PS - 09 Determinari Biochimice

CENTRUL MEDICAL UNIREA
Laborator Craiova, strada Alexandru Ioan Cuza nr 17
Nume Functia Semnatura

Elaborat Mirela Pencu Biolog
Verificat Ruxandra Tershnjaku Medic sef laborator
Aprobat Andreea Alexandru Manager Tehnic
Tip PROCEDURA SPECIFICA

document
Cod: PS – 09
Titlu: Determinari biochimice si imunologice Cobas integra 400+
Editia: 1/ 18.04.2014 Rev.0 Ex. nr.:
EVIDENTA MODIFICARILOR:
Pagina
Data
Nr. total pagini, exclusiv pagina de titlu si anexe: 39
AVERTISMENT: Utilizarea, reproducerea completa sau partiala a prezentei documentatii fara acordul scris al Centrului Medical Unirea din cadrul
Retelei private de sanatate REGINA MARIA Divizia Laboratoare, constituie o violare a drepturilor de autor si va fi sanctionata conform legislatiei
in vigoare.
Determinari biochimice Cod: PS -09
CENTRUL MEDICAL UNIREA si imunologice Editie: 1 Revizie:0
Laborator analize medicale Data: Pagina:
Craiova Cobas integra 400+ 18.04.2014 2 /39
1.SCOP
Procedura stabileşte modul în care laboratoarele Centrul Medical Unirea apartinand Retelei private de
sanatate Regina Maria Divizia Laboratoare Clinice realizeaza determinarile biochimice si imunologice
cu ajutorul analizorului Cobas Integra 400+ .
2. DOMENIUL DE APLICARE
2.1. Procedura se aplicã de catre laboratoarele Centrul Medical Unirea apartinand Retelei private de
sanatate Regina Maria Divizia Laboratoare Clinice pentru realizarea determinarilor biochimice si
imunologice cu ajutorul analizorului Cobas Integra 400+ .
3. DEFINITII SI PRESCURTARI
3.1. Definitii
3.1.1. Manualul de utilizare Cobas Integra 400+.
3.2. Prescurtari
DG – Director General
MC – Manager Calitate
MT – Manager Tehnic
RAC – Responsabil asigurarea calitatii
DF – Director Financiar
DRU – Director resurse umane
DIT – Director Departament IT
DJ – Director Departament Juridic
SL – Sef Laborator
PG – Procedură generala
PS – Procedura specifica
PO – Procedura operationala
ILG - Instrucţiune de lucru apartinand PG
ILS – Instructiune de lucru apartinand PS
MQL – Manualul Calitatii pentru laborator
FG - Formular apartinand PG
FS – Formular apartinand PS
FO – Formular apartinand PO
RG – Registru apartinand PG
RS – Registru apartinand PS
RO – Registru apartinand PO
LIS – Sistem informatic al laboratorului
AVERTISMENT: Utilizarea, reproducerea completa sau partiala a prezentei documentatii fara acordul scris al Centrului Medical Unirea
din cadrul Retelei private de sanatate REGINA MARIA Divizia Laboratoare, constituie o violare a drepturilor de autor si va fi sanctionata
conform legislatiei in vigoare.
4. DOCUMENTE DE REFERINTA
4.1 SR EN ISO 15189:2007 - Laboratoare medicale. Cerinte particulare pentru calitate si competenta
4.2 EA 4/10 : 2002 - Ghid pentru acreditarea laboratoarelor de microbiologie
4.3 MQL - Manualul calitatii laboratorului
4.4 Procedura generala PG – 5.4 Managementul probelor
4.5 Procedura generala PG – 5.6 Asigurarea calitatii rezultatelor analizelor
4.6 Procedura generala PG – 5.8 Raportarea rezultatelor
4.7 Procedura operationala PO – 01 Ghid de recoltare a probelor primare
4.8 Procedura operationala PO – 02 Buna gospodarire. Indepartarea reziduurilor periculoase rezultate din
activitatea laboratorului de analize medicale
3.9. Manual de operare pentru analizorul cobas integra 400 plus.
3.10. Prospectele reactivilor utilizati.
3.11. Prospectul calibratorilor si a serurilor de control utilizati.
5. DESCRIERE PROCEDURA
5.1. REALIZAREA MENTENANTEI
5.1.1. Deproteinizarea sondelor

Este o actiune de service ce se realizeaza automat si nu este necesara interventia operatorului
Durata : 6 minute
Interval : zilnic sau dupa 600 de teste
Materiale necesare : ISE DEPROTEINIZATOR pozitionat pe rack-ul de ISE in pozitia 8
ISE ACTIVATOR (amestec de seruri 3 ml de seruri + 1ml de apa distilata) pozitionat pe rack-ul ISE in
pozitia1
Pentru deproteinizare sonde :
-Se selecteaza Deproteinize probes in fereastra Service
-Perform
-Pipetele de spalare se umplu cu solutia de deproteinizare(pas automat)
-Sondele si ventrele de probe sunt umplute cu solutia deproteinizanta(pas automat)
-Sondele sunt pozitionate in interiorul conductelor de spalare(pas automat)
-Sondele sunt miscate in sus si in jos(pas auomat)
-Prime fluid system se initiaza(pas automat)
-Sondele sunt activate (pas automat)
-Prime fluid system este realizat(pas automat)
5.1.2. Curatarea sondelor si capacului pentru a preveni imprastierea stropilor

Durata : 5 minute
Interval : saptamanal sau dupa 3000 de teste
Materiale necesare :
-solutie de etanol 70 %
-manusi
-tifon
-sapun
Realizare actiune de mentenanata:
-Se selecteaza Clean probes and splash guard din fereastra de Service
-Perform
-Se deschide panoul pentru a avea acces la rackuri
-Se indeparteaza rackurile
-Bratul de deplasare este pozitinat in aria probelor(pas automat)
-Se deschide capacul frontal pentru a avea acces la sonde si la plasticul de sub sonde care previne
imprastierea stropilor.
-Se indeparteaza capacul de plastic negru
-Se curata sondele cu un tfon imbibat cu 70 % alcool(sondele se curate de sus in jos)
-Plasticul negru se curate cu apa si sapun se clateste si se sterge cu tifon uscat
-Se reinstaleaza platicul sub sonde
-Next
-Bratul de deplasare este initializat(pas automat)
-Se reinstaleaza rackurile –Next.
5.1.3. Curatarea rezervorului intern de apa

Durata : 8 minute
Interval : la 6 luni de zile
Materiale necesare:
-2 filtre noi de lichid
-manusi
-tifon
-solutie de hipoclorit de sodium 0.6%
Pentru curatirea rezervorului intern de apa:
-Se selecteaza Clean internal water reservoir din fereastra de Service
-Perform
-Se eschide capacul principal frontal ala aparatului
-Se indeparteaza panoul lateral stanga pentru a avea acces la rezervorul intern de apa
-Se desurubeaza rezervorul intern de apa
-Se goleste rezervorul intern de apa si se curate cu solutie de hipoclorit de sodium 0.6%
-Se clateste rezervorul intern de apa cu apa deionizata de 4 ori
- Se curata comutatorul de nivel al rezervorului intrn de apa si furtunul de aspiratie folosind tifon imbibat
cu alcool etilic
-Se clateste cu apa distilata
-Se inlocuieste filtrul de lichide la capatul terminal al furtunului de aspiratie
-Se reinstaleaza rezervorul intern de apa gol(dunga neagra de pe rezervor sa fie la nivel cu dunga neagra
trasata de pe capacul rezervorului)
-Se apasa butonul Next
-Rezervorul intern de apa se umple si sistemul este initializat(pas automat)
-Se verifica ca pipetele de spalare sa nu aiba bule, In cazul in care se vad bule in pipetele de spalare se da
Prime fluid system pana bulele nu mai sunt visibile
-Se reinstaleaza panoul lateral din partea stanga
-Se apasa butonul Finis
5.1.4. Curatearea statie de apa

Durata: 8 minute
Interval: la 6 luni
Materiale necesare:
-pipete de spalare sigilate
-tifon
-tampoane de bumbac
-sapun
-manusi
-penseta
Pentru curatarea statiei de spalare:

-Se selecteaza Clean wash station din ferastra de Service
-Se apasa butonul Perform
-Se deschide capacul frontal principal al aparatului
-Se muta bratul de deplasare intr-o parte a aparatului pentru a avea acces la statia de apa
-Indepartati cele 2 suruburi ale statiei de spalare
-Se indeparteaza capacul de plastic
-Ridicati statia de apa astfel incat sa aveti acces la tubul de deseuri ce se conecteaza la rezervorul extern
de deseuri lichide
-Se de conecteaza tubul de deseuri lichide
-Folositi penseta pentru a indeparta amortizorul de zgomot
-Clatiti amortizorul de zgomot cu apa distiata
-Reinstalati amortizorul de zgomot
-Curatati interiorul partii pentru pipetele de spalare cu un tampon de bumbac
-Se inlocuiesc pipetele de spalare cu pipetele de spalare sigilate
-Clatiti statia de apa cu apa distilata
-Conectati tubul pentru deseurile lichide si se reinstaleaza statia de apa
-Cand statia de apa la locul ei se instaleaza capacul de plastic
- Sistemul de transfer este initializat(pas automat)
-Se apasa butonul Finish
5.1.5. Curatarea rezervorului extern de apa si a rezervorului de deseuri lichide

Durata: 5 minute
Interval: 6 luni
Materiale necesare:
-filtre de lichide
-solutie de hipoclorit de sodium 0.6%
-pahar curat
-tifon
-manusi
-alcool etilic
Pentru curatarea rezervorului extern de apa:

-Se selecteaza Clean external water reservoir /fluid waste reservoir din fereastra de SERVICE
-Se apasa butonul de Perform
-Se indeparteaza adaptorul de tuburi din rezervorul extern de apa si se pune intr-un pahar curat pentru
apreveni contaminarea.Nu deconectati furtunul de aspiratie sau comutatorul de nivel.
-Se goleste rezervorul externde apa
-Se toarna 1000 ml de solutie de hipoclorit de sodium 0.6 % in rezervorul extern de apa si se agita
viguros
-Se repeta pasul de dinainte
-Se clateste cu apa deionizata de 4 ori
-Se curate comutatorul de nivel si furtunul de aspiratie cu un tifon imbibat cu alcool etilic
-Se inlocuieste filtrul de lichid
-Se umple rezervorul extern de apa cu apa deionizata si se introduce adaptorul de tuburi
Pentru rezervorul extern de deseuri lichide:

-Se indeparteaza adaptorul de tuburi din rezervorul extern de deseuri lichide si se pune intr-un pahar curat
pentru a preveni contaminarea
-Nu deconectati furtunul de deseuri sau comutatorul de nivel din instrument
-Se goleste rezervorul extern
-Se toarna 100 ml de solutie de hipoclorit de sodium 0.6% si se agita viguros
-Se repeat pasul de dinainte
-Se clateste cu apa deionizata de 4 ori
- Se curate comutatorul de nivel cu un tifon imbibat in alcool etilic
-Se reinstaleaza adaptorul de tuburi in ezervorul de deseuri lichide
-Se apasa butonul FiNISH
5.1.6. Curatarea cutiei de deseuri solide

Durata: 1 minut
Interval: 30 de zile sau dupa 2000 de teste ISE
Materiale necesare:
-apa deionizata
-manusi
-tifon
Curatarea cutiei de deseuri solide:

-Se selecteaza Clean waste box fitting din fereastra de SERVICE
-Se indeparteaza cutia de deseuri solide
-Se curate peretii de Plexiglas cu un tifon imbibat in apa distilata
-Se introduce o noua cutie de deseuri
-Cutia plina cu deseuri in partea superioara in locul u8nde se varsa deseurile se acopera cu un autocolant
si se arunca la deseuri periculoase.
-Cand toti pasii au fost realizati se apasa butonul Finish si sistemul instrumentului se reseteaza
5.1.7. Prime fluid system

Durata: 1 minut
Interval: zilnic sau cand aparatul a stat mai mult de 4 ore in starea de Stand-by sau Sleeping
Realizarea Prime fluid system:
-Se selecteaza Prime fluid system din fereastra de Service

-Sondele se pozitioneaza in afara tuburilor de spalare (pas automat)
-Cinci cicluri de spalare cu cleaner (acid hidrocloric 300 mmol/l , detergent 1%) se realizeaza (pas
automat)
-Sondele se pozitioneaza in interiorul tuburilor de spalare(pas automat)
-Un ciclu de spalare cu cleaner este realizat(pas automat)
5.1.8. ROCHE SERVICE

Interval: la 6 luni de zile
5.1.9. BACKP-UL BAZEI DE DATE

Durata: 15 minute
Interval: Saptamanal
5.1.10. Inlocuirea filtrului rezervorului extern de apa:

Durata: 5 minute
Interval: la 3 luni
Materiale necesare: flitru de lichid
Pentru inlocuirea filtruluirezervorului extern de apa:
-Se selecteaza serviciul Replace external water reservoir filer in fereastra de SERVICE
- Se apasa butonul de Perform
-Se scoate adaptorul de tuburi din rezervorul extern de apa, si se pune intr-un pahar curat pentru a evita
contaminarea
-Nu se deconecteaza furtunul de aspiratie si nici detectorul de nivel
-Se inlocuieste filtrul
-Se reinstaleaza adaptorul de tuburi
-Se apasa butonul de Finish
5.1.11. Inlocuire pipete de dozaj

Durata: 10 minute
Interval: dupa 200000 de teste
Materiale necesare:
-pipeta de 250 µl
-capac sigiliu
-tifon
-manusi
Pentru inlocuire pipete de dozaj:

-Se selecteaza Replace dosage pipette in fereastra de SERVICE
-Se selecteaza butonul Perform
-Pipetele de dozaj sunt pozitionate (pas automat)
-Sondele sunt pozitionate inauntrul conductelor de spalare(pas automat)
-Se deschide capacul frontal al aparatului
-Se scoate rezervorul de cleaner
- Se desface surbul de blocare al pipetei de dozaj.
- Desurubati pipeta de dozaj din diostribuitor.

-Se trage de pipeta inspre inainte pentru a o indeparta din modul
-Se ia noua pipeta si se trage de piston
-Introduceti pistonul in sticla baril si umpleti pe jumatare pipeta cu apa
-Instalati sigiliul pipetei
-Reinstalati pipeta
-Stergeti picaturile de apa de pe modulul de pipette, sonde si plasticul negru care previne imprastierea
stropilor.
- Se reinstaleaza rezervorul de cleaner
-Modulul de pipette se initializeaza (pas automat)
-Se apasa butonul Finish
5.1.12. Inlocuire filter de ventilatie

Durata: 5 minute
Interval: la 3 luni de zile sau dupa 500 de ore in Running sau Stand-by
Materiale necesare:
-filtre de ventilatie
Pentru inlocuire filter de ventilatie:

-Se selecteaza Replace ventilatiom filters in fereastra SERVICE
- Se selecteaza butonul de Perform
-Se indeparteaza capacul de la nivelul fltrului de pe partea dreapta a analizorului
-Se introduce noul flitru
-Se introduce capacul de la nivelul filtrului
-Se indeparteaza capacul central jos unde este pozitionat filtrul de la nivelul zonei de probe
- Se scoate filtrul se inlocuieste cu un filtru nou
-Se reintroduce carcasa in care s-a montat filtrul nou in aparat
-Se reinstaleaza capacul central
- Se apasa butonul de Finish.
5.1.13. Inlocuire lampa de halogen

Durata: 26 minute
Interval: dupa 800 de ore in running sau standby
Materiale necesare:
-tifon
-lampa de halogen
Pentru inlocuire lampa de halogen::

-Se selecteaza Replace Abs.halogen lamp in fereastra de SERVICE
- Lampa de halogen se opreste(pas automat)
-Se asteapta 2-3 minute ca lampa sa se raceasca
-Se indeparteaza carcasa lateral dreapta
-Se indeparteaza capacul de la nivelul locului unde este montata lampa de halogen
-Folositi o carpa uscata pentru indepartarea capacului
-Se deconecteaza cablul lampei

- Se desface surubul care tine fixate lampa de halogen
-Se inlocuieste lampa veche cu o noua lampa de halogen .ATENTIE A NU SE ATINGE NOUA LAMPA
DE HALOGEN
-Se fixeaza lampa in pozitie
-Se insurubeaza butonul
-Se fixeaza cablul lampii in interiorul locului unde lampa este pozitionata
-Se reconecteaza la sursa
-Se reinstaleaza capacul de la nivelul locului unde se afla lampa de halogen
-Se reinstaleaza capacul lateral dreapta
-Fotometrul de absorbanta se initializeaza(pas automat)
-O calibrare apa/aer are loc- sistemul masoara absorbanta a 50 de cuvete goale la fiecare lungime de
unda.Sistemul umple aceleasi cuve cu apa si masoara din nou absorbanta la fiecare lungime de unda.
Media rezultatelor este stocata in baza de date si sunt folosite pentru ajustarea rezultatelor (pas automat).
-Constantele apei si aerului sunt automat salvate(pas automat)
-Se apasa butonul FINISH.
5.1.14 Inlocuire sonde B/C

Durata: 9 minute
Interval: dupa 50.000 de teste
Materiale necesare:
-set de sonde
-activator pe rack-ul de ISE
-manusi
Pentru inlocuire sondeB/C

-Se selecteaza Repalce probe B/C in fereastra de SERVICE
-Se selecteaza butonul de Perform
-Bratul de deplasare este pozitionat in zona probelor (pas automat)
-Se deschide capacul frontal principal pentru a avea acces la sonde
-Inlaturati capacul protector de la nivelul sondelor
-Deconectati tuburile sondelor de la nivelul distibuitorului
-Se apasa be butonul de la nivelul partii metalice care tine acul si se trage acul in sus .
-Tubul sondelor se scot cu grija de pe arcul care le mentine pozitia
-Se monteaza noua sonda
-Cand sondele sunt instalate se apasa butonul Next
-Sistemul de transfer este initializat(pas automat)
- Sondele sunt activate si sistemul fluidelor este amorsat(pas automat)
-Cand activitatea de mentenanata a luat sfarsit se apasa butinul Finish
5.2 CALIBRARE
5.2.1 Definitie.
Calibrarea este procesul care stabileste o relatie intre valorile masurarii ( valorile de absorbtie sau
semnalele ECL) si rezultatele respective. Acest proces include stabilirea unei noi curbe de calibrare sau
poate fi doar o actualizare a unui parametru sau doi ai curbei de calibrare existente.
5.2.1 Calibrare :
Calibrarea se realizeaza :
 pentru majoritatea testelor biochimice cu C.f.a.s
 C.f.a.s. Lipids pentru HDL – Colesterol, LDL – C
 C.f.a.s. HBA1C pentru hemoglobina glicozilata
 PreciSet RF pentru RF
 C.f.a.s. Proteins pentru C3, C4, CRPL ;
 SERT pentru IgA, IgG, IgM
 C.f.a.s. PAC pentru ASLO
Frecventa calibrarii: se recomanda calibrarea in 2 puncte atunci cand se schimba lotul de reactivi si ori
de cate ori este necesar (ex: incalcarea regulilor de acceptare a controlului intern);
Preparare: Se deschide cu grija o sticluta evitand pierderea liofilizatului se adauda 3 ml apa distilata
pentru C.f.a.s, se inchide sticla cu grija se dizolva continutul prin agitari periodice pe parcursul a 30
minute la 15-250C si la intuneric. Se evita formarea spumei. Calibratorul reconstituit se aliquoteaza in 10
eppendorfuri si se pastreaza la ( -15)-(-25) 0C maxim 4 saptamani.
C.f.a.s Lipid se deschide cu grija sticluta evitand pierderea liofilizantului se adauga 1 ml apa distilata, se
inchide sticluta cu grija se dizolva continutul prin agitari periodice pe parcursul a 30 de minute la 15-25 0C
si la intuneric.
Se evita formarea spumei. Calibratorul reconstituit se aliquoteaza in 4 eppendorf-uri si se pastreaza la (-
15)-(-25)0C maxim 4 saptamani.
Identificarea fractiunilor: pe eppendorfuri se noteaza denumirea prescurtata a calibratorului (C.f.a.s sau
C.f.a.s L), data de reconstituire.
C.f.a.s Proteins
Frecventa calibrarii: Se recomanda calibrarea full cand se schimba lotul de reactivi si ori de cate ori este
necesar (ex: incalcarea regulilor de acceptare a controlului intern);
Preparare: calibratoarele se gasesc in flacoane de 1 ml, fiind gata pentru utilizare..
Identificarea fractiunilor: pe capacele flacoanelor se noteaza data deschiderii.
C.f.a.s PAC
Frecventa calibrarii: Se recomanda calibrarea in 2 puncte atunci cand se schimba lotul de reactivi si ori
de cate ori este necesar (ex: incalcarea regulilor de acceptare a controlului intern);
Preparare: Se deschide cu grija o sticluta evitand pierderea liofilizatului  se adauda 1 ml apa
distilata/sau deionizata  se inchide sticla cu grija se dizolva continutul prin agitari periodice pe
parcursul a 30 minute la 15-250C si la intuneric. Se evita formarea spumei. Calibratorul reconstituit se
imparte in 5 eppendorfuri si se pastreaza la ( -15)-(-25) 0C maxim 8 saptamani.
Identificarea fractiunilor: pe eppendorfuri se noteaza denumirea prescurtata a calibratorului (Cfas
PAC), data de reconstituire.
PreciSet RF
Frecventa calibrarii: Se recomanda calibrarea full atunci cand se schimba lotul de reactivi si ori de cate
ori este necesar (ex: incalcarea regulilor de acceptare a controlului intern);
Preparare: calibratorul se gaseste in flacoane de 1 ml, fiind gata pentru utilizare. Calibratorul se
pastreaza maxim 4 saptamani la 2-80C.
Identificarea fractiunilor: pe capacele flacoanelor se noteaza data deschiderii
Utilizare: calibratorul pastrat la 2-80C se utilizeaza dupa ce ajunge la temperatura de 15-250C
C.f.a.s. HBA1C pentru hemoglobina glicozilata

Frecventa calibrarii: Se recomanda calibrarea full atunci cand se schimba lotul de reactivi si ori de cate
ori este necesar (ex: incalcarea regulilor de acceptare a controlului intern);
Preparare: Se deschide cu grija o sticluta evitand pierderea liofilizatului  se adauda 2 ml apa
distilata/sau deionizata  se inchide sticla cu grija se dizolva continutul prin agitari periodice pe
parcursul a 30 minute la 15-250C si la intuneric. Se evita formarea spumei. Calibratorul reconstituit se
imparte in 5 eppendorfuri si se pastreaza la ( -15)-(-25) 0C maxim 8 saptamani.
Identificarea fractiunilor: pe capacele flacoanelor se noteaza data deschiderii
Utilizare: calibratorul pastrat la 2-80C se utilizeaza dupa ce ajunge la temperatura de 15-250C
Stabilitate:
C.f.a.s: Calibratorul liofilizat se pastreaza la 2-8 0C. Stabilitatea calibratorului liofilizat daca se pastreaza
la 2-8 0C este pana la data de expirare afisata pe cutia in care vin calibratorii.
Stabilitaea componentelor in calibratorul reconstituit este:
La 15-250C – 8 ore
La 2-8 0C- 2 zile
La ( -15)-(-25) 0C- 4 saptamani(o singura data congelate).
Exceptii:
Stabilitatea bilirubinei totale in calibratorul reconstituit (depozitat la intuneric) este:
La 15-250C – 6 ore
La 2-8 0C- 1 zi
Stabilitatea bilirubinei directe in calibratorul reconstituit (depozitat la intuneric) este :
La 15-250C – 3 ore
La 2-8 0C- 8 ore
C.f.a.s Lipids: Calibratorul liofilizat se pastreaza la 2-8 0C. Stabilitatea calibratorului liofilizat daca se
pastreaza la 2-8 0C este pana la data de expirare afisata pe cutia in care vin calibratorii.
Stabilitaea componentelor in calibratorul reconstituit este:
La 15-250C – 8 ore
La 2-8 0C- 5 zile
C.f.a.s Protein : 4 saptamani la 2-80C
C.f.a.s PAC
Stabilitate la intuneric: 8 ore la 15-250C ; 2 zile la 2-80C, 2 saptamani la ( -15)-(-20) 0C ;
Utilizare : Calibratorul poate fi utilizat imediat dupa reconstituire

Calibratorul pastrat la ( -15)-(-25) 0C(congelate) se utilizeaza dupa dezghetarea treptata pana ajunge la
temperatura de 15-250C ;acestea se utilizeaza o singura data dupa ce au fost dezghetate. Inainte de
utilizare este obligatorie omogenizarea acestora.
Utilizare: Calibratorul poate fi utilizat imediat dupa reconstituire.

Calibratorul pastrat la ( -15)-(-25) 0C(congelate) se utilizeaza dupa dezghetarea treptata pana ajunge la
temperatura de 15-250C; acestea se utilizeaza o singura data dupa ce au fost dezghetate. Inainte de
utilizare este obligatorie omogenizarea acestora.
Calibratorul gata de utilizare se pipeteaza in eppendorf-uri care sunt pozitionate in rack-ul configurat
special pentru Calibratori/Control(Rack-ul 21)
Pe rack-ul 1 s-a configurat pozitia 1 pentru C.f.a.s, pozitia 2 pentru apa distilata.
5.2.2. CALIBRAREA
5.2.2.1Calibrarea se realizeaza la intervale regulate de timp (definite in CONFIGURATION- TESTS-

GENERAL) pentru a compensa modificarile in timp ale reactivilor in sistemul de masurare.
5.2.2.2.Calibrarile de asemenea se efectueaza cand:
-se incarca reactivi noi(cu un alt numar de lot)
-expira calibrarea precedenta
-ori de cate ori se considera a fi necesar.
5.2.2.3. Se pozitioneaza eppendorf-urile ce contin calibatorul C.f.a.s (standard 1) si apa distilata (standard
2) pe rack-ul 1 pe locurile definite in protocolul de lucru al analizorului pozitia 1(C.f.a.s),2(apa distilata)
– pentru majoritatea testelor biochimice. Ceilalti calibratori se pozitioneaza in continuare pe acelasi rack
dar se da pozitie manual pentru fiecare in parte (nu au pozitii predefinite).
5.2.2.4. Se realizeaza cererea de teste pentru calibrare:
ORDERS – CALIBRATION
Se selecteaza testele pentru care se face calibrare – SAVE
5.2.2.5. Se pozitioneaza calibratorii in pozitiile asignate pe rack-ul 1 in analizor in regiunea I.
Se da comanda “START.”
5.2.2.6. Se verifica calibrarea si se vizualizeaza curbele de calibrare prin accesarea meniului:
RESULTS- CALIBRATION
Se selecteaza testul pentru care vrem sa vedem calibrarea. In fereastra din dreapta se merge pe
rezultatul calibrarii se da click dreapta – se selcteaza Detail si putem sa vedem curba de calibrare.
Se printeaza prin apasarea butonului Print.
5.2.2.7. Nu se realizeaza determinari pe o calibrare expirata sau eronata.
5.2.2.8. In cazul loturilor noi de calibratori trebuie introduse noile valori de calibrator.
Datele se pot introduce:
A .Automat – utilizand cititorul de cod de bare extern atasat analizorului
B. Manual
A. Se intra in meniul CONFIGURATIONS si din bara orizontala de meniuri se selecteaza si

activeaza simbolul ETICHETA COD DE BARE.
Se citesc codurile de bare din inserturile corespunzatoare(calibratori pentru INTEGRA 400).

Toate campurile trebuie sa devina verzi daca citirea valorilor s-a facut corect. Se activeaza OK. Pentru a
verifica ca citirea s-a facut corect se intra in CONFIGURATIONS – CALIBRATORS – TAB LOT
si se verifica pentru fiecare lot concentratia pentru STD 1 din insert sa fie cea din insert iar la STD.
2 concentratia sa fie 0.0
B. Se intra in meniul CONFIGURATIONS – COLOANA DEFINITIONS- CALIBRATORS se

selecteaza calibratorul corespunzator.Se intra pe pagina LOT si din lista de teste care se calibreaza
cu standardul respectiv se selecteaza testul dorit. Campul Std. 1 se completeaza cu valoarea din
insert iar campul Std.2 se introduce valoarea 0.0 Se activeaza butonul SAVE.
5.3. CONTROLUL INTERN
5.3.1. PREGATIREA SI PASTRAREA SERURILOR DE CONTROL
Frecventa QC: zilnic, dupa fiecare calibrare si ori de cate ori este nevoie
Prepararea pentru :
 PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1)
 PCCC2 (Preci Control ClinChem Multi 2)
 RF Control Set
 PreciControl HbA1c
Se deschide cu grija o sticluta evitand pierderea liofilizatului, se adauda 5 ml apa distilata pentru PCCC1
si PCCC2, se inchide sticla cu grija, se dizolva continutul prin agitari periodice pe parcursul a 30 minute
la 15-250C si la intuneric. Se evita formarea spumei.Controlul reconstituit se aliquoteaza in 14
eppendorfuri si se pastreaza la (-15)-(-25) 0C maxim 4 saptamani;
Identificarea fractiunilor: pe eppendorfuri se noteaza denumirea prescurtata a controlului si data de
reconstituire.
Stabilitate :
PCCC1, PCCC2: Controlul liofilizat se pastreaza la 2-8 0C. Stabilitatea controlului liofilizat daca se
pastreaza la 2-8 0C este pana la data de expirare afisata pe cutia in care vin controalele liofilizate.
Stabilitatea componentelor in controlul reconstituit :
la 15-25 0C – 12 ore
la 2-8 0C – 5 zile
(-15)-(-25) 0C – 4 saptamani (o singura data congelate
Exceptie:
- Stabilitatea bilirubinei totale in serurile de control reconstituite (depozitata la intuneric)
la 15-25 0C – 4 ore
la 2-8 0C – 8 ore
(-15)-(-25) 0C – 2 saptamani (o singura data congelate)
-Stabilitatea bilirubinei directe in serurile de control reconstituite (depozitate la intuneric)
la 15-25 0C – 4 ore
la 2-8 0C – 8 ore
(-15)-(-25) 0C – 2 saptamani (o singura data congelate)
RF Control Set – control pentru factorul reumatoid (normal si patologic).2x1ml. Controlul liofilizat se
pastreaza la 2-8 0C. Stabilitatea controlului liofilizat daca se pastreaza la 2-8 0C este pana la data de
expirare afisata pe cutia in care vin controalele liofilizate.
Se deschide cu grija o sticluta evitand pierderea liofilizatului, se adauda 1 ml apa distilata se inchide sticla
cu grija, se dizolva continutul prin agitari periodice pe parcursul a 30 minute la 15-25 0C si la intuneric. Se
evita formarea spumei. Controlul reconstituit se aliquoteaza in 4 eppendorfuri si se pastreaza la (-15)-(-
25) 0C maxim 4 saptamani;
PreciControl HbA1c – control pentru hemoglobina glicozilata. 4 x 1ml gata de utilizare. Controlul lichid
se pastreaza la 2-8 0C. Stabilitatea controlului daca se pastreaza la 2-8 0C este pana la data de expirare
afisata pe cutia in care vin controalele liofilizate.
5.3.2. CONTROLUL INTERN DE CALITATE
Controlul se realizeaza zilnic pe 2 nivele de control :

 PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
 PCCC2 (Preci Control ClinChem Multi 2)
 RF Control Set
 PreciControl HbA1c
5.3.2.1.Se realizeaza cererea de teste pentru control astfel:
ORDERS – CONTROLS
Se selecteaza testele pentru care se doreste efectuarea controalelor.
Se activeaza SAVE
5.3.2.2. Se pozitioneaza eppendorf-urile ce contin serurile de control pentru nivelul normal si patologic pe
rack-ul 1 pe locurile definite in protocolul de lucru al analizorului pozitia 3,4 – pentru teste biochimice,
apoi se da comanda “START”.
5.3.2.3. Rezultatele obtinute pot fi vizualizate astfel:
RESULTS – CONTROLS
5.3.2.4.La schimbarea loturilor noi de control trebuie introduse noile valori de seruri de control.
Datele se pot introduce :
A. AUTOMAT – UTILIZAND CITITORUL DE COD DE BARE EXTERN
B. MANUAL
A. Se intra in meniul CONFIGURATIONS si din bara orizontala de meniuri se selecteaza si activeaza

simbolul ETICHETA COD DE BARE.
Se citesc codurile de bare din inserturile corespunzatoare (seruri de control pentru COBAS INTEGRA
400 PLUS). Toate campurile trebuie sa devina verzi daca citirea valorilor s-a facut corect.
B. Se intra in meniul CONFIGURATIONS – coloana DEFINITIONS – iconita CONTROLS .

Se selecteaza controlul corespunzator. Se intra pe pagina LOT si din lista de teste pentru care se utilizeaza
controlul respectiv se selecteaza testul dorit. Se bifeaza ACCURACY, in campul ASSIGNED VALUE se
introduce valoarea tinta din insertul serurilor de control si in campul PERMISSIBLE DEV. Se introduce
valoarea corespunzatoare pentru ± 3SD (valoarea din Insert de pe coloana de ± 1SD se inmulteste cu 3.
Se apasa butonul SAVE.
5.4 OPERARE
5.4.1. Pornirea analizorului.
5.4.1.1. Se verifica:
-integritatea analizorului (sa nu fie scurgeri la nivelul bratelor de pipetare, pompelor, tubulaturii de la
nivelul tank-ului de apa deionizata);
-nivelul de apa deionizata din rezervorul extern de apa : in cazul in care apa deionizata nu este suficienta
se scoate cu grija adaptorul de tuburi din rezervorul extern de apa si se pune intr-un pahar curat pentru a
preveni conaminarea.
Se goleste apa ce se mai afla in rezervor se clateste rezervorul se umple cu apa deionizata de la statia de
apa , se fixeaza adaptorul cu tuburi in interiorul rezervorului de apa.
-sa fie sufficient Cleaner(acid hidrocloric 300 mmol/l, detergent 1%).
5.4.1.2.Se apasa butonul de pornire a analizorului (butonul de culoare verde) situat pe partea din fata a
analizorului,
5.4.1.3. Se apasa butonul de pornire al unitatii calculatorului
5.4.1.4. Dupa pornirea aparatului si a unitatii calculatorului programul COBAS INTEGRA 400 PLUS
porneste automat
5.4.1.5. In fereastra programului pentru COBAS INTEGRA 400 PLUS se apasa tatele Shift +F3 pentru
logare in aplicatie
Se introduce USER: ADMIN
PAROLA: ADMIN
Se lasa sistemul sa se initializeze.
5.4.1.6. Se pregatesc solutiile neesare pentru executarea mentenantei zinice BEGIN OF DAY:
Pe pozitia 1 a rack-ului de ISE s-a rezervat pozitia pentru Solutia de activator(este un amestec de seruri
de pacient: 3 ml ser + 1 ml H2O distilata).
Pe pozitia 8 a rack-ului de ISE s-a rezervat pozitia pentru ISE DEPROTEINIZATOR .
5.4.1.7. Solutiile necesare pentru realizarea BOD se incarca la bordul aparatului in zona ISE.
5.4.1.8. Se merge pe iconita de SERVICE – BEGIN OF DAY- Se selecteaza Prime fluid system si
Deproteinize probes – PERFORM
5.4.1.9. Daca mai apar si alte actiuni de service la deschiderea aparatului se vor realiza conform Planul de
mentenanta al echipamentelor de incercari”.
5.4.1.10. Se pun reactivii la bordul aparatului in regiunea A,B,C,D,E,F G,H.
5.5. CALIBRAREA SI CONTROLUL INTERN DE CALITATE
5.5.1.Calibrarea si contolul intern de calitate se realizeaza conform pct 5.2.2. si 5.3.2.
5.6. PROGRAMAREA SI PROCESAREA PROBELOR
Exista doua moduri de programarea a probelor :

-in sistem de cod de bare
-in sistem secvential
5.6.1. In sistem de cod de bare:
5.6.1.1.Vacutainerele se dispun in rack-urile de probe (cu eticheta rosie de la 1-4) cu codurile de bare
dispuse astfel incat sa poate fi citite se introduc in analizor in regiunea J,K,L,M,N ..
5.6.1.2.Se da comanda START.
5.6.1.3.Prin cititrea codului de bare de pe vacutainer de catre analizor se identifica pozitia vacutainerului
in rack, numarul de set si se preia din “ host computer” cererea de analize corespunzatoare numarului de
set.
5.6.1.4. Determinarile se realizeaza pe baza protocoalelor de lucru configurate pe analizor;
5.6.1.5. Rezultatele testelor sunt transmise direct in “host computer” in programul CMS-Charisma
Medical Software .
5.6.1.6. Dupa realizarea determinarilor, vacutainerele se indeparteaza din laborator ca material cu risc
biologic conform PO-02 - “Buna gospodarire. Indepartarea deseurilor periculoase rezultate din
activitatea laboratorului de analize medicale”.
5.6.2. In sistem secvential programarea se face astfel :
5.6.2.1. Se programeaza probele de pacienti astfel:
ORDERS – SAMPLE – SE TRECE ID PACIENTULUI SI ORDER ID
La SAMPLE TYPE se selecteaza SERUM

La Position : se trece rack-ul si numarul de pe rack pe care pun proba pentru analizat.
Se selecteaza testele.
5.6.2.2. Determinarile se realizeaza pe baza protocoalelor de lucru configurate pe analizor;
5.6.2.3. Rezultatele testelor sunt transmise direct in “host computer” in programul
CMS-Charisma Medical Sostware
5.6.2.4. Dupa realizarea determinarilor, vacutainerele se indeparteaza din laborator ca material cu risc
biologic conform PO- 02 - “Buna gospodarire. Indepartarea deseurilor periculoase rezultate din
5.6.3. In sistem de urgenta

5.6.3.1. In acest caz probele se vor programa si procesa pe dispozitivul STAT astfel:
Daca programarea probelor se face pe baza pe coduri de bare im momentul in care vacutainerele dispuse
pe rack-uri de probe cu codurile de bare pozitionate astfel incat sa poate fi citite se preia din host
computer cererea de analize cat si statusul cererei de analize :
In ORDERS – FIND (cautam proba dupa ID) – si ne uitam ca in partea stanga sa fie bifat STAT.
5.6.3.2. Se da comanda START .
5.6.3.4. Determinarile se realizeaza pe baza protocoalelor de lucru configurate pe analizor.
5.6.3.5. Rezultatele testelor sunt transmise direct in “host computer” in programul CMS –Charisma
Medical Software .
5.6.3.6. Dupa realizarea determinarilor vacutainerele se indeparteaza din laborator ca material cu risc
biologic conform PO-02 - “Buna gospodarire. Indepartarea deseurilor periculoase rezultate din
Daca programarea probelor in regim de urgenta se realizeaza manual :
ORDERS – SAMPLE-
Se trece ID pacient, Sample type-serum, se trece rack-ul si numarul de pe rack unde se pozitioneaza
proba, se selecteaza testele specifici cererii de analize – se bieaza butonul STAT –SAVE
Se introduce rack-ul cu probe in zona probelor si se da START.
Rezultatele testelor sunt transmise direct in “host computer” in programul CMS – Charisma Medical
Software .
5.6.4. Repetarea determinarilor.
5.6.4.1. In cazul in care unul sau mai multe rezultate de pe un order au flagguri, toate aceste rezultate apar
in RESULTS-VALIDATE.Se pot accepta rezultatele sau se pot repeat determinarile.
Pentru repetarea unui test se merge in fereastra RESULTS-VALIDATE
In fereastra VALIDATE se selecteaza ce test, calibrare sau control sa se repete si se apasa butonul Rerun.
In momentul in care se apasa butonul Rerun fereastra de dilutii este interogata.
Se selecteaza un factor de dilutie din cei configurati (Factor A-1:10, As original -1:1, Specific factor – se
specifica valorile pentru o dilutie automata, Manual dilution factor: se bifeaza aceasta optiune daca dilutia
a fost facuta manual, se trece factorul de dilutie).Se apasa butonul OK in fereastra de
5.7. VIZUALIZAREA SI TRANSMITEREA REZULTATELOR
5.7.1. Pentru vizualizarea rezultatelor:
RESULTS – SAMPLE
In cazul in care la anumite analize la un pacient au iesit valori mai mari sau mai mici decat intervalul
configurat, rezultatele se vor regasi in:
RESULTS – VALIDATE
Rezultatele din fereastra de VALIDATE se pot accepta sau se poate initia RERUN (se comanda lucrarea
din nou a testelor).
5.7.2. Pentru transmiterea rezultatelor:

In momentul in care rezultatele sunt gata ele sunt transmise automate catre aplicatia CMS-Charisma
Medical Software.
In cazul aparitiei unei neconformitaii in transmiterea datelor, rezultatele determinarile pot fi retransmise
astfel :
A. TOOLS – RETRANSMIT ALL DATA FRM THEMENU BAR

Aceasta comanda retransmite toate rezultatele din system chiar daca ne intereseaza numai un rezultat sau
doua.
Pentru transmiterea rezultatelor selectate:
CONFIGURATION – PROCESSING – RESULT OUTPUT – se selecteaza Interfata de transmitere
pentru host al rezultatelor pe care vrei sa le transmit se verifica ca Sample sa fie Enabled
Se selecteaza rezultatele in fereastra RESULTS.

TOOLS - TRANSMIT SELECTED DATA FROM THE MENU BAR
Cand transmiterea rezultatelor in CMS – Charisma Medical Software s-a realizat apare o fereasttra de
confirmare.
Se verifica in aplicatia CMS – CHARISMA MEDICAL SOFTWARE daca rezultatele au fost trimise.
B. Se merge in RESULTS – SAMPLE
-Se selecteaza id-ul probei ale carui rezultate trebuie trimise catre host
-In fereastra din dreapta se pot vedea testele analizate
-Se pot selecta si trimte toate testele sau numai un test
-Se apasa click-dreapta si se alege Retransmit.
-Cand transmiterea s-a realizat apare o fereastra de confirmare.
5.8. INCHIDEREA ANALIZORULUI
5.8.1. Inainte de inchiderea aalizorului se verifica in fereastra de Service- Due ce actiuni de service
trebuie facute inainte de inchiderea sistemului.
Se selecteaza butonul Perform pentru a realizaactiunea de service
5.8.2. Se scot rack-urile de la bordul aparatului(rac-urile de casete, rack-ul ISE, Rack-urile de probe).
5.8.3. Se intra in File-Shut down
Se deschide o fereastra care cere confirmarea de inchidere aaparatului-se apasa butonul OK
5.8.4. Cand inchiderea este completa se inchide aparatul (de la butonul verde situat pe fata aparatului).
Odata initiata inchiderea aparatului restartarea sistemului este recomandat a se face dupa un repaus de 15
minute.
5.9 DETERMINAREA ANALIZELOR BIOCHIMICE PE ANALIZORUL COBAS Integra 400+
a. Scop
Procedura stabileste modul in care Laboratorul de analize medicale realizeaza determinarile biochimice
din ser , urina ,si sange integral pe analizorul COBAS Integra 400+.
Prin această procedură se determină următorii analiti: albumina, acid uric, bilirubina directa, bilirubina
totala, bilirubina indirecta , creatinina, colesterol , calciu total, calciu ionic, glicemie, HDL- colesterol ,
LDL-colesterol, magneziu , proteine totale, sideremie, trigliceride, uree, ALT/TGP, AST/TGO, amilaza,
fosfataza alcalina, creatinkinaza, gamaglutamiltransferaza, lactatdehidrogenaza, hemoglobina glicozilata.
b. Principiul metodei
Pentru obţinerea compusului a carei absorbanta este citita in scopul determinării concentraţiei analitului
dorit are loc o anumita reacţie sau set de reacţii specifice pentru fiecare analit determinat.
În tabelul de mai jos este descris principiul reacţiei pentru fiecare din analiţii determinaţi în această
procedură .
Analit Principiul metodei
Acid uric Test colorimetric enzimatic.

acid uric + 2 H2O + O2  H2O2 + alantoina + CO2
(reactie catalizata de uricaza)
H2O2 + 4 aminoantipirina + acid 3 hidroxi 2,4,6,triiodobenzoioc  quinonimina
+2 H2O
(reactie catalizata de peroxidaza)
Intensitatea colorimetrica a solutiei finale este direct proportionala cu concentratia
acidului uric , si este determinata prin masurarea cresterii absorbantei la 546 nm .
Bilirubina Acid sulfanilic + NaNO2  acid sulfanilic diazotizat
directa Bilirubina + acid sulfanilicdiazotizat  azobilirubina ( pH 1,4)
Intensitatea culorii complexului format la ultima reactie este direct proportionala cu
concentratia bilirubinei directe . Aceasta este determinata prin masurarea cresterii
absorbantei la 548 nm .
Bilirubina Metoda colorimetrica.
totala Acid sulfanilic + NaNO2 acid sulfanilic diazotizat
Bilirubina + acid sulfanilic diazotizat azobilirubina
Intensitatea culorii complexului format la ultima reactie este direct proportioanala
cu concentratia bilirubinei totale. Aceasta este determinata prin masurarea
cresterii absorbantei .
Bilirubina Se calculeaza astfel:
indirecta Bilirubina indirecta= bilirubina totala- bilirubina directa
Calciu Metoda colorimetrica cu Schwarzenbach, cu o- cresolphthalein complexone (o-

CPC).
Ca ++ + o-CPC calciu- o- CPC complex
Intensitatea culorii complexului format este direct proportionala cu concentratia
calciului . Aceasta este determinata prin masurarea cresterii absorbantei .
Calciu ionic Se calculeaza astfel:
Calciu ionic =(6*Calciu total – proteine totale/3) /( 6+proteine totale)
Colesterol Metoda colorimetrica enzimatica.
Colesterol esterificat + H2O   colesterol + acizi grasi
colesterol esteraza
Colesterol +O2  colest-4-en-3-ona + H2O2

(reactie catalizata de colesteroloxidaza)
2H2O2 + 4 aminoantipirina + fenol quinonimina + 4 apa
Intensitatea colorimetrica a solutiei finale este direct proportionala cu concentratia
colesterolului. Aceasta este determinata prin masurarea cresterii absorbantei .
Creatinina Reactie cinetica Jaffe cu buffer , fara deproteinizare.

Creatinina + acid picric  complex colorat
Intensitatea culorii complexului format este direct proportionala cu concentratia
creatininei din proba. Aceasta este masurata prin cresterea absorbantei .
Glucoza Metoda enzimatica de referinta cu hexokinaza(HK).
D- Glucoza + ATP  D – Glucoza –6- fosfat + ADP
(reactie catalizata de hexokinaza)
D – Glucoza- 6 – fosfat + NADP+  D – 6 fosfogluconat + NADPH + H+
(reactie catalizata de glucozo 6 fosfat dehidrogenaza)ogenaza)
In reactia finala , concentratia NADPH formate este direct proportionala cu
concentratia glucozei. Aceasta este determinata prin masurarea cresterii absorbantei
.
HDL- In prezenta sulfatului de magneziu, sulfatul de dextran formeaza selectiv complexe
colesterol solubile in apa cu LDL, VLDL si chilomicroni care sunt rezistente la enzime
modificate cu PEG. Concentratia HDL- colesterol este determinata enzimatic cu
colesterolesteraza si colesterol oxidaza legate cu PEG la grupul amino ( aproximativ
40%). Esterii colesterolului sunt scindati cantitativ in colesterol liber si acizi grasi
de colesterolesteraza.
HDL- colesterolesteraza+ H2O → PEG- colesterolesteraza → HDL- colesterol +

RCOOH
In prezenta oxigenului, colesterolul este oxidat de colesterol oxidaza in Δ –
colestenin si peroxid de hidrogen.
HDL- colesterol + O2 → PEG-colesterol oxidaza → Δ4 - colestenon +

H2O2
In prezenta peroxidazei, peroxidul de hidrogen generat reactioneaza cu 4- amino-
antipirina si HSDA pentru a forma un compus albastru-purpuriu. Intensitatea culorii
este direct proportionala cu concentratia HDL-Colesterolul si este masurata
fotometric.
2 H2O2 + 4- aminoantipirina+ HSDA + H+ + H2O → peroxidazei →

complex albastru- purpuriu+ 5 H2O.
Concentratia HDL-Colesterol este determinata prin masurarea cresterii absorbantei
la 600nm.
LDL- colesteol Analiza colorimetrica enzimatica omogena.

HDL, VLDL, Chilomicroni + detergent 1  colesterol
Colesterol  colesterol oxidat + H2O2
(reatia are loc in prezenta colesterolesterazei si a colesteroloxidazei)
H2O2 + 4 aminoantipirina  produs incolor
(reactia are loc in prezenta peroxidazei)
LDL + detergent 2  colesterol
Colesterol  colesterol oxidat + H2O2
(reatia are loc in prezenta colesterolesterazei si a colesteroloxidazei)
H2O2 + 4 aminoantipirina + N, N, bi(4 sulfobutil) m toluidina  quinoneimina
(reactia are loc in prezenta peroxidazei)
Intensitatea culorii albastre a quinoneiminei formate in reactia finala este direct
proportionala cu concentratia de LDL – colesterol . Aceasta este determinata prin
masurarea cresterii absorbantei la 600 nm.
Magneziu Metoda colorimetrica folosind Chlorophosphonazo III ( CPZ III ).
Mg++ + CPZ III  Mg-CPZ III complex
Mg-CPZ III complex + EDTA Mg-EDTA + CPZ III
In final, diferenta de absorbanta dintre complexul Mg- CPZ III si complexul tratat
cu EDTA este absorbanta datorata numai prezentei magneziului
Proteine totale Reactia biuretului.
Proteina + Cu 2+Cu-Proteina complex
Intensitatea culorii complexului format este direct proportioanala cu concentratia
proteinelor .Aceasta este determinata prin masurarea cresterii absorbantei .
Sideremie Metoda colorimetrica.
Transferin-Fe(III)  apotransferina + Fe(III)
Fe(III)Fe(II)
Fe(II) + 3 ferozina  Fe(II)-(ferozina)3
Intensitatea culorii complexului format la ultima reactie este direct proportionala
cu concentratia fierului.Aceasta este determinata prin masurarea cresterii
absorbantei .
Trigliceride Metoda colorimetrica enzimatica (GPO/PAP) cu glicerolfosfat oxidaza si 4
aminofenazona .
Triglyceride  glicerol + acizi grasi
(reactie catalizata de lipoproteinlipaza)
glicerol + ATP  glicerol-3-fosfat + ADP
(reactie catalizata de glicerolkinaza)
glicerol-3-fosfat + O2  dihidroxiaceton fosfat + H2O2
(reactie catalizata de glicerolfosfatoxidaza)
H2O2 + 4-clorofeno + 4-aminoantipirin  quinonimina + H2O2
Reactia finala formeaza o solutie rosie de quinonimina , care este masurata la 505
nm. Cresterea absorbantei este direct proportionala cu concentratia trigliceridelor
din proba.
Uree Test cinetic cu ureaza si glutamat dehidrogenaza . Viteza de scadere a concentratiei

NADH este direct proportionala cu concentratia ureii din proba . Aceasta este
determinata prin masurarea absorbantei la 340nm.
Urea + 2 H2O 2NH4+ + CO3 2-
NH4++ 2 oxoglutarat + NADH L-glutamat + NAD+ + H2O
ALT/ GPT Metoda enzimatica - IFCC
L-alanină + -cetoglutarat → piruvat + glutamat (reacţie catalizată de ALT)
Piruvat + NADH + H+ → L-lactat + NAD+ (reacţie catalizată de LDH)
Viteza de oxidare a NADH este direct proporţională cu activitatea catalitică a ALT
şi este măsurată prin scăderea valorii absorbanţei .
AST/GOT Metoda enzimatica- IFCC
L-aspartat + -cetoglutarat → oxaloacetat + glutamat (reacţie catalizată de AST)
oxaloacetat + NADH + H+ → L-malat + NAD+ (reacţie catalizată de MDH)
Viteza de oxidare a NADH este direct proporţională cu activitatea catalitică a AST
şi este măsurată prin scăderea valorii absorbanţei .
FOSFATAZA Metoda colorimetrica
ALCALINA
ALP
pNPP + H2O (sau AMP)     pNP +

Zn 2  , Mg 2 
HEDTA 
  pH 10 , 4
2 2
HPO ( sauAMP  PO
4 ) 3
Viteza de formare a pNP (para-nitrofenil), produs de culoare galbena, este direct

proporţionala cu activitatea catalitica a fosfatazei alcaline si se determina prin
creşterea absorbantei
GGT Test enzymatic colorimetric.

L--glutamil-3-carboxi-4-nitroanilidă + glicil-glicină → L--glutamil-glicil-
glicină + 5-amino-2-nitrobenzoat (reacţie catalizată de GGT). Viteza de formare a
produsului 5-amino-2-nitrobenzoat este direct proporţională cu activitatea catalitică
a GGT şi este măsurată prin creşterea valorii absorbanţei .
HbA1c Pentru a determina procentul de HbA1c sau fracţia hemoglobinei este necesara
măsurarea a 2 concentraţii se parate: a hemoglobinei glicate si a hemoglobinei
totale. Proba de sânge este mai întâi pretratata cu un denaturant. Eritrocitele sunt
lizate iar hemoglobina este degradata de enzime proteolitice, pepsina, si formează
hemolizatul. Atât concentraţia hemoglobinei totale cat si hemoglobina glicate sunt
determinate din acelaşi hemolizat.
Concentraţia de hemoglobina totale este determinata colorimetric. Hemolizatul este
adăugat reactivului de hemoglobina totala care conţine o soluţie alcalina. Toata
hemoglobina este transformata in hematii, rezultând o soluţie verde.. Aceasta
transformare poate fi măsurata printr-o reacţie end-point la o lungime de unda de
604 nm.
Concetratia hemoglobinei glicate este măsurata imunoturbidimetric folosind o
metoda de inhibare a microparticulelor aglutinate. Creşterea concentraţiei de
hemoglobina glicata din proba este invers proporţionala cu rata de aglutinare si se
poate măsura la o lungime de unda de 700 nm.
Procentul de hemoglobina glicozilata se determina prin raportul dintre hemoglobina
glicata si hemoglobina totala conform formulei:
Valorile concentraţiei individuale de hemoglobina glicata si de hemoglobina totala

sunt folosite numai pentru a calcula procentul de hemoglobina glicozilată (fracţia
hemoglobinei), si nu pot fi folosite individual pentru a hotari un diagnostic.
ASLO Metoda: imunoturbidimetrie latex
Anticorpul uman antistreptolisin O se aglutineaza cu particule din latex acoperite cu
antigenul antistreptolisin O. Se formeaza un precipitat care determina turbidimetria.
C3 Metoda: imunoturbidimetrie
Formele de C3c uman precipita cu antiserul specific, determinand turbidimetria.
C4 Metoda: imunoturbidimetrie
Formele de C4 uman precipita cu antiserul specific, determinand turbidimetria.
CRP Metoda: imunoturbidimetrie
CRP umana se aglutineaza cu particulele din latex acoperite cu anticorpi anti-CRP
monoclonal.
IGA Metoda: imunoturbidimetrie
Anticorpul Anti-IgA reactioneza cu antigenul din proba si formeaza complexul
antigen/anticorp. Prin aglutinare se masoara turbidimetria.
IGM Ig M este o procedura imunoturbidimetrica ce măsoară creşterea de turbiditate

cauzate de formarea complexelor imune insolubile când anticorpii de IgM sunt
adaugati in proba. Concentraţia de IgM este măsurata in funcţie de turbimetrie la
700 nm.
IGG Ig G este o procedura imunoturbidimetrica ce măsoară cresterea de turbiditate

cauzate de formarea complexelor imune insolubile cand anticorpii de IgG sunt
adaugati in proba. Concentraţia de IgG este măsurata in funcţie de turbimetrie la
700 nm.
Factor Este folosit pentru diagnosticul in vitro, pentru o determinarea cantitativa a

reumatoid factorului reumatoid din proba. Metoda este imunoturbidimetrica ce implica o
reacţie antigen-anticorp intre factorul reumatoid din proba si particulele latex
acoperite cu IgG. Rezultatul aglutinării este măsurata turbidimetric la 570 nm.
c. Limita de detectie
În tabelul următor sunt prezentate limita de detecţie a fiecărei metode de testare a concentratiei analitilor
de biochimie pe analizorul Cobac C 501 , cat si valoarea maximă până la care reacţia este liniară.
Analit Limita de detectie Liniaritate
Acid uric 0.2 mg/dl 25 mg/dl (62.5 mg/dl dupa dilutie )

Bilirubina directa 0.1 mg/dl 15 mg/dl
Bilirubina totala 0.1 mg/dl 38 mg/dl (190 mg/dl dupa dilutie )

Bilirubina indirecta - -
Calciu 0.4 mg/dl 20 mg/dl (30 mg/dl dupa dilutie)
Calciu ionic - -
Colesterol 3.86 mg/dl 800 mg/dl (8000 mg/dl dupa dilutie )
Creatinina 0.17 mg/dl 24.9 mg/dl (124 mg/dl dupa dilutie )
Glucoza 2 mg/dl 750 mg/dl (1500 mg/dl dupa dilutie)
HDL-colesterol 3 mg/dl 120 mg/dl (240 mg/dl dupa dilutie )

LDL- colesteol 3.86 mg/dl 548 mg/dl (1097 mg/dl dupa dilutie )
Magneziu 0.24 mg/dl 6.08 mg/dl(12.2 mg/dl dupa dilutie )
Proteine totale 0.2 g/dl 12 g/dl (36 g/dl)
Sideremie 5 μg/dl 1000 μg/dl (2130 μg/dl dupa dilutie)
Trigliceride 8.85 mg/dl 885 mg/dl (4425 mg/dl dupa dilutie )
Uree 3 mg/dl 240 mg/dl (720 mg/dl dupa dilutie )
ALT/ GPT 5 U/L 700 U/L (7000 U/L dupa dilutie )
AST/GOT 5 U/L 700 U/L (7000 U/L dupa dilutie )
FOSFATAZA ALCALINA 5 U/L 1200 U/L (6000 dupa dilutie )
GGT 3 U/L 1200 U/L(13200 U/L dupa dilutie )
Hemoglobina glicozilata THb : 4 g/dl THb : 35 g/dl

HbA1C: 0.3 g/dl HbA1C: 2.5 g/dl
ASLO 20 UI/mL 600 UI/mL (3660 UI/ mL dupa dilutie)
C3 4 mg/dL 500 mg/dL (1000 mg/dL dupa dilutie)
C4 2 mg/dL 100 mg/dL (200 mg/dL dupa dilutie)
CRP 1 mg/L 250 mg/L (750 mg/L dupa dilutie)
IGA 5 mg/dL 800 mg/dL (6400 mg/dL dupa dilutie)
IGM 1 mg/dl 250 mg/dl
IGG 3 mg/dl 300 mg/dl
Factor rheumatoid 10 IU/ml 130 UI/ml
d. Natura probei primare
Analit Proba
Acid uric Ser, plasma , urina

Bilirubina Ser, plasma
directa
Bilirubina totala Ser, plasma
Bilirubina Ser, plasma
indirecta
Calciu Ser, plasma, urina
Calciu ionic Ser, plasma
Colesterol Ser, plasma
Creatinina Ser, plasma , urina
Glucoza Ser, plasma , urina , LCR
HDL-colesterol Ser, plasma

LDL- colesteol Ser, plasma
Magneziu Ser, plasma, urina

Proteine totale Ser, plasma
Sideremie Ser, plasma
Trigliceride Ser, plasma
Uree Ser, plasma , urina

ALT/ GPT Ser, plasma
AST/GOT Ser, plasma
FOSFATAZA Ser, plasma
ALCALINA
GGT Ser, plasma
HbA1c Plasma
ASLO Ser, plasma

C3 Ser, plasma
C4 Ser, plasma
CRP Ser, plasma
IGA Ser, plasma
IGM Ser, plasma
IGG Ser, plasma
Factor Ser, plasma
reumatoid
e. Tipul recipientului si al aditivilor
Analit Aditivi
Acid uric Heparina , EDTA

Bilirubina Heparina , EDTA
directa

totala

indirecta
Calciu Heparina
Calciu ionic Heparina
Colesterol Heparina , EDTA
Creatinina Heparina , EDTA
Glucoza Heparina , EDTA , fluoruri
HDL-colesterol Heparina , EDTA

LDL- colesteol Heparina
Magneziu Heparina
Proteine totale Heparina, EDTA
Sideremie Heparina
Trigliceride Heparina, EDTA
Uree Li-heparina, EDTA.

NU SE FOLOSESTE AMONIU
HEPARINA
ALT/ GPT Heparina , EDTA
AST/GOT Heparina , EDTA
FOSFATAZA Heparina
ALCALINA
GGT Heparina , EDTA
HbA1c Heparina , EDTA
ASLO Heparina , EDTA
C3 Li-heparina
C4 Heparina , EDTA
CRP Li-heparina, EDTA
IGA Li-heparina, EDTA
IGM Li-heparina, EDTA
IGG Li-heparina, EDTA
Factor Li-heparina, EDTA

reumatoid
f. Materiale de control
În tabelul de mai jos se prezintă calibratorii şi serurile de control pentru determinarile biochimice
efectuate pe analizorul Cobas integra 400 plus.
Analit Calibrator Control normal si patologic:
Acid uric Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
PCCC2 (Preci Control ClinChem Multi 2)
Bilirubina Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
directa PCCC2 (Preci Control ClinChem Multi 2)
Bilirubina Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),

totala PCCC2 (Preci Control ClinChem Multi 2)
Bilirubina - -
indirecta
Calciu Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),

Calciu ionic - -
Colesterol Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),

Creatinina Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
Glucoza Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),

HDL-colesterol Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
LIPIDE PCCC2 (Preci Control ClinChem Multi 2)
LDL- colesteol Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
LIPIDE PCCC2 (Preci Control ClinChem Multi 2)
Magneziu Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),

Proteine totale Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
Sideremie Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),

Trigliceride Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),

Uree Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
ALT/ GPT Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
AST/GOT Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
FOSFATAZA Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
ALCALINA PCCC2 (Preci Control ClinChem Multi 2)
GGT Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
HbA1c Calibrator CFAS HbA1C Control N
HbA1C HbA1C Control P
ASLO Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
C3 Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
PROTEINE PCCC2 (Preci Control ClinChem Multi 2)
C4 Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
CRP Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
IGA Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
IGM Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
IGG Calibrator CFAS PCCC1 (Preci Control ClinChem Multi 1),
Factor Preciset RF FR- control
reumatoid
h. Intervale biologice de referinta
În tabelul următor sunt prezentate valorile de referinţă pentru determinarile biochimice pe analizorul
Cobas Integra 400+
Analit Valori de referinta
Acid uric Ser, plasma:

Femei: 2.4-5.7 mg/dl
Barbate: 3.4-7 mg/dl
Urina 24h: 200-1000 mg/24h
Prima urina de dimineata: 37-92 mg/dl
Bilirubina <0.3 mg/dl
directa
Bilirubina Adulti si copii: <1 mg/dl

totala Nou nascuti prematuri:
24 ore: 1-6 mg/dl
48 ore: 6-8 mg/dl
3-5 zile: 10-15 mg/dl
Nou nascuti la termen:
24 ore: 2-6 mg/dl
48 ore: 6-7 mg/dl
3-5 zile: 4-12 mg/dl
Bilirubina <1 mg/dl
indirecta
Calciu Ser , plasma: 8.6-10.2 g/dl

Urina 24 h: 100-321 mg/24h
Calciu ionic 3.6-5.2 mg/dl
Colesterol <200 mg/dl

zona de risc scazut: 200-240 mg/dl
zona de risc cresct:>=240 mg/dl
Creatinina Femei (ser, plasma): 0.5-0.9 mg/dl

Barbati (ser, plasma): 0.7-1.2 mg/dl
Nou nascuti prematuri: 0.29-1.04 mg/dl
Nou nascuti la termen:0.24-0.85 mg/dl
2-12 luni :0.17-0.42 mg/dl
1-<3 ani:0.24-0.41 mg/dl
5-<7ani:0.32-0.59 mg/dl
7-<9ani:0.40-0.60 mg/dl
9-<11ani: 0.39-0.73 mg/dl
11-<13ani:0.53-0.79 mg/dl
13-<15ani:0.57-0.87 mg/dl
Glucoza Ser, plasma:

Adulti 60-90 ani: 82-115 mg/dl
Adulti >90 ani: 75-121 mg/dl
Copii : 60-100 mg/dl
Nounascuti (o zi) : 40-60 mg/dl
Nounascuti (>o zi): 50-80 mg/dl
Urina:
24 h: <0.5 g/24h
urina spontana: 1-15 mg/dl
LCR:
Copii : 60-80 mg/dl
Adulti: 40-70 mg/dl
HDL-colesterol Femei : >65 mg/dl
Femei risc moderat : 45-65 mg/dl
Femei risc crescut : <45 mg/dl
Barbati : >55 mg/dl
Barbati risc moderat : 35-55 mg/dl
Barbati risc crescut : <35 mg/dl
LDL- colesteol Adulti:
Optim:<100 mg/dl
Risc scazut: 100-130 mg/dl
Zona de risc: 130-159 mg/dl
Risc crescut: 160-189 mg/dl
Risc foarte crescut: >=190 mg/dl
Magneziu Ser, plasma:
Nounascuti prematuri: 1.4-1.9 mg/dl
Copii si adulti: 1.7-2.55 mg/dl
Urina 24h: 60-210 mg/24h
Proteine totale Adulti: 6.6-8.7 g/dl
Sideremie Femei: 37-145 yg/dl

Barbati: 59-158 yg/dl
Trigliceride <200mg/dl
Uree Ser, plasma:

Adulti<=65ani: <50 mg/dl
Adulti >=65ani: <71 mg/dl
Urina 24h: <35 g/24h
Prima urina de dimineata: 0.9-3 g/dl
ALT/ GPT Femei: <31 U/l

Bărbaţi: <41 U/l
AST/GOT Femei: <32 U/l

Bărbaţi: <38 U/l
FOSFATAZA Femei: 35 – 104 U/L
ALCALINA Barbati: 40 – 129 U/L
Copii 1 zi: < 250 U/L
Copii 2-5 zile: < 231 U/L
Copii 6 zile-6luni: < 449 U/L
Copii 7luni -1ani: < 462 U/L
Copii 1-3ani: < 281 U/L
Copii 13-17ani (fete): < 187 U/L
Copii 13-17ani(baieti): < 390 U/L
GGT Bărbaţi: 8-61 U/l

Femei: 5-36 U/l
HbA1c 4.8-5.9 %
i. Interpretarea de laborator
Semnificatia clinică a modificării valorilor de referinţă ale concentraţiei determinarilor biochimice
Analit Valori crescute in : Valori scazute in :
Acid uric Guta, leucemii, policitemia vera, Leziuni tubulare renale , necroze hepatice
tumori maligne , tumori maligne severe , mielom multiplu , xantinurie; cistinoza ;
necrozante ; eclampsie, sarcina ; intoxicatii cu metale grele
insuficienta renala; diabet zaharat,
mixedem, hiperparatiroidism,
acromegalie; acidoza lactica ;
hiperlipidemie tip IV ; psoriazis ;
inanitie, obezitate alcoolism ;
diuretice ; tuberculostaticesi
citostatice
Bilirubina Cauze hepatocelulare: hepatita, Fara semnificatie clinica

directa ciroza, leziuni toxice, infectii
severe , insuficienta cardiaca .
Cauze colestatice : ficat gras,
abces hepatic, tumori hepatice,
sarcina, icter obstructiv.
Cauze medicamentoase :
indometacina, metildopa,
tetraciclina, fenotiazine, estrogeni,
steroizi anabolizanti, citostatice si
tuberculostatice
Bilirubina boli de ficat - cai biliare (hepatita, Fără semnificaţie clinică
totala obstructie biliara [calculi
coledocieni, calculi veziculari,
stricturi, atrezie, cancer (primar
sau metastaze), traumatism
chirurgical, pancreatita),colestaza,
ciroza, ficat de staza, sepsis,
nutritie totala parenterala,
Medicamente (Halotan,
contraceptive orale, Alopurinol,
antibiotice, steroizi, INH,
Indometacin, Metildopa,
sulfonamide, Tolbutamida,
Cloramfenicol, Clorpromazin),
Mononucleoza Infectioasa,
insuficienta hepatica, ictere
ereditare (eg. Gilbert).
Bilirubina Hemoliza, transfuzii, Sickle Cell
indirecta Anemia, hematom in resorbtie,
hepatita, ciroza, sepsis,
insuficienta hepatica congestiva,
cancer, insuficienta hepatica,
Gilbert, Crigler - Najjar.
Calciu Hiperparatiroidism, nefropatii Hipoparatiroidism, hipovitaminoza D,
cronice, mielom multiplu, osteomalacie, hipoproteinemie (sindrom nefrotic,
hipervitaminoza D , boala Paget; ciroza hepatica) ; hiperfosfatemie; pancreatita
valori fals crescute prin staza acuta necrozanta; rahitism; tetanii
prelungita la recoltarea sangelui
Calciu ionic Hipercalcemie: Este determinata Hipocalcemie: Se datoreaza unei sinteze

de o mobilizare crescuta de Ca deficitare de PTH ( glanda paratiroida) sau unui
osos (osteroporoza) sau absorbtie deficit de sinteza a vitaminei D.
intestinala crescuta : Semne de hipocalcemie :
hiperpartiroidie primara tetania latenta si manifesta
metastaza osose (cancer de san, osteomalacia
prostata, tiroidian, brohopulmonar) Hipocalcemia se intalneste in: post
Hipercalcemia se intalneste in: tiroidectomie, rahitism ereditar sau dobandit,
maladia Recklinghausen, osteomalacie, hipokaliemie,rezectia de stomac,
hipervitaminoza D, osteomielita, ocluzia cailor biliare, diaree cronica, sindroame
insuficienta renala avansata, de malabsorbtie, dializa prelungita, sindrom
hiperparatiroidism, procese Burnett, alcaloza, varsaturi, post medicamentos.
osteolitice prin tumori, post
imobilizare.
Un comportament particular
manifesta hipercalcemia din
mielomul multiplu ,care se
insoteste de o crestere a fosforului
sanguin iar fosfatazele alcaline
serice sunt in limite normale,
elemente esentiale biologice de
diagnostic diferrential cu
hiperparatiroidismul primar.
Colesterol Hiperlipoproteinemii primare , mai Malabsorbtie, maldigestie, carenta alimentara ,
ales tip II, III , V; hipotiroidie, steatoree; boli hepatice; hipertiroidie;α-β-
colestaza, ciroza biliara , sindrom lipoproteinimie; hipo-α-lipoproteinemie
nefrotic, anorexie nervoasa; guta;
diabet zaharat, alcoolism;
tratament cu cortizol, retinoizi si
androgeni.
Creatinina Insuficienta renala cronica, Fără semnificaţie clinică
insuficienta renala acuta , necroze
musculare acute (traumatism
,arsuri, miodistrofii acute),
acromegalie
Glucoza Diabet zaharat , sindrom Cushing, Foame; malabsorbtie; efort; febra; insuficienta
hipertiroidie, acromegalie, hepatica; glicogenoze, intoleranta la fructoza,
hiperaldosteronism , tumoare galactozemie; hiperinsulinism; hiperplazia
pancreatica cu celule A, accidente celulelor insulare , antidiabetice, β-blocanti
vasculare ale SNC sau tumoare de
SNC, encefalita; infarct
miocardic ; febra ;soc; insuficienta
renala; hipotermie
HDL- Aproximativ 25% din colesterolul Fără semnificaţie clinică

colesterol total.
Spre deosebire de LDL-
colesterol , HDL-colesterol are
proprietati protectoare
Risc moderat pentru boli
cardiovasculare:
F : 45 – 65 mg/dl
M: 35 – 55 mg/dl
Risc mare:
F: < 45 mg/dl
B: < 35 mg/dl
LDL- colesteol Cea mai mare parte din Fără semnificaţie clinică
colesterolul total .
Risc moderat pentru boli vasculare
:150 – 190 mg/dl
Risc mare : > 190 mg/dl
Magneziu oligurie, insuficienta renala, alimentatie parenterala, alcoolism, pierderi de

perfuzii care contin ioni de suc gastric ;diaree ; pancreatita; diuretice;
magneziu, laxative si antiacide plasmocitom; sarcina
Proteine totale ciroza hepatica in stadiul malnutritie, malabsorbtie, maldigestie; ciroza
compensat; sarcoidoza; hepatica; sindrom nefrotic, glomerulonefrita,
paraproteinemii; deshidratare insuficienta renala cronica ; hemoragii cronice ;
arsuri intinse, amiloidoza;peritonita; hipertiroidie
; hiperhidratare
Sideremie hemocromatoza primara sau hemoragii;mai rar prin tulburari de reutilizare
secundara , hematita, ciroza (de exemplu in inflamatii cronice),
hepatica; infectii ; anemii carcinom(feritina crescuta), necesitati
hemolitice , pernicioase, , crescute(pubertate, sarcina, lactatie)sau aport
aplastice; talasemie; porfirie; scazut ( de exemplu carenta alimentara ,
intoxicatii cu plumb sau cu fier; paraziti , gastrita atrofica)
dupa transfuzii cu sange
Trigliceride hiperlipoproteinemii primare cu anemii severe; boli consumptive, inanitie;
exceptia tipului Iia; infarct hipertiroidie; arsuri , enteropatie exsudativa; α-β
miocardic; diabet zaharat ; -lipoproteinemie
obezitate; hipotiroidie; boli
hepatice, icter obstructiv; sindrom
nefrotic, sarcina ; tratament cu
cortizol , tratament cu estrogeni
Uree afectiuni renale acute si cronice - fiziologic la copii si gravide, aport

ca si creatinina ureea este invers proteic scazut, afectiuni hepatice
proportionala cu GFR ( rata de grave insotite de perfuzii a la long
filtrare glomerulara ) , cat timp cu lichide sarace in electroliti
perfuzia renala si aportul proteic
sunt normale iar GFR >= 30
ml/min conc de uree se va mentine
normala; in afectiuni cronice
renale cu GFR < 30 ml/min ureea
va monitoriza succesul dietei
hipoproteice; azotemie prerenala,
hemoragii, varsaturi, diaree, arsuri
cu aport insuficient de lichide,
datorita reducerii volumului
extracelular, care atrage
diminuarea perfuziei renale si
dezechilibre electrolitice , febra,
tratamente cu doze mari de
glucocorticoizi raport U/C > 35;
azotemia postrenala , obstructii
ureterale, vezicale , uretrale,
tumori prostatice , prostatite ,
litiaze,,ureea. > Creatinina;
aport crescut de proteine > 200
g/zi U/C > 35 mg/dl
ALT/ GPT Marker de citoliză hepatică: Fără semnificaţie clinică
Hepatite virale / toxice /
medicamentoase (creşte de 10-100
ori), colestaze extra / intrahepatice
(creşte până la 20 ori), hepatite
cronice active (creşte până la 20
ori), tumori hepatice primitive şi
hepatite alcoolice (creşteri
moderate).
AST/GOT Infarctul de miocard (apare după Fără semnificaţie clinică

6 ore, maxim la 36 ore, revenire la
normal în 5-6 zile, creştere de
aprox. 5 ori).
Alte afecţiuni: hepatită, ciroza,
colestaza intrahepatică, tumoră
hepatică primitivă, alcoolism,
mononucleoza infecţioasă,
pancreatită acută, distrofia
musculară progresivă,
dermatomiozită, traumatisme
musculare, anemie hemolitică,
gangrenă, medicamente (salicilaţi,
opiacee, amipicilină).
FOSFATAZA Patologie hepatică (marker de Val norm.: tumori hepatice benigne, abces
ALCALINA colestază): colestază extrahepatică hepatic, chist hidatic, boala polichistică
(litiază, cancer de cap de Val scăzute: congenital, hipo PTH,
pancreas), hepatite virale icter hemolitic
colestatice, colestaza
medicamentoasă, metastaze
hepatice, tumori hepatice
primitive, ciroza biliară primitivă,
granulomatoze hepatice
(sarcoidoză, TBC, bruceloză,
schistosomiază, amiloidoză).
Patologie osoasă (marker de
hiperactivitate osteoblastică):
boala Paget, osteomalacie şi
rahitism, tumori şi metastaze
osoase, leucoze, boala Hodgkin,
hiperPTH, osteoporoza (creşteri
tranzitorii).
GGT Toate tipurile de afectări Fără semnificaţie clinică
hepatice, colestaze (valori
crescute de 5-30 ori), tumori
hepatice primare şi secundare.
HbA1c- semnificatie clinica:

Efectuarea glicemiei permite evaluarea statusului curent al metabolismului carbohidraţilor la pacienţii
diabetici în momentul recoltării probei de sânge. Spre deosebire de aceasta, determinarea hemoglobinei
glicozilate oferă o estimare retrospectivă a statusului glicemic, independentă de ritmul circadian, dietă şi
alte fluctuaţii tranzitorii ale concentraţiei glucozei în sânge.
Hemoglobina glicozilată HbA1 (HbA1a, HbA1b şi HbA1c) reprezintă un mic procent din hemoglobina
A (5-7%), rezultată prin legarea continuă şi ireversibilă a glucozei din sânge pe durata de viaţă a
eritrocitelor (de aprox. 100-120 zile). Glicozilarea se efectuează în două etape prin reacţii non-
enzimatice, fiind dependentă de cantitatea de glucoză din sânge. Astfel, creşterea hemoglobinei
glicozilate (şi prin urmare a Hb A1c, care reprezintă 75-80% din HbA1) este proporţională cu nivelul
mediu al glucozei sanguine în cursul ultimelor 2-3 luni anterioare testării.
Determinarea Hb A1c constituie un test de evaluare şi monitorizare pe termen lung al controlului
glicemic la pacienţii cu diabet zaharat.
De asemenea are un rol predictiv în ceea ce priveşte riscul complicaţiilor diabetului: cetoacidoza,
nefropatia, retinopatia. Poate evalua metoda terapeutică cea mai eficientă: antidiabetice orale, insulină,
transplant de celule β.
Determinarea HbA1c se recomanda pentru :
• diabet zaharat de tip I instabil, cu modificări mari ale glicemiei de la zi la zi;
• diabetul copilului;
• diabetul la care pragul renal al glucozei este anormal;
• diabetul zaharat de tip II, la paciente care devin însărcinate sau pacienţi care şi-au modificat recent
dieta, stilul obişnuit de viaţă sau medicaţia, astfel încât controlul lor metabolic pare mai bun decât este
în realitate;
• diabet gestaţional.
Testul se execută la interval de :
• 3-4 luni la pacienţi cu diabet zaharat tip I;
• 6 luni la pacienţi cu diabet zaharat de tip II (excepţie: sarcină - control la 2 luni).
5.10 INDEPARTAREA REZIDUURILOR PERICULOASE
5.10.1 Indepartarea reziduurilor obtinute in urma activitatii compartimentului se executa conform PO - 02

“ Buna gospodarire.Indepartare deseurilor periculoase rezultate din activitatea laboratorului de analize
medicale”.
6. RESPONSABILITĂŢI
6.1 Manager Tehnic/Sef de laborator/punct de lucru/compartiment:
6.1.1 Supervizeaza activitatea laboratorului/compartimentului
6.1.2 Analizeaza eventualele neconformitati
6.1.3 Evalueaza si analizeaza rezultatele obţinute la programul de comparari interlaboratoare si controlul
intern de calitate
6.1.4 Dispune repetarea analizelor

6.1.5 Verifica documentele calitatii si dispune modificarea acestora
6.1.6 Nominalizeaza seful de compartimente si stabileste atributiile acestuia
6.1.7 Verifica modul de indepartare a reziduurilor periculoase din compartiment.
6.2 Responsabil analiza
6.2.1 Valideaza rezultatele analizelor
6.2.2 Pune la dispozitia executantului prezenta procedura
6.2.3 Evalueaza si analizeaza rezultatele controlului intern de calitate.
6.3 Asistent laborator
6.3.1 Receptioneaza probele
6.3.2 Sorteaza si aseaza probele in stative
6.3.3 Verifica existenta unei etichetari corecte a probelor
6.3.4 Stocheza probele sortate in frigider/ congelator
6.4 Agent cleaning
6.4.1 Indeparteaza probele primare si deseurile periculoase conform PO - 02.
7. INREGISTARI SI ANEXE
7.1 Buletinul de analize, cod FG – 5.8 -01.
7.2 Lista de lucru per departament si aparat FG – 5.5 – 01..

PS - 09 Determinari Biochimice

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

PS - 09 Determinari Biochimice

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

CENTRUL MEDICAL UNIREA

Laborator Craiova, strada Alexandru Ioan Cuza nr 17

Nume Functia Semnatura

Tip PROCEDURA SPECIFICA

Editia: 1/ 18.04.2014 Rev.0 Ex. nr.:

Nr. total pagini, exclusiv pagina de titlu si anexe: 39

3.1.1. Manualul de utilizare Cobas Integra 400+.

5.1. REALIZAREA MENTENANTEI

5.1.1. Deproteinizarea sondelor

5.1.2. Curatarea sondelor si capacului pentru a preveni imprastierea stropilor

5.1.3. Curatarea rezervorului intern de apa

5.1.4. Curatearea statie de apa

Pentru curatarea statiei de spalare:

5.1.5. Curatarea rezervorului extern de apa si a rezervorului de deseuri lichide

Pentru curatarea rezervorului extern de apa:

Pentru rezervorul extern de deseuri lichide:

5.1.6. Curatarea cutiei de deseuri solide

Curatarea cutiei de deseuri solide:

5.1.7. Prime fluid system

-Se apasa butonul Perform

5.1.8. ROCHE SERVICE

5.1.9. BACKP-UL BAZEI DE DATE

5.1.10. Inlocuirea filtrului rezervorului extern de apa:

5.1.11. Inlocuire pipete de dozaj

Pentru inlocuire pipete de dozaj:

- Desurubati pipeta de dozaj din diostribuitor.

5.1.12. Inlocuire filter de ventilatie

Pentru inlocuire filter de ventilatie:

5.1.13. Inlocuire lampa de halogen

Pentru inlocuire lampa de halogen::

-Se deconecteaza cablul lampei

5.1.14 Inlocuire sonde B/C

Pentru inlocuire sondeB/C

C.f.a.s. HBA1C pentru hemoglobina glicozilata

C.f.a.s Protein : 4 saptamani la 2-80C

Utilizare : Calibratorul poate fi utilizat imediat dupa reconstituire

Utilizare: Calibratorul poate fi utilizat imediat dupa reconstituire.

5.2.2.1Calibrarea se realizeaza la intervale regulate de timp (definite in CONFIGURATION- TESTS-

A. Se intra in meniul CONFIGURATIONS si din bara orizontala de meniuri se selecteaza si

Se citesc codurile de bare din inserturile corespunzatoare(calibratori pentru INTEGRA 400).

B. Se intra in meniul CONFIGURATIONS – COLOANA DEFINITIONS- CALIBRATORS se

5.3. CONTROLUL INTERN

5.3.1. PREGATIREA SI PASTRAREA SERURILOR DE CONTROL

5.3.2. CONTROLUL INTERN DE CALITATE

Controlul se realizeaza zilnic pe 2 nivele de control :

5.3.2.1.Se realizeaza cererea de teste pentru control astfel:

A. Se intra in meniul CONFIGURATIONS si din bara orizontala de meniuri se selecteaza si activeaza

B. Se intra in meniul CONFIGURATIONS – coloana DEFINITIONS – iconita CONTROLS .

5.4.1. Pornirea analizorului.

5.5. CALIBRAREA SI CONTROLUL INTERN DE CALITATE

5.5.1.Calibrarea si contolul intern de calitate se realizeaza conform pct 5.2.2. si 5.3.2.

5.6. PROGRAMAREA SI PROCESAREA PROBELOR

Exista doua moduri de programarea a probelor :

5.6.1. In sistem de cod de bare:

5.6.2. In sistem secvential programarea se face astfel :

5.6.2.1. Se programeaza probele de pacienti astfel:

ORDERS – SAMPLE – SE TRECE ID PACIENTULUI SI ORDER ID

La SAMPLE TYPE se selecteaza SERUM

5.6.3. In sistem de urgenta

5.6.4. Repetarea determinarilor.

5.7. VIZUALIZAREA SI TRANSMITEREA REZULTATELOR

5.7.1. Pentru vizualizarea rezultatelor:

5.7.2. Pentru transmiterea rezultatelor:

A. TOOLS – RETRANSMIT ALL DATA FRM THEMENU BAR