29/02/2020

1 Streptococcus
Conf. univ. Dr. Olivia Dorneanu
2 Minidefiniţie
• coci Gram-pozitivi, sferici/ ovali, aşezaţi în lanţuri sau perechi
• unele specii au capsulă
• imobili
• pretenţioşi nutritiv (agar-sânge)
• facultativ anaerobi (↓O2) unele tulpini carboxifile în culturi primare
• catalază negativi, oxidază negativi
• uzual hemolitici
3 Streptococcus spp.
4 Morphology of the streptococci in comparison with staphylococci.
Streptococci divide in a single plane and tend not to separate, causing chain
formation.
5

Clasificare

• aspectul coloniilor pe geloză-sânge:

- β-hemolitice (zonă completă de hemoliză)
- α-hemolitice (zonă incompletă de hemoliză, de culoare verzuie)
- nehemolitice (colonii care nu modifică mediul)
• structura antigenică (Ag parietal-carbohidratul C sau Ag Lancefield):
- streptococi grupabili (20 grupe serologice): A-H, K-W
- streptococi negrupabili – S.pneumoniae şi streptococi orali
• caractere biochimice:
- diferenţiază specii din acelaşi grup serologic şi streptococii negrupabili
• patogenitate:
- piogeni - patogeni la om sau animale
- condiţionat sau accidental patogeni
6 Clasificare
• tipul hemolizei
• β-hemolitici
• α-hemolitici
• nehemolitici
•
7

8 Clasificare

• antigenică (Ag specific de grup): Lancefield

• streptococi grupabili: A-H, K-W
• streptococi negrupabili (streptococi orali, Streptococcus pneumoniae)
•
9 Clasificarea principalilor streptococi cu importanţă medicală
10 Streptococcus pyogenes (grup A) 1
 8 Clasificare 29/02/2020

• antigenică (Ag specific de grup): Lancefield

• streptococi grupabili: A-H, K-W
• streptococi negrupabili (streptococi orali, Streptococcus pneumoniae)
•
9 Clasificarea principalilor streptococi cu importanţă medicală
10 Streptococcus pyogenes (grup A)
11 Streptococcus pyogenes (grup A)
• Habitat
• oro-/ nasofaringe: 5-20% purtători sănătoşi (copii)
• piele, vagin, rect
•
• Caractere microscopice
• coci sferici în diplo sau scurte lanţuri
• morfologie caracteristică în medii lichide
•
12 Streptococcus pyogenes (grup A)

• Caractere de cultură
• facultativ anaerob
• dezvoltă pe geloză-sânge colonii mici β-hemolitice (streptolizine O, S)
• tulpinile capsulate dau colonii cu aspect mucos
13

• Rezistenţa la factorii de mediu

• îşi pierd virulenţa prin deshidratare
• pot supravieţui timp îndelungat pe suprafeţe uscate, la întuneric, la temperatura
camerei
• sensibil la antiseptice şi dezinfectante uzuale
•
• Antigene de specificitate
• cu specificitate de specie:
- carbohidratul C cu specificitate de grup A
- proteina MAP (asociată proteinei M)
• cu specificitate de tip (markeri epidemiologici):
- proteina M (120 serotipuri M)
- factorul de opacifiere serică (FOS)
- proteina T
14 Structura antigenică a Streptococcus pyogenes
15

Factori de patogenitate
•
• factori de colonizare
- proteina M şi acizii lipoteichoici realizează proiectii filamentoase pe suprafaţa
celulei bacteriene prin care se ataşează la celulele gazdei
- proteina F se ataşează de fibronectină (matrice proteică pe suprafaţa celulelor
gazdei)

• factori anti-fagocitari
- proteina M şi capsula de acid hialuronic impiedică interacţiunea bacteriilor cu
2
celulele fagocitare
 •
• factori de colonizare 29/02/2020
- proteina M şi acizii lipoteichoici realizează proiectii filamentoase pe suprafaţa
celulei bacteriene prin care se ataşează la celulele gazdei
- proteina F se ataşează de fibronectină (matrice proteică pe suprafaţa celulelor
gazdei)

• factori anti-fagocitari
- proteina M şi capsula de acid hialuronic impiedică interacţiunea bacteriilor cu
celulele fagocitare
- C5a-peptidaza inhibă fagocitoza prin eliminarea efectului chemotactic al C5a
-
16

Factori de patogenitate
• factori de invazie
- streptokinaza (fibrinolizina) previne constituiea barierei de fibrină
- hialuronidaza degradează acidul hialuronic prezent în ţesutul conjunctiv
- dezoxiribonucleaza depolimerizează ADN rezultat din dezintegrarea leucocitelor;
din cele 4 tipuri antigenice (A-D), tipul B este produs caracteristic de această
specie

• toxine citolitice
- streptolizina O, antigenică, inhibată reversibil de prezenţa O2, are efect litic faţă de
numeroase tipuri de celule eucariote, inclusiv hematii
- streptolizina S, neantigenică, oxigen-stabilă, este responsabilă de caracterul
hemolitic al coloniilor dezvoltate in condiţii aerobe
-
17

Factori de patogenitate
• toxina eritrogenă (sau pirogenă)
- corespunde la trei tipuri antigenice
- A şi C codificate de gene fagice (conversie lizogenă)
- B codificat de gene cromozomale
- funcţionează ca superantigen, acţionând prin mecanisme asemănătoare cu cele
determinate de toxina sindromului şocului toxic stafilococic
- evidenţiată la tulpini izolate de la cazuri cu scarlatină şi şoc toxic streptococic
- ocazional poate fi prezentă la streptococi aparţinînd altor grupe serologice (C şiG)
• proteina M, peptidoglicanul, carbohidratul C au determinanţi antigenici comuni cu
epitopi prezenţi la nivelul ţesutului conjunctiv şi muscular
•
18 Factori de virulenţă ai Streptococcus pyogenes
19

20 Streptococcus pyogenes - boli

• Infecţii acute
• Nespecifice
• angină eritemato-pultacee (/eritematoasă) – 5-15 ani
• otită, sinuzită, adenită
• flegmon amigdalian, celulita difuză a planşeului bucal (angina Ludwig)
• impetigo (“bube dulci”) – 2-5 ani
• vulvo-vaginite la fetiţe
• infecţii ale tegumentului lezat (celulită, fasciită necrozantă)
• febră puerperală (endometrită acută nosocomială)
• bacteriemie 3
 • Infecţii acute
• Nespecifice 29/02/2020
• angină eritemato-pultacee (/eritematoasă) – 5-15 ani
• otită, sinuzită, adenită
• flegmon amigdalian, celulita difuză a planşeului bucal (angina Ludwig)
• impetigo (“bube dulci”) – 2-5 ani
• vulvo-vaginite la fetiţe
• infecţii ale tegumentului lezat (celulită, fasciită necrozantă)
• febră puerperală (endometrită acută nosocomială)
• bacteriemie
• pneumonie, endocardită acută, meningită, peritonită
• Specifice
• scarlatină
• erizipel
• sdr. şocului toxic streptococic
• Complicaţii nonsupurative tardive (boli poststreptococice)
• Reumatism articular acut (RAA)
• Glomerulonefrită acută (GNA)
•
21 Patogenia infecţiilor cu S pyogenes
22 Angină eritemato-pultacee vs. Angină eritematoasă
23 Impetigo
24 Erizipel
25 Scarlatină
26 Celulită
27 Streptococcus pyogenes - imunitate
• Ac anti-proteină M (specificitate de tip) – protectori; sunt opsonizanţi
•
• Ac anti-eritrotoxină protejează faţă de eritemul scarlatinos
•
• Ac anti-streptolizină O (ASLO) şi anti-DNază – markeri ai unei infecţii streptococice
recente la pacienţi cu RAA sau GNA
28 Streptococcus pyogenes – diagnostic de laborator
•
• Examen microscopic – preparate din zone normal sterile
•
• Detectare Ag SBHA – exsudat faringian
•
• Cultivare – agar-sânge de berbec (β); 5% CO2
•
•
29 Streptococcus pyogenes – diagnostic de laborator

• Identificare

• identificarea polizaharidului cu specificitate de grup A

•
•
• Diagnostic serologic
• ASLO 4
29 Streptococcus pyogenes – diagnostic de laborator
29/02/2020
• Identificare

• identificarea polizaharidului cu specificitate de grup A

•
•
• Diagnostic serologic
• ASLO
• anti-DNază
30 Streptococcus pyogenes – tratament
• penicilina (P) este antibioticul de elecţie (FĂRĂ antibiogramă)
• pacienţi sensibilizaţi la penicilină: eritromicină, clindamicină (Antibiogramă)

• eşec terapeutic
• administrare incorectă P
• recontaminare anturaj
• inactivare P prin β-lactamaze produse de bacterii din flora faringiană
• toleranța la penicilină

31 Streptococcus pyogenes – epidemiologie

• Rezervor de infecţie – uman
• bolnavi/ purtători sănătoşi (nasali/ faringieni)
•
• Transmitere
• picături Flügge, salivă
• contact cu leziuni cutanate (impetigo scalp)
• consum alimente contaminate

• Receptivitate – generală (absenţa Ac anti-proteină M cu specificitate de tip)

32 Streptococcus pyogenes – profilaxie
• Contact apropiat, episod epidemic
• o doză penicilină, apoi o doză peniciclină retard
• cefalosporine mai active în eradicarea portajului
• Profilaxia complicaţiilor poststreptococice
• profilaxie primară – tratament corect al infecţiilor acute
• profilaxie secundară – penicilină retard
• GNA – fără chimioprofilaxie

33 Streptococi de grup C&G

• C - S. equi, S. zooepidemicus, S. dysgalactiae
• G – S. dysgalactiae, S. canis

• habitat – uman/animal

• caractere microscopice şi de cultivare, factori de virulenţă, patogenitate

asemănătoare S. pyogenes

• infecţii similare S. pyogenes

• rareori scarlatină/sdr. şocului toxic streptococic
• fără complicaţii nonsupurative tardive (S. zooepidemicus poate produce GNA)

• sensibili la P
5
 • habitat – uman/animal
29/02/2020
• caractere microscopice şi de cultivare, factori de virulenţă, patogenitate
asemănătoare S. pyogenes

• infecţii similare S. pyogenes

• rareori scarlatină/sdr. şocului toxic streptococic
• fără complicaţii nonsupurative tardive (S. zooepidemicus poate produce GNA)

• sensibili la P
34 Streptococii de grup D
• S. gallolyticus, S. equinus
• habitat – animale (intestin)
•
• S. gallolyticus – septicemie/ endocardită la pacienţi cu leziuni ale colonului (e.g.,
cancer)
• S. equinus – rar - bacteriemie, endocardită
•
• ampicilină (AM) + aminoglicozid (AG)
35 Streptococcus agalactiae (grup B)
• Habitat
• colonizare asimptomatică (vagin, intestin, orofaringe)

• Proprietăţi
• coci gram+ în lanţuri lungi
• colonii translucide mari, hemoliză incompletă îngustă
• Ag polizaharidic specific de grup (B) în peretele celular şi Ag capsular cu
specificitate de tip (Ia, Ib, II-VIII)

• Factori de virulenţă
• capsula polizaharidică – antifagocitară
• serotip III – inf. n.n.
• factorul CAMP – antifagocitar (leagă Fc IgG)
• hemolizina, hialuronidaza, C5a peptidaza
36 Streptococcus agalactiae (grup B)
• Infecţii
• infecţii neonatale
• precoce (Z0-5) – pneumonie severă cu evoluţie septicemică
• tardive (S1-L3) – meningită purulentă
• infecţiile adultului
• endometrită (femeia gravidă peripartum)
• infecţii urinare, endocardite, meningite, celulite (DZ, vârstnici)

• Diagnostic
• n.n. (sânge, nasofaringe, meconiu) + mamă (vagin)
• cultură + identificare (test CAMP, Ag B)

• Tratament
• aminopeniciline (AM) > P
• aminopenicilină + AG – infecţii severe
• vancomicină (VA) pacienţi alergici la P
•
37 6
 • n.n. (sânge, nasofaringe, meconiu) + mamă (vagin)
• cultură + identificare (test CAMP, Ag B) 29/02/2020

• Tratament
• aminopeniciline (AM) > P
• aminopenicilină + AG – infecţii severe
• vancomicină (VA) pacienţi alergici la P
•
37

38 Streptococcus agalactiae (grup B)

• Epidemiologie
• sursa de infecţie – umană
• portaj vaginal
• portaj orofaringian
• transmitere
• verticală: majoritatea infecţiilor n.n. sunt contractate de la mamă, în timpul
sarcinii/ naşterii
• orizontală: familie, personal medical
• factori de risc
• n.n.
• prematuritate, travaliu prelungit, infecţie maternă diseminată cu streptococ
grup B
• mama fără Ac cu specificitate de tip şi cu nivel scăzut al C seric
• femei cu colonizare genitală au risc crescut de sepsis post-partum
• DZ, cancer, alcoolism
•
• Profilaxie
• Depistare portaj S. agalactiae în ultimul trimestru de sarcină
• perfuzie AM în cursul travaliului
• AM la n.n. cu risc
39 Streptococcus pneumoniae
scanning electron micrograph of a pair of diplococci
40 Streptococcus pneumoniae
• Habitat
• mucoasa TRS (5-10% adulți, 20-40% copii sunt purtători sănătoşi)
•
• Caractere microscopice
• diplococi gram+ ovali/ lanceolaţi, cu axul longitudinal în prelungire
• capsulaţi
41

42

43 Streptococcus pneumoniae
• Caractere de cultivare
• carboxifili
• pretenţioşi nutritiv
• α-hemolitici; autoliză centrală (aspect crateriform)
44

45 Streptococcus pneumoniae – colonii crateriforme

46 Streptococcus pneumoniae
• Rezistenţa la factorii de mediu 7
43 Streptococcus pneumoniae
• Caractere de cultivare 29/02/2020
• carboxifili
• pretenţioşi nutritiv
• α-hemolitici; autoliză centrală (aspect crateriform)
44

45 Streptococcus pneumoniae – colonii crateriforme

46 Streptococcus pneumoniae
• Rezistenţa la factorii de mediu
• bacterii fragile (uscăciune, lumină, temperatura camerei)
• Structura antigenică
• polizaharid C (≠polizaharidul de grup Lancefield)poate precipita CRP, poate activa
C
• Ag capsular polizaharidic
• 90 tipuri
• reacţia de umflare a capsulei
47 Streptococcus pneumoniae
48 Streptococcus pneumoniae
• Factori de virulenţă
• capsula (efect antifagocitar)
• pneumolizina (efect hemolitic, leucolitic, dermonecroză)
• IgA proteaza (clivează IgA1)

• Imunitate
• Ac anticapsulari opsonizanţi
• specificitate de tip
49 Streptococcus pneumoniae

• Infecţii – bacterie condiţionat patogenă

• infecţii TRI: pneumonie, bronşită (acutizare bronșită cronică)
• infecţii cavităţi conecte TRS: sinuzită, otită medie acută
• meningită, endocardită
• conjunctivită, peritonită, artrită, infecţii peripartum şi n.n.
• bacteriemie

50

51 Patogenia infecţiilor cu S pneumoniae

52 Streptococcus pneumoniae – diagnostic de laborator
• spută, LCR, sânge, puroi
• microscopia directă
• izolarea (ASg, 5-10% CO2)
• identificare
• testul de sensibilitate la optochin
• testul de bilioliza
• Ag capsulare pot fi prezente în LCR, urină (latex aglutinare)
53 Frotiu spută, Gram, x1000
54

55 8
 • izolarea (ASg, 5-10% CO2)
• identificare 29/02/2020
• testul de sensibilitate la optochin
• testul de bilioliza
• Ag capsulare pot fi prezente în LCR, urină (latex aglutinare)
53 Frotiu spută, Gram, x1000
54

55

56

57 Streptococcus pneumoniae
• Tratament
• P este antibioticul de elecţie pentru tulpini sensibile, dar rezistenţa este în creştere
(PLP modificate)
• Pneumonie pneumococică – penicilina G
• cefalosporine III (e.g., ceftriaxona, cefotaxima), vancomicina, macrolide sunt
utilizate la pacienţi alergici la P sau împotriva tulpinilor rezistente la P

• Epidemiologie
• sursă de infecţie – purtători sănătoşi de tulpini capsulate
• transmitere – majoritatea infecţiilor sunt endogene
• în colectivităţi închise pneumonia poate evolua epidemic în paralel cu o epidemie
de gripă
• bătrâni – risc crescut pentru meningită
• pacienţi asplenici/ boli hematologice - risc crescut pentru sepsis
•
• Profilaxie
• vaccin polizaharidic 23-valent: vârstnici, diabetici, bronşitici cronici
• vaccin conjugat 13-valent – sugar – Ag capsulare + anatoxina difterica
58 Streptococi orali (viridans)
• m.m. specii
• grupe anginosus, mitis, sanguinis, mutans, salivarius
• α-hemolitici, pretenţioşi nutritiv
• colonizează orofaringele (intestin, tract genito-urinar, conjunctiva, tegumentul)
• boli
• endocardită (valve lezate)
• caria dentară (S. mutans, S. sanguinis)
• bacteriemie, septicemie la pacienţi cu terapie anticanceroasă
• meningite după puncţii rahidiene

• tratament
• de regulă rezistent la P
• P + AG
• cefalosporină cu spectru larg sau VA

59 Enterococcus
• E. faecalis, E. faecium
• colonizează tractul gastrointestinal şi cel genitourinar
• supravieţuieşte perioade lungi pe suprafeţe
• coci gram+ în perechi / scurte lanţuri
• facultativ anaerobi, α/ β/ nehemolitici
• catalază-negativi
9
 29/02/2020
59 Enterococcus
• E. faecalis, E. faecium
• colonizează tractul gastrointestinal şi cel genitourinar
• supravieţuieşte perioade lungi pe suprafeţe
• coci gram+ în perechi / scurte lanţuri
• facultativ anaerobi, α/ β/ nehemolitici
• catalază-negativi
• cresc în prezenţa a 6.5% NaCl; la 10-45 °C
• rezistenţi la bilă şi optochin; hidrolizeaza esculina
• grup D Lancefield
60 Entérocoques – frottis de pus
61 Enterococcus
• infecţii
• ITU, endocardită, meningită (singur)
• peritonită, infecţii tract biliar, abces hepatic, infecţii plăgi (împreună cu
enterobacterii/ anaerobi)
• Infecții nosocomiale
•
• tratament
• penicilinele au efect bacteriostatic
• rezistență naturală de nivel jos la aminoglicozide
• natural rezistenţi la cefalosporine, sulfamide, lincosamide
• AG+ AM/ VA - endocardite
• nitrofurantoin, fluorochinolone - ITU
•
• epidemiologie
• risc crescut – pacienţi cu spitalizări prelungite, trataţi cu AB cu spectru larg
(cefalosporine)
62

10