Lp 4

DETERMINAREA CONTAMINARII MICROBIENE A AERULUI, OBIECTELOR SI

SUPRAFETELOR

Cunoasterea gradului de contaminare microbiana a aerului, obiectelor si diferitelor

suprafete constituie un criteriu important de apreciere a conditiilor de igiena. Metodele de
control a contaminarii acestor substrate permit identificarea conditiilor favorabile de
transmitere a infectiilor precum si stabilirea unor masuri de profilaxie care se impun atunci
cand apare riscul producerii unor infectii.
Metodele de determinarea a graduluu de contaminare microbiana a aerului si a
suprafetelor se utilizeaza pentru controlul conditiilor de igiena in incaperile in care
posibilitatea transmiterii infectiilor este mai ridicata precum:
 Institutii de copii: scoli, gradinite, camine, crese;
 Unitatisanitare: saloane, Sali de operatie, Sali de tratamente, Sali de asteptare, Sali de
recoltare probe biologice, etc;
 Industriaalimentara;
 Laboratoare de microbiologie;
 Industria de medicamentesiprodusecosmetice;
ANALIZA BACTERIOLOGICA A AERULUI
In atmosfera se gasesc permanent microorganismeaflate in suspensie,
densitatealordepinzand de regiunesi de altitudine.
Ca natura, acestemicroorganismesunt: virusuri, bacteriisiciuperci. Pot proven din
mediul extern (sol, apa, vegetatie) sau potaveaprovenientaanimalasauumana.
Microorganismele din mediul extern suntpsihrofile (se dezvoltaoptim la 15-22°C) in
timpcemicroorganismele de provenientaanimalasauumanasuntmezofile (se dezvoltaoptim la
35-40°C).
Din punct de vederesanitar, prezintainteres medical
microorganismelemezofiledeoarece in
conditiilecresteriinumaruluiacestoracrestesirisculaparitieiinfectiilorrespiratorii la oameni.
Desi in mare parte acestemicroorganismesuntsaprofite, totusi pot fi si microorganism
patogene, mai ales cele eliminate in mediul exterior de bolnavisau de purtatoriisanatosi. In
aergermeniiprovin din nazofaringe, cavitatebucala, trahee, bronhiimari. Sunt eliminate
prinvorbit, tuse, stranut, dap pot proven si de petegumenteintactesaulezatesau contaminate cu
dejecte.
Aerulreprezinta o caleimportanta de transmiterebolilor cu poarta de
intrarerespiratoriepentru o serie de boliprecum:rujeola, scarlatina, varicela, oreionul, gripa,
virozerespiratorii, psitacoza, ornitozasauunelemicoze.
Analizabacteriologicaaaerului nu se practicauzual ci doar in
unitatilemedicalepentruverificareaconditiilorsanitare din incaperi. Nu se
urmaresteevidentiereaunuianumit tip de microorganism ci maidegrabamasura in care
aerulesteincarcat cu flora de provenientaanimalasauumana.
Indicatoriibacteriologici de contaminareaaeruluisunt:
-Numarul total de germeni- permiteapreciereainacrcariimicrobieneaaerului.
Prezintadezavantajul ca nu poateidentificadecatmicroorganismele care se dezvolta la 37°C,
temperatura de incubareutilizata in laborator;
-PrezentaStreptococilorhemolitici, indiferent de numarul total de
germeniprezintasemnificatieclinicaintrucatacestigermenisuntpatogenisemnalizandprezentaun
uibolnavsau a unuipurtatorsanatos al acestorgermeni.
-PrezentaStafilococilor cucaractere de patogenitate au
semnificatieasemanatoareprezenteiStrepococilorhemoliticichiardacanumarul total de germeni
se incadreaza in limitelevaloriloradmise.
-Prezentacoliformilor in aer, germeni de origineintestinalaumanasi animal indicaun grad
ridicat de insalubritate a aeruluidintr-o incapere, prezentalornefiindadmisa.

METODE DE DETERMINARE A FLOREI MICROBIENE DIN AER

1. Metoda Koch (prinsedimentare)-consta in expunereaplacilor Petri continandmedii de

cultura (gelozasimplasigelozasange), un timpdeterminat, in pozitieorizontala, la 1 m
deasupraniveluluipardoselii, in mijloculincaperiisi in unul din colturi. Apoiplacile se
incubeaza la thermostat la 37grade Celsius pentru 24 de ore cu
prelungireaincubariipentruidentificareastreptococilorinca 24 de ore.
Formula de calcul (Omelianski):
Numarul total de germeni= N X 10000/S X K
N= numarul de coloniicrescutepeplaca Petri incubate
S= suprafataplacii Petri (63,5cm)
K= Timpul de expunereexprimat in minute/5
2. Metodebazatepeaspiratie – presupundeterminareanumarului de germeniintr-un volum
de aerdeterminat. Cuprindemetode de filtrare, de barbotare, bazatepe impact
sielectroprecipitare.
Metoda de filtrareconsta in trecereaunuivolum de aeraspiratsimasuratprintr-un filtru
special (nisip de cuartsterilizat) care va fi spalat in conditiiaseptice cu un lichid
isotonic steril, iarsuspensiamicrobianaobtinutava fi
insamantatadiluatasinediluatapediferitemedii de
culturasolideatatpentrucalculareanumarului total de germeni cat
sipentruidentificareatipului de germeni.
Metoda de barbotarese bazeazapebarbotareaaeruluiaspiratprintr-un lichidizotonsisteril
care ulterior va fi insamantadiluatsinediluatpemedii de culturasolide.
Metodabazatape impact realizeazaproiectareaaeruluiaspirat direct
pesuprafataunuimediu de cultura solid. Prinimpactulprovocat de fluxul de
aeraspiratsidirectionatcatreplaca cu mediu de cultura,
eventualelemicroorganismeexistente in aersuntretinutepesuprafataaderenta a mediului
de cultura . Se utilizeaza un apparat special- aparatulKrotov care are o eficienta mare
si care, in plus permitestabilireadensitatiireale a microorganismelor din aer .
Metodaelectroprecipitariise bazeazaperealizareaunui camp electrostatic care
atragemicroorganismele din aer, electrozii de depunerefiindsituatiintr-un mediu de
cultura.

Valorinormale:
 In institutii de copii 0-1500 germeni/m3 aer;
 In Sali de operatie 0-300 germeni/m3 aer;
 In Sali de tratamente, saloane ATI, saloanenou-nascuti, Sali de nastere,
biberonerii, 0-500 germeni/m3 aer;
  In saloanepacienti 0-600 germeni/m3 aer;
 In industriaalimentara 0-2500germeni/m3 aer;
Nu se admiteprezentaSteptococcilorhemolitici, a Stafilococilorpatogenisi a
Coliformilor indifferent de numarul total de germeni.
CONTROLUL BACTERIOLOGIC AL SUPRAFETELOR

Prindepunereagermenilor din aersauprincontactul direct cu omul,

suprafataobiectelordintr-o incaperepoate fi contaminata cu flora de
origineumanasauanimalaputandprovocapeaceastacaleimbolnaviri ale persoanelor.
O incarcaremicrobianacrescuta a suprafetelor traduce un potential
epidemiologic ridicatsi in acelasitimpdovedeste o curateniesi o dezinfectiedeficitaraa
suprafetelor respective.
Controlul microbiologic al curatenieisuprafetelorsi al eficienteidezinfectiei se
realizeazain urmatoareleinstitutii:institutii de copii, industriaalimentara, unitati de
alimentatiepublica, laboratoare, industriefarmceutica, simai ales in unitatisanitare.
O imporantadeosebita o prezintacontrolul microbiologic al suprafeteicutanate
a mainilorpersonalului medical sinemedical din industriaalimentara, farmaceutica,
cosmetic, invatamantprescolarsiscolar.

METODE DE CERCETARE A FLOREI MICROBIENE DE PE

SUPRAFETE

Acestemetodeurmarescdesprindereafloreimicrobiene de
pesuprafetelecercetatesitrecerealorpesuprafataunormedii de culturasolide. Recoltarea
se face de pesuprafete delimitate. Exprimareaincarcaturiimicrobiene se poate face fie
raportata la cm2 fie la intreagasuprafata (ex maini). Se utilizeazaurmatoarelemetode:
 Metodastergerii
 Metodaspalarii
 Metodaparticuleloradezive
 Metoda de contact

Metodastergeriisuprafetei cu ajutorulunui tampon sterilconsta in

stergereauneisuprafete de 25cm2 recent curatatasaudezinfectata cu ajutorulunui
tampon de vatasterilmontatpe un porttamponsiumectat anterior cu 1 ml de
serfiziologicsteril. Ulterior in eprubeta port-tampon se adauga 9 ml de mediu de
culturalichid (bullion nutritive) iar din suspensiarezultata se insamanteaza aseptic 0,1
ml pesuprafataunuimediu de culturaneselectiv (gelozasange) si a unuimediulactozat.
In cazulsuspicionariiuneiincarcaturimicrobienemari se pot face
maimultedilutiizecimaleurmand ca rezultateleprivindnumarul total de germenisa fie
ajustate in functie de dilutie.
Formula de calcul:
Nr total de germeni=N x 0,1 /25 x10
N = numarul de colonii de peplaca
0.1= volumulinsamantat
25= suprafata de pe care s-a efectuatrecolta
10= dilutia
 Metodaspalariise folosestepentrucontrolul microbiologic a mainilor. Consta in
introducereamainlor in serfiziologicsterilefectuandu-se
miscariasmanataoarespalarii.Suspensiamicrobianaobtinuta se insamanteaza ca la
metodastergeriisuprafetelor.
Metodaparticuleloradeziveutilizeazapeliculeadezivecomercialede
dimensiunicunoscutesipastrate in conditiiaseptice .Cu ajutoruluneipense sterile se
aplicapeliculaadezivapesuprafata de cercetattimp de 5 minute siapoi se
aplicapesuprafataunuimediude culturatimp de 30 de secunde. Se incubeazasi se Numara
coloniiledezvoltateraportandu-se rezultatul la unitatea de suprafata.
Metoda de contactconsta in aplicarea direct ape suprafatamediului de cultura a
suprafetei de cercetat. Se practicapentrucontrolultegumentelor –
suprafatapalmaraaultimeifalange. Are dezavantajul ca nu permiteraportarea la unitatea de
suprafata.
Valorinormalenumar total de germeni:
 Sali de operatie 2germeni/cm2
 Saloane ATI, nou-nascuti, Sali de nastere,biberonerii 3germeni/cm2
 Saloanepacientisialtesuprafete (laboratoare, farmacii, unitatialimentare,
gradinite, crese, camine) 5germeni/cm2.
Nu se admiteprezentaStreptococilorhemolitici, a Stafilococilorpatogeni,
aEnterobacteriaceelor, Acinetobacter, Pseudomonas sau a Enterococilorrezistenti la
Vancomicina.

METODE DE DETERMINARE A STARII DE SANATATE A APEI SI A

ACTIUNII ASUPRA ORGANISMULUI UMAN SI A SANATATII POPULATIEI