LP-5

DETERMINAREA GGT

GGT – gama-glutamiltranspeptidaza
 catalizeaza transferul grupului γ–glutamil de la peptide ca glutationul (GSH)
catre alti aminoacizi.
 masurat in ser, provine in special din ficat.
 este indepartat din plasma prin bila, activitatea enzimei in bila fiind de 10
ori mai mare decat cea plasmatica.

Recomandari pentru determinarea GGT

 GGT este cel mai sensibil indicator pentru depistarea alcoolismului, fiind
enzima a carei crestere depaseste celelalte enzime hepatice dozate in mod
curent. Are rol de asemenea in monitorizarea abstinentei de la alcool.
 pentru diagnosticul unei hepatopatii in prezenta unei afectiuni osoase, a
sarcinii sau in perioada copilariei (conditii in care valorile fosfatazei alcaline
cresc, in timp ce GGT ramane la valori normale).

Metoda Szasz modificata

GGT catalizeaza transferul acidului glutamic pe un acceptor, in acest caz,
glicilglicina. Este eliberat 5-amino-2-nitrobenzoat, care poate fi masurat la 420
nm. Cresterea absorbantei la aceasta lungime de unda exprima direct activitatea
GGT.

L-gamma-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida + glicilglicina

GGT gamma-glutamil-glicilglicina + 5-amino-2-nitrobenzoat

Reactivi: R1= Tampon TRIS

Glicilglicina
R2 = L-gamma-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida
Reactiv Standard Proba
Standard, μL 100
Proba, μL 100
R1, μL 1200 1200
R2, μL 300 300

Se citeste variatia absorbantei (ΔA) la lungimea de unda de 420 nm fata de apa

distilata, in cuve de 1 cm, timp de 3 min.
Calcul
Se calculeaza activitatea enzimatica a GGT exprimata prin variatia absorbantei pe
minut ΔA/min

VN = B: 0-55 U/L

F: 0-38 U/L

Valori patologice:

Crescute:

 in hepatita acuta virala

 in hepatita alcoolica acuta
 in ciroza hepatica
 in ciroza biliara primitiva
 in ficatul gras
 in sindromul de colestaza
 in tumorile hepatice primitive, metastazele hepatice
Alte cauze de crestere a GGT: pancreatite acute; infarct miocardic acut;
insuficienta renala acuta, sindrom nefrotic, rejet de grefa renala (cresteri
moderate); diabet zaharat (usor crescut); tumori si hemoragii cerebrale (cresteri
usoare); neoplasme – in special melanomul malign, cancerul de san si cel
pulmonar
 Determinarea fosfatazei alcaline

FA este o α-globulina reprezentata de 2 grupe mari de enzime ce

catalizeaza hidroliza esterilor fosforici la pH alcalin si participa la transferul
fosforului.
Se gaseste in sistemul osos in osteoblasti (nu si in osteoclasti), mucoasa
intestinala (intervine in absorbtia glucidelor), corticala renala, glanda mamara
(lactatie), ficat, placenta, leucocite, dar localizarea preferentiala este cea
hepatica.

Metoda spectrofotometrica
FA hidrolizeaza in mediu alcalin p-nitrofenilfosfatul. Activitatea enzimei este direct
proportionala cu cantitatea de p-nitrofenol eliberata, respective cu intensitatea
coloratiei obtinute.

p-nitrofenilfosfat + H2O FA fosfat + p-nitrofenol

Reactivi: R1 =2-amino2-metil-1-propanol cu pH=10,4

Sulfat de magneziu
R2= p-nitrofenilfosfat

Reactiv Standard Proba

Standard, μL 100
Proba, μL 100
R1, μL 300 300
R2, μL 1200 1200

Se citeste variatia absorbantei (ΔA) la lungimea de unda de 420 nm fata de apa

distilata, in cuve de 1 cm, timp de 3 min.
VN = B: 40-129 U/L

F: 35-104 U/L
Variatii fiziologice:

Marirea nivelului seric al izoenzimei de origine osoasa are loc in perioadele de

crestere (pana la 15-17 ani), copiii si mai ales adolescentii prezentand valori
maxime normale de 3 ori fata de adulti (datorita formarii si remanierii tesutului
osos in cadrul procesului de crestere al osului in lungime).

Variatii patologice

FA este singura enzima care se determina uzual pentru diagnosticul afectiunilor

osoase.

Valori crescute:

 de origine osoasa:
Rahitism
Hiperparatiroidism
Metastaze osoase
Boala Paget
Osteoporoza
Perioada de vindecare a fracturilor
 de origine hepatica
Colestaza de orice cauza (FA crescuta denota staza biliara)
Icter obstructiv
Hepatita toxica
Metastaze hepatice neoplazice
Ciroza biliara
Hepatita virala

 de origine intestinala
diverse afectiuni ulcerative ale tractului gastrointestinal
malabsorbtie severa,
infarct intestinal.

Valori scazute:
Hipofosfatazie congenitala
Hipotiroidie
Deficit sever de vitamina C