tratamentului
-afectiuni musculare.

Variatii patologice:
Valori scazute:
 Afectiuni hepatice severe
 Scaderea masei musculare
Valori crescute:
 Cauze prerenale:
o Insuficienta cardiaca congestiva
o Diabet zaharat
o Diabet insipid
o Guta
o Miopatii
o Polimiozita
 Cauze renale
o IRA sau IRC
 Cauze postrenale
o Obstructii ale cailor urinare
 Neoplasm
 Litiaza renala
 Adenom de prostata

Determinarea crteatininei prin metoda Jaffe

Principiul metodei
Creatinina reduce acidul picric, in mediu puternic alcalin, la acid picramic de culoare
galben-portocalie, fotocolorimetrabil.
Intensitatea culorii este direct proporțională cu concentrația de creatinină.

Reactivi:
R1: acid picric
R2: NaOH

Reactiv Standard,μL Proba, μL

Standard 400 -
Proba - 400
R1 1200 1200
R2 300 300
Se citește variația absorbanței (ΔA) la lungimea de unda de 550 nm față de apă distilată,
in cuve de 1 cm, timp de 3 min.

Calcul
Se calculează activitatea enzimatică a ureei exprimata prin variatia absorbantei pe minut
ΔA/min

ACIDUL URIC

Acidul uric este produsul final de catabolizare a purinelor( adenina, si guanina),

constituienti ai acidului dezoxiribonucleic.
Nivelul acidului uric in sânge se numeste uricemie.

Valori normale
F: 2,5 – 6,5 mg/dL
B: 3,5 – 7,5 mg/dL

Principiul metodei
Este folosita metoda Trinder:

Acid uric +2H2O +O2 Uricaza alantoin + CO2 + H2O2

2H2O2 +4AAP + EHSPT Peroxidaza quinonimina

Reactivi:
R1: solutie tampon
EHSPT (etil-hidroxisulfopropil-toluidina
R2: Uricaza
AAP-aminoantipirina

Reactiv Standard,μL Proba, μL

Standard 25 -
Proba - 25
R1 1300 1300
R2 300 300
Agitare, repaus 10 minute, se va citi Ep la λ=550 nm

Variatii patologice:
 Hiperuricemii primare:
o Enzimopatii
o Guta
 Hiperuricemii secundare
o Hiperproductia de acid uric prin catabolism exagerat al nucleoproteinelor
celulare:
 Poliglobulii
 Leucemia acuta si cronica
 Mielom multiplu
o Tulburarea excretiei renale din:
 IRC
 GNC
 Scleroza renala
 Boala polichistica renala
o Alte afectiuni
 Diabet zaharat cu cetoacidoza
 Hiperparatiroidie
 Hipouricemii
o Primare
 Xantinuria ereditara
o Secundare
 Consum inadecvat de medicamente (alopurinol,
aspirina, indometacin, manitol,)
 Afectiuni hepatice severe