LP6 – IDENTIFICAREA ACIZILOR

NUCLEICI
ACIZII NUCLEICI = macromolecule formate din unități polinucleotidice,constituenți ai materiei vii

= au rol esențial în sinteza proteinelor

= prin hidroliza acidă a acizilor nucleici se obțin baze azotate, pentoze și acid fosforic

A. Bazele azotate sunt:

- baze purinice: adenină (A) și guanină (G).

- baze pirimidinice: timină (T), citozină (C), uracil (U).

B. Pentozele (glucide formate din 5 atomi de carbon) sunt D-riboza în ARN și D-deoxiriboza în

ADN. [În structura ADN se găsesc A, T, C, G, iar în structura ARN se găsesc A, G, C și U.]

- moleculele de ADN sunt alcătuite din 2 catene polinucleotidice (moleculă dublu catenară), -

moleculele de ARN sunt formate dintr-o singură catenă polinucleotidică.

Identificarea acizilor nucleici - ADN și ARN se identifică pe baza reacțiilor de culoare caracteristice
pentozelor din structura lor.

METODA ADN

1 ml soluție ADN + 2 ml soluție de difenilamină 1% în acid acetic glacial și H2SO4 concentrat,

se agită și se încălzește eprubeta pe baie de apă până la fierbere timp de 10 minute =>

CULOARE ALBASTRA => intensitatea culorii este proporțională cu cantitatea de ADN. !!!

METODA ARN

1,5 ml soluție ARN + un volum egal de orcinol (1% în HCl concentrat care mai conține și 0,5%

FeCl3) => CULOARE VERDE

METODA IDENTIFICARE BAZE AZOTATE PURINICE

2 ml hidrolizat de acizi nucleici + NH4OH + 1 ml soluție AgNO3 0,5%=> PP BRUN

METODA IDENTIFICARE ACID FOSFORIC

1 ml hidrolizat de acizi nucleici + 1 ml clorhidrat de hidroxilamină 0,3 M în H2SO4 0,05 N + 0,5

ml soluție de molibdat de amoniu 5% în H2SO4 1 N (Se omogenizează și se încălzește) După

2-3 minute se adaugă 0,5 ml soluție NaOH 4 N.=> CULOARE ALBASTRA